细胞形态学检查

血液细胞形态学检验山东省临检中心张炳昌

血液骨髓疾病实验诊断标准化 血液骨髓疾病实验诊断标准化

1.理论依据：FAB诊断标准等

2.血液分析正确、合理、科学应用

3.诊断手段：MIC-M

4.方法标准化及可溯性

5.基础形态标准化

6.方法的实用性和互补性（形态、化学染色、免疫组

化、流式细胞、FISH 、染色体分析及PCR 等)

7.人员技术因素、综合的知识体系

8.环境、设备、试剂、方法因素

第一部分血液细胞分析仪进展

细胞形态学检验

临床需要

维护患者利益

保护检验工作者

血液分析系统

血液细胞分析仪

推片机（自动染色+烘干）

细胞阅片机

血液细胞分析仪按WBC分类

（群）分类：

两分群:第一细胞群(小细胞群)主要为淋巴细胞LYM；第二亚群(单个核细胞MONO＋EC＋BO＋GRAN)。

三分群:第一细胞群(小细胞群)主要为淋巴细胞LYM;第二亚群(单个核细胞MONO、EC、BO);第三亚群相当于GRAN。

五分类：发展为应用血细胞的五分类计数的技术,而进一步把嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、幼稚细胞区分开来。LYM+ MONO＋EC＋BO＋GRAN及幼稚细胞。

多参数进展

1.红细胞多参数

2.白细胞多参数

3. 血小板多参数

4.网织红细胞多参数

5.幼红细胞参数

6.原始、幼稚细胞多参数等

7.血小板计数校正：激光法+荧光染色

常见的五分类技术一般采用的检测方法进展

一、VCS技术

①VOLUME或称为电阻抗法(即是利用细胞的体积)。

②高频电磁波传导(Conductivitiy或称射频法。

③激光散射(LIGHT SCATTER或称光散射)。VCS技术（电阻抗、射频及激光散射）检测

方法

其中V代表体积测量，也就是传统的电阻法原理，可将体积大小差异显著的淋巴细胞和粒细胞分开；

S代表高频电导性，该技术可直接测量细胞内部结构间的差异，了解细胞内部核浆比例和细胞内化学成分，

可辨别细胞体积相同而内部性质不同的细胞，可将体

积相近的淋巴细胞和嗜碱性细胞区分开，因为他们的

核质比例明显不同。

S代表激光散射，它可穿透细胞，探测细胞内核分叶状况和颗粒情况，通过分析光散射信息对细胞内颗粒

性进行分析，细胞内颗粒粗的光反射强，因此可以用

于单核细胞和三种粒细胞的区分。通过综合处理三个

参数的特性，可全面对白细胞的各种特征进行综合评

价分析，得到五项白细胞分类结果。

二、激光散射+白细胞化学染色 即是在稀释液中加入过氧化酶（MPO）的底物及现色剂，根据白细胞的对MPO的反应分类。

光散射和细胞化学染色检测方法 机型：德国Bayer的ADVIA 120等

检测原理：主要是用溶血素破坏红细胞，利用中性粒细胞浆里含有的MPO>单核>原始、淋巴、嗜酸、嗜碱的性质，用固定酶，然后加显色剂，沉淀定位酶，最后由光散射与细胞的大小进行分类。其用二维光散射方式分析血析血小板，使小红细胞、红细胞碎片与血小板更容易分辨，大大提高了血小板测定的准确度和精密度。

三、电阻抗与射频联合检测方法原理:采用三种技术:

①淋巴细胞、单核细胞、中性粒细胞测试系

统：就是在溶血素的作用下，用电阻抗法与射

频技术分类白细胞。

②嗜酸、嗜碱性粒细胞也用电阻法。

③幼稚细胞测试系统：利用幼稚细胞的氨基比

成熟的细胞多，加入含有硫化氢基素的液体，

与其结合，其对溶血素的抵抗就比成熟强，于

是加入溶血素将成熟溶解掉，再用电阻抗法测

定。

四、电阻抗、射频和荧光染色联

合检测方法

机型:东亚公司的XE-2100和SF-3000、新推出的XT-1800i、XS系列与XE-2000i

(一）FCM荧光染色检测方法 在流式通道内，稀释后的血液从样本口低速进入快速运动的鞘液流中，因为两种液体的流速不同，所以不会混合，形成一个直径30微米的液流，同时加入不同的溶血素和缓冲液和荧光染料聚次甲基和噁嗪。当细胞单个排列通过激光束时，收集前向散射光、侧向散射光和侧向荧光的信号，进行细胞分析。

1. 前向散射光：反映细胞大小。

2. 侧向散射光：反映细胞的内容物如核和颗粒。

3. 侧向荧光：反映细胞内DNA、RNA的含量。

（二）阻抗与射频联合检测技术：

1.电阻抗（DC）：反映血细胞的体积大小。

2.射频（RF）：反映血细胞内的密度，（细

胞核的大小等其他信息）。

（三）幼稚粒细胞通道

五、流水线分析系统

全自动血液分析仪＋推片（染色）机

阅片系统

性能

设定

Alpha 流水线系统

血液分析仪功能进展

*白细胞—计数—两分类—三分类——五分类———IG /HPC

*红细胞———————半自动网红—全自动网红—有核红

不规范分类和分类

*血小板（电阻法）———（光学法）———（染色光学法）

速度30/h—————————————————110-150/h

进样手动————自动————分批———-———随机

其他—————————网络功能—扩展接口—推/染片机

形态学检查的现状问题及对策

自动化仪器应用的意义

自动化仪器的应用是细胞学检验的一场革命。不但提高了计数的精确性、准确性、易于标准化、规范化、，且提供了许多有用的形态学指标。更主要的是，通过高科技“筛选”的手段，可将符合“筛选”的标本视为正常免去镜检，而节省出更多的时间用于有病理意义标本的显微镜下检查，提高形态学分析的质量。从这种意义讲，自动化仪器的应用不是废除镜检而是为了更好地镜检。

筛选方式

1.分析数据

2.散点图

3.直方图

4.异常提示

5.临床需要