完全和不完全福氏佐剂的作用

福氏佐剂作用

完全和不完全福氏佐剂
以抗原免疫动物获得抗体血清是制备抗体的经典方法。

为了提高免疫效果，在免疫应答的时候，常辅以佐剂以改变抗原的物理状态而延长其在体内的滞留时间，以使抗原缓慢释放，同时非特异性地促进局部吞噬细胞反应来增强动物的免疫效果。

佐剂的类型较多，目前常用的还是福氏佐剂（FA）。

FA是一种大多数抗原都有效的佐剂，FA是矿物油（石蜡油）、乳化剂（羊毛脂）和灭活的分支杆菌（结核分支杆菌或者卡介苗）组成的油包水乳化佐剂。

这三种成分俱全的佐剂称为福氏完全佐剂（FCA），不含分支杆菌的佐剂为辅氏不完全佐剂（FIA）。

石蜡油因不能代谢而存留在注射部位，这样就阻碍了抗原的降解或快速反应，起到了抗原储存的作用，使抗原缓慢持续的释放，不断地刺激机体的免疫系统而产生免疫反应。

佐剂的分类及作用

佐剂的分类及作用佐剂是草药的一个分类。

它们是与其他草药或药物一起使用来增强其功效的植物，也称为植物性协同药物。

佐剂被广泛用于中草药的配方中，并且可以根据其作用分类如下：1."增强作用"佐剂：增强作用佐剂可以增强其他草药或药物的功效。

例如，黄连是一种增强作用佐剂，能增加槐角的抗菌作用。

2."抵抗作用"佐剂：抵抗作用佐剂可以帮助身体抵抗疾病。

例如，银杏叶富含抗氧化物质，可以增强体内抗氧化能力，减少自由基的损伤。

3."代谢作用"佐剂：代谢作用佐剂可以促进身体的代谢过程，包括新陈代谢、消化和排泄。

例如，山楂可以帮助消化和降低胆固醇。

4."保护作用"佐剂：保护作用佐剂可以保护身体免受损害。

例如，乌梅富含抗氧化物质，可以保护肝脏免受损伤。

5."兴奋作用"佐剂：兴奋作用佐剂可以增加身体机能的活动水平。

例如，蛇胆可以增强心脏的收缩力。

6."镇静作用"佐剂：镇静作用佐剂可以减轻身体的紧张和焦虑。

例如，熟地黄具有镇静作用，可以帮助缓解焦虑和失眠。

7."解毒作用"佐剂：解毒作用佐剂可以帮助身体排出毒素。

例如，蒲公英可以促进尿液的排出，从而有助于排毒。

8."抗炎作用"佐剂：抗炎作用佐剂可以减轻炎症反应。

例如，木瓜可以减轻风湿病的炎症和疼痛。

9."抗凝作用"佐剂：抗凝作用佐剂可以减少血液凝结的风险。

例如，红花可以减缓血液凝结，并且适用于心血管疾病的治疗。

10."抗癌作用"佐剂：抗癌作用佐剂可以帮助抑制癌细胞的生长和转移。

例如，青蒿素是一种常用的抗癌佐剂。

总结而言，佐剂能够对草药或药物的功效进行增强、抵抗疾病、促进代谢、保护身体、兴奋活动、镇静心情、解毒排毒、抗炎止痛、抗凝血、抗癌等。

不同的佐剂具有不同的作用，可以在中草药的配方中根据需要进行选择和搭配，以达到更好的疗效。

佐剂的分类及作用

2-2 副作用
皮下注射时，可在注射部位引起强烈的炎症和溃疡
2-3其他油性佐剂
佐剂-65 在体内可被代谢或分泌,用于人的流感疫苗,证明
安全有效.
白油Span佐剂
是用轻质矿物油(白油)作油相,用Span-80 或Span-85及Tween-80作为乳化剂制成的油乳佐剂,是当前兽用生物品中最常用最有效的佐剂之一。
1-2 铝盐佐剂的种类
铝化合物沉淀疫苗
铝化合物吸附疫苗
1-3铝盐佐剂存在的缺点
1 主要刺激 Th2 相关抗体的产生，不能刺激 Th1 的细胞活性, 也不加强 CD8+细胞毒性 T 淋巴细胞（CTL）的活性,即只能增强体液免疫，不能增强细胞免疫。 2 会诱导产生 IgE 抗体，增加发生超敏反应的危险
免疫佐剂
一佐剂的发现及其概念
1926年，Glenny 等发现明矾沉淀白喉毒素能产生一种微粒，极大地增强机体对抗原的特异性免疫应答，从而拉开了佐剂使用的序幕。
与抗原同时或预先应用，能够增强机体针对抗原的免疫应答能力，或改变免疫反应类型的制剂
1 为什么要使用佐剂？
可溶性纯化蛋白质疫苗或蛋白质亚单位疫苗的免疫激活作用通常较弱，不足以刺激机体产生足够的抗体，因此通常在疫苗制剂中加入佐剂
位暴露于免疫细胞，将抗原有效地递呈给抗原提呈细胞，由于抗原递呈细胞的内体小泡和胞质溶胶的双重作用，含 ISCOM 的疫苗可以通过 MHC-Ⅰ和 MHC-Ⅱ两种途径将抗原递呈给免疫系统，同时激活 CD4+T细胞和CD8+T细胞
3 作用特点
ISCOM 可以显著提高 T 细胞的增殖、分化，并诱导多种亚
与单独应用抗原相比，抗原与佐剂联合应用所需的抗原量较少，机体产生的抗体量较多，并且还可以减轻免疫耐受

佐剂

1、我用两个注射器进行等量抗原与弗氏不完全佐剂的乳化,可是乳化了四个多小时后,滴在冰水里还是很快扩散,麻烦各位帮忙分析一下乳化失败的原因,多谢!弗氏佐剂是目前动物实验中最常用的佐剂，分为不完全弗氏佐剂和完全弗氏佐剂。

不完全弗氏佐剂是液体石蜡与羊毛脂混合而成，组分比为1～5：1，可根据需要而定，通常为2：1。

不完全佐剂中加卡介苗(最终浓度为2～20mg/ml)或死的结核分枝杆菌，即为完全弗氏佐剂。

上述佐剂经高压灭菌后，低温保存备用。

在免疫动物前，先将弗氏佐剂与抗原按一定比例混合，制备成"油包水"乳状液。

佐剂和抗原体积比一般为1：1。

佐剂与抗原乳化可按如下方法进行：（1）研磨法：先将佐剂加热并取适量放入无菌的玻璃研钵内，待冷却后再缓缓滴入等体积的抗原溶液，边滴边按同一方向研磨，滴加抗原的速度要慢。

待抗原全部加入后，继续研磨一段时间，使之成为乳白色粘稠的油包水乳剂。

本法适于制备大量的佐剂抗原，缺点是研钵壁上粘附大量乳剂，抗原损失较大。

（2）注射器混合法：将等量的弗氏佐剂和抗原溶液分别吸入两个注射器内，两注射器之间以一细胶管相连，注意排净空气，然后交替推动针管，直至形成粘稠的乳剂为止。

本法优点是容易做到无菌操作，适用于制备少量的抗原乳剂。

制备好的乳化剂经鉴定才能适用。

鉴定方法是将乳化剂滴入冷水中，若保持完整不分散，成滴状浮于水面，即乳化完全，为合格的油包水剂。

可以取弗式不完全佐剂滴在水里试试，看看是不是佐剂的问题！wo我们常常用很细的匀浆器来乳化，很好用注意把水相推到油相，我试过，这样大概十几分钟就乳化好了，反过来可能怎么都不好（有两次我推反了足足2个小时我手都快抽筋了都不好），原理是油包水型的是水到大量的油中才行，反过来就成水包油了，在药剂书上有弗氏佐剂弗氏佐剂是目前动物实验中最常用的佐剂，分为不完全弗氏佐剂和完全弗氏佐剂。

不完全弗氏佐剂是液体石蜡与羊毛脂混合而成，组分比为1～5：1，可根据需要而定，通常为2：1。

sigma弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂说明书

sigma弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂说明书生物商城 / 2011-02-08一、定义：弗氏佐剂（Freundadjuvant）,这是目前最常用于动物实验的佐剂，它是将抗原水溶液与油剂（石蜡油或植物油）等量混合，再加乳化剂（羊毛脂或叶吐温80）制成油包水抗原乳剂，称之为不完全弗氏佐剂。

如在不完全佐剂中加入分枝杆菌（如死卡苗）则称为完全弗氏佐剂。

二、制备方法：弗氏佐剂是现在动物实验中最常用的佐剂，分为不完全弗氏佐剂和完全弗氏佐剂。

不完全弗氏佐剂是液体石蜡与羊毛脂混合而成，组分比为1～5：1，可根据需要而定，通常为2：1。

不完全佐剂中加卡介苗(最终浓度为2～20mg/ml)或死的结核分枝杆菌，即为完全弗氏佐剂（FCA）。

一般首次注射时用1／2体积FCA 加上1／2体积的抗原进行乳化，第二次或第三次注射时用不完全佐剂或不用佐剂。

如不加佐剂，则抗原量增大10-20倍。

配制方法：按比例将羊毛脂与石蜡油置容器内，用超声波使之混匀，高压灭菌，置4℃下保存备用。

在免疫动物前，先将弗氏佐剂与抗原按一定比例混合，佐剂和抗原体积比一般为1：1，制备成"油包水"乳状液。

因为含SDS很易促使其乳化成油包水抗原乳化复合物，注射入动物体内时一定要保持乳化状态。

抗原用量视抗原分子量不同及免疫原性及免疫动物不同而有一定差异，无统一标准和固定模式。

一般是每兔（约2kg重）或每羊（约20kg重）第1次注射抗原1mg，以后逐次增加抗原量，最多每次不超过3mg。

佐剂与抗原乳化可按如下方法进行：（1）研磨法：先将佐剂加热并取适量放入无菌的玻璃研钵内，待冷却后再缓缓滴入等体积的抗原溶液，边滴边按同一方向研磨，滴加抗原的速度要慢。

待抗原全部加入后，继续研磨一段时间，使之成为乳白色粘稠的油包水乳剂。

本法适于制备大量的佐剂抗原，缺点是研钵壁上粘附大量乳剂，抗原损失较大。

（2）注射器混合法：将等量的弗氏佐剂和抗原溶液分别吸入两个注射器内，两注射器之间以一细胶管相连，注意排净空气，然后交替推动针管，直至形成粘稠的乳剂为止。

弗氏完全佐剂(CFA)诱导的大鼠关节炎模型筛选

弗氏完全佐剂（CFA）诱导的大鼠关节炎模型筛选服务类风湿性关节炎(RA)是一种以关节滑膜炎为特征的自身免疫性疾病，其发病机制十分复杂，迄今尚未完全阐明。

佐剂性关节炎(从)模型此模型是Freund于20世纪50年代创立的，又称福氏佐剂关节炎，福氏佐剂分为完全佐剂(cFA)和不完全佐剂(IFA)。

其机制是结核杆菌致关节炎抗原为65 kD 热休克蛋白(HSP)，RA病人软骨内具有与65kD HSP相似的蛋白多糖桥联蛋白抗原成分，FCA 注入激活T细胞，激活T细胞参与RA发病机制。

原发病变主要表现为致炎局部的炎症反应，续发病变一般于致炎后10—20d出现，约20d达到高峰，病理改变为滑膜下组织炎症，滑膜增生，血管翳形成，软骨破坏。

4周后，关节红肿减退，骨质减少，新骨形成，关节间隙变窄，形成不可逆的关节改变。

从大鼠的关节组织病理学及血中变化与人RA相似。

同时，对其免疫学机制研究发现，此模型存在明显的细胞免疫异常，为一种典型的免疫性炎症模型。

从制作方法简单，可广泛应用于多种动物，便于研究者选择应用。

RA的病因与发病机制目前尚未完全阐明，但随着细胞分子学和免疫学的深入研究，RA 动物模型的建立，发现了细胞因子、TH1／TH2细胞平衡、性激素等在RA的发病中起重要作用。

其中人们已证实TNF-a及IL-lβ在RA进展中起着决定性作用。

TNF-a是机体炎症反应与免疫应答的重要调节因子，能刺激滑膜细胞和软骨细胞合成PGE2和胶原酶，导致关节局部滑膜炎症和软骨组织破坏，TNF-a既能刺激IL-Iβ，IL-6，IL-8的产生，又能刺激其自身的合成，在RA的细胞因子网络中起中心作用；IL-1分为IL-1a和IL-lβ，主要由巨噬细胞分泌，内皮细胞和淋巴细胞也能产生，能诱导一系列全身的炎症反应，包括引起发热和消瘦，合成急性期蛋白，也可对软骨和骨基质代谢产生局部作用。

TNF-a主要导致RA初期的关节肿胀，而软骨的侵蚀则由IL-Iβ介导且和免疫复合物有协同效应。

弗氏佐剂的成分

弗氏佐剂的成分
弗氏佐剂，也称沙努尔霉素佐剂或者啊水间毒素佐剂，是一种用于驱除口腔疾病的联合药
物体系。

弗氏佐剂由三种组分组成：氨酚羟亚胺、异丙酚和马来酰亚胺链霉素，它们都是
有效的抗菌成分，而它们的合成可以帮助人们更好地祛病去疾，让病人由口腔病痛中解脱
出来。

首先，氨酚羟亚胺是一种传统的抗菌药，它具有抗真菌和抗细菌的作用，可以有效地抑制
细菌的生长，产生一定的抗菌活性。

在使用氨酚羟亚胺的弗氏佐剂中，它的作用是有效抑
制细菌生长，针对病菌进行杀伤，同时也可以减少炎症以减轻牙痛，并使牙齿更易于清洁、保养。

其次，异丙酚是一种常用的抗菌剂，它可以阻断细菌的新陈代谢，从而有效地达到抗菌的
目的，也有助于消除口腔炎症。

在弗氏佐剂中，异丙酚可以起抑制细菌生长，抑制皮肤及
口腔疾病发展的作用，进一步增强口腔疾病的治疗效果。

最后，马来酰胺链霉素是一种新型的抗生素，它可以有效地抑制细菌的生长，达到杀伤细
菌的效果。

弗氏佐剂中使用的马来酰胺链霉素可以抑制放线菌科、链球菌科和变形菌科的
细菌，有效抑制口腔疾病菌的繁殖，从而帮助患者更快恢复健康。

弗氏佐剂的三种组分，可以有效地降低细菌对口腔疾病的侵害，减轻病情，使口腔疾病得
到有效的治疗。

它们的有效组合和使用，可以使病人的口腔更快恢复，保持个人口腔卫生，让你的口腔洁净健康，使你湛然如新！。

弗氏完全佐剂(complete

弗氏完全佐剂（complete freund’s adjuvant, CFA）弗氏不完全佐剂（incomplete freund’s adjuvant, IFA）佐剂的作用：1．形成抗原储存库。

2．形成局部肉芽肿。

3．刺激淋巴细胞增殖和分化。

二、抗体特异性体液免疫是由抗体介导的免疫。

是人和动物的B细胞在抗原刺激下转化成浆细胞，并由浆细胞产生的具有与抗原发生特异性结合反应的免疫球蛋白（Ig）。

存在于血液、淋巴液和组织液中。

（一）抗体的种类与结构抗体的种类多，血清中可有千百种不同的抗体，分为五种，已统一命名为IgG、IgM、IgA、IgD相IgE。

五种免疫球蛋白的分子结构基本相似（P257图9—9）说明。

(1)每个单体由两条长链又称重链(H链)及两条短链又称轻链(L链)构成。

各链之间以二硫键(S—S)相连接，两条L链位于两条H链所形成的Y形结构的两侧。

(2) 重链：每条H链分子量为55000，由420--460个氨基酸组成，重链共分四段，各段约含110个氨基酸。

靠近氨基(N—端)的第一段为重链可变区(V区)，简称VH，其余三段为恒定区(简称CH)，以CH1、CH2、CH3表示。

重链有γ、α、μ、δ、ε五种类型，每种抗体只能有一种类型的重链。

(3)轻链：分子量为22000，由2l3—216个氨基酸组成。

每条轻链分为两段：轻链可变区(简称v L)和轻链恒定区(简称C L)。

V L区有109个左右的氨基酸，CL区有l04个左右氨基酸。

轻链有两种类型，κ链和λ链。

一种抗体只能有同一种轻链。

(4)可变区：重链与轻链的可变区共同构成抗体结合价(即抗原结合簇部位)，与抗原呈特异性结合。

一个单体抗体分子具有两个结合抗原的部位，故为二价。

(5)用木瓜蛋白酶消化抗体，可得到三个片段：两个抗原结合片段，称为Fab，一个可结晶片段Fc；用胃蛋白酶消化，得到一个二价抗体活性部分，称F(ab’)2和两个剩余的小分子片段Fc’,不具任何生物活性。

动物疫苗中灭活剂与佐剂的种类及其作用

动物疫苗中灭活剂与佐剂的种类及其作用摘要介绍了动物疫苗中的灭活剂和佐剂的种类及其作用,以期为灭活剂和佐剂的推广应用提供参考。

关键词动物疫苗;灭活剂;佐剂;种类;作用动物疫苗种类包括弱毒苗和灭活疫苗,在灭活疫苗生产过程中,必然涉及灭活剂和佐剂,二者的安全性和效力也决定了疫苗的质量和推广应用效果。

1疫苗灭活剂灭活是指破坏病原体的生物学特性,但尽可能避免影响其免疫原性或破坏血清中补体活性的过程。

常用的灭活剂有甲醛、β-丙内酯(BPL)或其他有效灭活剂。

1.1甲醛甲醛是一种有强烈刺激性的致癌物质,其既可作用于病毒含氨基的核苷酸碱基(如A,G,U),又可作用于病毒壳蛋白。

作用于病毒壳蛋白时,易使蛋白质发生交联或病毒颗粒聚集,不能再作用于壳蛋白内的核酸。

这样,病原体蛋白的抗原性会遭到严重破坏,并可能有病原体存活。

用甲醛灭活时间长,一般需要在37～39℃处理24h以上或更长时间,使用浓度一般为0.1%。

其灭活的效果易受温度、pH值、浓度、是否存在有机物、病原体的种类和含氮量等因素影响,残留的游离甲醛若随疫苗注入机体后,会产生制激性反应。

1.2β-丙内酯β-丙内酯(Beta-Propiolactone,BPL)在国外已广泛用于各种疫苗的灭活,是一种杂环类化合物,沸点155℃,常温下是无色粘稠状液体,对病毒具有很强的灭活作用。

能作用于病原体DNA或RNA,改变病毒核酸结构达到灭活目的,而不直接作用于蛋白,不破坏病原体的免疫原性。

大剂量β-丙内酯(BPL)虽是一种致癌物,但极易水解,在37℃水浴水解2h后消失,其水解为无毒性的人体脂肪代谢产物β-羟基丙酸。

另外,由于其能在疫苗液体中完全水解,不必考虑在成品疫苗中的残留,接种反应也轻微。

同时,β-丙内酯灭活病原时间短,从而显著地缩短了疫苗生产周期,提高了经济效益。

但与甲醛相比,价格明显昂贵,不适用于发展中国家或经济落后国家。

2免疫佐剂免疫佐剂是指与抗原同时或预先应用、能增强机体针对抗原的免疫应答能力、或改变免疫反应类型的物质。

佐剂比较表

有种属特异性，需根据动物种属设计相应的寡核苷酸序列；
需构建表达CpG的质粒与病毒颗粒联合免疫。
非商品化
脂质体(LIP)和
Novasomes
人工合成
佐剂
既是抗原载体，也是免疫佐剂；
Novasomes为非磷脂亲水脂分子，在体内稳定性比常规LIP好，而且价廉、易制备；
无毒性、无免疫原性；在可体内的可降解性，不引起组织损伤。
需制备油包水乳剂。
Roche/Sigma
MF59
油乳佐剂
可降解鲨烯与Tween 80和Span 85混合后进行微流化进而形成均一的滴状油包水乳液；耐受性良好；
第一个可用于人体的疫苗佐剂。
Chiron公司
CpG-ODN
佐剂
水溶性分子佐剂
含有胞嘧啶鸟嘌呤二核苷酸的寡脱氧核苷酸；
有很强的粘膜佐剂活性，通过膜受体TLR9直接激活DC和B细胞，是一种高效的Thl型疫苗佐剂；不同类型CpG-ODN具有不同疫苗佐剂活性,B和c型CpG-ODN在小鼠体内的体液免疫佐剂效果优于A型CpG-ODN.
稳定性较差；
脂质体在制备过程中要求一定的技术性；费用比其他免疫佐剂高
非商品化？
ImmunEasyMouse Adjuvant
水溶性
佐剂
为免疫小鼠而设计、只适用于小鼠；
含有特效免疫诱导剂CpG DNA，产生的抗体效价高于FIA；
免疫周期2周；
无毒性，无副作用；
容易操作，只需加入抗原混合，室温下5～10分钟后即可注射，无需加热、超声波处理、乳化等复杂步骤。
Qiagen公司（已停产）
QuickAntibody系列免疫佐剂
水溶性
佐剂
使用时不需复杂乳化过程，抗原和佐剂只需简单混合即可用于免疫动物。

佐剂的分类及作用

组成
弗氏不完全佐剂是由低引力和低粘度的矿物油及乳化剂组成的一种贮藏性佐剂。
弗氏完全佐剂是在不完全佐剂的基础上加一定量的分枝杆菌而成。
2-1 作用特点
对体液和细胞免疫系统具有很强的激活作用。 FCA 只用于初始免疫,在以后的加强免疫中只用 FIA。佐剂与抗原的体积一般各占 50 %。最终所形成的抗原佐剂混合物是典型的“油包水”乳胶混合体。 FCA 能够刺激机体产生很强的体液免疫和细胞免疫应答。
CpG序列作为免疫佐剂有如些不能与铝混合的减毒活疫苗或多价疫苗则可单独使用CpG–DNA增强其免疫原性
应用范围广
6 化学物质
左旋咪唑主要作用于T淋巴细胞。此外它还有恢复周围效应细胞的功能,既是免疫扶正剂又是免疫调节剂
六佐剂研究的新趋向
抗原递呈细胞佐剂通过刺激抗原递呈细胞影响抗原的识别、加工及处理过程,从而增强免疫原性的佐剂。如树突状细胞、脂质体等。
位暴露于免疫细胞，将抗原有效地递呈给抗原提呈细胞，由于抗原递呈细胞的内体小泡和胞质溶胶的双重作用，含 ISCOM 的疫苗可以通过 MHC-Ⅰ和 MHC-Ⅱ两种途径将抗原递呈给免疫系统，同时激活 CD4+T细胞和CD8+T细胞
3 作用特点
ISCOM 可以显著提高 T 细胞的增殖、分化，并诱导多种亚型 IgG 及特异性抗体的生，引起动物对多种抗原产生高滴度的抗体应答。
IL-15 主要由单核—巨噬细胞产生,在哺乳动物一个主要的功能为调节NK细胞的发育与增殖,通过NK细胞产生IL-15 共刺激细胞因子从而调节巨噬细胞和NK细胞间的相互作用。
IFN-γ 是一种有效的免疫佐剂,它能协同IL-2诱导LAK活性、增强抗原呈递
5-2 CpG序列(CpG）

弗氏完全佐剂(CFA)诱导的大鼠关节炎模型筛选

弗氏完全佐剂（CFA）诱导的大鼠关节炎模型筛选服务类风湿性关节炎(RA)是一种以关节滑膜炎为特征的自身免疫性疾病，其发病机制十分复杂，迄今尚未完全阐明。

佐剂性关节炎(从)模型此模型是Freund于20世纪50年代创立的，又称福氏佐剂关节炎，福氏佐剂分为完全佐剂(cFA)和不完全佐剂(IFA)。

其机制是结核杆菌致关节炎抗原为65 kD 热休克蛋白(HSP)，RA病人软骨内具有与65kD HSP相似的蛋白多糖桥联蛋白抗原成分，FCA 注入激活T细胞，激活T细胞参与RA发病机制。

原发病变主要表现为致炎局部的炎症反应，续发病变一般于致炎后10—20d出现，约20d达到高峰，病理改变为滑膜下组织炎症，滑膜增生，血管翳形成，软骨破坏。

4周后，关节红肿减退，骨质减少，新骨形成，关节间隙变窄，形成不可逆的关节改变。

从大鼠的关节组织病理学及血中变化与人RA相似。

同时，对其免疫学机制研究发现，此模型存在明显的细胞免疫异常，为一种典型的免疫性炎症模型。

从制作方法简单，可广泛应用于多种动物，便于研究者选择应用。

RA的病因与发病机制目前尚未完全阐明，但随着细胞分子学和免疫学的深入研究，RA 动物模型的建立，发现了细胞因子、TH1／TH2细胞平衡、性激素等在RA的发病中起重要作用。

其中人们已证实TNF-a及IL-lβ在RA进展中起着决定性作用。

TNF-a是机体炎症反应与免疫应答的重要调节因子，能刺激滑膜细胞和软骨细胞合成PGE2和胶原酶，导致关节局部滑膜炎症和软骨组织破坏，TNF-a既能刺激IL-Iβ，IL-6，IL-8的产生，又能刺激其自身的合成，在RA的细胞因子网络中起中心作用；IL-1分为IL-1a和IL-lβ，主要由巨噬细胞分泌，内皮细胞和淋巴细胞也能产生，能诱导一系列全身的炎症反应，包括引起发热和消瘦，合成急性期蛋白，也可对软骨和骨基质代谢产生局部作用。

TNF-a主要导致RA初期的关节肿胀，而软骨的侵蚀则由IL-Iβ介导且和免疫复合物有协同效应。

疫苗免疫佐剂

皂昔系：从皂树Quillaja saponaria：树皮提取的三菇类混合物, Quilla A和spikoside为其部分纯化物, 为精制物。皂昔能诱导对某些蛋白强和应答、中等应答, 可能是由于生成了蛋白一皂昔混合小体的结果。 Quilla A已广泛用作兽用佐剂并提议用于人体, 它价廉、安全、配制简单。细胞因子一般为分子量约20KDa。

大肠杆菌不耐热毒素及其亚单位, 在动物实验中显示粘膜佐剂活性。它们可能是通过GM1神经节苷脂受体靶向作用和刺激内源性腺昔酸环化酶活性而起佐剂作用。
Vaccine adjuvant

微生物衍生物型佐剂：微生物的核酸类,CpG 寡脱氧核苷酸(CpG2ODN)佐剂 , 非核酸类佐剂单磷脂A (MPL) 、OM2174、不耐热肠毒素 (LT)及其突变体等。
二、佐剂的类型：
油水乳剂：矿物油、乳化剂微生物及代谢产物：脂多糖、分支杆菌、霍乱毒素等细胞因子：白介素、干扰素等脂质体：胆固醇类蜂胶：蜂蜜人工合成：胞壁酰二肽
vaccine adjuvant

1.具备免疫原性的佐剂：如卡介苗、枯草分枝杆菌、短小棒状杆菌、百日咳杆菌、脂多糖、细胞因子等。

AS02 是一种含有单磷脂A (MPL)和皂角苷(QS221)的油包水乳剂,能诱导强烈的抗体应答并伴有Th1 型和CTL 反应。
Vaccine adjuvant

颗粒型佐剂：将抗原输送系统与疫苗抗原复配或融合后形成颗粒状物质，显微镜下呈颗粒状。铝盐氢氧化铝、磷酸铝等的不溶性胶状沉淀, 颗粒大小100-1000nm, 免疫原通过静电与胶结合。安全性佳, 靶向良好, 贮存作用中等, 诱导强Th2应答, 常见强IgE应答, 但诱导CTL和CM1作用很弱。价廉, 易制备。

完全和不完全福氏佐剂的作用

完全和不完全福氏佐剂的作用以抗原免疫动物获得抗血清是制备抗体的经典方法。

为了提高免疫效果，在免疫的时候，常辅以佐剂以改变抗原的物理状态而延长其在体内的滞留时间，使抗原缓慢释放，同时非特异性的促进局部吞噬细胞反应来增强动物的免疫效果。

佐剂的类型较多，目前常用的还是福氏佐剂(Freund’s Adjuvant，FA)。

它是一种对大多数抗原都有效的佐剂，但由于它的一些副作用限制了它在实验动物上的使用。

因此，福氏佐剂只能在确实需要的情况下(如使用的抗原为小分子可溶性抗原或半抗原)和强佐剂活性时使用。

FA是用矿物油(石蜡油)、乳化剂(羊毛脂)和灭活的分枝杆菌(结核分枝杆菌或卡介苗)组成的油包水乳化佐剂。

这三种成分俱全的佐剂称为福氏完全佐剂(Freund’s ComD】ele Adjuvant，FCA)，不含分枝杆菌的佐剂为福氏不完全佐剂(Freund’s InconrpleteAdjuvant，FIA)。

石蜡油因不能代谢而存留在注射的部位，这就阻碍了抗原降解或快速反应，起到抗原储存作用，使抗原缓慢持续的释放，不断刺激机体的免疫系统而产生免疫反应。

乳化剂对于水溶性抗原与油稳定地乳化是必要的。

分枝杆菌具有很强的免疫刺激作用，可以非特异性的激活免疫系统。

FCA用于基础注射，而FIA用于辅助注射以避免分枝杆菌蛋白引起的过敏反应。

FA皮下注射或肌内注射可导致多种副作用，例如肉芽肿和无菌性脓肿的形成。

腹腔注射引起腹膜炎。

由于这些严重的副作用，FA不允许用于人或动物的疫苗接种免疫。

传统的免疫方案，包括使用福氏佐剂和某些免疫程序，已不再被一些国家的权威机构所接受。

据调查，在荷兰有64％的研究人员使用FCA，而且，用于多克隆抗体的生产方案差异很大。

因此，在1993年，荷兰发布了利用动物免疫技术制备多克隆抗体的生产指南。

主要规定了加强免疫注射的次数、免疫途径、注射量和佐剂的使用，并且支持使用替代佐剂来替换FCA。

由于FCA给实验动物带来的严重的副反应，对它的使用提出了特别的限制，规定了(小鼠和大鼠sc：0．1nd；i．d：家兔0．o5 rI1l；i．P：小鼠0．2nd)推荐使用量和注射途径。

弗氏不完全佐剂,弗氏完全佐剂

弗氏不完全佐剂和弗氏完全佐剂一、定义：弗氏佐剂（Freundadjuvant）,这是目前最常用于动物实验的佐剂，它是将抗原水溶液与油剂（石蜡油或植物油）等量混合，再加乳化剂（羊毛脂或叶吐温80）制成油包水抗原乳剂，称之为不完全弗氏佐剂。

如在不完全佐剂中加入分枝杆菌（如死卡苗）则称为完全弗氏佐剂。

二、区别：弗氏不完全佐剂产品简介：弗氏完全佐剂是一种油包水的乳浊液，含结核分枝杆菌的细胞壁成分。

佐剂活性来自于油滴中免疫原的持续释放，并刺激局部免疫反应。

弗氏不完全佐剂用于初次免疫刺激。

为了减少副作用，不含结核分枝杆菌成分的弗氏不完全佐剂用于加强免疫。

弗氏完全佐剂产品简介：弗氏完全佐剂是一种油包水的乳浊液，能够非常有效的诱导产生高滴度的抗体。

弗氏完全佐剂含结核分枝杆菌的细胞壁成分，可以加强对抗原的抗体反应。

佐剂活性来自于油滴中免疫原的持续释放，并刺激局部免疫反应。

三、制备方法：弗氏佐剂是现在动物实验中最常用的佐剂，分为不完全弗氏佐剂和完全弗氏佐剂。

不完全弗氏佐剂是液体石蜡与羊毛脂混合而成，组分比为1～5：1，可根据需要而定，通常为2：1。

不完全佐剂中加卡介苗(最终浓度为2～20mg/ml)或死的结核分枝杆菌，即为完全弗氏佐剂（FCA）。

一般首次注射时用1／2体积FCA加上1／2体积的抗原进行乳化，第二次或第三次注射时用不完全佐剂或不用佐剂。

如不加佐剂，则抗原量增大10-20倍。

配制方法：按比例将羊毛脂与石蜡油置容器内，用超声波使之混匀，高压灭菌，置4℃下保存备用。

在免疫动物前，先将弗氏佐剂与抗原按一定比例混合，佐剂和抗原体积比一般为1：1，制备成"油包水"乳状液。

因为含SDS很易促使其乳化成油包水抗原乳化复合物，注射入动物体内时一定要保持乳化状态。

抗原用量视抗原分子量不同及免疫原性及免疫动物不同而有一定差异，无统一标准和固定模式。

一般是每兔（约2kg重）或每羊（约20kg重）第1次注射抗原1mg，以后逐次增加抗原量，最多每次不超过3mg。

完全弗氏佐剂的成分

完全弗氏佐剂的成分
完全弗氏佐剂是一种用于预防和治疗动物疾病的佐剂，它由多种
成分组成。

以下是完全弗氏佐剂的成分以及其作用。

1. 矿物质与微量元素：矿物质和微量元素在动物体内发挥着重
要的生理作用，例如在体内协调传递神经信息、维持酸碱平衡。

此外，还参与多种代谢过程和酶反应，帮助机体增强免疫力。

2. 维生素：动物体内需要多种维生素，如A、C、D、E、K和B
族维生素。

维生素A有助于提高免疫功能和增强视力，维生素D有利
于钙和磷的吸收和利用，维生素B族则是合成和酵解蛋白质和糖类重
要的辅酶。

3. 氨基酸：氨基酸是蛋白质合成的主要原料，同时还能促进生
长和增强免疫力，对于动物的生长和健康至关重要。

4. 植物提取物：植物提取物是从各种植物中提取的天然化合物，具有多种生化活性，例如抗氧化、抗炎和抑菌作用等。

5. 生物活性成分：这些成分能够直接参与机体生化代谢反应，
提高机体免疫功能，促进生长发育，减轻疲劳和改善身体健康。

最后，完全弗氏佐剂除了以上基本成分外，还可能添加其他成分，以适应不同种类动物和不同的生长期需求。

这些成分可以发挥协同作用，提高佐剂的治疗效果，对于保障动物健康至关重要。

弗氏完全佐剂制备

弗氏完全佐剂制备【一、弗氏完全佐剂的概述】弗氏完全佐剂（FCA，Freund"s Complete Adjuvant）是一种广泛应用于疫苗研究和动物实验的佐剂。

它可以增强疫苗的免疫原性，诱导机体产生更强的免疫应答，从而提高疫苗的保护效果。

弗氏完全佐剂由抗原、免疫剂和辅助剂组成，其制备方法相对简单，但在操作过程中需要注意一些细节。

【二、弗氏完全佐剂的制备方法】1.原材料：弗氏完全佐剂的主要原材料包括抗原、免疫剂和辅助剂。

抗原可以是蛋白质、多糖或核酸等，免疫剂通常为氢氧化铝（Al(OH)3），辅助剂主要有油酸、石蜡油等。

2.操作步骤：（1）将抗原与氢氧化铝混合，充分搅拌，使其形成均匀的悬浊液；（2）将石蜡油与水混合，加热至充分溶解，然后与氢氧化铝抗原混合物混合，再次搅拌均匀；（3）将混合物冷却至室温，缓慢加入油酸，持续搅拌，直至形成稳定的乳状液；（4）用滤纸过滤，除去杂质，得到弗氏完全佐剂。

3.注意事项：（1）抗原与氢氧化铝的比例要适当，过低免疫原性不足，过高则会导致佐剂性能不稳定；（2）在搅拌过程中，速度不宜过快，以免产生气泡，影响最终产品的质量；（3）加入油酸时，要缓慢均匀地加入，以免出现油水分离现象；（4）制备过程中需严格无菌操作，避免细菌污染。

【三、弗氏完全佐剂的应用领域】弗氏完全佐剂广泛应用于疫苗研究、免疫学实验和生物制品研发等领域。

通过加入弗氏完全佐剂，可以提高疫苗的免疫原性，增强机体对病原体的抵抗力，从而预防和控制多种疾病。

【四、弗氏完全佐剂的优点与局限性】优点：1.免疫原性强，能有效提高疫苗的保护效果；2.制备方法简单，易于操作；3.适用范围广泛，几乎可用于所有抗原的免疫实验。

局限性：1.有一定的副作用，可能导致注射部位疼痛、红肿等；2.对于某些抗原，可能出现过敏反应；3.储存和运输条件要求较高，不耐高温，易受微生物污染。

【五、总结】弗氏完全佐剂作为一种重要的疫苗佐剂，在疫苗研究和动物实验中具有广泛的应用。

佐剂介绍

佐剂介绍当一种物质先于抗原或与抗原混合或同时注射于动物体内，能非特异性地改变或增强机体对该抗原的特异性免疫应答，发挥其辅佐作用者都称之为佐剂，又称非特异性免疫增生剂。

种类很多，目前尚无统一的分类方法，常用的佐剂可分为4类：无机佐剂，如氢氧化铝，明矾等；有机佐剂，微生物及其产物如分枝杆菌（结核杆菌、卡介苗）、短小杆菌、百日咳杆菌、内毒素、细菌提取物（胞壁酰二肽）等；合成佐剂，如人工合成的双链多聚核苷酸（双链多聚腺苷酸、尿苷酸）、左旋咪唑、异丙肌苷等；油剂，如费氏佐剂、花生油乳化佐剂、矿物油、植物油等。

弗氏佐剂目前在实验动物中最常用，又可分为弗氏不完全佐剂和完全佐剂两种。

不完全佐剂是油剂（石蜡油或植物油）与乳化剂（羊毛脂或吐温（Tween）80）相混合而成，当其再与抗原混合，即成油包水乳剂，可用于免疫注射。

在不完全佐剂中加入死的分枝杆菌，即成为弗氏完全佐剂。

完全佐剂的免疫强度大于不完全佐剂。

而双相佐剂（W/O/W）与油包水佐剂（W/O）具有同等抗原性而且易于吸收，更为稳定，粘性教小，更易于乳化，安全有效。

免疫佐剂的生物作用包括：（1）抗原物质混合佐剂注入机体后，改变了抗原的物理性状，可使抗原物质缓慢地释放，延长了抗原的作用时间；（2）佐剂吸附了抗原后，增加了抗原的表面积，使抗原易于被巨噬细胞吞噬；（3）佐剂能刺激吞噬细胞对抗原的处理；（4）佐剂可促进淋巴细胞之间的接触，增强辅助T细胞的作用；（5）可刺激致敏淋巴细胞的分裂和浆细胞产生抗体。

故免疫佐剂的作用可使无免疫原性物质变成有效的免疫原；（6）可提高机体初次和再次免疫应答的抗体滴变；（7）改变抗体的产生类型以及产生迟发型变态反应，并使其增强。

具备条件佐剂的条件作为一种良好的佐剂，必须具备下列条件：（1）增加抗原的表面积，并改变抗原的活性基团构型，从而增强抗原的免（2）佐剂与抗原混合能延长抗原在局部组织的存留时间，减低抗原的分解速度，使抗原缓慢释放至淋巴系统中，持续刺激机体产生高滴度的抗体；（3）佐剂可以直接或间接激活免疫活性细胞并使之增生，从而增强了体液免疫、细胞免疫和非特异性免疫功能；（4）良好的佐剂应具有无毒性或副作用低的特点。