动物细胞融合和单克隆抗体(终极版)
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1、在体外培养的条件下，一个B淋巴细胞有没 有可能无限增殖？ 不可能 2、我们学过的什么细胞具有这样的能力？
癌细胞
3、你认为有什么办法让B淋巴细胞也具有这样的能力？
细胞融合
２、实验原理：
一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞（癌细胞）能无限增殖
柯勒
单克隆 动物细胞培养技术 杂种细胞 动物细胞融合 抗体 既能产生特异性抗 体，又能大量繁殖 创始人：米尔斯坦
⑵.诱导方式：
二醇（PEG）
生物法： 灭活的病毒 例如：仙台病毒
3.意义和应用：
打破生殖隔离，使远缘杂交成为可能；
重要用途：制备单克隆抗体。
知识回顾
1、抗体是由何种细胞产生的？
三、单克隆抗体 浆细胞（效应B细胞）
2、抗体是如何产生的？
B淋巴细胞 抗原 增殖分化成浆细胞
浆 细胞 骨髓瘤细胞 选出能产生 特定抗体的 细胞群继续 培养
细胞融合 筛选
杂交 瘤细胞
细胞培养
体外培养
从培养液或小 鼠腹水中取出 单克隆抗体
体内培养
练习：
1、动物细胞融合和植物原生质体融合比较， 在动物细胞融合中有特殊性的是（ A、融合的原理 C、融合的诱导手段 ）
B、融合的优点 D、融合的过程
2.制备过程：
注射抗原的目的是什么
诱导其融合的方法有哪些？ 融合后培养液中有几种细胞 怎样筛选出杂交瘤细胞，杂交 瘤细胞有何优点 为何要进行克隆化培养和专 一抗体检测，多次筛选 大量增殖杂交瘤细胞获得单 抗的方法
1.在制备单克隆抗体的过程中，选用 哪两种细胞进行融合？为什么选择这 两种细胞？ 浆细胞和骨髓瘤细胞 浆细胞能产生单一抗体，但不能无限 增殖；骨髓瘤细胞能无限增殖，但不 能产生单一抗体。
练习：
9．（多选）1975年米尔斯坦和柯勒成功地获得 了单克隆抗体。下列细胞中与单克隆抗体的制 备有关的是（ABCD）
A.效应B细胞 C.骨髓瘤细胞
B．T淋巴细胞 D．杂交瘤细胞
知识回顾
一、原理：
细胞膜具有流动性 植物细胞杂交 技术利用什么 细胞的全能性 原理？ 用什么方法可 二、诱导方式： 以诱导植物细 胞融合？ 物理法、化学法
？ ？ ？
再分化 ？
一、动物细胞融合 1.概念：
（别名：细胞杂交）
是指两个或多个动物细胞结合形成一个细 胞的过程。 融合后形成的具有两个或多个细胞遗传 信息的单核细胞，称为杂交细胞。
3、一种浆细胞能产生几 种抗体？ 一种
1、传统的方法得到的抗体具有什么 特点？
特异性差、产量和纯度都很低。
二、单克隆抗体
1.概念： 由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克 隆），形成基因型相同的细胞群，这一 细胞群所产生的化学性质单一、特异性 强的抗体称为单克隆抗体。 特点： 特异性强、灵敏度高
思考：
7、“生物导弹”是指 （ ） A.单克隆抗体 B.杂交瘤细胞 C.产生特定抗体的B淋巴细胞 D.在单抗上连接抗癌药物
练习：
8、（多选）下列关于单克隆抗体的制备和应用 的叙述中，正确的是（ BCD ） A．B淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合，一般不 需要灭活的仙台病毒或聚乙二醇诱导 B．融合后形成的杂交瘤细胞既能无限增殖，又 能产生单克隆抗体 C．体外培养时，一个效应B淋巴细胞可以产生 抗体，但不能无限增殖 D．单克隆抗体与常规抗体相比，特异性强，灵 敏度高，优越性明显
2.过程：
①、动物细胞融合的基本原理是什么？ ②、动物细胞融合的诱导方式是什么？ 与植物细胞融合的诱导方式有什么不 同？
2.过程： 这是什么？
不同DNA的 两个细胞
？ 灭活的病毒
融合
？ 有丝分裂
两个完整的杂 交细胞 用灭活的病毒诱导动物细胞融合的过程
⑴.原理：
与植物原生质体融合的基本原理相同， 即细胞膜的流动性。
2、在这过程中进行了几次筛选？分 别在哪个步骤进行筛选？ 两次筛选。第一次在B细胞和骨髓瘤 细胞融合以后筛选出杂交瘤细胞；第 二次在杂交瘤细胞中筛选出能产生所 需抗体的杂交瘤细胞。
三、单克隆抗体的应用
１、可用于作为诊断试剂 ２、可用于疾病治疗 请同学们根据自己所收集 ３、可用于运载药物（作为运载对应疾病的药物的 的资料，谈谈单克隆抗体的应 “生物导弹“。） 用。 “生物导弹”＝单克隆抗体＋药物
5、(2006，广雅中学考题)研究单克隆抗体治疗
癌症的思路是（ ）
练习：
A．利用单克隆抗体特异性地对抗癌细胞 B．以单克隆抗体作抗癌药物杀死癌细胞 C．抗癌物质在克隆细胞中大量合成 D．单克隆抗体携带抗癌药物特异性地与癌细胞 结合
练习：
6．只能使动物细胞融合的常用诱导方法（ A．PEG B．灭活的病毒 C．电刺激 D．离心 ）
练习：
2、动物细胞融合的目的中最重要的是（ ）
A、克服远缘杂交不亲和
C、培育新物种
B、制备单克隆抗体
D、生产杂种细胞
练习：
3、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合， 得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗 体，与骨髓瘤细胞融合的是（ A、经过免疫的B淋巴细胞 B、不经过免疫的T淋巴细胞 C、经过免疫的T淋巴细胞 ）
D、不经过免疫的B淋巴细胞
练习：
4. 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞 诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞， 在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（ ） ①淋巴细胞 ②小鼠骨髓瘤细胞 ③B淋巴细胞自身融 合细胞 ④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 ⑤杂交瘤细胞 A． ②④ B．①③⑤ C． ①②③④ D．②③
癌细胞
3、你认为有什么办法让B淋巴细胞也具有这样的能力？
细胞融合
２、实验原理：
一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞（癌细胞）能无限增殖
柯勒
单克隆 动物细胞培养技术 杂种细胞 动物细胞融合 抗体 既能产生特异性抗 体，又能大量繁殖 创始人：米尔斯坦
⑵.诱导方式：
二醇（PEG）
生物法： 灭活的病毒 例如：仙台病毒
3.意义和应用：
打破生殖隔离，使远缘杂交成为可能；
重要用途：制备单克隆抗体。
知识回顾
1、抗体是由何种细胞产生的？
三、单克隆抗体 浆细胞（效应B细胞）
2、抗体是如何产生的？
B淋巴细胞 抗原 增殖分化成浆细胞
浆 细胞 骨髓瘤细胞 选出能产生 特定抗体的 细胞群继续 培养
细胞融合 筛选
杂交 瘤细胞
细胞培养
体外培养
从培养液或小 鼠腹水中取出 单克隆抗体
体内培养
练习：
1、动物细胞融合和植物原生质体融合比较， 在动物细胞融合中有特殊性的是（ A、融合的原理 C、融合的诱导手段 ）
B、融合的优点 D、融合的过程
2.制备过程：
注射抗原的目的是什么
诱导其融合的方法有哪些？ 融合后培养液中有几种细胞 怎样筛选出杂交瘤细胞，杂交 瘤细胞有何优点 为何要进行克隆化培养和专 一抗体检测，多次筛选 大量增殖杂交瘤细胞获得单 抗的方法
1.在制备单克隆抗体的过程中，选用 哪两种细胞进行融合？为什么选择这 两种细胞？ 浆细胞和骨髓瘤细胞 浆细胞能产生单一抗体，但不能无限 增殖；骨髓瘤细胞能无限增殖，但不 能产生单一抗体。
练习：
9．（多选）1975年米尔斯坦和柯勒成功地获得 了单克隆抗体。下列细胞中与单克隆抗体的制 备有关的是（ABCD）
A.效应B细胞 C.骨髓瘤细胞
B．T淋巴细胞 D．杂交瘤细胞
知识回顾
一、原理：
细胞膜具有流动性 植物细胞杂交 技术利用什么 细胞的全能性 原理？ 用什么方法可 二、诱导方式： 以诱导植物细 胞融合？ 物理法、化学法
？ ？ ？
再分化 ？
一、动物细胞融合 1.概念：
（别名：细胞杂交）
是指两个或多个动物细胞结合形成一个细 胞的过程。 融合后形成的具有两个或多个细胞遗传 信息的单核细胞，称为杂交细胞。
3、一种浆细胞能产生几 种抗体？ 一种
1、传统的方法得到的抗体具有什么 特点？
特异性差、产量和纯度都很低。
二、单克隆抗体
1.概念： 由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克 隆），形成基因型相同的细胞群，这一 细胞群所产生的化学性质单一、特异性 强的抗体称为单克隆抗体。 特点： 特异性强、灵敏度高
思考：
7、“生物导弹”是指 （ ） A.单克隆抗体 B.杂交瘤细胞 C.产生特定抗体的B淋巴细胞 D.在单抗上连接抗癌药物
练习：
8、（多选）下列关于单克隆抗体的制备和应用 的叙述中，正确的是（ BCD ） A．B淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合，一般不 需要灭活的仙台病毒或聚乙二醇诱导 B．融合后形成的杂交瘤细胞既能无限增殖，又 能产生单克隆抗体 C．体外培养时，一个效应B淋巴细胞可以产生 抗体，但不能无限增殖 D．单克隆抗体与常规抗体相比，特异性强，灵 敏度高，优越性明显
2.过程：
①、动物细胞融合的基本原理是什么？ ②、动物细胞融合的诱导方式是什么？ 与植物细胞融合的诱导方式有什么不 同？
2.过程： 这是什么？
不同DNA的 两个细胞
？ 灭活的病毒
融合
？ 有丝分裂
两个完整的杂 交细胞 用灭活的病毒诱导动物细胞融合的过程
⑴.原理：
与植物原生质体融合的基本原理相同， 即细胞膜的流动性。
2、在这过程中进行了几次筛选？分 别在哪个步骤进行筛选？ 两次筛选。第一次在B细胞和骨髓瘤 细胞融合以后筛选出杂交瘤细胞；第 二次在杂交瘤细胞中筛选出能产生所 需抗体的杂交瘤细胞。
三、单克隆抗体的应用
１、可用于作为诊断试剂 ２、可用于疾病治疗 请同学们根据自己所收集 ３、可用于运载药物（作为运载对应疾病的药物的 的资料，谈谈单克隆抗体的应 “生物导弹“。） 用。 “生物导弹”＝单克隆抗体＋药物
5、(2006，广雅中学考题)研究单克隆抗体治疗
癌症的思路是（ ）
练习：
A．利用单克隆抗体特异性地对抗癌细胞 B．以单克隆抗体作抗癌药物杀死癌细胞 C．抗癌物质在克隆细胞中大量合成 D．单克隆抗体携带抗癌药物特异性地与癌细胞 结合
练习：
6．只能使动物细胞融合的常用诱导方法（ A．PEG B．灭活的病毒 C．电刺激 D．离心 ）
练习：
2、动物细胞融合的目的中最重要的是（ ）
A、克服远缘杂交不亲和
C、培育新物种
B、制备单克隆抗体
D、生产杂种细胞
练习：
3、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合， 得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗 体，与骨髓瘤细胞融合的是（ A、经过免疫的B淋巴细胞 B、不经过免疫的T淋巴细胞 C、经过免疫的T淋巴细胞 ）
D、不经过免疫的B淋巴细胞
练习：
4. 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞 诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞， 在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（ ） ①淋巴细胞 ②小鼠骨髓瘤细胞 ③B淋巴细胞自身融 合细胞 ④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 ⑤杂交瘤细胞 A． ②④ B．①③⑤ C． ①②③④ D．②③