酸溶血试验

酸溶血试验

1.酸溶血试验的原理：阵发性睡眠性血红蛋白尿症（PNH）患者体内存在对补体敏感的红细胞。酸化血清溶血试验，也称Hamtest，即红细胞在酸性（pH6.4～6.5）的正常血清中孵育，补体被激活，PNH红细胞破坏而产生溶血。而正常红细胞不被溶解，无溶血现象。

2.适应症：本试验阳性主要见于PNH,某些自身免疫性溶血性贫血发作严重时也可阳性。

3.试验仪器：水温箱，离心机

①试验试剂：同型正常人血清或AB型血清：取正常人同型或AB型血5ml分离血清备用（37℃孵育）。取新鲜血清0.5ml放60℃水浴3分钟灭活备用。

②50%RBC悬液：由被检者静脉采血2ml，肝素抗凝。用生理盐水洗涤红细胞2次，配成50%红细胞悬液。

③0.2mol/l HCL

4.操作步骤：

①取患者的红细胞，用生理盐水重复洗涤2次，最后配成50%红细胞悬液；

②取与患者同型或AB型血3-5ml，待其自然凝固，分离正常人血清（最好采用多人混合新鲜血清，以保证有足够的补体）

③取同一正常人的红细胞，用生理盐水重复洗涤2次，最后配成50%红细胞悬液；按下表操作：

试管号 1 2 3 4 5 6

同型或AB型血清（ml）0.5 0.5 0 0.5 0.5 0

灭活血清0 0 0.5 0 0 0.5

0.2NHCL 0.05 0 0.05 0.05 0 0.05

患者50%红细胞悬液0.05 0.05 0.05 0 0 0

正常人50%红细胞悬液0 0 0 0.05 0.05 0.05

置37℃水浴中1小时，观察结果。

参考值范围及报告;

1.试验管溶血、对照管不溶血为阳性。

2.试验管和对照管都不溶血为阴性。

注意事项：

1.血清酸化后，试管必须塞紧，否则二氧化碳逸出，可使血清酸

度下降。

2.抗凝剂会影响PH值，故不宜用抗凝血浆，但可用脱纤维血；

3.为了保证补体充足，最好用混合血清，但正常对照红细胞必须

用“O”型血；

4.如患者曾经多次输血，血中异常红细胞相对减少，本试验可为

弱阳性或阴性。