超氧阴离子自由基检测试剂盒(磺胺微板法)
总抗氧化能力(T-AOC)检测试剂盒(FRAP 微板法)说明书
植物样品的吸光度值和 0.5mM 的 Fe2+的吸光度值相同，则该血浆(血清)样品的总抗氧化 能力为 0.5mM/(0.5g/5ml)=0.5mmol/100g；
血浆(血清)样品的吸光度值和 0.7mM 的 Fe2+的吸光度值相同，则该血浆(血清)样品的总抗 氧化能力为 0.7mM；
细胞(组织)匀浆样品的吸光度值和 0.3mM 的 Fe2+的吸光度值相同，该匀浆液蛋白浓度为 0.2mg/ml，则该细胞(组织)样品的总抗氧化能力为 0.3mM/0.2mg/ml=0.15mmol/g； 0.3mM 的抗氧化物质，其吸光度值和 0.6mM 的 Fe2+的吸光度值相同，则其相对总抗氧化能力为 0.6mM/0.3mM=2。
注意事项： 1、 实验材料应尽量新鲜，样品提取的整个过程最好在 4℃条件下进行；如取材后不能立即 检测，也可以-80℃冻存后再进行测定(应在 1 个月内测定完毕)。 2、 亚铁标准溶液如变为黄色或棕黄色应弃用。 3、 测定 593nm 如有困难，亦可在 585~605nm 范围内进行测定。 4、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
总抗氧化能力(T-AOC)检测试剂盒(FRAP 微板法)即 Total Antioxidant Capacity Assay Kit with FRAP method，简称 T-AOC Assay Kit，是一种采用铁离子还原能力(Ferric Reducing Ability of Plasma,FRAP)来测定样品抗氧化活性的方法，其原理是在酸性条件下样品中的抗 氧化物质还原 Fe3+-TPTZ 产生 Fe2+-TPTZ，呈现出明显的蓝色(紫色)，于 593nm 处有最大 的光吸收，在 Fe3+-TPTZ 过量的情况下测定蓝色物质的生成量即可获得待测样品的还原能 力即总抗氧化能力，由于反应在酸性条件下进行，可以抑制内源性的一些干扰因素，并且由 于血浆等样品中的铁离子或亚铁离子的总浓度通常低于 10μM，因此血浆等样品中的铁离 子或亚铁离子不会显著干扰 FRAP 法的检测反应，本方法可以对血浆、血清、尿液等各种体 液，细胞或组织裂解液、植物或中草药抽提液或各种抗氧化物溶液的总抗氧化能力进行检测。 该试剂盒仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。
SOD试剂盒说明说书(100孔)
超氧化物歧化酶（SOD）检测试剂盒- WST®操作说明书 100孔
*本试剂盒（货号：S311）只能用于检测SOD的活性，不能用于检测超氧阴离子（O2- ）
本说明书提供了下列两种检测方法。 方法 1（检测 SOD 抑制率法）：100 孔可以检测 18-29 个样品。 方法 2（检测 SOD 活性法）： 100 孔可以检测 4-13 个样品。 两种方法的操作和实验结果准确度都有区别，请根据您的具体情况和实验准确度要求选择。如有疑问，请按照说明书下 方的联系方式咨询技术人员。
检测机理
超氧化物歧化酶（SOD）是一种重要的抗氧化酶，它可以催化超氧阴离子（O2- ）的歧化反应，生成过氧化氢和单
质氧。目前有很多种直接或间接地测量SOD活性的方法，在这些方法中，使用硝基蓝四唑（氮蓝四唑nitroblue tetrazolium ，
简称NBT）的一种间接测量方法因其便捷、简单的使用方法而被广泛应用。但是，NBT法存在一些缺点，例如生成的染 料（Formanzan dye）的水溶性较低，会和黄嘌呤氧化酶的还原型发生反应等问题。SOD检测试剂盒- WST®提供了更为 简便的检测SOD的方法，它是利用同仁化学研究所研发的高度水溶性四唑盐WST®-1（2-(4-碘苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4二磺酸苯基)-2氢-四唑盐,二钠盐），能与超氧阴离子（O2- ）反应生成一种水溶性的染料。WST®-1被超氧阴离子还原的 比率与黄嘌呤氧化酶的活性线性相关，并且会被SOD所抑制（见下图，即红色区域SOD反应优先发生，SOD反应完后蓝
至10 ml，4℃下，600 g 离心10分钟。 4. 弃上清液，加入等量的生理盐水至沉淀中，制成悬液。4℃下，600 g 离心10分钟。重复此步骤1次。 5. 在沉淀中加入4.0 ml蒸馏水，制成悬液。加入1 ml乙醇和0.6 ml氯仿。 6. 将混合后的液体，盖紧盖子， 4℃下用振荡器强烈震荡15分钟。 7. 在4℃下，将混合液600 g，离心10分钟，随后将上层水乙醇层小心移入一支新的试管中。 8. 取出0.1 ml的水乙醇层，加入0.7 ml蒸馏水，制成红细胞样品溶液。
超氧阴离子自由基检测试剂盒(磺胺比色法)
超氧阴离子自由基检测试剂盒(磺胺比色法)简介：超氧阴离子自由基作为生物体代谢过程中产生的一种自由基，可攻击生物大分子，如脂质、蛋白质、核酸和聚不饱和脂肪酸等，使其交链或者断裂，引起细胞结构和功能的破坏，与机体衰老和病变有很密切的关系，清除超氧阴离子自由基的研究已经得到了广泛的关注。
Leagene 超氧阴离子自由基检测试剂盒(磺胺比色法)又称超氧阴离子清除能力检测试剂盒，其检测原理是利用羟胺氧化的方法可以检测生物体系中超氧阴离子自由基(O 2-)，即超氧阴离子自由基(O 2-)与羟胺反应生成NO 2-，在一定范围内颜色深浅与超氧阴离子自由基(O 2-)成正比，根据NO 2-反应的标准曲线将A 530换算成NO 2-浓度，再依据上述关系式即可计算出O 2-浓度。
该试剂盒主要用于测定植物组织中的超氧阴离子自由基含量或超氧阴离子清除能力。
该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：自备材料：1、 蒸馏水2、 实验材料：植物组织(大豆、绿豆、玉米等叶片)、血液、组织样本等3、 研钵或匀浆器4、 离心管或试管5、 低温离心机6、 恒温箱或水浴锅7、 比色杯8、 分光光度计操作步骤(仅供参考)：编号 名称TO1123 50T Storage试剂(A): NO 2-标准(1mM) 1ml RT 试剂(B): O 2- Lysis buffer 125ml RT 试剂(C): 羟胺溶液30ml RT 试剂(D): 氨基苯磺酸显色液 30ml 4℃ 避光 试剂(E): 萘胺显色液 30ml4℃ 避光 使用说明书1份1、准备样品：①植物样品：取正常或逆境下的新鲜植物组织，清洗干净，擦干，切碎，迅速称取预冷的O2-Lysis buffer后冰浴条件下匀浆或研磨，4℃离心，上清液即为超氧阴离子自由基提取液，4℃保存备用。
②血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定，4℃保存，用于超氧阴离子自由基的检测。
2022年南京工业大学食品科学与工程专业《微生物学》期末试卷B(有答案)
2022年南京工业大学食品科学与工程专业《微生物学》期末试卷B(有答案）一、填空题1、G－细菌的鞭毛是由基体以及______和______3部分构成，在基体上着生______、______、______和______4个与鞭毛旋转有关的环。
2、艾滋病全名为______，其病原体称为______，英文简写为______。
3、发酵的产能机制都是______，因而产能效率极低。
4、实验室常用的有机氮源有______和______等，无机氮源有______和______等。
为节约成本，工厂中常用______等作为有机氮源。
5、在真核微生物细胞质内存在着沉降系数为______S的核糖体，它是由______S和______S两个小亚基组成，而其线粒体和叶绿体内则存在着______S核糖体，它是由______S和______S两个小亚基组成。
6、在微生物促进人类医疗保健事业发展过程中，曾发生过“六大战役”，即______，______，______，______，______，______。
7、1971年，McCord和Fridovich提出了一个关于厌氧菌氧毒害机制的______学说。
其根据是厌氧菌缺乏______酶，一般也缺乏______酶，因此易受______等的毒害。
8、植物根际微生物对植物有害的方面有______和______等。
9、目前国际上有代表性的菌种保藏机构美国的ATCC仅使用两种保藏方法，即______和______。
10、T细胞在识别抗原的同时也识别自身______。
二、判断题11、固氮菌等的孢囊，除其形成方式与芽孢不同外，其功能（休眠、抗热性）与芽孢相同。
（）12、在分离化能无机自养细菌时，必须使用以硅胶作凝固剂的无机培养基平板。
（）13、在肽聚糖的合成过程中，各个肽聚糖单体间的交联仅靠转肽作用即可完成。
（）14、腺病毒是一种呈二十面体对称的DNA病毒，在其包膜上，长有12个刺突。
（）15、游动孢子只存在于鞭毛菌和子囊菌的无性世代中。
超氧阴离子清除能力检测试剂盒说明书 可见分光光度法
第1页，共2页超氧阴离子清除能力检测试剂盒说明书可见分光光度法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号:BC1410规格:50T/48S 产品内容:提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体2mL×1瓶，4℃避光保存。
试剂二：粉剂×1瓶，4℃避光保存。
临用前加8mL蒸馏水充分溶解。
试剂三：液体10mL×1瓶，4℃保存。
试剂四：液体10mL×1瓶，4℃避光保存。
试剂五：液体10mL×1瓶，4℃避光保存。
产品说明:超氧阴离子自由基作为生物体代谢过程中产生的一种自由基，可攻击生物大分子，如脂质、蛋白质、核酸和聚不饱和脂肪酸等，使其交链或者断裂，引起细胞结构和功能的破坏，与机体衰老和病变有很密切的关系，清除超氧阴离子自由基的研究已经得到了广泛的关注。
AP-TEMED系统产生超氧阴离子，与盐酸羟胺反应生成NO 2－，NO 2－与对氨基苯磺酸和α－萘胺的作用生成红色的偶氮化合物，在530nm处有特征吸收峰，样品对超氧阴离子的清除能力与530nm的吸光值呈负相关。
自备实验用品及仪器:天平、研钵、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、1ml玻璃比色皿、恒温水浴锅。
操作步骤:一、样品处理1.组织：按照质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g，加入1mL提取液）加入提取液，冰浴匀浆后于4℃，10000g离心10min，取上清置于冰上待测。
2.细胞：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后4℃，10000g离心10min，取上清置于冰上待测。
3.培养液或其它液体：直接检测。
4.粉剂药物可配制成相同浓度，比如1mg/mL。
二、测定操作空白管对照管测定管试剂一（μL）404040试剂二（μL）160160H2O（μL）260100充分混匀，25℃反应1min样品（μL）100试剂三（μL）200200200充分混匀，37℃反应30min试剂四（μL）200200200试剂五（μL）200200200充分混匀，37℃显色20min，于1ml玻璃比色皿，以空白管调零，在530nm处测定对照管和测定管的吸光值，分别记为A对照管和A测定管。
2022年湖南环境生物职业技术学院生物制药技术专业《微生物学》期末试卷B(有答案)
2022年湖南环境生物职业技术学院生物制药技术专业《微生物学》期末试卷B(有答案）一、填空题1、微生物学为现代生命科学提供的独特研究方法有：① ______，② ______，③ ______，④ ______，⑤ ______，⑥ ______，⑦ ______，⑧ ______和⑨ ______等。
2、G－细菌细胞外膜的构成成分为______、______、______和______。
3、微生物的自发突变一般有三个主要原因：① ______，② ______，③ ______。
4、1971年，McCord和Fridovich提出了一个关于厌氧菌氧毒害机制的______学说。
其根据是厌氧菌缺乏______酶，一般也缺乏______酶，因此易受______等的毒害。
5、霉菌的气生菌丝可分化出各种类型的子实体，如无性的______、______、______等；有性的______、______和______等。
6、病毒可分真病毒与亚病毒两大类。
从组成的化学本质来划分，真病毒至少含有______和______两种成分；亚病毒中的______只含______， ______只含______或______，而______则只含______。
7、在工业防霉剂的筛选中，经常要用8种霉菌作为模式试验菌种，如______、______、______和______等。
8、氮源物质主要有______、______、______、______等，常用的速效氮源如______、______，有利于______；迟效氮源如______、______，它有利于______。
9、分支代谢途径中酶活性的反馈抑制可以有不同的方式，常见的方式是______、______、______、______等。
10、细菌性病原体会通过产生______、______和______等物质危害宿主；病毒会通过______、______和______等方式危害宿主；而真菌则会通过______、______、______和______等方式危害其宿主。
2022年塔里木大学食品科学与工程专业《微生物学》期末试卷A(有答案)
2022年塔里木大学食品科学与工程专业《微生物学》期末试卷A(有答案）一、填空题1、G－细菌细胞外膜的构成成分为______、______、______和______。
2、T4噬菌体由______、______和______三部分组成。
3、微生物的4种糖酵解途径中，______是存在于大多数生物体内的一条主流代谢途径；______是存在于某些缺乏完整EMP途径的微生物中的一种替代途径，为微生物所特有；______是产生4碳、5碳等中间产物，为生物合成提供多种前体物质的途径。
4、霉菌水浸片的制片程序是______，______，______，______， ______，______。
5、酵母菌中，有性生殖可以产生的孢子有______孢子或______孢子。
6、微生物在现代生物分类系统中分别属于______界、______界、______界和______界。
7、1971年，McCord和Fridovich提出了一个关于厌氧菌氧毒害机制的______学说。
其根据是厌氧菌缺乏______酶，一般也缺乏______酶，因此易受______等的毒害。
8、由霉腐微生物引起的材料劣变有______、______、______和______ 等多种。
9、当前对原核受体细胞来说，在遗传工程中的最合适外源基因载体是 ______和______，对真核细胞受体来说，在动物方面主要有______，植物方面则主要是______。
10、IgG在木瓜蛋白酶的作用下，可产生2个相同的______（符号为______）和1个______（符号为______）。
二、判断题11、细菌的芽孢只能由杆菌产生，细菌一旦形成芽孢后，不具有运动和繁殖的能力。
（）12、用白糖配制培养基能满足微生物对一般微量元素的需要。
（）13、无氧呼吸是专性厌氧菌所特有的一种生物氧化产能方式。
（）14、在病毒分离时，经盲传3代仍无感染症状出现，便可认定没有病毒存在。
2022年同济大学生物技术专业《微生物学》期末试卷A(有答案)
2022年同济大学生物技术专业《微生物学》期末试卷A(有答案）一、填空题1、细菌表面常有毛状附属物，其中用于运动的称为______，帮助细菌附着到物质表面的称为______，在不同菌株间传递遗传物质的称为______。
2、温和噬菌体的存在形式有三种，即______、______和______。
3、呼吸链在传递氢或电子的过程中，通过与______反应相偶联，产生了生物的通用能源______，其形成机制可根据英国学者______的______ 学说来解释。
4、实验室常用的培养细菌的天然培养基为______，培养酵母菌的天然培养基为______，培养放线菌的组合（合成）培养基为______等，培养真菌的组合培养基为______等。
5、细胞骨架是由______、______和______三种蛋白质纤维构成的细胞支架，具有支持、运输和运动等功能。
6、在微生物促进人类医疗保健事业发展过程中，曾发生过“六大战役”，即______，______，______，______，______，______。
7、1971年，McCord和Fridovich提出了一个关于厌氧菌氧毒害机制的______学说。
其根据是厌氧菌缺乏______酶，一般也缺乏______酶，因此易受______等的毒害。
8、微生物间和微生物与它种生物间的主要关系有五种，即______、______、______、______、______。
9、某些核糖体蛋白mRNA的部分二级结构和rRNA的部分二级结构相似，当rRNA短缺时，多余的核糖体蛋白质与本身的mRNA结合，从而阻断本身的翻译，同时也阻断同一多顺反子的mRNA下游其他核糖体蛋白质编码区的翻译，使______的合成和______的合成几乎同时停止。
10、在免疫学反应中，抗原抗体反应的一般规律是______、______、______、______、______。
二、判断题11、核糖核蛋白体是核酸和蛋白质合成的场所。
抗超氧阴离子自由基及生产超氧阴离子自由基测试盒
抗超氧阴离子自由基及生产超氧阴离子自由基测试盒说明书修订日期：2015.07.13 Cat number：KGT012Store at4℃for6monthsFor Research Use Only（科研专用）一、测定原理模拟机体中黄嘌呤与黄嘌呤氧化酶反应系统，产生超氧阴离子自由基O2—，加入电子传递物质及gress 氏显色剂，使反应体系呈现紫红色，可用分光光度计测其吸光度，当被测样本中含有O2。
抑制剂时，则比色时测定管的吸光度低于对照管的吸光度，而如果被测样本中含有产生O2。
物质时，则比色时测定管的吸光度高于对照管的吸光度，通过以维生素C做标准，可计算出被检物品对O2。
的影响能力。
二、试剂盒组份组份KGT01250assaysBuffer A 5.0mLBuffer B 5.0mLBuffer C 5.0mLBuffer D350μLBuffer D稀释液 5.0mL试剂E1支试剂F1支Vc标准品4支注意事项1．Buffer A室温较低时会有部分结晶析出，溶解后加蒸馏水稀释10倍至1×Buffer A50ml。
2．Buffer D用前用Buffer D稀释液按1︰14稀释至1×Buffer D（不可冷冻，4℃可保存2个月）。
3．试剂E配制：将试剂加入蒸馏水37.5mL中溶解后备用，4℃避光保存。
4．试剂F配制：将试剂加入蒸馏水37.5mL中溶解后备用，4℃避光保存。
5．显色剂配制：试剂E︰试剂F︰冰乙酸＝3︰3︰2的体积比配制，4℃避光保存（冰乙酸自备）。
6．Vc标准贮备液配制：将一支Vc标准品加蒸馏水定容至5ml（Vc标准配制后当天内使用）Vc标准品工作液（0.15mg/ml）配制：取1ml贮备液加4ml蒸馏水，5倍稀释现配现用。
Vc标准品配制后见光极易分解，配制的0.15mg/ml Vc标准品工作液需30分钟内检测。
三、操作步骤试剂测定管对照管标准管1×Buffer A （mL ） 1.01.0 1.0蒸馏水（mL ）0.050.15mg/ml Vc 标准品（mL ）0.05样品（ml ）0.05Buffer B （mL ）0.10.10.1Buffer C （mL ）0.10.10.11×Buffer D （mL ）0.10.10.1用涡旋混匀器充分混匀，置37水浴40分钟显色剂（ml ）2.02.02.010min 后倒入1cm 光径比色杯中，蒸馏水调零，波长550nm 处比色。
2022年陆军防化学院生物技术专业《微生物学》期末试卷A(有答案)
2022年陆军防化学院生物技术专业《微生物学》期末试卷A(有答案）一、填空题1、在蓝细菌类囊体内存在的光合色素是______和______，在蓝细菌类囊体外表面有藻胆蛋白体，其中有______、______、______三种光合色素。
2、最大的病毒是直径为200nm的______；最小病毒之一是______，其直径仅为28nm。
3、微生物在糖酵解生成丙酮酸基础上进行的其他种类的发酵有丁二醇发酵、混合酸发酵、______发酵和______发酵等。
丁二醇发酵的主要产物是______，______发酵的主要产物是乳酸、乙酸、甲酸、乙醇。
4、配制培养基时，应注意各种营养物质的配比，特别是______。
一般而言，当C:N≥5:1时，有利于______；当C:N＜5:1时有利于______。
5、蕈菌典型肉质子实体的构造包括______、______、______、______ 和______五个主要部分。
6、微生物在能源供应方面与人类关系密切，例如______、______、______、______和______等。
7、1971年，McCord和Fridovich提出了一个关于厌氧菌氧毒害机制的______学说。
其根据是厌氧菌缺乏______酶，一般也缺乏______酶，因此易受______等的毒害。
8、植物根际微生物对植物有害的方面有______和______等。
9、DNA分子中一种嘧啶被另一种嘌呤取代称为______。
10、补体主要有______细胞和______细胞产生，其化学成分为______，它被______激活后具补充抗体的作用。
二、判断题11、细菌的鞭毛与真菌的鞭毛在结构上差别很大，但两者在运动方式上是相同的。
（）12、病毒、类病毒和朊病毒因其是活细胞内寄生物，不能在人工培养基上培养，故属于难养菌。
（）13、在化能自养细菌中，呼吸链的递氢作用是不可逆的。
（）14、一步生长曲线是用于描述温和噬菌体生长规律的一种实验曲线。
DPPH、ABTS和FRAP微量法测定山奈酚的抗氧化能力
2. 1. 2 山奈酚对 DPPH·清除能力
称取适量山奈酚, 加入无水乙醇配制成浓度为 160 μmol / L
的溶液, 后用无 水 乙 醇 稀 释 成 浓 度 梯 度 为 160、 80、 40、 20、
10、 5、 2. 5 μmol / L 的溶液。 精密吸取梯度样品溶液 100 μL 和
to evaluate the scavenging ability of Kaempferol against DPPH free radical and ABTS free radical. The antioxidant activity
of Kaempferol was evaluated by measuring a micro - model of FRAP. The scavenges DPPH and ABTS free radicals of
∗
第 49 卷第 3 期
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王荣, 等: DPPH、 ABTS 和 FRAP 微量法测定山奈酚的抗氧化能力
Hale Waihona Puke 2 方法与结果2. 1 DPPH·清除能力的测定
2. 1. 1 DPPH·标准曲线的绘制
避光称取 DPPH 粉末 82 mg, 无水乙醇定容于 50 mL 量瓶
中, 得 1. 64 mg / mL 的 DPPH 母液。 以无水乙醇为溶剂将上述母
Kaempferol increased with the increase of the concentration. IC50 of the scavenge DPPH and ABTS free radicals were
超氧阴离子自由基清除能力测试试剂盒分光光度计法
超氧阴离子自由基清除能力测试试剂盒（A002-96T分光光度计法）一、测定原理该方法利用NADH-PMS-NBT为超氧阴离子(O2·-)生成系统，超氧阴离子清除剂能减少NBT的蓝色。
通过检测560nm处吸光值可判断体系中还原物质的还原能力。
二、试剂组成试剂一：液体40mL×1瓶；试剂二：液体1mL一瓶；试剂三：液体1mL一瓶；试剂四：粉剂一支；试剂五：1mg/mL没食子酸标准品，1mL。
三、储存条件及有效期试剂盒-20℃可保存6个月。
四、试剂的配制试剂一工作液：用时加双蒸水360mL，也就是10倍稀释，得到400mL试剂一工作液；试剂二工作液：用赠送的棕色瓶配制。
试剂二工作液由试剂二加上100mL试剂一工作液配得，现配现用，注意避光；试剂三工作液：试剂三工作液由试剂三加上100mL试剂一工作液配得，现配现用；试剂四工作液：粉剂一支。
用50mL双蒸水溶解，摇匀后，取10mL，加入90mL试剂一，配成试剂四工作液，现配现用，用赠送的棕色瓶盛装。
注意避光，配好的试剂请于2小时内用完。
试剂五：1mg/mL没食子酸标准品，100μL，-20℃保存。
五、操作步骤测定吸光值。
1空白管很重要，建议做3个以上平行；2如样品颜色较浅可不做对照管六、计算公式注： 1 如未做对照孔，可以将其视作为0；2 阳性对照求值时将其视作测定孔进行计算即可。
七、注意事项1. 如样品中色素物质不是分析对象，建议先通过SEP C18柱进行脱色处理，处理后样品可不做对照孔；2. 如不确定样品的超氧阴离子自由基清除能力，可先做不同浓度的稀释液进行摸索，并选择适宜浓度进行测定，高浓度下，浓度与清除率间并不线性相关。
3. 试剂四切记避光保存，特别是配制后，且应尽快用完。
建议在做好一切其它准备工作后再配制试剂四应用液。
试剂四正常颜色为黄色，强光照射下，5-10分钟内会变为绿色，随后变为蓝色，变色后试剂不可再用！4. 试剂二、三应用液和样品混匀后再加入试剂四，次序颠倒会导致不显色。
植物组织超氧阴离子自由基含量测定
植物组织超氧阴离子自由基含量测定一、实验原理超氧阴离子是植物体内重要的信号分子，同时，在逆境环境或细胞衰老时，氧作为电子传递的受体，易得到单电子而形成超氧阴离子。
它是细胞内生成的第一个氧自由基，能启动自由基连锁反应，经过一系列反应转化生成过氧化氢、羟自由基、单线态氧等其它的氧自由基，最后导致植物细胞的氧化损伤。
利用羟胺氧化的方法可以测定生物系统中超氧阴离子含量。
超氧阴离子与羟胺反应生成亚硝酸根，亚硝酸根在对氨基苯磺酸和α-萘胺的作用下，生成粉红色的偶氮染料（对-苯磺酸-偶氮-α-萘胺）。
取生成物在530nm波长处测定吸光度（A）值，根据A530值可以算出样品中超氧阴离子含量。
二、实验仪器高速冷冻离心机；分光光度计；恒温水浴锅；研钵；试管；移液管；试管架；移液管架；洗耳球等。
三、实验试剂0.05mol/L磷酸缓冲液（pH7.8）；10mmol/L盐酸羟胺；17mmol/L对氨基苯磺酸；7mmol/L α-萘胺；5µg/mL亚硝酸钠标准液四、实验材料小麦叶片五、实验步骤1、亚硝酸根标准曲线制作按照下表分别加入亚硝酸钠标准液和蒸馏水：氨基苯磺酸和α-萘胺各1mL），置于25℃显色15min，然后以1号管调零，在530nm波长处测定其余管的吸光值。
最后以1-9号管亚硝酸根含量为横坐标，吸光度值作纵坐标，求出方程式标准曲线回归直线。
2、超氧阴离子含量测定（1）提取液制备：称取1g小麦叶片放入研钵中，加入少许预冷的50mmol/L 磷酸缓冲液（PH7.8），研磨成匀浆，最后定容至5mL，摇匀后，在4℃，3000r/min 下离心10min，取上清液，在4℃,12000r/min下离心20min，取二次上清为提取液。
（2）取4支试管，按下表加入溶液各1mL混匀，置于25℃下显色15min，最后以1号管调零，在530nm波长处测定其余管吸光值。
六、实验结果及计算求平均值得A530为0.073。
通过标准曲线回归方程求得亚硝酸根含量为2.36nmol/mL ，反应体系中提取液为1mL，故反应体系中中亚硝酸根含量为2.36nmol。
食物总抗氧化能力(TAC)荧光法(ORAC)定量检测试剂盒产品说明书(中文版)【模板】
食物总抗氧化能力（TAC）荧光法（ORAC）定量检测试剂盒产品说明书（中文版）主要用途食物总抗氧化能力（TAC）荧光法（ORAC）定量检测试剂是一种旨在通过使用荧光素探针，受到有机氮自由基AAPH的破坏，但在抗氧化剂的存在下，得到抑制，由此通过荧光分光光度仪，观察其峰值下降程度的变化，来定量检测对应于标准水溶性生育酚Trolox的总抗氧化能力，即消除自由基等值浓度的权威而经典的技术方法。
该技术经过精心研制、成功实验证明的。
适用于各种新鲜食物样品总抗氧化能力检测。
产品严格无菌，即到即用，操作简易，性能稳定。
技术背景超氧自由基阴离子（superoxide radical；O2-）、过氧化氢（hydrogen peroxide；H2O2）、羟自由基或氢氧基（hydroxyl radical；OH-）、过氧化基（peroxyl radical；ROO-）、氢过氧自由基（hydroperoxyl；HOO）、烷氧自由基（alcoxyl radical）、氮氧基（nitric Oxide；NO-）、过氧亚硝基阴离子（peroxynitrite anion；ONOO-）次氯酸（hypochlorous acid；HOCl）、半醌自由基（semiquinone radical）、单线态氧气（singlet oxygen）等细胞内活性氧族（Reactive Oxygen Species；ROS）的产生和增多，将导致细胞衰老或凋亡，甚而导致诸如冠心病、风湿性关节炎、肿瘤、退行性病变等各种病理状况。
在生物系统内，通过抗氧化酶例如超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶等，大分子，例如白蛋白、铜蓝蛋白（ceruloplasmin；CER）、铁蛋白（ferritin）和抗氧化因子，例如生育醇、类胡萝卜素、抗坏血酸、还原性谷胱甘肽和尿酸胆红素（bilirubin）等，产生抗氧化能力，即捕获自由基的能力，达到消除或降低ROS的损害。
南京建成生物工程研究所价目表
南京建成生物工程研究所价目表南京建成生物工程研究所价目表二○○四年七月一、抗氧化检测试剂及科研试剂：（注：**为新试剂盒）序号产品名称规格单位检测方法售价厂家A001 超氧化物歧化酶（SOD）测试盒100T 盒羟胺法240.00 建成50T 盒羟胺法130.00 建成A003 丙二醛（MDA）测试盒100T 盒TBA法150.00 建成50T 盒TBA法90.00 建成A002 黄嘌呤氧化酶（XOD）测试盒50T 盒比色法130.00 建成A015 总抗氧化能力（T-AOC）测试盒50T 盒比色法120.00 建成25T 盒比色法70.00 建成A018 羟自由基测试盒50T 盒比色法150.00 建成A052 超氧阴离子自由基（O ）测试盒50T 盒比色法130.00 建成A044 髓过氧化物酶（MPO）测试盒50T 盒比色法160.00 建成A007 过氧化氢酶（CAT）测试盒紫外分光光度法100T 盒紫外比色法100.00 建成可见光分光光度法100T 盒钼酸铵法100.00 建成A064 过氧化氢（H2O2）测试盒50T 盒比色法50.00 建成A004 谷胱甘肽—S转移酶（GSH—ST）测试盒80T 盒比色法200.00 建成A005 谷胱甘肽—过氧化物酶（GSH—PX）测试盒50T 盒比色法200.00 建成A062 谷胱甘肽－还原酶(GR)测试盒50T 盒比色法200.00 建成A006 还原型谷胱甘肽（GSH）测试盒50T 盒比色法180.00 建成A061 氧化型谷胱甘肽(GSSG) 测试盒50T 盒比色法180.00 建成A063 巯基（-SH）测试盒50T 盒比色法180.00 建成A034 单胺氧化酶（MAO）测试盒50T 盒紫外比色法150.00 建成A012一氧化氮（NO）测试盒(硝酸还原酶法) 50T 盒比色法300.00 建成25T 盒比色法180.00 建成A013 一氧化氮（NO）测试盒（化学法测NO2—）100T 盒比色法150.00 建成A014 -1 一氧化氮合成酶（NOS）测试盒[（T－NOS、iNOS、cNOS）三型同时出结果] 50T 盒比色法480.00 建成25T 盒比色法260.00 建成A014-2 一氧化氮合成酶（NOS）测试盒[总NOS（T－NOS）] 50T 盒比色法350.00 建成25T 盒比色法200.00 建成A019-1 乳酸（LD）测试盒（测全血）50T 盒紫外比色法240.00 建成50T 盒可见光比色法240.00 建成A019-2 乳酸（LD）测试盒（测血清、组织）50T 盒比色法200.00 建成A020 乳酸脱氢酶（LDH）测试盒100T 盒比色法240.00 建成50T 盒比色法130.00 建成A016-1 A TP酶测试盒（组织及细胞膜需高速离心）(可测Na+K+、Ca2+Mg2+ ATPase) 100T 盒比色法240.00 建成50T 盒比色法150.00 建成A016-2 A TP酶测试盒（组织及细胞膜不需高速离心）(可测Na+K+、Ca2+Mg2+ ATPase) 100T 盒比色法300.00 建成50T 盒比色法180.00 建成A057 Cu-A TP酶（Cu-A TPase）测试盒100T 盒比色法300.00 建成50T 盒比色法180.00 建成序号产品名称规格单位检测方法售价厂家A069 氢－钾A TP酶（H+-A TPase）测试盒100T 盒比色法300.00 建成50T 盒比色法180.00 建成A070-1 超微量A TP酶测试盒（可测Na+K+、Ca2+Mg2+ A TPase、总ATPase）200T 盒比色法390.00 建成100T 盒比色法230.00 建成A070-2 超微量A TP酶测试盒（可测总A TPase）100T 盒比色法300.00 建成50T 盒比色法180.00 建成A021 苹果酸脱氢酶测试盒50T 盒紫外比色法面议建成A022 琥珀酸脱氢酶测试盒50T 盒比色法240.00 建成A032 肌酸激酶（CK）测试盒50T 盒比色法180.00 建成A023 胆碱酯酶（CHE）测试盒50T 盒比色法70.00 建成A024 乙酰胆碱酯酶（T-CHE）测试盒50T 盒比色法150.00 建成A025 丁酰胆碱酯酶测试盒50T 盒比色法150.00 建成A027 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G-6-PD）测试盒50T 盒比色法100.00 建成A031 b-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶（NAG）测试盒50T 盒比色法260.00 建成A053 β-葡萄糖醛酸苷酶测试盒50T 盒比色法200.00 建成A055** 红细胞NADH高铁血红蛋白还原酶测试盒50T 盒比色法260.00 建成A059 碱性磷酸酶（AKP）测试盒50T 盒比色法100.00 建成A060 酸性磷酸酶（ACP）测试盒50T 盒比色法130.00 建成A049 前列腺酸性磷酸酶（PACP）测试盒50T 盒比色法180.00 建成A058 抗酒石酸酸性磷酸酶（StrACP）测试盒50T 盒比色法180.00 建成A068 钙调神经磷酸酶（CaN）测试盒25T 盒比色法200.00 建成A072 全血2，3-二磷酸甘油酸（2，3-DPG）测试盒50T 盒比色法面议建成A047 谷氨酰胺合成酶（GS）测试盒50T 盒比色法300.00 建成A048 腺苷脱氨酶(ADA)测试盒50T 盒比色法130.00 建成A073** 谷氨酰胺测试盒50T 盒比色法200.00 建成A074** 谷氨酸测试盒50T 盒比色法260.00 建成A075** 谷氨酰胺、谷氨酸（两种均可测）50T 盒比色法480.00 建成A076** 丙酮酸激酶（PK）测试盒50T 盒比色法面议建成A077** 己糖激酶（HK）测试盒50T 盒比色法面议建成A036 唾液酸（SA）测试盒(带SA标准) 50T 盒比色法200.00 建成A017-1 细胞凋亡测试盒（TdT酶、稀释液、POD）10片盒TUNEL法1450.00 建成A017-2 细胞凋亡测试盒（TdT介导的原位末端切口平移双标记法）(全套）10片盒TUNEL法1850.00 建成A008 维生素E（VE）测试盒50T 盒比色法130.00 建成A009 维生素C（VC）测试盒50T 盒比色法150.00 建成A010 维生素B1（V B1）测试盒50T 盒比色法面议建成A011 维生素B2（V B2）测试盒50T 盒比色法面议建成A026 总氨基酸（T—AA）测试盒80T 盒比色法100.00 建成A030-1 羟脯氨酸测试前处理试剂消化液50T 瓶比色法100.00 建成调PH试剂50T 瓶比色法70.00 建成A030-2 羟脯氨酸（Hyp）测试盒（可测血清、培养液、尿液、心肌、皮肤、软骨、肝脏等等）50T 盒比色法180.00 建成A041 5’-核苷酸酶（5’-NT）测试盒50T 盒比色法150.00 建成A035 D—木糖测试盒50T 盒比色法100.00 建成A056 糖化血红蛋白（GHb）测试盒15T 盒比色法55.00 建成A037 糖化血清蛋白（GSP）测试盒（果糖胺法）（带标准）50T 盒比色法150.00 建成25T 盒比色法80.00 建成A043 肝/肌糖元测试盒50T 盒比色法160.00 建成A038 脂蛋白（a）[LP（a）]测试盒96T 盒ELISA法380.00 建成A054 脂肪酶测试盒50T 盒比色法200.00 建成A067 总脂酶【脂蛋白脂酶（LPL）/肝脂酶（HL）】测试盒100T 盒比色法300.00 建成50T 盒比色法160.00 建成A042 游离脂肪酸(NEFA)测试盒50T 盒比色法160.00 建成A033 脂褐质测试盒50T 盒荧光比色法100.00 建成A039 血清铁测试盒50T 盒比色法100.00 建成A040 总铁结合力(TIBC)测试盒50T 盒比色法180.00 建成A029 铜兰蛋白（CP）测试盒50T 盒比色法150.00 建成A071 微量游离血红蛋白测试盒50T 盒比色法80.00 建成A028 白蛋白测试盒（溴甲酚绿法）100T 盒比色法30.00 建成A045-1 总蛋白定量测试盒（双缩脲法）100T 盒比色法30.00 建成A045-2 总蛋白定量测试盒（考马斯亮兰法）100T 盒比色法30.00 建成A046 蛋白标准品(总蛋白、白蛋白) 1ml 支7.00 建成A050-1 溶菌酶（LZM）测试盒（带标准）30T 盒试管比浊法60.00 建成A050-2 溶菌酶（LZM）测试盒（带标准）30T 盒平板法60.00 建成A050-3 溶菌酶标准品2mg 支6.00 建成A050-4 微球菌粉30mg 支40.00 建成A065 解脲（溶脲）支原体快速培养基（UU培养基）每人份支培养基10.00 建成A066 人型支原体快速培养基每人份支培养基10.00 建成A051-1 肝素溶液10ml 支20.00 建成A051-2 肝素抗凝管10ml 支2.00 建成二、不孕症系列酶免疫试剂：序号产品名称规格单位检测方法售价厂家B001 抗心磷脂抗体测试盒（ACL）IgG类48T 盒ELISA 160.00 建成抗心磷脂抗体测试盒（ACL）IgA类48T 盒ELISA 160.00 建成抗心磷脂抗体测试盒（ACL）IgM类48T 盒ELISA 160.00 建成B002 抗精子抗体测试盒（AsAb）IgG类48T 盒ELISA 160.00 建成抗精子抗体测试盒（AsAb）IgA类48T 盒ELISA 160.00 建成抗精子抗体测试盒（AsAb）IgM类48T 盒ELISA 160.00 建成B003 抗子宫内膜抗体测试盒（EmAb）IgG类48T 盒ELISA 260.00 建成抗子宫内膜抗体测试盒（EmAb）IgA类48T 盒ELISA 260.00 建成抗子宫内膜抗体测试盒（EmAb）IgM类48T 盒ELISA 260.00 建成B004 抗卵巢抗体测试盒（AoAb）IgG类48T 盒ELISA 260.00 建成抗卵巢抗体测试盒（AoAb）IgA类48T 盒ELISA 260.00 建成抗卵巢抗体测试盒（AoAb）IgM类48T 盒ELISA 260.00 建成三、常用试剂：序号产品名称规格单位检测方法售价厂家C001 钾（K）测试盒（带标准）30T 盒比色法（上机）45.00 建成30T 盒比浊法（手工）35.00 建成C002 钠（Na）测试盒（带标准）30T 盒比色法（上机）45.00 建成30T 盒比浊法（手工）35.00 建成C003 氯（Cl）测试盒（带标准）30T 盒比色法（上机）45.00 建成30T 盒比色法（手工）28.00 建成C004 钙（Ca）测试盒（带标准）30T 盒比色法（上机）40.00 建成30T 盒比色法（手工）30.00 建成C006 磷（Pi）测试盒（带标准）100T 套孔雀绿显色39.00 建成A059 碱性磷酸酶（AKP）测试盒50T 盒比色法100.00 建成A060 酸性磷酸酶（ACP）测试盒50T 盒比色法130.00 建成C009 谷丙转氨酶（SGPT）测试盒100T 盒比色法30.00 建成C010 谷草转氨酶（SGOT）测试盒100T 盒比色法30.00 建成C018 总胆红素、直接胆红素测试盒80T 套咖啡因比色法65.00 建成80T 套一步法65.00 建成C017 Υ—谷氨酰转移酶（Υ—GT）测试盒100T 套比色法88.00 建成C020 尿胆红素测试盒50T 套哈里森氏法25.00 建成C033 尿胆原测试盒50T 套25.00 建成C013 尿素氮（BUN）测试盒100T 套脲酶比色法36.00 建成100T 套二乙酰－肟比色法27.00 建成C016 淀粉酶（AMS）测试盒100T 套淀粉一碘比色法39.00 建成C012 尿酸测试盒50T 套比色法40.00 建成C011-1 肌酐（Cr）测试盒（苦味酸法）100T 套比色法（除蛋白）60.00 建成C011-2 肌酐（Cr）测试盒（苦味酸法）100T 套比色法（不除蛋白）40.00 建成C021 血红蛋白稀释液（测试液）5ml 支HICN比色法4.50 建成C022 血红蛋白标准品5ml×4支套比色法12.00 建成C023 血红蛋白校正液250ml 瓶比色法35.00 建成100ml 瓶比色法14.00 建成C024 血小板稀释液（计数液）100ml 瓶8.00 建成C025 白细胞稀释液（计数液）100ml 瓶8.00 建成C037 红细胞稀释液（计数液）100ml 瓶8.00 建成C026 血细胞仪清洗液250ml 瓶25.00 建成C028 CO2结合力测试盒2ml×3×10 套滴定法40.00 建成C034 脑脊液蛋白测试盒50T 盒磺基水杨酸法50.00 建成C038 血沉测试液100ml 瓶10.00 建成C039 嗜酸粒细胞直接计数液40ml×1 瓶50.00 建成C040 网织红细胞计数液8 ml×2 套试管法30.00 建成10 ml×1 瓶玻片法20.00 建成C035-1 尿蛋白定性测试盒100T 盒磺基水杨酸法30.00 建成C035-2 尿蛋白定量测试盒100T 盒CBB法30.00 建成C041 尿糖试剂100ml 瓶班氏法40.00 建成C027 尿粪隐血测试盒100T 套联苯胺法15.00 建成100T 套邻联甲苯胺法15.00 建成A051-1 肝素溶液10ml 支20.00 建成A051-2 肝素抗凝管10ml 支2.00 建成四、染液类序号产品名称规格单位检测方法售价厂家D001 碱性磷酸酶染液50片套染色50.00 建成D002 酸性磷酸酶染液50片套染色50.00 建成D003-1 酸性酯酶染液5.0ml×4 盒染色50.00 建成D003-2 中性酯酶染液5.0ml×4 盒染色50.00 建成D003-3 碱性酯酶染液5.0ml×4 盒染色50.00 建成D003-4 双重酯酶染液5.0ml´4 盒染色60.00 建成D009 快速血细胞染液50ml×2 套染色40.00 建成D004 糖元染液10ml×4 盒染色40.00 建成D005 苏木素染液50ml×1 瓶染色40.00 建成D019 伊红染液100ml×1 套染色50.00 建成D006 H-E染液套染色55.00 建成D007 瑞氏染液50ml×2 套染色40.00 建成D010 瑞氏一姬姆萨复合染液50ml×2 套染色40.00 建成D011 姬姆萨染液套染色30.00 建成D015 巴氏染液（脱落细胞染色）套染色50.00 建成D017 快速H-E组织细胞及脱落细胞染液10ml×4 染色20.00 建成D008 革兰氏染液50ml×4 套染色50.00 建成D012 抗酸染液50ml×2 套染色40.00 建成D013 溴酚兰溶液1.0ml 支染色10.00 建成D014 溴乙淀溶液1.0ml 支染色20.00 建成D016 细胞活性鉴别染液20ml 瓶伊文斯蓝法20.00 建成D018 血管通透性测试染液20ml 瓶美蓝法20.00 建成D020** 过氧化物酶染液5ml 套染色20.00 建成五、各种浓度及PH值的缓冲液：(注: 以下缓冲液PH值、摩尔浓度按客户要求配制。
天麻多酚的超声辅助提取工艺优化及抗氧化活性研究
天麻多酚的超声辅助提取工艺优化及抗氧化活性研究孙海燕【摘要】以鲜天麻为试材,研究了天麻总酚的超声辅助提取工艺条件,以最佳工艺对不同干燥条件下的天麻粉进行总酚提取,测定其总酚含量与抗氧化能力,并分析两者的相关性.结果表明,影响天麻总酚提取效果的最主要因素是提取温度,最优工艺条件为:提取温度50℃、提取时间35 min、提取功率80 W,料液比1:10(g/mL),在该条件下,天麻总酚含量最高为5.62 mg/g;不同干燥条件下,55℃热风干燥制得的天麻粉总酚含量最高,达5.754 mg/g,其总抗氧化能力、抗超氧阴离子自由基能力、抑制羟自由基能力和DPPH自由基清除能力也最高,同时,天麻总酚含量与其抗氧化能力呈显著相关,说明天麻总酚具有一定的抗氧化能力.%The fresh Gastrodia elata was used to extract total phenolic content which help to explore an ultrasonic assisted extraction technology..The total phenol from the G.elata under different drying conditions was extracted by the optimized technology.The total phenolic content and antioxidant capacity were detected,and then the correlation between them was analyzed.The results showed that extraction temperature was the main factor that influenced the extraction efficiency of total phenol.The optimal process condition was.extracting the total phenol for 35 min at 50℃,using a solidliquid ratio is 1 ∶ 10(g/mL)with extraction power 80 W,and consenquently 5.62 mg/g of total phenole was obtained from G.Elata.Furthemor,it was found that the highest content of total phenolic content is 5.754 mg/g in hot air drying among all the different drying conditions,and total antioxidant capacity,anti superoxide anion free radical,hydroxyl radical scavengingactivity and DPPH radical scavenging ability of it were also the highest.In addition,the total phenolic content and antioxidant capacity were found significantly correlated with each other,and this indicated that the total phenolic compounds might poccess certain antioxidant capacity.【期刊名称】《食品与机械》【年(卷),期】2016(032)010【总页数】6页(P158-163)【关键词】天麻;多酚;超声辅助提取;抗氧化活性【作者】孙海燕【作者单位】陕西理工大学陕西省资源生物重点实验室,陕西汉中723000;陕西理工大学生物科学与工程学院,陕西汉中 723000;国家农产品保鲜工程技术研究中心秦巴地区保鲜工作站,陕西汉中 723000;陕南秦巴山区生物资源综合开发协同创新中心,陕西汉中723000【正文语种】中文天麻(Gastrodia elata Bl)，又名赤箭、独摇芝、离母、合离草、神草、鬼督邮、木浦、明天麻、定风草、白龙皮等，根状茎肥厚，无绿叶，蒴果倒卵状椭圆形，常以块茎或种子繁殖，是兰科天麻属多年生草本植物，为常用名贵中药。
索莱宝超氧阴离子含量检测试剂盒说明书 (微量法)
超氧阴离子含量检测试剂盒说明书微量法货号：BC1295规格：100T/96S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液液体110 mL×1瓶4℃保存试剂一液体12 mL×1瓶4℃保存试剂二液体8 mL×1瓶4℃保存试剂三液体8 mL×1瓶4℃保存试剂四液体14 mL×1瓶（自备）4℃保存标准品液体0.5mL×1支4℃保存溶液的配制：1、试剂四：自备氯仿；2、标准品：10μmol/mL 亚硝酸钠。
产品说明：生物体内超氧阴离子等活性氧具有免疫和信号传导的作用，但积累过多时会对细胞膜及生物大分子产生破坏作用，导致机体细胞和组织代谢异常，从而引起多种疾病。
超氧阴离子与盐酸羟胺反应生成NO 2-，NO2-在对氨基苯磺酰胺和萘乙二胺盐酸盐的作用下，生成紫红色的偶氮化合物，在530nm 有特征吸收峰，根据A 530值可以计算样本中O 2－含量。
技术指标：最低检出限：0.001451 μmol/mL 线性范围：0.0019-0.5 μmol/mL注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：天平、水浴锅、离心机、可见分光光度计/酶标仪、研钵/匀浆器、微量玻璃比色皿/96孔板、氯仿和蒸馏水。
操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1.植物、动物组织：称取约0.1g 样本，加入提取液1mL ，充分研磨，12000rpm ，4℃，离心20min ，取20μL 上清测定蛋白含量，其余上清作为待测样本。
2.血清或培养液：直接测定。
二、测定步骤：1.分光光度计或酶标仪预热30min 以上，调节波长至530nm ，蒸馏水调零。
2.标准溶液的制备取适量亚硝酸钠标准液，将其稀释为0.25、0.125、0.0625、0.03125、0.015625、0.0078125μmol/mL的标准溶液，用这些标准管做标准曲线。
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相关：
编号 DF0135 NR0001 PS0013 TO1013
名称 多聚甲醛溶液(4% PFA) DEPC 处理水(0.1%) RIPA 裂解液(强) 丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA 比色法)
计算：
以系列 NO2-标准(1-6 号孔)含量(μM)为横坐标，以对应的吸光度为纵坐标，制作标准
北京雷根生物技术有限公司
曲线，根据测定孔的吸光度进而计算 NO2-含量。根据如下公式计算具体样品中超氧阴离子 自由基(O2-)的含量：
植物组织样品 O2-(μM/g)=2×n×VT/(W×VS) 式中：2=NO2-与 O2-间的化学计量数
①植物样品：取正常或逆境下的新鲜植物组织，清洗干净，擦干，切碎，迅速称取,加入预 冷的 O2- Lysis buffer 后冰浴条件下匀浆或研磨，离心，上清液即为超氧阴离子自由基提取 液，保存备用。
②血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定，
保存，用于超氧阴离子自由基的检测。
北京雷根生物技术有限公司
超氧阴离子自由基检测试剂盒(磺胺微板法)
简介：
超氧阴离子自由基作为生物体代谢过程中产生的一种自由基，可攻击生物大分子，如 脂质、蛋白质、核酸和聚不饱和脂肪酸等，使其交链或者断裂，引起细胞结构和功能的破 坏，与机体衰老和病变有很密切的关系，清除超氧阴离子自由基的研究已经得到了广泛的 关注。生物体内的分子氧可以经过单电子还原转变为超氧阴离子自由基(O2-)，超氧阴离子 自由基既可以直接作用于蛋白质和核酸等大分子，也可以衍生为羟自由基、单线态氧、过 氧化氢及脂质过氧物自由基等对细胞结构和功能具有破坏作用的活性氧。
94
NO2-含量(μM)
10
20
30
40
50
60
3、 O2-加样：按照下表设置空白孔、标准孔、测定孔，溶液应按照顺序依次加入，并注意 避免产生气泡。如果样品中的超氧阴离子自由基浓度过高，可以减少样品用量或适当稀 释后再进行测定，样品的检测最好能设置平行管。
加入物(μl)
空白孔
蒸馏水
100
系列 NO2-标准(1-6 号孔)
注意事项：
1、 实验材料应尽量新鲜，如取材后不立即使用，应存于 4℃。 2、 如果样品中含有较多的叶绿素，会干扰测定结果，可在加入羟胺溶液 25℃水浴孵育
20min 后用等体积乙醚萃取叶绿素，再行显色反应。 3、 如果没有分光光度计，也可以使用普通的酶标仪测定，但应考虑酶标仪的最大检测体
积。 4、 所测样本的浓度过高，应用 O2- Lysis buffer 稀释样品后重新测定。
1份
自备材料：
1、 蒸馏水 2、 实验材料：植物组织(大豆、绿豆、玉米等叶片)、血液、组织样本等 3、 研钵或匀浆器 4、 离心管或试管 5、 低温离心机 6、 恒温箱或水浴锅
北京雷根生物技术有限公司
7、 96 孔板 8、 酶标仪
操作步骤(仅供参考)：
1、 准备样品：
Leagene 超氧阴离子自由基检测试剂盒(磺胺微板法)又称超氧阴离子清除能力检测试 剂盒，其检测原理是利用羟胺氧化的方法可以检测生物体系中超氧阴离子自由基(O2-)，即 超氧阴离子自由基(O2-)与羟胺反应生成 NO2-，NO2-在氨基苯磺酸和萘胺作用下反应生成 粉红色的偶氮物质对-苯磺酸-萘胺，以酶标仪测定 530nm 处吸光度，在一定范围内颜色深 浅与超氧阴离子自由基(O2-)成正比，根据 NO2-反应的标准曲线将 A530 换算成 NO2-浓度， 再依据上述关系式即可计算出 O2-浓度。该试剂盒主要用于测定植物组织中的超氧阴离子自 由基含量或超氧阴离子清除能力。该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用 途。
③高活性样品：如果样品中含有较高浓度的超氧阴离子自由基，可以使用 O2- Lysis buffer 进行恰当的稀释。
2、 配制系 NO2-标准溶液：取出 NO2-标准恢复至室温后，以 NO2-标准按下表继续稀释：
加入物(μl)
1
2
3
4
5
6NO2-标准(1mM)1 Nhomakorabea2
3
4
5
6
蒸馏水
99
98
97
0.96
95
n=从标准曲线上查得的 NO2-含量(μM) VT=超氧阴离子自由基提取液总体积(ml) W=样品鲜重(g) VS=测定时加入提取液体积(ml)
血清、尿液等样品 O2-(μM/ml)=2×n×N/VS 式中：2=NO2-与 O2-间的化学计量数 n=从标准曲线上查得的 NO2-含量(μM) N=稀释倍数 VS=测定时加入提取液体积(ml)
组成：
名称 试剂(A): NO2-标准(1mM) 试剂(B): O2- Lysis buffer 试剂(C): 羟胺溶液
编号
TO1121 100T 1ml 250ml 5ml
Storage
RT RT RT
试剂(D): 氨基苯磺酸显色液
5ml 4℃ 避光
试剂(E): 萘胺显色液
5ml 4℃ 避光
使用说明书
—
待测样品
—
O2- Lysis buffer
—
羟胺溶液
—
混匀，水浴孵育。
氨基苯磺酸显色液
50
萘胺显色液
50
混匀，水浴孵育。
标准孔 — 100 — — —
50 50
测定孔 — — 25 25 50
50 50
4、O2-测定：以空白调零，酶标仪检测标准孔、测定孔 530nm 处吸光度(A 标准、A 测定)。