乙肝两对半定性测定ppt课件
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乙肝两对半的解读PPT课件
性传播(Sexually transmission) ：性滥交、同性恋和异性恋之间的亲 密性行为是重要的乙肝病毒传播途径，这种传播亦包括家庭夫妻间的传 播，夫妻之间的无防御措施的性行为传播率大概在14%左右，具体引人 而异。因乙肝病人的唾液中可以查到乙肝病毒，在接吻时有可能会由于 皮肤粘膜破损造成传染。因此在口腔有破损（如溃疡，咬伤，牙龈出血
可见大三阳和小三阳的区别主要在病毒复制活跃程度上，但并不表示“大三阳”一定比“小三阳”病 情严重，临床研究证实，有些小三阳患者更容易转化为肝癌。在治疗上，如果是乙肝患者且HBVDNA含 量高，大三阳和小三阳的区别不大，都要以抗病毒治疗为主，辅助抗炎保肝，抗纤维化治疗。 Visible big 3 this world and small 3 this world difference is mainly in the viral replication activity, but it doesn't mean the "big 3 this world" than "small 3 this world" the disease is severe, clinical studies have confirmed that some small 3 this world are more likely to be converted into liver cancer patients. In treatment, if is hepatitis b patients and hbvdn乙a肝co两nt对en半t h的ig解h,读the difference between big 3 this world and4 small 3 this world is not big, to give priority to with antiviral therapy, anti-inflammatory, protecting liver, auxiliary anti fibrosis treatment.
乙肝两对半PPT课件
假阳性：在我国正常人群中约近10%可检出单一抗HBc,单一抗
HBc有很高的假阳性，可达30%甚至更高。原因：未完全成熟的B 细胞对任何抗原都是敏感的，可被非特异地激活，能产生低滴度 的IgM-及／或IgA-抗HBc。 HBcIgG－出现晚－终身。高滴度的抗HBc(主要是IgM)表示现行感 染；被认为诊断急性乙型肝炎的“金标准”。低滴度的抗HBc(主 要是IgG)表示过去感染。
核心颗粒的表面才是病毒真正的衣壳，由乙肝病毒的核心抗原 （HBcAg）组成。HBeAg为HBcAg的可溶性成份，两者约有75%的 氨基酸序列相同，但二级结构不同，各有特异的抗原决定族。临 床上在血液中只检测其可溶性成份。而HBcAg在肝细胞内更容易 被检测到。Dane颗粒中的中心部位就是环状并且有缺口的DNA双 链和依附在上面的DNA聚合酶。
HBV感染的转归
急性HBV感染
婴儿期感染 85%~95 %
成年期感染 5%~10% 慢性HBV感染
慢性乙型肝炎
5年发生率12%~25%
肝硬化
5年发生率5%~15%
肝细胞癌
肝移植
5年发生率20%~23%
肝功能衰竭
慢性HBV感染的自然病程
免疫耐受 免疫清除 非活动或低复制期 再活动
HBsAg
HBeAg anti-HBe HBV DNA
这个家族中的病毒成员除了对具体的器官具有特异性，它们对寄 主也同样有“种族要求”，比如HBV就只对人和猩猩有易感性。 乙型肝炎病毒（HBV）为专一的嗜肝病毒，HBV感染者血清经电 镜检查有3种病毒颗粒：①Dane颗粒（HBV颗粒），外壳蛋白为 HBsAg，核心含有HBV-DNA及HBVDNAp（DNA-多聚酶）、HBcAg、 HBeAg；②小球形颗粒；③管形颗粒。
如何看懂乙肝两对半ppt课件
13
慢性HBV感染临床诊断小结
携带者
慢性乙肝
隐匿性慢性乙 肝
乙肝 肝硬化
乙肝相关肝 癌
HBeAg+ HBeAg-
乙肝
乙肝
代偿期
失代偿期
HBV携带 者(HBV
DNA+)
非活动性 HBsAg携带者 (HBV DNA－)
轻、中、重
·
活动期和静止期
14
HBV的复制过程
HBV DNA 聚合酶
e
cap
3.5kb
·
3
双股DNA 核心
DNA多聚酶
有逆转录酶活性 有合成DNA功能
脂质双层
外
PreS1
衣
壳 外壳 PreS2
蛋白
HBsAg
HBcAg
内衣壳 HBeAg
乙肝病毒Dane颗粒结构模式图
·
4
·
5
乙肝五项（二对半）及HBV DNA的临床意义
方法：ELISA或RIA检测。
HBsAg：最先出现，急性肝炎，慢性肝炎和携带者。 1-4个月消失，持续6个月为慢性肝炎。
RNA pregenome
修补正链
宿主RNA聚合酶
Ccc DNA
·
15
·
16
HBV的抗原抗体系统HBsAg和抗HBs1
HBsAg ：组装病毒外模的主蛋白（外膜蛋白包括主蛋白、中蛋
白、大蛋白）。外模蛋白与其相应的抗体形成复合物与一些肝外 疾病有关。
HBsAg: 只具有抗原性，无传染性
急性自限性HBV感染：感染HBV后1－2周（11－12周）HBsAg 出现，持续1－6周（20周）。
代偿性肝硬化
病毒感染
慢性肝炎
慢性HBV感染临床诊断小结
携带者
慢性乙肝
隐匿性慢性乙 肝
乙肝 肝硬化
乙肝相关肝 癌
HBeAg+ HBeAg-
乙肝
乙肝
代偿期
失代偿期
HBV携带 者(HBV
DNA+)
非活动性 HBsAg携带者 (HBV DNA－)
轻、中、重
·
活动期和静止期
14
HBV的复制过程
HBV DNA 聚合酶
e
cap
3.5kb
·
3
双股DNA 核心
DNA多聚酶
有逆转录酶活性 有合成DNA功能
脂质双层
外
PreS1
衣
壳 外壳 PreS2
蛋白
HBsAg
HBcAg
内衣壳 HBeAg
乙肝病毒Dane颗粒结构模式图
·
4
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5
乙肝五项（二对半）及HBV DNA的临床意义
方法：ELISA或RIA检测。
HBsAg：最先出现，急性肝炎，慢性肝炎和携带者。 1-4个月消失，持续6个月为慢性肝炎。
RNA pregenome
修补正链
宿主RNA聚合酶
Ccc DNA
·
15
·
16
HBV的抗原抗体系统HBsAg和抗HBs1
HBsAg ：组装病毒外模的主蛋白（外膜蛋白包括主蛋白、中蛋
白、大蛋白）。外模蛋白与其相应的抗体形成复合物与一些肝外 疾病有关。
HBsAg: 只具有抗原性，无传染性
急性自限性HBV感染：感染HBV后1－2周（11－12周）HBsAg 出现，持续1－6周（20周）。
代偿性肝硬化
病毒感染
慢性肝炎
乙肝两对半的意义PPT课件
●抗-HBs为保护性抗体（中和抗体） 其出现标志着HBV感染进入恢复期
●抗-HBs 对相同 HBsAg亚型的HBV再感染有免 疫力，但对不同亚型的HBV保护力不完全。
.
5
（3）HBeAg
HBeAg是HBcAg的降解产物HBV Βιβλιοθήκη 基因前C区C区 表达
HBeAg
前C / C 蛋白 切割、加工
HBcAg
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
抗-HBc
＋ ＋ ＋ ＋
＋
有过HBV感染，目前有无传染性应结合 HBV DAN结果
.
21
“两对半”分析举例
HBsAg 抗-HBs HBeAg 抗-HBe
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
抗-HBc
＋ ＋ ＋ ＋
＋
HBV感染的恢复期，有免疫力，无传染性
.
22
“两对半”分析举例
HBsAg 抗-HBs HBeAg 抗-HBe
仍阳性
可能与前C基因变异有关
易加重病情、易演变为肝硬化 . α-干扰素疗效亦较差 8
乙肝
（5）HBcAg
●HBcAg主要存在于HBV感染的肝细胞内或DANE颗粒 核心中，到血液中即被降解为HBeAg。
一般血清学方法检测不到HBcAg，而只能检测到抗-HBc
.
9
（6）抗-HBc
持续时间：6～18个月
抗HBc-IgM：是HBV近期感染或慢性感染者病毒活动的标志
抗HBc-IgG：凡“有过” HBV感染者均可阳 性
可终身阳性
HBcAg的免疫原性最强
●抗-HBs 对相同 HBsAg亚型的HBV再感染有免 疫力，但对不同亚型的HBV保护力不完全。
.
5
（3）HBeAg
HBeAg是HBcAg的降解产物HBV Βιβλιοθήκη 基因前C区C区 表达
HBeAg
前C / C 蛋白 切割、加工
HBcAg
＋
＋
＋
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＋
＋
＋
抗-HBc
＋ ＋ ＋ ＋
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有过HBV感染，目前有无传染性应结合 HBV DAN结果
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“两对半”分析举例
HBsAg 抗-HBs HBeAg 抗-HBe
＋
＋
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＋
＋
＋
抗-HBc
＋ ＋ ＋ ＋
＋
HBV感染的恢复期，有免疫力，无传染性
.
22
“两对半”分析举例
HBsAg 抗-HBs HBeAg 抗-HBe
仍阳性
可能与前C基因变异有关
易加重病情、易演变为肝硬化 . α-干扰素疗效亦较差 8
乙肝
（5）HBcAg
●HBcAg主要存在于HBV感染的肝细胞内或DANE颗粒 核心中，到血液中即被降解为HBeAg。
一般血清学方法检测不到HBcAg，而只能检测到抗-HBc
.
9
（6）抗-HBc
持续时间：6～18个月
抗HBc-IgM：是HBV近期感染或慢性感染者病毒活动的标志
抗HBc-IgG：凡“有过” HBV感染者均可阳 性
可终身阳性
HBcAg的免疫原性最强
乙肝两对半检验报告解读教学讲义PPT
个人卫生
保持良好的个人卫生习惯，勤洗手、避免与他人共用餐具等物品 ，以降低病毒传播风险。
防护措施
在公共场所、医院等地方，应采取必要的防护措施，如佩戴口罩、 保持社交距离等，以降低感染风险。
避免接触血液和体液
避免直接接触乙肝患者的血液和体液，尤其是皮肤有破损时更应注 意防护。
THANKS
感谢观看
判断传染性
HBeAg阳性表示病毒正在复制， 并且具有传染性。若HBeAg阴性 ，则表示病毒复制相对较低，传 染性较弱。
评估治疗效果
监测抗病毒治疗的效果
在接受抗病毒治疗后，患者需要定期 进行乙肝两对半检验，以监测治疗效 果。若治疗后HBsAg、HBeAg等指 标逐渐降低，则表明治疗有效。
指导后续治疗方案
CHAPTER
04
乙肝两对半检验报告的注意事 项
报告的时效性
01
乙肝两对半检验报告的有效期通 常为1-2个月，超过这个时间，报 告的结果可能不再准确反映受检 者的乙肝病毒感染状态。
02
如果在报告有效期内，受检者出 现乙肝病毒感染症状或接触过乙 肝病毒携带者，建议重新进行乙 肝两对半检验。
报告的准确性
选择正规的医疗机构进行乙肝两对半 检验，以确保检验结果的准确性。
在进行乙肝两对半检验前，应避免饮 酒、过度疲劳或服用可能影响肝脏功 能的药物，以免影响检验结果。
报告的隐私保护
乙肝两对半检验报告涉及个人隐私，应妥善保管，避免泄露 个人信息。
如发现报告结果异常，应及时咨询专业医生，并遵循医生的 建议进行治疗和复查，以免延误病情。
乙肝两对半检验报告解 读教学讲义
CONTENTS
目录
• 乙肝两对半检验报告概述 • 乙肝两对半检验报告解读 • 乙肝两对半检验报告的临床意义 • 乙肝两对半检验报告的注意事项 • 乙肝两对半检验报告的后续处理建议
乙肝两对半检测相关问题 PPT课件
变异率高 ，自然变异和免疫逃避，变异无 地域性。
HBsAg抗原性发生改变，不能被野生型 HBsAb所识别。 此时用一般的国产试剂盒可能 检不出。
能导致HBsAg阴性的S区变异
145甘氨酸
精氨酸
aa124 半胱氨酸
酪氨酸
aa129 谷氨酸 天冬氨酸
aa131 苏氨酸 天冬氨酸
aa131 蛋氨酸 苏氨酸 aa122-124 插入氨基酸 前S1/S2部分缺失
乙肝两对半免疫学检测相关问题研讨
HBV感染的实验室检测是目前国内最为常见的 检验项目，也是医患纠纷产生较多的领域之一。
乙肝两对半： HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb。
检测结果：定性、半定量、定量。 试剂原材料：抗原（天然抗原、重组抗原）、抗
体（单抗、多抗、Fab）。 就一定漏检。很多时 候野生型与突变型是混合存在的，这种情况虽然有突变， 同样可以检出 。
4)RF引起的假阳性
RF是一种自身抗体，能和多种动物IgG的Fc段结 合。由于固相抗体和标记抗体均为IgG，双抗体夹心 法测抗原可能有RF的干扰，产生假阳性。
固相IgG
固 相 载 体
固相McAb
标记McAb
固 相 载 体
人抗鼠抗体
Human Anti-Mouse Antibodies (HAMA)
HAMA效应的假阴性模式:
Figure 3-6 How HAMA generates a false negative
3) S基因突变引起的HBsAg漏检：
基因突变引起“a”决定簇内部一个或多个 氨基酸置换、缺失或插入，HBsAg 蛋白质氨 基酸组成发生改变，导致其抗原性产生变化。
产生HAMA的原因：
HBsAg抗原性发生改变，不能被野生型 HBsAb所识别。 此时用一般的国产试剂盒可能 检不出。
能导致HBsAg阴性的S区变异
145甘氨酸
精氨酸
aa124 半胱氨酸
酪氨酸
aa129 谷氨酸 天冬氨酸
aa131 苏氨酸 天冬氨酸
aa131 蛋氨酸 苏氨酸 aa122-124 插入氨基酸 前S1/S2部分缺失
乙肝两对半免疫学检测相关问题研讨
HBV感染的实验室检测是目前国内最为常见的 检验项目，也是医患纠纷产生较多的领域之一。
乙肝两对半： HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb。
检测结果：定性、半定量、定量。 试剂原材料：抗原（天然抗原、重组抗原）、抗
体（单抗、多抗、Fab）。 就一定漏检。很多时 候野生型与突变型是混合存在的，这种情况虽然有突变， 同样可以检出 。
4)RF引起的假阳性
RF是一种自身抗体，能和多种动物IgG的Fc段结 合。由于固相抗体和标记抗体均为IgG，双抗体夹心 法测抗原可能有RF的干扰，产生假阳性。
固相IgG
固 相 载 体
固相McAb
标记McAb
固 相 载 体
人抗鼠抗体
Human Anti-Mouse Antibodies (HAMA)
HAMA效应的假阴性模式:
Figure 3-6 How HAMA generates a false negative
3) S基因突变引起的HBsAg漏检：
基因突变引起“a”决定簇内部一个或多个 氨基酸置换、缺失或插入，HBsAg 蛋白质氨 基酸组成发生改变，导致其抗原性产生变化。
产生HAMA的原因：
如何看懂“乙肝两对半”PPT课件
如何看懂“乙肝两对半”
第二军医大学长征医院南京分 院肝脏科
第1项（HBsAg）:乙肝病毒感染。 第2项（HBsAb）:感染后免疫，对疫苗的免疫应答；
或乙肝免疫球蛋白的被动免疫。 第3项（HBeAg）:反映乙肝病毒复制，有病毒血症， 血液有高传染性。 第4项（HBeAb）:ALT持续正常者表示乙肝病毒低复 制或不复制，HBsAg(+)血液低传染性，ALT波动者表 示病毒变异。 第5项（HBcAb）:低滴度表示过去感染，高滴度表示 现行感染。
1，2，4，5项阳性，多为病毒变异引起，分
析等同于“小三阳”。
2，3，5项阳性，为病毒变异引起，为乙肝病
毒变异株活动期表现。
1项阳性，反映为乙肝病毒携带者；或处于乙
肝病毒急性感染期，应注意复查。
5项阳性，反映为既往有乙肝病毒感染，现已
完全清除，但对乙肝病毒无免疫性，应注意 复查，必要时注射乙肝疫苗。
1,2,3,4,5项均阴性，为正常但对乙肝病毒无
免疫力的人群，应及时注射乙肝疫苗进行保 护。
2，4，5项阳性，多考虑急性乙肝病毒感染的
恢复阶段，应注意复查；或有合并其他肝炎 病毒感染，应加以排除。
2，5项阳性，多考虑因感染乙肝病毒，而出
现保护性抗体，应注意复查。
1，3，5项阳性，俗称“大三阳”，表示乙肝
祝 您SUCCESS
2019/4/20
病毒处于活动期。应进一步检查，以确定治 疗方法。
1，4，5项阳性，俗称“小三阳”，如结合肝
功能正常，则考虑乙肝病毒处于非活动期； 如肝功能异常，则多考虑有病毒变异株活动。
THANK
YOU
SUCCESS
2019/4/20
1，2，3，5项阳性，主要是病毒变异引起，
第二军医大学长征医院南京分 院肝脏科
第1项（HBsAg）:乙肝病毒感染。 第2项（HBsAb）:感染后免疫，对疫苗的免疫应答；
或乙肝免疫球蛋白的被动免疫。 第3项（HBeAg）:反映乙肝病毒复制，有病毒血症， 血液有高传染性。 第4项（HBeAb）:ALT持续正常者表示乙肝病毒低复 制或不复制，HBsAg(+)血液低传染性，ALT波动者表 示病毒变异。 第5项（HBcAb）:低滴度表示过去感染，高滴度表示 现行感染。
1，2，4，5项阳性，多为病毒变异引起，分
析等同于“小三阳”。
2，3，5项阳性，为病毒变异引起，为乙肝病
毒变异株活动期表现。
1项阳性，反映为乙肝病毒携带者；或处于乙
肝病毒急性感染期，应注意复查。
5项阳性，反映为既往有乙肝病毒感染，现已
完全清除，但对乙肝病毒无免疫性，应注意 复查，必要时注射乙肝疫苗。
1,2,3,4,5项均阴性，为正常但对乙肝病毒无
免疫力的人群，应及时注射乙肝疫苗进行保 护。
2，4，5项阳性，多考虑急性乙肝病毒感染的
恢复阶段，应注意复查；或有合并其他肝炎 病毒感染，应加以排除。
2，5项阳性，多考虑因感染乙肝病毒，而出
现保护性抗体，应注意复查。
1，3，5项阳性，俗称“大三阳”，表示乙肝
祝 您SUCCESS
2019/4/20
病毒处于活动期。应进一步检查，以确定治 疗方法。
1，4，5项阳性，俗称“小三阳”，如结合肝
功能正常，则考虑乙肝病毒处于非活动期； 如肝功能异常，则多考虑有病毒变异株活动。
THANK
YOU
SUCCESS
2019/4/20
1，2，3，5项阳性，主要是病毒变异引起，
乙肝两对半的解读课件
乙肝两对半中某项指标阳性
总结词
可能存在乙肝病毒感染或疫苗接种史
详细描述
注意事项
需要进一步检查肝功能和乙肝病毒 DNA，以确定是否需要治疗。同时， 需要定期复查乙肝两对半，以监测病 情变化。
乙肝两对半中某项指标阳性表示受检 者体内可能存在乙肝病毒感染或曾经 接种过乙肝疫苗。
04 乙肝两对半与疾病状态的关系
这五项指标的变化可以反映乙型肝炎病 毒在体内的感染状态和免疫状况，对于 诊断、治疗和预后评估具有重要意义。
HBsAg阳性表示病毒在体内复制活跃， 具有传染性；HBsAb阳性表示机体已产 生免疫力，对病毒有一定的抵抗力。
乙肝两对半异常的疾病状态
HBsAg和HBcAb阳性
HBsAg和HBeAg阳性
表示病毒在体内复制活跃，具有传染性， 可能存在慢性肝炎或肝硬化。
表示病毒在体内大量复制，传染性强，可 能存在慢性肝炎或肝硬化。
HBsAb和HBcAb阳性
HBeAb和HBcAb阳性
表示机体已产生免疫力，对病毒有一定的 抵抗力，但病毒仍在体内复制，可能存在 慢性肝炎或肝硬化。
表示病毒复制减弱，传染性降低，但机体 仍存在免疫应答，可能存在慢性肝炎或肝 硬化。
乙肝两对半正常与异常的疾病状态比较
肝脏有损害的药物。
谢谢
THANKS
乙肝两对半的检测意义
01
判断是否感染HBV
通过检测HBsAg和HBcAb，可以确定个体是否感染了HBV。HBsAg阳
性表示正在感染HBV，而HBcAb阳性则表示曾经感染过HBV。
02 03
评估病情
HBeAg和HBeAb的检测可以用来评估病情的严重程度。HBeAg阳性表 示病毒复制活跃，传染性强，而HBeAb阳性则表示病毒复制受到抑制 ，传染性降低。
乙肝五项指标二对半ppt课件
·
11
9
9、急性感染早期或者慢性乙肝 表面抗原携带都传染性弱。
09.12.2020
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12
10
10、慢性乙肝表面抗原携带者易转阴 或者是急性感染趋向恢复。
09.12.2020
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13
11
11、早期乙肝惑染或者慢性携带者， 传染性强。
09.12.2020
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14
12
12、急性乙肝感染趋向恢复。 或者为慢性携带者。
09.12.2020
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15
09.12.2020
·
4
2
2、急性乙肝感染阶段或是慢性 乙肝表面抗原携带者。 传染性弱些。
09.12.2020
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5
3
3、乙肝已趋向恢复，属于慢性携带者。 传染性弱，长期持续此状态可转变为 肝癌。
09.12.2020
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6
4
4、既往感染过乙肝，现仍有免疫力， 属于不典型恢复期。 也可能为急性乙肝感柒期。
乙肝五项指标(二对半)的说明
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
乙肝五项正常检验结果
1.
乙肝表面抗原
(HBsAg)
2.
乙肝表面抗体
(HBsAb)
3.
乙肝e抗原(HBeAg)
4.
乙肝e抗体(HBeAb)
5.
乙肝核心杭体
09.12.2020
(HBcAb)·
2
乙肝检验结果
09.12.2020
·
3
1
1、俗称三大阳: 说明患者是慢性肝炎，有传染性. 处于活动期。
09.12.2020
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7
5
5、既往有乙肝感染。 属于急性感染恢复期，少数人仍有传染性
(精选课件)ELISA2-乙肝两对半PPT幻灯片
(450nm处测定吸光度)。
.
结果判断及解释
COV=2.1 × OD阴性对照（ OD阴性对照低于0.05 按0.05计算）
阳性：OD样品≥COV 阴性：OD样品＜COV
检测有效性
OD阴性对照≤0.10，OD阳性对照≥1.0 OD空白对照≤0.015（双波长检测）
15
.
e抗体检测(竞争抑制法)
1. 准备：试剂盒各组份在37℃平衡30min； 2. 配洗涤液：用纯化水按1:25将浓缩洗液稀释； 3. 加样品：每孔50ul，同时设阳性对照、阴性
12
.
e抗原检测(夹心法)
1. 准备：试剂盒各组份在37℃平衡30min； 2. 配洗涤液：用纯化水按1:25将浓缩洗液稀释； 3. 加样品：每孔50ul，同时设阳性对照、阴性
对照和空白对照（不加样品）； 4. 加酶结合物：每孔50ul（空白对照不加）； 5. 孵育：贴上封膜，37 ℃反应30min；
13
6. 洗板：洗板机5次，每次洗液在孔中滞留 时间10-15s，并注满反应微孔；
.
7. 显色：先加显色液A50ul，再加入显色液 B50ul，贴上封膜，37℃反应15min(避 光)；
（注：显色从加入第一滴显色液B开始计时）
8. 终止：加终止液50ul；
9. 判读：终止反应后10min内完成。
14
处测定吸光度)。 8
.
结果判断及解释
COV=2.1×OD阴性对照 阳性：OD样品≥COV 阴性：OD样品＜COV
检测有效性
OD阴性对照≤0.10， OD阳性对照≥1.0 OD空白对照≤0.04（双波长检测）
9
.
表面抗体检测(夹心法)
1. 准备：试剂盒各组份在37℃平衡30min； 2. 配洗涤液：用纯化水按1:25将浓缩洗液稀释； 3. 加样品：每孔加50ul，同时设阳性对照、阴
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影响检测结果的因素
3.操作技术的影响 3.1 加样吸嘴的洁净 与否和吸量的准确性， 直接影响检测结果。
常见模式及临床意义
HBsAg HBsAb
HBeA g
+
－
+
+
－
－
+
－
－
+
－
－
+
－
+
+
－
－
HBeA b
HBcAb
临床意义
－
+
急性或慢性乙型肝炎感染；提示HBV 复制，传染性强－大三阳
+
+
急性HBV感染趋向恢复；慢性HBsAg 携带者；传染性弱－小三阳
夹心法 HBsAg
HBeAg
夹心法 HBeAb
HBeAb
竞争法 HBeAb
HBcAb
竞争法 HBcAg
标记或结合物 HBsAb HBsAg
结果判断 显色(+) 显色(+)
HBeAb
显色(+)
HBeAb及中和抗 原
HBcAb
不显色(+) 不显色(+)
结果判定
2.酶标仪判定：用酶标仪单波长450nm 或双波长450nm/630nm测定各孔OD 值，根据OD值判定结果
b
临床意义
－
+
+
－
+ 非典型性或亚临床型HBV感染
－
+
－
－
－
注射过乙肝疫苗有免疫力；既往感染； 假阳性
－
+
－
+
+ 急性HBV感染后康复
－
+
－
+
－ HBV感染后已恢复
－
+
－
－
+
既往感染，仍有免疫力；HBV感染恢复 期
既往感染未能测出HBsAb；恢复期
竞争法 HBcAg
标记或结合物 结果判断
HBsAb HBsAg
显色(+) 显色(+)
HBeAb
显色(+)
HBeAb及中和抗 原
HBcAb
不显色(+) 不显色(+)
标本本要求
采集： 血浆：使用抗凝血浆 管（枸橼酸盐、 EDTA盐、肝素之一 为抗凝剂）采集样品。
标本要求
储存：样品可存放于 2~8℃冰箱，24小时 内测定。若需长时间 保存，则应冻存于20℃以下，避免反复
1个 1份 3张
实验前准备
1.取出试剂盒及待测 样品，将所有试剂及 样品恢复至室温 （18~25℃）。 2.将恒温箱或水浴锅
检验步骤
排板
检验步骤
表面抗原（两步法）
1.留一孔作空白对照， 加入样本稀释液20ul/ 孔（含空白孔），其 他加入阴性对照三孔
检验步骤
4.撕下板贴，除空白孔外，各孔加入酶结合物50ul。 5.在微型振荡器上振荡30秒使孔内液体混合均匀
注意事项
所有样本都应按传染源处理。 样品显色深浅与样品中抗体的含量没有
一定正相关。任何一种测试都不能绝 对保证样品中没有低浓度的抗体存在。 不同品名、不同批号的试剂不可混用， 以免产生错误结果。
影响检测结果的因素
1.样本采集与处理的 影响 1.1 标本严重溶血。 1.2 标本凝固不全： 血液还未开始凝固时
试剂（安图生物）
主要组成成分
编号
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
组分名称
包被板 样品稀释液
酶结合物 底物液 显色剂 洗涤液 终止液 阴性对照 阳性对照 子母袋 说明书
板贴
96人份
69孔X1块 2.3ml X1瓶 5.5ml X1瓶 6.2ml X1瓶 6.2ml X1瓶 30ml X1瓶 5.5ml X1瓶 1.0ml X1瓶 1.0ml X1瓶
5.撕下板贴，洗板6次，最后在吸水纸上拍干。 6.每孔加入底物液、显色剂各50ul，37℃避光反应10
分钟。 7.加终止液50ul/孔，轻轻振荡混匀后，立即测试结
果。 8.使用酶标仪450nm单波长测量各孔的OD值。
结果判定
1.肉眼判定
血清学标志 原理 包被试剂
HBsAg
夹心法 HBsAb
HBsAb
注意事项
浓缩洗涤液配制前充分摇匀。 加样本时要加到孔底。 加试剂前应将试剂瓶翻转数次，使液
体混匀。 如果滴加，滴加前应弃去1-2滴。
注意事项
滴加时瓶身应保持垂直，以使滴量准确。 勿将试剂滴在孔壁上。
洗涤时各孔须加满，防止孔口内有游离 酶残留。
洗涤时注意孔与孔之间的交叉污染。 脂血，溶血可影响结果。
（该步骤非常重要）。 6.贴上板贴，置37℃下温育30分钟。 7.撕下板贴，洗板6次，最后在吸水纸上拍干。 8.每孔加入底物液、显色剂各50ul，37℃避光温育30
分钟。
检验步骤
9.加终止液50ul/孔， 轻轻振荡混匀后，立 即测试结果。
10.使用酶标仪450nm 单波长测量各孔的
检验步骤
表面抗体、e抗原、e抗体、核心抗体（一步法） 1.留一孔空白，三孔加入阴性对照、二孔加入阳
－
+
急性HBV感染；慢性HBsAg携带者； 传染性弱
+
－
慢性HBsAg携带者易转阴；急性HBV 感染趋向恢复
－
－
急性HBV感染早期或慢性携带者，传 染性强
－
－
急性HBV感染早期；急性HBV感染潜 伏期；慢性HBV携带者，传染性弱
常见模式及床意义
HBsA HBsA HBe HBe HBcA
g
b
Ag Ab
乙肝两对半测定 －酶联免疫法
实习生：廖於波 指导老师：李海龙
HBV是乙型病毒性肝 炎的病原体。HBV感 染呈世界性流行，但 不同地区感染的流行 程度差异很大。据
乙肝病毒血清标志物
HBsAg
第一个出现，感染后1-2周即可阳性 阳性表示存在HBV感染
HBsAb
出现在HBsAg消失后 保护性抗体 疫苗免疫成功的标志
酶联免疫吸附实验原理
用于检测包被于固相 板孔中的待测抗原 （或抗体）。即用酶 标记抗体，并将已知 的抗原或抗体吸附在
乙肝病毒血清标志物检测原理
血清学标志 原理 包被试剂
HBsAg HBsAb
夹心法 HBsAb 夹心法 HBsAg
HBeAg HBeAb
夹心法 HBeAb 竞争法 HBeAb
HBcAb
性对照各50ul/孔，其他各孔分别加入样本50ul (HBcAb测定时待测血清用生理盐水1:30稀释 －50ul血清+1.5ml生理盐水) 。 2.除空白孔外，各孔加入酶结合物50ul。 3.在微型真当器上振荡30秒使孔内液体混合均匀 （该步骤非常重要）。 4.贴上板贴，置37℃下温育30分钟。
检验步骤
乙肝病毒血清标志物
HBeAg
病毒复制标志 传染性强
HBeAb
传染性降低 长期存在是DNA与肝细胞整合的结果
乙肝病毒血清标志物
HBcAg
HBV复制的标志 血清中难以检测出来
IgM-HBcAb
急性HBV感染
IgG-HBcAb
急性感染恢复期和慢性持续感染
检测HBV病毒血清标 志物是临床最常用的 病原学诊断方法。 HBV具有三个抗原抗 体系统，即乙肝表面