血糖尿糖PPT课件

4．胰岛β 细胞增生或癌瘤、对抗胰岛素的激素分泌不足、严 重肝病患者可出现病理性低血糖。
实验十三
尿葡萄糖定性实验
生物化学与分子生物学教研室
【实验目的】
掌握尿糖的检测方法。
【实验原理】
葡萄糖在葡萄糖氧化酶的催化作用下形成葡萄糖酸和过氧化氢，过氧化 氢在过氧化氢酶的催化作用下形成水和氧，氧可将某种无色化合物氧化 成有色的化合物，将上述两种酶和无色化合物固定在纸条上，制成测试 尿糖含量的酶试纸。这种酶试纸与尿液相遇时，很快会因为尿液中葡萄 糖的含量的少到多而依次呈现浅蓝、浅绿、棕或深棕色。
A ac b
c测 ？
标准曲线
检测系统
样品池 (比色杯 )
光源 单色器
国产721型分光光度计
【实验原理】
2. 血糖浓度测定的原理
葡萄糖的醛基与邻甲苯胺在热醋酸溶液中缩合成葡萄糖基胺，再脱水生 成希夫氏（Schiff）碱，然后经分子重排，生成一组蓝绿色化合物， 在630nm处有一吸收峰，吸光度大小与血糖浓度成正比。
肝糖原 分解
氧化 分解
CO2 + H2O
糖异生
非糖物质
血 糖
糖原合成
肝（肌）糖原
磷酸戊糖途径等 其它糖 脂类、氨基酸合成代谢 脂肪、氨基酸
【实验原理】
1.分光光度技术 （Absorption Photometry） 利用物质的光吸收特性进行含量分析与性 质鉴定的技术
颜 色
浓 度
用颜色进行定量分析
实验十二
血糖浓度的测定
生物化学与分子生物学教研室
【实验目的】
1.巩固复习血糖的相关知识。
2.掌握分光光度计的原理及使用。
3.掌握测定血糖浓度的方法。
血糖及血糖水平的概念
* 血糖，指血液中的葡萄糖。
* 血糖水平，即血糖浓度。 正常血糖浓度 ：3.89-6.11mmol/L
血糖来源和去路
食 物 糖 消化， 吸收
【试剂与器材】
目测尿糖试纸、尿杯
【步骤】 1.将试纸带浸入尿液中(中段尿液最佳),湿透(约1-2秒钟)后取出; 2.在30-60秒内观察试纸带颜色并与比色板对照,测得结果； 3.结果判断：（试纸由浅蓝到棕红色变化来表示检测结果）浅蓝色表示没有糖尿病，用“”表示；颜色愈深“+”号愈多,尿糖愈高。
【参考值】 正常应为阴性。 【注意事项】 1．尿液应新鲜，如放置后细菌生长。可分解糖而使结果偏低； 2．不要在尿样中加入防腐剂，尿样不可离心。
【参考值】 3.89～6.11mmol/L（70～110mg/dl）
【临床意义】
1．饭后1～2小时、摄入高糖食物后、情绪紧张导致肾上腺 素分泌增加时，均可出现高血糖。此为生理性高血糖。 2．饥饿或剧烈运动后可出现生理性低血糖。 3．糖尿病、对抗胰岛素的激素分泌过多、颅内压增加时可出 现病理性高血糖。
【步骤】
1.选试管3支，分别标以“测定”、“标准”和“空白”，然后按下表 操作。
加入物（ml） 血清 葡萄糖标准应用液 蒸馏水 邻甲苯胺试剂 测定管 0.1 — — 5.0 标准管 — 0.1 — 5.0 空白管 — — 0.1 5.0
2.将上述各管分别混匀后，置沸水浴中煮沸12分钟，取出用自来水流 水冷却5分钟。 3.用分光光度计，在波长630nm下，以空白管调零，读取各管吸光度。
无色溶液适用吗？
Leabharlann Baidu
定性
物质的光吸收曲线（吸收光谱）
最大吸收光

直接反映物质对各单色光的吸收情况 间接反映物质的结构特点
未知浓度的测定

标准溶液法
标准溶液与待测溶液的吸光度进行比较
A 标 KC标L A 测 KC测L

标准曲线法
测出不同浓度标准溶液的 吸光度，绘制标准曲线
例： A测 0.54
颜色如何量化？

溶液的颜色：由于物质的结构不同， 会选择性吸收特定波长的单色光 同种溶液颜色越深，吸光能力越强

颜 色 吸光能力
浓 度
浓 度
用吸光能力进行定量分析
如何检测吸光能力？
分光光度计工作示意图
朗伯-比尔定律
A — 吸光度(Absorbance) C — 溶液浓度 L — 液层厚度 K — 吸光系数
【试剂与器材】
【试剂】
1．邻甲苯胺试剂：新配试剂应放置24小时后（待老化）使用。此试剂腐蚀性极强， 应避免与皮肤接触而造成灼伤。 2．葡萄糖标准应用液（5mmol/L）准确吸取葡萄糖标准贮存液5.0ml，置于100ml 容量瓶中，再以12mmol/L苯甲酸溶液稀释至刻度。
【器材】 水浴箱，分光光度计，试管，烧杯，容量瓶。
O CH2 NH2 + H C H C OH HO C H H C OH H C OH H C OH H 邻甲苯胺 葡萄糖 CH2 H NH C OH H C OH HO C H H C OH H C OH H C OH H 葡基胺 H2O CH2 N H C
H C OH HO C H H C OH H C OH H C OH H 希夫氏碱
【临床意义】 尿糖阳性见于糖尿病、肾性糖尿、甲亢等。内服、注射大量葡萄糖及精神激动等也可致阳 性反应。
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