P0012S BCA蛋白浓度测定试剂盒
BCA蛋白浓度测定试剂盒
BCA蛋白浓度测定试剂盒产品编号产品名称包装价格P0012 BCA蛋白浓度测定试剂盒500次258.00 元O 碧云天生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒是根据目前世界上最常用的两种蛋白浓度检测方法之一BCA法研制而成，实现了蛋白浓度测定的简单，高稳定性，高灵敏度和高兼容性。
O 灵敏度高，检测浓度下限达到25微克/毫升，最小检测蛋白量达到0.5微克，待测样品体积为1-20微升。
O 在50-2000微克/毫升浓度范围内有较好的线性关系。
O BCA法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响，可以兼容样品中高达5%的SDS，5%的Triton X-100，5%的Tween20, 60, 80。
但受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响，需确保EDTA低于10mM，无EGTA，二硫苏糖醇低于1mM，β-巯基乙醇低于1mM。
不适用BCA法时建议使用碧云天Bradford蛋白浓度测定试剂盒。
O BCA蛋白浓度测定试剂盒对样品中各种物质详细的兼容性表，参见BCA蛋白浓度测定兼容性表。
O 每个试剂盒可以检测500个样品。
包装清单：BCA试剂A 100 mlBCA试剂B 3 ml蛋白标准（5mg/ml BSA） 1 ml说明书 1 份保存条件：BCA试剂A和B室温保存，蛋白标准请-20℃冻存。
本试剂盒自订购之日起一年注意事项：O 需酶标仪一台，测定波长为540-595nm之间，562nm最佳。
需96孔板。
如果没有酶标仪，也可以使用普通的分光光度计测定，但是测定蛋白浓度时，需根据测定吸光度的杯子的体积，按比例调整A液,B液和样品的体积。
使用分光光度计测定蛋白浓度时，每个试剂盒可以测定的样品数量可能会显著减少。
O 如发现样品稀释液或裂解液本身就有较高背景，请试用Bradford蛋白浓度测定试剂盒。
O 为了加快BCA法测定蛋白浓度的速度可以适当用微波炉加热，但是切勿过热。
O EDTA浓度必需小于10mM，不兼容EGTA。
不适用BCA法时，请试用Bradford蛋白浓度测定试剂盒。
P0012S BCA蛋白浓度测定试剂盒说明书
使用说明：
1. 取0.8ml蛋白标准配制液加入到一管蛋白标准(20mg BSA)中，充分溶解后配制成25mg/ml的蛋白标准溶液。配制后可立即 使用，也可以-20℃长期保存。
2. 取适量25mg/ml蛋白标准，稀释至终浓度为0.5mg/ml。例如取20l 25mg/ml蛋白标准，加入980l稀释液即可配制成 0.5mg/ml蛋白标准。蛋白样品在什么溶液中，标准品也宜用什么溶液稀释。但是为了简便起见，也可以用0.9%NaCl或PBS 稀释标准品。稀释后的0.5mg/ml蛋白标准也可以-20℃长期保存。
15. Zong-Chun Yi, Hong Wang, Guang-Yao Zhang, Bing Xia. Downregulation of connexin 43 in nasopharyngeal carcinoma cells is related to promoter methylation. Oral Oncol. 2007 Feb 14;
注: 也可以室温放置2小时，或60℃放置30分钟。BCA法测定蛋白浓度时，颜色会随着时间的延长不断加深。并且显色反 应会因温度升高而加快。如果浓度较低，适合在较高温度孵育，或适当延长孵育时间。 7. 测定A562，540-595nm之间的波长也可接受。根据标准曲线计算出样品的蛋白浓度。
常见问题：
1. 测定标准曲线时发现随着标准品浓度的增加吸光度或颜色没有明显变化。 可能的原因是样品中含有严重干扰BCA法测定蛋白浓度的物质，详细的BCA法的兼容性列表请参考碧云天如下网页: /Compatibility Chart For BCA Kit.pdf
9. Le-Feng Zhang, Shuang-Qing Peng, Sheng Wang. Influence of lead (Pb2+) on the reactions of in vitro cultured rat aorta to 5-hydroxytryptamine. Toxicology Letters 159 (2005) 71–82.
BCA蛋白浓度测定-酶标仪法
BCA法测定蛋白浓度-酶标仪一、药品1.BCA蛋白浓度测定试剂盒（P0012，500次酶标仪，碧云天），含以下成分：a)BCA试剂A（P0012-1，100ml，碧云天），室温保存b)BCA试剂B（P0012-2，3ml，碧云天），室温保存c)蛋白标准（5mg/ml BSA）（P0012-3，1ml，碧云天），-20度保存二、仪器和试剂1.酶标仪（测定波长为540-595nm之间，562nm最佳），水浴锅2.96孔单条可拆酶标板（平底）3.15 ml 离心管1个（准备BCA工作液用）4. 1.5 ml 离心管1个（准备蛋白标准品工作液用）5.单道移液器和枪头，8道移液器（排枪）和枪头6.PBS三、操作步骤1.水浴锅调至37℃。
2.蛋白标准品工作液（1 mg/ml）的配制：将蛋白标准品（5mg/ml）从-20℃冰箱中取出，完全溶解并混匀。
取60μl 蛋白标准品（5mg/ml），加入240μl PBS，即稀释5倍，即配成蛋白标准品工作液（1 mg/ml）。
3.计算BCA工作液总量= 0.2 ml×（样本数+8）×2×1.1（标准品和样本均需测复孔）。
BCA工作量按50体积的BCA试剂A加上1体积的BCA试剂B配制（即50:1），需充分混匀。
BCA 工作液室温24小时内稳定。
4.按下表配制8个蛋白标准液（S0~S7），充分摇匀。
5.将96孔酶标板的A1孔放在左上角，按下表加入蛋白样本和标准品。
（1）先在第3~4条酶标板的蛋白样本孔（N 1~N8）中加入待测蛋白样本各2μl，再用排枪在蛋白样本孔中追加PBS液各18μl，使总量达到20μl。
（此时蛋白样本的稀释比为10，适用于预计蛋白浓度为2~8mg/ml时。
如预计蛋白浓度太高或太低，可适当调整稀释比例）（2）再在第1~2条酶标板的蛋白标准品孔（S0~S7）中加入上面配制的8个蛋白标准液各20μl。
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12A S0 S0 N1 N1B S1 S1 N2 N2C S2 S2 N3 N3D S3 S3 N4 N4E S4 S4 N5 N5F S5 S5 N6 N6G S6 S6 N7 N7H S7 S7 N8 N86.用排枪在各孔中加入200μl BCA工作液，轻轻摇匀，37℃放置30分钟或室温放置2小时。
BCA蛋白浓度测定试剂盒
BCA蛋白浓度测定试剂盒产品编号：SK1070保存条件：室温保存。
蛋白标准配制成溶液后-20℃冻存。
包装清单：组分编号产品组成SK1070-250T SK1070-500T SK1070-5000T SK1070-1A液50ml100ml8*125mlSK1070-2B液 1.5ml3ml30mlSK1070-3蛋白标准(5mg/ml BSA)0.5ml1ml10*1ml —说明书1份产品简介：BCA蛋白浓度测定试剂盒(BCA Protein Assay Kit)是根据最常用的BCA蛋白浓度检测法研制而成，实现了蛋白浓度测定的简单化，稳定性高，灵敏度高和兼容性好。
最小检测浓度达到25µg/ml，最小检测蛋白量达到0.5µg，待测样品体积为1-20µl。
在50-2000µg/ml浓度范围内有较好的线性关系。
BCA法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响，可以兼容样品中高达5%的SDS，5%的TritonX-100，5%的Tween20,Tween60,Tween80。
但受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响，需确保EDTA低于10mM，无EGTA，二硫苏糖醇低于1mM，β-巯基乙醇低于0.01%。
每个试剂盒可以检测500个样品。
使用说明：1.取适量5mg/ml蛋白标准，用0.9%NaCl或PBS稀释至终浓度为0.5mg/ml。
稀释后的0.5mg/ml蛋白标准也可以-20℃长期保存。
2.根据样品数量，按50体积A液加1体积B液配制适量BCA工作液，充分混匀。
例如5ml A液加100µl B液，混匀，配制成5.1ml工作液。
工作液室温24小时内稳定。
3.将标准品按0、1、2、4、8、12、16、20µl加到96孔板的标准品孔中，加标准品稀释液，补足到20µl。
4.加适当体积样品到96孔板的样品孔中，加标准品稀释液到20µl。
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BCA蛋白浓度测定试剂盒产品编号产品名称包装价格P0012 BCA蛋白浓度测定试剂盒500次258.00 元O 碧云天生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒是根据目前世界上最常用的两种蛋白浓度检测方法之一BCA法研制而成，实现了蛋白浓度测定的简单，高稳定性，高灵敏度和高兼容性。
O 灵敏度高，检测浓度下限达到25微克/毫升，最小检测蛋白量达到0.5微克，待测样品体积为1-20微升。
O 在50-2000微克/毫升浓度范围内有较好的线性关系。
O BCA法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响，可以兼容样品中高达5%的SDS，5%的Triton X-100，5%的Tween20, 60, 80。
但受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响，需确保EDTA低于10mM，无EGTA，二硫苏糖醇低于1mM，β-巯基乙醇低于1mM。
不适用BCA法时建议使用碧云天Bradford蛋白浓度测定试剂盒。
O BCA蛋白浓度测定试剂盒对样品中各种物质详细的兼容性表，参见BCA蛋白浓度测定兼容性表。
O 每个试剂盒可以检测500个样品。
包装清单：BCA试剂A 100 mlBCA试剂B 3 ml蛋白标准（5mg/ml BSA） 1 ml说明书 1 份保存条件：BCA试剂A和B室温保存，蛋白标准请-20℃冻存。
本试剂盒自订购之日起一年注意事项：O 需酶标仪一台，测定波长为540-595nm之间，562nm最佳。
需96孔板。
如果没有酶标仪，也可以使用普通的分光光度计测定，但是测定蛋白浓度时，需根据测定吸光度的杯子的体积，按比例调整A液,B液和样品的体积。
使用分光光度计测定蛋白浓度时，每个试剂盒可以测定的样品数量可能会显著减少。
O 如发现样品稀释液或裂解液本身就有较高背景，请试用Bradford蛋白浓度测定试剂盒。
O 为了加快BCA法测定蛋白浓度的速度可以适当用微波炉加热，但是切勿过热。
O EDTA浓度必需小于10mM，不兼容EGTA。
不适用BCA法时，请试用Bradford蛋白浓度测定试剂盒。
BCA法蛋白含量测定试剂盒说明书
BCA法蛋白含量测定试剂盒说明书BCA法蛋白含量测定试剂盒说明书微量法100T/96S注意：正式测定之前选择23个预期差异大的样本做预测定测定意义：样品可溶性蛋白质含量常常用于酶活性计算。
此外，可溶性蛋白质含量也用于食品等质量分析。
测定原理：碱性条件下，蛋白质中半胱氨酸、胱氨酸、色氨酸、酪氨酸以及肽键，能将Cu2+还原成Cu+；2分子的BCA与Cu+结合，生成紫色络合物，在540595nm有吸收峰，562nm处吸收峰Z强。
自备仪器和用品：台式离心机、恒温水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、移液器和蒸馏水。
试剂组成和配制：试剂A：液体25mL×1瓶，4℃保存。
试剂B：液体0.5mL×1支，4℃保存。
标准品：液体2mL×1支，4℃保存。
工作液配制：临用前请根据拟用工作液体积（样本数×0.2mL），将试剂A和B按照50：1的比例混合，盖紧后充分混匀。
样品中可溶性蛋白质提取：1. 液体样品：澄清液体样品可以直接测定。
2. 组织样品：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液（自备，根据需要选用酶提取缓冲液或者蒸馏水或者生理盐水）冰浴匀浆，10000rpm，4℃离心10min，取上清，即待测液。
3. 细菌、细胞：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后10000rpm，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。
测定操作： 1. 可见分光光度计/酶标仪预热30min，调节波长到562 nm，蒸馏水调零。
2. 工作液置于60℃水浴预热30 min。
空白管标准管测定管蒸馏水（μL）4标准品（μL）4待测液（μL）4工作液（μL）200200200混匀后置于60℃保温30min，于微量玻璃比色皿/96孔板，于562nm处测定吸光值A，分别记为A空白管、A标准管、A测定管。
BCA法蛋白含量测定试剂盒使用说明
BCA法蛋白含量测定试剂盒使用说明BCA法（bicinchoninic acid assay）是一种用于测定蛋白质含量的常用方法。
BCA法蛋白含量测定试剂盒使用说明如下：试剂盒组成：1.BCA试剂A：含有重铜离子和碱性溶液。
2.BCA试剂B：含有双咪唑试剂和碱性溶液。
3.蛋白标准溶液：一系列已知浓度的牛血清蛋白标准溶液。
4.BCA试剂C：含有特殊缓冲溶液。
注意事项：1.所有试剂和样品在使用前均需室温下静置至少30分钟。
2.打开试剂盒后，避免将试剂直接暴露于空气中，以免影响试剂稳定性。
3.在所有步骤中，使用干净且蛋白污染的工具可能会导致错误的结果。
步骤1：制备标准曲线1.准备一系列不同浓度的蛋白标准溶液，如0、20、40、60、80和100μg/mL。
2.取0.1mL蛋白标准溶液加入1.9mL去离子水，即配制出100μg/mL的稀释溶液。
3.以同样的方法依次配制出20、40、60和80μg/mL的稀释溶液。
4.将每个稀释溶液的0.2mL与2mLBCA试剂A混合，放置30分钟。
5.加入0.5mLBCA试剂B，再次混合均匀。
6.将混合液放置37°C加热反应30分钟后冷却至室温。
7. 使用紫外-可见光谱仪测定吸光度，以280 nm为波长，绘制标准曲线。
步骤2：测定待测样品1.取待测样品，如细胞裂解液，加入BCA试剂C进行稀释，使得样品中的蛋白质浓度在标准曲线范围内。
2.取样品0.1mL加入1.9mL去离子水，配制出与标准曲线相同浓度的稀释液。
3.加入1mLBCA试剂A混合均匀，放置30分钟。
4.加入0.2mLBCA试剂B，再次混合均匀。
5.将混合液放置37°C加热反应30分钟后冷却至室温。
6. 使用280 nm波长的紫外-可见光谱仪测定吸光度。
步骤3：计算蛋白质含量1.将待测样品的吸光度值与标准曲线进行比较，根据吸光度值确定样品中蛋白质的含量。
2.通过线性拟合标准曲线计算待测样品中蛋白质的浓度。
BCA蛋白浓度测定试剂盒完整版
BCA蛋白浓度测定试剂盒说明23225蛋白质化验试剂盒：为500试管或5000微孔板的检测提供充足的试剂23227蛋白质化验试剂盒：为250试管或2500微孔板的检测提供充足的试剂试剂盒组分：BCA 试剂A，1000 mL (No. 23225产品中) 或500mL ( No. 23227产品中)，碳酸钠，碳酸氢钠，二喹啉甲酸，酒石酸钠溶于0.1 M氢氧化钠中。
BCA 试剂B , 25 mL, 包括4%硫酸铜一次性标准白蛋白, 2mg/ mL, 10 × 1 mL 安瓿, 包含2 mg/ mL牛血清白蛋白(BSA) 存在于0.9% 盐和0.05%叠氮化钠中。
储存：以上试剂保持在室温下储存和装运注意：如果试剂A 或试剂B 在低温下运输或长期储存时出现沉淀现象，可以通过缓慢加温或轻轻搅拌溶液使沉淀物溶解。
当试剂变色或确定微生物污染时请丢球试剂盒。
目录介绍 (1)准备标准试剂和工作试剂 (2)准备试管 (3)准备微型版 (3)故障检修 (4)有关美国热电其他产品 (5)附加信息 (5)参考文献 (6)介绍美国热电（Thermo）公司的BCA蛋白浓度测定试剂盒是基于二喹啉甲酸(BCA)通过比色检测和定量测定总蛋白的洗涤剂兼容配方。
该方法通过碱性介质中的一种蛋白结合了Cu2使其显著减少转变为Cu1 （缩二脲反应）。
用一种含二奎琳甲酸的试剂选择性的比色法高敏感的比色杯中的Cu1. 这种测定方法的紫色色反应产物是通过BCA的两个分子和亚铜离子螯合作用形成的。
这种水溶性复合物在562nm 处有强吸收峰。
在大的活性范围内(20-2000µg / mL）几乎同蛋白浓度增加呈线性关系。
BCA 法不是真正的终点的方法；也就是说，最终颜色继续发展。
孵化之后, 继续的颜色发展速度是足够慢以允许一起进行测定大量样本。
大分子结构的蛋白质,肽键的数量和存在的四个特定氨基酸(半胱氨酸,胱氨酸，色氨酸和酪氨酸)据说是与BCA形成颜色产物的原因。
BCA蛋白浓度测定-酶标仪法
.酶标仪BCA法测定蛋白浓度-一、药品500次酶标仪，碧云天），含以下成分：BCA蛋白浓度测定试剂盒（P0012，1. 100ml，碧云天），室温保存试剂A（P0012-1，a)BCA ，碧云天），室温保存P0012-2试剂B（，3mlb)BCA 度保存P0012-3，1ml，碧云天），-20c)蛋白标准（5mg/ml BSA）（二、仪器和试剂最佳），水浴锅酶标仪（测定波长为540-595nm之间，562nm1. 孔单条可拆酶标板（平底）2.96 1个（准备BCA工作液用）3.15 ml 离心管个（准备蛋白标准品工作液用） 1.5 ml 离心管14. 道移液器（排枪）和枪头5.单道移液器和枪头，8PBS 6. 三、操作步骤℃。
1.水浴锅调至37℃冰箱中取出，）的配制：将蛋白标准品（5mg/ml）从-202.蛋白标准品工作液（1 mg/ml倍，即配μl PBS，即稀释5完全溶解并混匀。
取60μl 蛋白标准品（5mg/ml），加入240 成蛋白标准品工作液（1 mg/ml）。
BCA。
2×1.1（标准品和样本均需测复孔）BCA计算工作液总量= 0.2 ml×（样本数+8）×3.BCA需充分混匀。
50:1），体积的BCA试剂B配制（即试剂工作量按50体积的BCAA加上1 24工作液室温小时内稳定。
S0~S7），充分摇匀。
4.按下表配制8个蛋白标准液（0.2 20 D 80S30.3 S4 7030E0.4 S5 F 40 600.5 G 50 50S61.00S7100H5.将96孔酶标板的A1孔放在左上角，按下表加入蛋白样本和标准品。
（1）先在第3~4条酶标板的蛋白样本孔（N 1~N8）中加入待测蛋白样本各2μl，再用排枪在蛋白样本孔中追加PBS液各18μl，使总量达到20μl。
（此时蛋白样本的稀释比1 / 2.时。
如预计蛋白浓度太高或太低，可适当10，适用于预计蛋白浓度为2~8mg/ml为调整稀释比例）个蛋白标准液S0~S7）中加入上面配制的8）（2再在第1~2条酶标板的蛋白标准品孔（。
BCA蛋白浓度测定试剂盒使用说明书
注意事项
1•在低温条件或长期保存出现沉淀时，可搅拌或37C温育使溶解，如发现细
菌污染则应丢弃
2.样品中若含有EDT
A、EGT
A、DTT硫酸铵、脂类会影响检测结果，请试用Bradford蛋白浓度测定试
剂盒；高浓度的去垢剂也影响实验结果，可用TCA沉淀去除干扰物质。
3.要得到更为精确的蛋白浓度结果，每个蛋白梯度和样品均需做复孔,每次
均应做标准曲线。
4•当试剂A和B混合时可能会有浑浊，但混匀后就会消失，工作液在密闭 情况下可保存1周。
5.需准备37C水浴或温箱、酶标仪或普通分光光度计，测定波长为540-
595nm之间，562nm最佳。酶标仪需与96孔酶标板配套使用。使用分光光度计 测定蛋白浓度时，试剂盒测定的样品数量会因此而减少。使用温箱孵育时，应 注意防止因水粉蒸发影响检测结果。
3•加适当体积样品到96孔板的样品孔中，补加PBS到20微升。
4.各孔加入200微升BCA工作液，37C放置30分钟。
5•冷却到室温，用酶标仪测定A562，根据标准曲线计算出蛋白浓度。BCA蛋白浓度测定试剂盒使用说明书
产品简介
蛋白质定量是蛋白质研究的基础工作之一。博奥森开发的BCA蛋白质检测
试剂（bicinchonic acid是理想的蛋白质定量方法；是当前比Lowry法更优越的专用 于检测总蛋白质含量的产品。该方法以快速灵敏、稳定可靠，对不同种类蛋白 质检测的变异系数非常小而倍受专业人士的青睐。BCA法测定蛋白浓度不受绝
bca蛋白浓度测定试剂盒原理
bca蛋白浓度测定试剂盒原理BCA蛋白浓度测定试剂盒是用于测定蛋白质溶液浓度的一种常用试剂盒。
BCA（Bicinchoninic Acid）法是一种基于铜离子对蛋白质的氮原子的络合反应的方法，通过测定产生的蓝色化合物的吸光度来间接测定蛋白质的浓度。
BCA蛋白浓度测定试剂盒通常包含有BCA试剂、标准蛋白、含蛋白样品和试剂盐溶液等，下面将对BCA蛋白浓度测定试剂盒的原理进行详细描述。
首先，BCA法的原理基于铜离子（Cu2+）和蛋白质之间的络合反应。
BCA试剂中含有两个主要成分：bicinchoninic酸（BCA）和柠檬酸盐缓冲溶液。
此外，还添加有氢氧化钠溶液等试剂以调节反应条件。
当BCA试剂与蛋白质样品中的铜离子相结合时，形成紫红色螯合络合物。
螯合反应是在碱性条件下进行的，此时蛋白质中的四个以上的肽键和氨基酸残基中的部分功能团（特别是还原型氨基酸，如半胱氨酸、酪氨酸、组氨酸等）能参与到络合反应中。
然后，络合物吸收O.D. 562nm处的特定波长下，形成深浅不同的紫红色。
络合物的深度与蛋白质的浓度成正相关。
在进行测定前，需要校准光学密度计（尤其对于多样本测量或与先前的试验结果相比）。
然后，我们使用标准曲线法测定未知样品中的蛋白质浓度。
标准曲线由已知浓度的标准蛋白构建，通常是牛血清蛋白（BSA）。
首先，标准蛋白被稀释成一系列已知浓度的标准溶液。
然后，将标准溶液与BCA试剂反应，并记录吸光度。
这将为后续绘制标准曲线提供基础。
对于待测样品，我们需要将其稀释到适当的浓度范围内，并与BCA试剂反应。
然后，通过比较待测样品的吸光度与标准曲线上相应吸光度对照点，可以计算出待测样品中的蛋白质浓度。
总体来说，BCA蛋白浓度测定试剂盒的原理是基于蛋白质与BCA试剂中的铜离子的络合反应，并通过测定产生的紫红色络合物的吸光度来间接测定蛋白质的浓度。
测定前需要校准光学密度计，利用构建的标准曲线，可以计算待测样品中的蛋白质浓度。
BCA蛋白质定量试剂盒说明书
适用范围：
本检测方法可耐受的干扰物质浓度表：
干扰物质 盐/缓冲液 HEPES (pH7.9) PIPES(pH6.8) NaCl HCl NaOH Sodium citrate TRICINE(pH8.0) Sodium Acetate Guanidine.HCl Tris
BCA Protein Assay Kit
BCA 蛋白质定量试剂盒
目录号：PA115 试剂盒内容：
试剂盒组成
BCA 试剂 A BCA 试剂 B BSA 标准品(2mg/ml)
说明书
PA115-01*
100 ml 3 ml
2× 1 ml 1份
PA115-02**
500 ml 15 ml 10 × 1 ml 1份
产品简介：
BCA 蛋白质定量试剂盒(BCA Protein Assay Kit)是根据目前世界上最常用 的两种蛋白浓度检测方法中的 BCA（bicinchoninic acid）法研制而成，实现了 对蛋白质进行快速、稳定、灵敏的浓度测定。本试剂盒的原理是蛋白质分子中 的肽键结构在碱性环境下能与 Cu2+生成络合物，并将 Cu2+还原成 Cu+，而 BCA 试剂可敏感特异地与 Cu+结合，形成稳定的有颜色的复合物，并在 562nm 处 有最大光吸收值，该复合物颜色深浅与蛋白质浓度成正比，可根据吸收值的大 小来测定蛋白质的含量。
1 小时内即可完成蛋白质定量检测。本试剂盒含有牛血清白蛋白（BSA） 溶液作为蛋白质标准溶液，测定范围为 20～2000 ug/ml。
操作步骤：
1. 标准品的稀释：用与样品相同缓冲体系的稀释剂按下表对 BSA 标准品进
行稀释：
BSA 标准浓度配制表
P0010S BCA蛋白浓度测定试剂盒_增强型_
包装清单：
产品编号 P0010S-1 P0010S-2 P0010S-3 P0010S-4
—
产品名称 BCA试剂 A BCA试剂 B 蛋白标准(BSA) 蛋白标准配制液
说明书
包装 40ml 1.2ml 20mg 1ml 1份
保存条件：
室温保存。蛋白标准配制成溶液后-20℃冻存。
注意事项：
¾ 需酶标仪一台，测定波长为540-595nm之间，562nm最佳。需96孔板。如果没有酶标仪，也可以使用普通的分光光度计测 定，但测定时，需根据比色皿的最小检测体积，适当加大BCA工作液的用量使不小于最小检测体积，样品和标准品的用 量可相应按比例放大也可不变。使用分光光度计测定蛋白浓度时，每个试剂盒可以测定的样品数量可能会显著减少。
3. Zheng CH, Gao JQ, Zhang YP, Liang WQ. A protein delivery system: biodegradable alginate-chitosan-poly(lactic-co-glycolic acid) composite microspheres. Biochem Biophys Res Commun. 2004 Oct 29;323(4):1321-7.
15.Wu ZQ, Li M, Chen J, Chi ZQ, Liu JG. Involvement of cAMP/cAMP-dependent protein kinase signaling pathway in regulation of Na+,K+-ATPase upon activation of opioid receptors by morphine. Mol Pharmacol. 2006 Mar;69(3):866-76.
P0010 BCA蛋白浓度测定试剂盒_增强型_
使用本产品的部分文献：
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9. Le-Feng Zhang, Shuang-Qing Peng, Sheng Wang. Influence of lead (Pb2+) on the reactions of in vitro cultured rat aorta to 5hydroxytryptamine. Toxicology Letters 159 (2005) 71–82.
12. Huang YY, Deng JY, Gu J, Zhang ZP, Maxwell A, Bi LJ, Chen YY, Zhou YF, Yu ZN, Zhang XE. The key DNA-binding residues in the C-terminal domain of Mycobacterium tuberculosis DNA gyrase A subunit (GyrA). Nucleic Acids Res. 2006;34(19):5650-9.
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/Compatibility Chart For BCA Kit.pdf ¾ 每个试剂盒可以检测200个样品。
包装清单：
产品编号 P0012S-1 P0012S-2 P0012S-3 P0012S-4
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产品名称 BCA试剂 A BCA试剂 B 蛋白标准(BSA) 蛋白标准配制液
4. R.-C. Wu, Z. Wang, M.-J. Liu, D.-F. Chen and X.-S. Yue. β2-integrins mediate a novel form ofchemoresistance in cycloheximide-induced U937 apoptosis. Cell. Mol. Life Sci. 2004,61(16):2071–2082.
3. Zheng CH, Gao JQ, Zhang YP, Liang WQ. A protein delivery system: biodegradable alginate-chitosan-poly(lactic-co-glycolic acid) composite microspheres. Biochem Biophys Res Commun. 2004 Oct 29;323(4):1321-7.
¾ 如发现样品稀释液或裂解液本身就有较高背景，请试用碧云天生产的Bradford蛋白浓度测定试剂盒(P0006)。 ¾ 为了加快BCA法测定蛋白浓度的速度可以适当用微波炉加热，但是切勿过热。 ¾ EDTA浓度必需小于10mM，不兼容EGTA。不适用BCA法时，请试用碧云天生产的Bradford蛋白浓度测定试剂盒(P0006)。 ¾ 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
产品编号 P0012S
BCA蛋白浓度测定试剂盒
产品名称 BCA蛋白浓度测定试剂盒
包装 200次
产品简介：
¾ BCA蛋白浓度测定试剂盒(BCA Protein Assay Kit)是根据目前世界上最常用的两种蛋白浓度检测方法之一BCA法研制而 成，实现了蛋白浓度测定的简单，高稳定性，高灵敏度和高兼容性。
9. Jin Ding, Jun Liu, Cai-Fang Xue, Ying-Hui Li, Ya Zhao, Jun Chen, Yu-Xiao Huang, ZhongXiang Liu.
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3. 根据样品数量，按50体积BCA试剂A加1体积BCA试剂B(50:1)配制适量BCA工作液，充分混匀。例如5ml BCA试剂A加 100µlBCA试剂B，混匀，配制成5.1ml BCA工作液。 BCA工作液室温24小时内稳定。
4. 将标准品按0, 1, 2, 4, 8, 12, 16, 20µl加到96孔板的标准品孔中，加标准品稀释液补足到20µl。 5. 加适当体积样品到96孔板的样品孔中，加标准品稀释液到20µl。 6. 各孔加入200µl BCA工作液，37℃放置30分钟。
说明书
包装 40ml 1.2ml 20mg 1ml 1份
保存条件：
室温保存。蛋白标准配制成溶液后-20℃冻存。
注意事项：
¾ 需酶标仪一台，测定波长为540-595nm之间，562nm最佳。需96孔板。如果没有酶标仪，也可以使用普通的分光光度计测 定，但测定时，需根据比色皿的最小检测体积，适当加大BCA工作液的用量使不小于最小检测体积，样品和标准品的用 量可相应按比例放大也可不变。使用分光光度计测定蛋白浓度时，每个试剂盒可以测定的样品数量可能会显著减少。
使用说明：
1. 取0.8ml蛋白标准配制液加入到一管蛋白标准(20mg BSA)中，充分溶解后配制成25mg/ml的蛋白标准溶液。配制后可立即 使用，也可以-20℃长期保存。
2. 取适量25mg/ml蛋白标准，稀释至终浓度为0.5mg/ml。例如取20µl 25mg/ml蛋白标准，加入980µl稀释液即可配制成 0.5mg/ml蛋白标准。蛋白样品在什么溶液中，标准品也宜用什么溶液稀释。但是为了简便起见，也可以用0.9%NaCl或PBS 稀释标准品。稀释后的0.5mg/ml蛋白标准也可以-20℃长期保存。
注: 也可以室温放置2小时，或60℃放置30分钟。BCA法测定蛋白浓度时，颜色会随着时间的延长不断加深。并且显色反 应会因温度升高而加快。如果浓度较低，适合在较高温度孵育，或适当延长孵育时间。 7. 测定A562，540-595nm之间的波长也可接受。根据标准曲线计算出样品的蛋白浓度。
常见问题：
1. 测定标准曲线时发现随着标准品浓度的增加吸光度或颜色没有明显变化。 可能的原因是样品中含有严重干扰BCA法测定蛋白浓度的物质，详细的BCA法的兼容性列表请参考碧云天如下网页: /Compatibility Chart For BCA Kit.pdf
¾ 灵敏度高，检测浓度下限达到25µg/ml，最小检测蛋白量达到0.5µg，待测样品体积为1-20µl。 ¾ 在50-2000µg/ml浓度范围内有较好的线性关系。 ¾ BCA法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响，可以兼容样品中高达5%的SDS，5%的Triton X-100，5%的
Tween 20, 60, 80。但受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响，需确保EDTA低于10mM，无EGTA，二硫苏糖醇低于1mM， β-巯基乙醇低于0.01%。不适用BCA法时建议试用碧云天生产的Bradford蛋白浓度测定试剂盒(P0006)。 ¾ BCA蛋白浓度测定试剂盒对样品中各种物质的详细的兼容性，请参见碧云天如下网页: