色谱分析ppt课件

多机联用与微机化、自动化是现代分析仪器发展
的重要趋势。
色谱流出曲线及有关术语
1.色谱图（chromatogram） 表明已被色谱柱分离的物质流过检测器的含量 与时间的关系。
2.基线（base line）
是图中与时间轴平行t的记录线b。它表明纯流动相流过检
测器时所产生的响应。判断基线稳定与否的标准是基线稳定
• 色谱分离中的两相是指系统具有一个有大比表面
积的固定相（stationary phase）（可以是固体或以
某种方式固定了的液体）和一个能携带待分离混合
物流过固定相的所谓流动相（mobile phase）（可
以是气体或液体）。
• 色谱工作就是根据被测样品（混合物）的性质，
选择适当的两相和其他操作条件，利用分离系统
将各个组分分离开来，通过检测系统进行定性、
定量分析。具有高分辨率、高灵敏度、样品量少
且速度较快、结果准确等优点，是分析混合物的
有效wenku.baidu.com法。
色谱分析的基本原理
• 色谱是利用待分离的样品组分在两相中分配的差异而实现 分离的。
色谱法是一种分离、分析方法，有时又称为层析技术。它利用被
分离的诸物质在互不相溶的两相中分配系数等的微小差异进行分 离。当两相作相对移动时，使被测物质在两相之间进行反复多次
性，即基线b与时间轴t平行或偏离的程度。
色谱峰 信 号 进样
空气峰
h
a



色谱流出曲线和色谱峰 基线（a） 峰高（h）
•
色谱仪（chromatograph）的实质是利用色谱分 离技术再加上检测技术，对混合物进行先分离 后检测，从而实现对多组分的复杂混合物进行
定性、定量分析。
在色谱法中，将填入玻璃管或不锈钢管内静止不动的一相（固体 或液体）称为固定相 ； 自上而下运动的一相（一般是气体或液体）称为流动相 ； 装有固定相的管子（玻璃管或不锈钢管）称为色谱柱 。
色谱技术的分类
1.按两相状态分类 气体为流动相的色谱称为气相色谱（GC） 根据固定相是固体吸附剂还是固定液（附着在惰性载体上的一 薄层有机化合物液体），又可分为气固色谱（ GSC）和气液色 谱（GLC）。 液体为流动相的色谱称液相色谱（LC） 超临界流体为流动相的色谱为超临界流体色谱（SFC）。
分配，使原来微小的差异累加产生了很大的效果，形成差速迁移
，使各组分在柱内移动的同时逐渐分离，以达到分离、分析及测 定一些物理化学常数的目的。
色谱过程
吸附→解吸→再吸附→再解吸 两种组分的理化性质原本 存在着微小的差异，经过反复 多次地吸附→解吸→再吸附→ 再解吸的过程使微小差异累积 起来，结果使吸附能力弱的组
色谱法的特点
1．分离效率高：可在很短的时间内分离多达二、三百个组 分的复杂物质，柱效能可达106的理论板。 2．检测能力强：可以检测出10-11~10-15克级的痕量组分，能 满足环境检测、农药残留等大量日常检测 分析的需要。 3．样品用量少：样品用量一般为微升级，少的可达纳克级。 4．适用范围广：几乎所有与化学有关的领域都有其用武之 地。
第十八章 色谱分析技术和色谱 分析仪器

色谱法早在1903年由俄国植物学家茨维特分离植物色素 时采用。

他在研究植物叶的色素成分时，将植物叶子的萃取物倒 入填有碳酸钙的直立玻璃管内，然后加入石油醚使其自 由流下，结果色素中各组分互相分离形成各种不同颜色
的谱带。这种方法因此得名为色谱法。以后此法逐渐应
用于无色物质的分离，“色谱”二字虽已失去原来的含 义，但仍被人们沿用至今。

英国生物学家Martin和Synge。他们首先提出了色谱塔板 理论，发明分配色谱（1952年获诺贝尔化学奖）。

1944年出现纸色谱以后，色谱法不断发展，相继出现薄 层色谱、亲和色谱、凝胶色谱、气相色谱、高压液相色 谱（HPLC）等。

同理液相色谱亦可分为液固色谱（LSC）和液液色谱（LLC）。
随着色谱工作的发展，通过化学反应将固定液键合到载体表面，这 种化学键合固定相的色谱又称化学键合相色谱（CBPC）。
2.按分离机理分类 利用组分在吸附剂（固定相）上的吸附能力强弱不同而得以分离 的方法，称为吸附色谱法。 利用组分在固定液（固定相）中溶解度不同而达到分离的方法称 为分配色谱法。 利用组分在离子交换剂（固定相）上的亲和力大小不同而达到分 离的方法，称为离子交换色谱法。 利用大小不同的分子在多孔固定相中的选择渗透而达到分离的方 法，称为凝胶色谱法或尺寸排阻色谱法。

20世纪50年代气液色谱的创立和发展具有划时代的意义
，催生了许多现代色谱方法。
第一节 色谱法概述
引 言
色谱法（chromatography）是一种物理分离技
术，实质上是利用混合物中各个组分在互不相溶
的两相（固定相和流动相）之间的分配的差异而
使混合物得到分离的一种方法，也有人称之为色
层法、层析法等。
最近，又有一种新分离技术，利用不同组分与固定相（固定化分子） 的高专属性亲和力进行分离的技术称为亲和色谱法，常用于蛋白 质的分离。
3. 按固定相的外型分类
固定相装于柱内的色谱法，称为柱色谱。
固定相呈平板状的色谱，称为平板色谱，它又可分为薄层色谱和纸色谱。
4. 按照展开程序分类

按照展开程序的不同，可将色谱法分为洗脱法、顶替法、和前沿法。
与光谱仪、质谱仪等分析仪器相比较，色谱仪 的突出优点是对多组分混合物分离、分析能力较 强，其分析灵敏度与质谱仪接近，比光谱仪高。 而且造价低，使用方便。
色谱仪最大的不足之处是难于分析未知物。因 此，可以将其与光谱仪、质谱仪联合起来使用，
优势互补，形成色谱-光谱法、色谱-质谱法联用
技术，再配备上微机进行自动控制与信息处理。
分先流出色谱柱，吸附能力强
的组分后流出色谱柱，从而使 各个组分得到了分离。
检 测 器
1
2
3
色 谱 柱 （ 固 定 相 ） 样品组分 1＋2＋3 响 应 R 流动相 进 样 峰 流动相
2 1 2 3 3
3
流动相
流动相
1
流动相
2
流动相
3
时间（t）
图5.1 色谱分离原理示意图
由此可见，色谱分离的两要素是互不相溶的两 相（流动相及固定相）以及样品（混合物）各组 分在两相中分配的差异，它是决定色谱最终分离 结果好坏的基础。