生殖道标本细菌学检验标准操作规程

生殖道标本细菌学检验标准操作规程

1.目的

规范生殖道标本细菌学检验标准操作规程，确保检验结果准确可靠。

2.适用范围

生殖道标本培养或涂片检查。

3.标本

3.1 标本类型生殖道标本。

3.2 标本采集

3.2.1 女性由临床医师用无菌棉拭子采集阴道、宫颈分泌物。怀疑盆腔炎厌氧菌感染时，由医师用注射器从阴道后穹窿穿刺抽取标本，立即床边接种于厌氧菌平板。

3.2.2 男性翻转包皮，用肥皂水清洗尿道口，清水冲洗，采集尿道口分泌物。采集前列腺液时，先冲洗尿道和膀胱，用手指从肛门内按摩前列腺，使前列腺液溢出。

3.2.3 梅毒螺旋体标本从外生殖器的硬下疳处蘸取渗出液，置于载玻片上，加盖玻片后立即送检。

3.3 标本拒收标准

3.3.1 化验申请单与标本不符。

3.3.2 标本不是用无菌容器留取。

4. 试剂、仪器

4.1 革兰染液、氧化酶试剂、3%触酶、血琼脂平板、巧克力平板、麦克凯平板、相关生化试剂等。

4.2 VITEK鉴定系统；革兰阴性菌鉴定卡（GNI+）、革兰阴性菌药敏卡（GNS）、革兰阳性菌鉴定卡（GPI）、革兰阳性菌药敏卡（GPS）、真菌鉴定卡（YBC）、药敏纸片、TBA板条等，有效期及储存条件参见试剂说明书。

4.3 接种针、接种环、电热灼烧器、显微镜、孵育箱、CO2培养箱等。

5. 细菌鉴定和药敏质控

参见《质量管理程序》

6. 检验步骤

接收标本后，立即对标本进行编号、登记。

涂片检查

6.1.1 革兰染色镜检观察阴道分泌物中有无细菌，以及细菌形态和染色性，尤其注意观察有无白细胞内外的革兰阴性双球菌（淋病奈瑟菌），以及有无覆盖大量革兰阴性菌的上皮细胞，（线索细胞，提示可能有阴道加特纳菌感染）。

6.1.2 梅毒螺旋体图涂片检查直接暗视野检查，观察有无纤细、发亮、前后旋转的密螺旋体，或冯泰纳染色，观察有无棕黑色的密螺旋体。

6.2 分离培养

6.2.1 一般细菌培养接种于血琼脂平板和麦康凯平板，置于5%-10%CO2环境中，35°C培养18-24小时。

6.2.2 淋病奈瑟菌培养接种于GC琼脂平板，置于5%-10%CO2环境中，35°C培养18-24小时，观察有无较小、灰白色、露滴状菌落形成，进一步生化鉴定。

6.2.3 阴道加特纳菌培养接种于5%羊血琼脂平板，5%-10%CO2环境中环境培养48小时，观察有无形成针尖大小（0.3-0.5）、圆形、光滑、不透明、不溶血（在人血或兔血琼脂平板上可出现β溶血）的菌落。

结核分枝杆菌培养参见《分支杆菌属检验标准操作规程》。

7. 结果报告

报告菌名和抗菌药物药敏结果试验结果。

注意事项

取阴道分泌物之前避免性生活、阴道冲洗和用药。

临床意义

正常的内生殖道是无菌的，而外生殖器（包括男性尿道口和女性阴道）有多种细菌寄生，如尿道口的常见有葡萄球菌、类白喉棒状杆菌和非结核分枝杆菌，阴道常见有乳杆菌、双歧杆菌、消化球菌等。查见病原菌提示有细菌感染，如急、

慢性前列腺炎，睾丸炎、精囊炎、附睾炎、阴道炎，急慢性淋病等。常见病原菌主要有葡萄球菌、肠球菌、链球菌、淋病奈瑟菌、大肠埃希菌、变形杆菌等。