微生物实验-细菌培养、接种 f讲课教案

利用枸橼酸盐生长 +
不能利用
-
硫化氢试验
硫化氢试验（醋Baidu Nhomakorabea铅培养基）
某些细菌分解含硫氨基酸，生成H2S， H2S遇铁盐（如硫化亚铁、醋酸铅等）， 则形成黑褐色硫化铁（铅）沉淀物，而 呈黑色为（＋）。
尿素酶试验
产生氨使培养基变碱， 指示剂显红色，为阳性。 如：变形杆菌为阳性。
IMViC试验
IMViC试验
I - 吲哚（indol）试验 M - 甲基红（methyl red）试验 V - VP（Voges-Proskauer）试验 C -枸橼酸盐利用（citrate utilization）试验
I M Vi C试验
大肠埃希菌 + + - -
产气杆菌
- - ++
IMViC试验： 是吲哚、甲基红、V-P以及枸橼酸盐利用试验四者的合称。常用于肠道杆菌的鉴定。
手
发
衣
盖上，标记 , 置 37℃，18-24h后观察。
飞沫、空气中细菌检查
材料：血平板 （1份/组）
距口15—20cm 用力咳嗽三次
置空气中 （避日光照射）
30分钟
飞沫
空气
盖上，标记 , 置 37℃，18-24h后观察。
结果观察——血平板
表皮葡萄球菌在血 琼脂平板培养基上 形成不溶血的菌落。
甲型溶血性链球菌形 成的α溶血现象也称 为甲型溶血现象或草 绿色溶血现象，属于 不完全溶血。
实验小结
1、三类培养基
➢液体培养基——用于增菌； 均匀混浊、沉淀、表面生长
➢ 半固体培养基——观察动力；保存菌种（6个 月）；穿刺线，扩散生长
➢ 固体培养基——分离纯化；保存菌种（1个月） 菌落、菌苔
2、IMViC试验
第三次实验课内容
1、热力对细菌和芽胞的杀菌作用 2、紫外线的杀菌作用 3、常用化学消毒剂的杀菌作用和抗生素敏感试验 4、耐药性变异； 5、细菌的鞭毛变异； 6、高压灭菌器的使用； 7、细菌的鉴定程序； 8、全自动微生物分析仪的基本原理及简单操作步骤
液体培养基
斜面培养基
半固体培养基
结果观察——普通平板
普通琼脂平板培养基上，大肠埃希菌形成菌苔和菌落生长现象。 注意：大小、颜色、透明度、凸起度、表面干燥或湿润、光滑或 粗糙、边缘是否整齐及血平板上的溶血情况。
结果观察——液体培养基
结果观察——斜面培养基
琼脂斜面培养基上大肠埃 希菌形成的菌苔生长现象
糖发酵试验
不同细菌分解糖类的能力和代谢产物不同。
甲基红（methyl red）实验
M - 甲基红（methyl red）实验 葡萄糖→丙酮酸→乙酰甲基甲醇 葡萄糖→丙酮酸
甲基红 甲基红 +
吲哚（indol）试验
I-吲哚（indol）试验
色氨酸→吲哚→玫瑰吲哚 ↑
对二甲基氨基苯甲醛
枸橼酸盐利用试验 C -枸橼酸盐利用（citrate utilization）试验
第二次实验课
内容
1.细菌培养法（录象） 2.基础培养基制备（讲解示教） 3. 细菌接种法（一份/组）讲解 4.人体、物品中细菌检查（一份/组）讲解 5.飞沫、空气中细菌检查（一份/桌）讲解 6.观察细菌代谢产物（讲解） 7. 第一次实验报告评讲
人体、物品中细菌检查
材料：普通平板 （1份/组）
钱
21
1
2
细菌代谢产物观察
细菌的酶不一样，对营养物质的分解能力不一样， 产生的代谢产物也不一样。
常见：
• 糖发酵试验 • 吲哚（indol）试验 • 甲基红（methyl red）实验 • VP（Voges-Proskauer）试验 • 枸橼酸盐利用（citrate utilization）试验 • 尿素酶试验 • 硫化氢试验
金黄色葡萄球菌形成 的β溶血现象也称为乙 型溶血现象，属于完 全溶血。
细菌培养接种法——平板划线法
菌种：混合菌液 材料：普通平板 用具：接种环 方法：分区划线
4区
原始区域
1区 2区
3区
细菌培养接种法--斜面接种、液体接种、半固体
菌种：大肠杆菌或葡萄球菌斜面 材料：斜面、液体、半固体培养基 用具：接种环、接种针
菌苔（mossy）
指细菌生长繁殖后，在培养基 表面形 成的一层培养物
结果观察——半固体培养基
1、 扩散生长：具有动力的 细菌,可见培养物扩散和培 养基变混浊。 即有鞭毛的细菌：由穿刺线 向外扩散生长（羽毛状或云 雾状）
2、原位生长：没有动力的 细菌，可见培养物没有扩散， 培养基仍然澄清。 即无鞭毛的细菌： 沿穿刺 线生长