第十章白细胞检验的基本方法

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白细胞计数的方法学评价

白细胞计数的方法学评价白细胞计数是一种常用的临床检验指标，用于评估机体免疫功能和炎症反应程度。

准确评价白细胞计数的方法学对于临床诊断和治疗具有重要的意义。

本文将对白细胞计数的方法学进行评价，包括采血、染色、计数和结果判读等方面。

采血是白细胞计数的第一步。

正确的采血方法能够保证样本的质量和准确性。

在采血过程中，应注意选择合适的采血部位和针头尺寸，避免对静脉内外压力造成影响。

同时，采血过程中要注意避免气泡进入样本，否则会对计数结果产生干扰。

染色是白细胞计数的关键步骤之一。

常用的染色方法有乌洛托品蓝染色和吉姆萨染色等。

在染色过程中，要控制好染色时间和浓度，以保证细胞核和细胞质染色充分且均匀。

染色过程中还要注意避免样本受污染，以免影响计数结果的准确性。

接下来是计数方法的选择。

常见的计数方法有手工计数和自动计数两种。

手工计数方法是传统的计数方法，需要借助显微镜进行细胞计数。

这种方法需要操作人员具备较高的技术水平和经验，计数过程中容易出现主观误差。

而自动计数方法则是利用计算机和显微镜配合进行计数，可以大大提高计数的准确性和效率。

最后是结果判读的环节。

白细胞计数的结果通常以细胞计数/升或百分比的形式呈现。

对于结果的判读需要结合个体的临床情况进行综合分析。

正常成年人的白细胞计数一般在4-11×10⁹/L之间，不同年龄段、性别和生理状态的人群可能会有差异。

因此，在判读结果时需要考虑到个体差异和临床指导意义。

白细胞计数的方法学评价是保证临床检验结果准确性和可靠性的重要环节。

采血、染色、计数和结果判读等步骤都需要严格控制和操作，以确保白细胞计数结果的准确性。

此外，还需要结合临床情况进行结果的综合分析和判读。

只有在方法学评价的基础上，才能为临床诊断和治疗提供准确可靠的依据，提高患者的治疗效果和生活质量。

白细胞检验的基本方法

白细胞检验的基本方法白细胞检验是一项常见的临床检查，用于评估身体的免疫状况以及检测是否存在某些疾病。

本文将介绍白细胞检验的基本方法，包括前期准备、样本采集、实验室检测以及结果解读等方面。

一、前期准备在进行白细胞检验之前，患者需要进行一些简单的准备工作。

首先，患者应该提前向医生告知任何已知的过敏史或对血液采集可能产生的恐惧感。

其次，患者应按照医生的指示暂停服用任何可能影响白细胞计数的药物，例如抗生素或抗炎药物。

在进行样本采集前，应确保患者处于良好的健康状态，避免疲劳、饥饿或其他因素对检验结果的干扰。

二、样本采集白细胞检验常采用外周血样本进行，通常是通过抽血来获取。

具体的采集方法包括：清洁被采集部位的皮肤，通常是患者的腕部或手背；用消毒棉球擦拭采集部位，防止感染的发生；医生或护士使用一根准确的针头将血液抽出，通常需要10毫升的样本；完成样本采集后，使用无菌棉球轻轻按压采集点，以避免出血。

三、实验室检测样本采集后，医生或实验室的专业人员将对白细胞进行检测。

最常见的方法是使用自动化血细胞计数仪，该仪器能够快速、准确地测量不同种类白细胞的数量，并计算出白细胞总数，通常以每升血液中的细胞数（cells/μL）来表示。

此外，一些实验室还会进行外观检查，通过显微镜观察染色的白细胞以确定其类型和形态，以辅助疾病的诊断。

四、结果解读白细胞检验的结果一般包括白细胞总数以及不同类型白细胞的百分比。

正常成年人的白细胞总数通常在4000-10000个/μL范围内，而白细胞类型分布如下：中性粒细胞（50-70%）、淋巴细胞（20-40%）、单核细胞（2-8%）、嗜酸细胞（0-5%）和嗜碱细胞（0-1%）。

医生将根据实验室提供的结果进行解读，结合患者的临床症状和其他检查结果来判断是否存在异常情况，并进一步进行疾病的诊断。

总结白细胞检验是一项重要的医学检查，通过测量血液中不同类型白细胞的数量和比例，有助于评估免疫功能和检测潜在的疾病。

白细胞分类计数操作规程

白细胞分类计数操作规程一、背景白细胞（WBC）分类计数是临床常用的血液检测项目之一，用于评估机体的免疫功能和炎症反应程度。

本操作规程旨在准确、高效地完成白细胞分类计数，确保结果的可靠性和一致性。

二、实验步骤1. 样本制备a. 将待测血液样本放置在真空抽血管中，轻轻颠倒数次以均匀混合。

b. 通过离心机将样本离心，将上清液吸走，留下底部的血细胞沉淀。

2. 制备涂片a. 取一块清洁无尘的载玻片，用酒精棉球清洁玻片表面，使其无油无尘。

b. 使用吸管吸取血细胞沉淀，轻轻涂抹于载玻片上，形成薄且均匀的涂片。

c. 将载玻片置于通风处晾干，避免沾染灰尘。

3. 染色处理a. 取一容器，加入Wright涂片染色液。

b. 将晾干的载玻片缓慢地完全浸入染色液中，浸泡时间约为3-5分钟。

c. 取出载玻片，用蒸馏水洗净，直到不再有颜色溢出。

d. 将载玻片倒置放置在架子上，风干。

4. 镜检操作a. 将染好的载玻片放置在显微镜平台上，调整倍数至1000倍。

b. 选择一个视野，使用显微镜目镜对白细胞进行分类计数。

c. 根据形态特征和染色情况，将白细胞分为分类计数，包括中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞。

d. 使用计数器或目测法进行计数，记录每种白细胞的数量。

5. 数据分析和结果报告a. 将得到的数量数据进行统计分析，计算各类白细胞的百分比。

b. 将统计结果填写在相应的报告表格中，并进行结果的审核和核对。

c. 完成数据分析后，将结果进行归档并上传至电子病历系统以备查阅。

三、质量控制1. 高质量涂片的制备与染色是确保准确计数的关键步骤，操作人员需严格按照规程操作，避免因操作不当导致的误差。

2. 操作人员需熟悉白细胞的形态特征和染色情况，以确保正确分类计数。

3. 建立质控标准和定期参加质量控制评估是标准化操作的必要保障，以确保结果的稳定性和可靠性。

四、安全注意事项1. 操作时需佩戴实验手套和口罩，避免直接接触血液样本。

检验基础之白细胞检查

检验基础之白细胞检查在医学检验的众多项目中，白细胞检查是一项至关重要的基础检查。

白细胞作为人体免疫系统的重要组成部分，其数量和形态的变化往往能反映出身体的健康状况。

接下来，让我们一起深入了解一下白细胞检查的相关知识。

白细胞，也被称为白血球，是一类无色、有核的血细胞。

它们在人体中发挥着防御病原体入侵、清除异常细胞和参与免疫反应等重要作用。

正常情况下，白细胞的数量和比例保持相对稳定，但当身体受到感染、炎症、免疫性疾病或其他病理因素的影响时，白细胞的数量和形态就可能发生改变。

白细胞主要分为五类：中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞。

每种类型的白细胞都有其独特的功能和特点。

中性粒细胞是白细胞中数量最多的一类，它们具有强大的吞噬作用，能够迅速吞噬和杀灭细菌等病原体。

当身体发生急性感染，特别是细菌感染时，中性粒细胞的数量会显著增加，这是身体对抗感染的一种自我保护机制。

淋巴细胞则在特异性免疫反应中发挥关键作用，包括细胞免疫和体液免疫。

病毒感染时，淋巴细胞的数量可能会增多。

单核细胞具有一定的吞噬能力，还能分化为巨噬细胞，进一步参与免疫和炎症反应。

嗜酸性粒细胞在过敏反应和寄生虫感染时常常增多。

嗜碱性粒细胞参与过敏反应和炎症过程，其数量的变化相对较少。

进行白细胞检查时，通常会采集患者的血液样本，然后在显微镜下观察白细胞的数量、形态和分类比例。

现代医学中，也常使用全自动血细胞分析仪来快速、准确地检测白细胞的各项指标。

白细胞数量的异常变化具有重要的临床意义。

白细胞增多常见于感染、炎症、组织损伤、恶性肿瘤等情况。

例如，严重的肺炎、化脓性扁桃体炎等细菌感染会导致中性粒细胞增多；而传染性单核细胞增多症则会引起淋巴细胞增多。

白细胞减少则可能是由于病毒感染、药物副作用、免疫系统疾病、骨髓造血功能障碍等原因引起。

例如，长期使用某些抗生素、抗甲状腺药物可能导致白细胞减少；再生障碍性贫血等骨髓疾病也会使白细胞生成减少。

白细胞检验测定方法及分类计数

步骤：制备血涂片、染色、观察并计数
优缺点：操作简单、直观，但易受主观因素影响自动细胞计数仪法源自流式细胞仪法添加标题
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样本要求：需要采集静脉血或末梢血
原理：通过流式细胞仪对白细胞进行快速计数和分类
操作流程：将样本与溶血剂混合，破碎红细胞后，用流式细胞仪进行计数和分类
优势：快速、准确、自动化程度高，适用于大规模样本检测
白细胞分类计数在骨髓增生异常综合征等疾病的诊断中的作用
白细胞分类计数的临床意义及局限性
自身免疫性疾病的诊断
白细胞分类计数在自身免疫性疾病诊断中的应用
白细胞分类计数在自身免疫性疾病诊断中的局限性
自身免疫性疾病的诊断方法及白细胞分类计数的辅助作用
白细胞分类计数在自身免疫性疾病诊断中的前景与展望
过敏性疾病的诊断
自身免疫性疾病的诊断：白细胞分类计数可辅助诊断自身免疫性疾病，如系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎等
恶性肿瘤的诊断：白细胞分类计数可辅助诊断恶性肿瘤，如肺癌、肝癌等
白细胞检验测定的注意事项
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标本采集注意事项
标本处理注意事项
检验操作注意事项
操作规范：按照规定的操作流程进行操作，避免误差和偏差
质量控制：对每个样本进行质量控制，确保结果的可靠性
注意事项：样本采集、保存、运输等环节需规范操作
粒细胞分类：中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞
计数方法：显微镜计数、自动化仪器计数
淋巴细胞计数
淋巴细胞计数方法：显微镜计数法、流式细胞仪计数法
淋巴细胞计数意义：辅助诊断血液系统疾病、免疫系统疾病等
淋巴细胞计数正常值：0.8-4.0×10^9/L
淋巴细胞计数异常情况：增多见于病毒感染、淋巴瘤等；减少见于使用药物、自身免疫性疾病等

检验基础之白细胞检查

检验基础之白细胞检查白细胞检查【概要】三类五种·单核细胞（M）·淋巴细胞（L）白细胞计数【定义】指测定单位体积的血液中各种白细胞的总数。

【方法】显微镜计数法和血液分析仪计数法【原理】显微镜计数法用白细胞计数稀释液（多为稀乙酸溶液），将血液稀释一定倍数并破坏成熟红细胞后，滴入血细胞计数盘中，在显微镜下计数一定范围内白细胞数，经换算求得每升血液中各种白细胞显微镜计数法和血液分析仪计数法【操作方法】显微镜计数法→计算0.38ml稀释液＋20μl血→混匀（棕褐色）→充池→静置2～3min→计数（低倍镜，四角4个大方格）【质量控制】1.经验控制血涂片上WBC分布密度与WBC数量关系（1）与红细胞数比较：红细胞数/白细胞数约为500～1000：1。

（2）与血涂片白细胞分布密度一致性。

血涂片上WBC数/HP2～44～62.计数误差（1）技术误差：通过熟练操作、仪器校准而减小，甚至避免。

（2）固有误差：是计数室内每次血细胞分布不可能完全相同所致的误差。

若白细胞数太低（＜3×10 /L），可增加计数量（数8个大方格白细胞数）或减低稀释倍数，太高（＞15×10 /L），可增加稀释倍数。

（3）有核红细胞：正常情况下，外周血中不会出现有核红细胞。

若出现大量有核红细胞，其不能被白细胞稀释液破坏，计数时与白细胞一同被计数，使白细胞计数值假性增高。

校正公式为：校正后白细胞数/L＝校正前白细胞数×【参考值】成人：（4～10）×10 /L。

新生儿：（15～20）×10 /L。

6个月～2岁：（11～12）×10 /L。

儿童：（5～12）×10 /L【临床意义】由于中性粒细胞占白细胞总数的50%～70%，所以白细胞计数与中性粒细胞计数的临床意义基本上一致。

白细胞分类计数（DC）【检测原理】求得各种白细胞的比值（百分率）；【质量控制】1.影响分类计数准确性因素（1）细胞分布不均：体尾交界最佳，“城垛”式移动。

白细胞检验的基本方法

2.吞噬指数＝ 200个中性粒细胞吞噬细菌总数／200 个（中性粒细胞）；正常人为1.06±0.05
第一节
【临床评价】吞噬细胞分大吞噬细胞和小吞噬细胞两大类。前者包括组织中的巨噬细胞和血循环中的大单核细胞，后者主要是中性粒细胞。本试验可了解中性粒细胞的吞噬功能。如吞噬率和吞噬指数增高，反映中性粒细胞吞噬异物功能的增强，常见于细菌性感染。对疑有中性粒细胞吞噬功能低下者，有帮助确诊的价值。
第一节
【临床评价】
1.用于中性粒细胞吞噬杀菌功能异常的过筛鉴别和辅助诊断儿童慢性肉芽肿。葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症，髓过氧化物酶缺乏症和 Job综合征，硝基四氮唑蓝（NBT）还原试验阳性。 2.用于细菌感染的鉴别 3.器官移植后发热的鉴别 4. 无丙种球蛋白血症、镰状细胞病、恶性营养不良等 NBT还原阳性细胞比例可降低。 5 ．新生儿、小儿成骨不全症、心肌梗死急性期、淋巴肉瘤、NBT还原阳性细胞比例可增高。
第八章
白细胞检验的基本方法
主要内容
一、白细胞功能检验二、白细胞代谢及其产物检验三、白细胞动力学检验四、白细胞免疫标记及血清粒细胞抗体检测
白细胞分类
中性粒细胞
粒细胞
嗜酸性粒细胞
嗜碱性粒细胞 T细胞
白细胞
淋巴细胞
B细胞 NK细胞
单核-巨噬细胞
白细胞检验：运用细胞生物学、免疫学及核医学的相关技术对白细胞的功能、代谢及其动力学进行的检验。
第一节
【临床评价】粒细胞的吞噬功能仅限于成熟阶段，单核细胞幼稚型和成熟型都具有吞噬能力。急性单核细胞白血病M5a为弱阳性，M5b吞噬指数明显增高。急性粒细胞白血病（M2）、急性淋巴细胞白血病和急性早幼粒细胞白血病的原始及幼稚细胞多无吞噬能力，吞噬试验为阴性。急性粒 - 单核细胞白血病呈阳性反应，对鉴别有一定价值。慢性粒细胞白血病的成熟中性粒细胞吞噬能力明显减低。

白细胞检验的基本方法PPT精品课程课件讲义

三、血清溶菌酶活性试验
【原理】
溶菌酶能水解革兰氏阳性球菌的细胞壁乙酰氨基多糖成分，使细胞失去细胞壁而破裂。以对溶菌酶较敏感的微球菌悬液
为作用底物，根据微球菌的溶解程度来检测血清或尿中溶菌
酶的活性。【参考值】
血清（5－15）mg／L
尿（0－2）mg／L（比浊法）
【临床评价】
l . 血清溶菌酶含量增高可见于部分急性髓细胞白血病。
T细胞白血病的血象
【原理】血细胞中的酸性 α-醋酸酯酶（ANAE），在弱酸性（pH5.8）条件下能将基质液中的 α-醋酸萘酯水解，产生 α-萘酚。产生的 α-萘酯酚再与六偶氮
副品红偶联形成不溶性暗红色偶氮副品红萘酚沉淀，
定位于胞质内酶活性处，呈现单一的或散在的红色点块状或颗粒状。
【结果】酸性α-醋酸酯酶（ANAE）主要分布在T细胞和单核细胞内；粒细胞、B细胞、红系细胞、巨核细胞和血
【参考值】正常人骨髓细胞的活性为dGTP掺入l〓108个细胞的量为（0－0.09）mmol／L。
【临床评价】
1．急性淋巴细胞白血病（B-ALL除外）可检出较高的TdT 活性，慢性粒细胞性白血病急性变时，约有1／3的病例在原始细胞中能检出高活性的TdT。 2．恶性淋巴瘤中，原始淋巴细胞性淋巴瘤的淋巴结细胞中能检出高的TdT活性。 3．此酶检查在研究造血细胞的分化与白血病的关系、白血病细胞的起源、白血病的治疗药物选择上都有较重要的价值。
【结果】阳性反应为棕黄色颗粒，定位在细胞核上。 TdT
为早期 T淋巴细胞的标志，在正常情况下不成熟的胸腺淋巴细胞出现阳性反应，正常人外周血细胞中极少或无活性。
【临床评价】
95％以上急性淋巴细胞白血病和大约 30％慢性粒细胞白血病急淋变患者外用血细胞有明显的 TdT 活力，病情缓解后阳性率逐渐减弱。在急性淋巴细胞白血病中，由于细胞表面标志不同, TdT活性也有变化，T-ALL，早B前体-ALL细胞的阳性率很高，B-ALL细胞阴性。当外周血中此酶活性升高，就预示着血细胞的恶性变。因此 TdT 的测定对急性白血病的鉴别和治疗都有一定意义。

《白细胞检验》课件

《白细胞检验》PPT课件
# 白细胞检验 ## 概述 - 白细胞的定义和功能 - 为什么需要白细胞检验
白细胞的定义和功能
白细胞是血液中的一类细胞，是机体免疫系统的重要组成部分。它们起着保护机体免受外来病原体侵害的作用，并参与炎症和免疫反应的调节。
为什么需要白细胞检验
白细胞检验可以提供有关机体免疫状态和炎症反应的重要信息。它可以帮助医生诊断疾病、评估治疗效果，并监测特定治疗的安全性和有效性。
常见的白细胞检验
## 血常规检查 - 总白细胞计数 - 分类计数 ## 骨髓检查 ## 免疫组化检查
白细胞异常的原因及诊断
- 感染和炎症 - 白血病和淋巴瘤 - 验是诊断疾病和监测疾病治疗效果的重要手段 - 通过白细胞检验可以得到重要的诊断信息，提高疾病治疗和管理的准确性

白细胞计数标准操作程序

白细胞计数标准操作程序白细胞计数是一种常用的临床检验项目，用于评估人体免疫系统的功能和检测炎症程度等。

为确保白细胞计数结果的准确性和可比性，以下是一份标准操作程序，旨在指导临床实验室技术人员正确进行白细胞计数。

一、实验室准备工作1. 检查所需设备是否齐全，包括自动血细胞分析仪、试剂、试管、取样针等。

2. 检查仪器的校准状态和正常工作性能，确保其符合质量控制标准。

3. 准备所有必要的试剂和标准品，并检查其保存状态和有效期。

二、样本采集和处理1. 严格按照标准的采样方法，使用一次性针头和试管，避免交叉污染。

2. 从患者的外周静脉采集血液样本，尽量避免空气污染和血液凝块形成。

3. 采集足够的血液样本，以确保标本的质量和可靠性。

4. 在采集完毕后，轻轻倾斜试管，将血液和抗凝剂充分混合，并避免气泡的产生。

三、样本稀释与计数1. 将标本转移到类似于显微镜载玻片的稀释管中，注意防止污染和渗漏。

2. 使用稀释管中的稀释液与样本进行合适的稀释，以确保细胞浓度在仪器可测范围内。

3. 根据仪器的操作手册，将样本转移到自动血细胞分析仪中进行计数。

四、结果记录与报告1. 根据仪器的操作手册，等待血细胞分析结果的生成。

2. 将计数结果记录在标准的实验记录表格中，并确保记录的准确和完整。

3. 如果有特殊情况或者异常结果，应及时进行复核，并记录相关操作和结果。

4. 根据实验室要求，及时向医生或相关临床人员报告结果。

五、质控与质量保证1. 每天开始工作前，进行日常质控测试，确保仪器的准确性。

2. 在每次样本计数前后，进行质控品的测试，以验证计数过程中的准确性和稳定性。

3. 定期参加外部质量评估活动，并及时处理评估结果中的异常或错误。

4. 及时维护和保养设备，进行仪器的定期校准和维修。

六、安全注意事项1. 遵守实验室的安全规章制度，佩戴防护手套、口罩等个人防护用品。

2. 正确处理和处置生物危险废弃物，避免感染和交叉污染的发生。

3. 严格按照试剂使用说明和操作程序，避免误操作和化学品飞溅。

白细胞检验的基本方法

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【原理】以3H或14C标记的脱氧核苷三磷酸等的dXTP为基质，用低聚脱氧核苷（dA）等人工同聚物作为引物，由于酶反应与引物重合，使基质不溶于三氯醋酸，可用玻璃纤维盘将其吸附，从未被放射性核素标记的反应基质中分离出反应的生成物，计测放射活性。除去不加引物所测定的内源性反应所引起的活性之后，可测算酶的活性。【参考值】正常人骨髓细胞的活性为dGTP掺入l×108个细胞的量为（0－0.09）mmol／L。
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四、硝基四氮唑蓝还原试验【原理】硝基四氮唑蓝（NBT）是一种染料，其水溶性呈淡黄色。当被吞入或掺入中性白细胞后，有产生过氧化物酶的作用，可接受葡萄糖中间代谢产物葡萄糖 -6磷酸在已糖磷酸旁路代谢中NADPH氧化脱下的氢，而被还原成非水溶性的蓝黑色甲颗粒，呈点状或片状沉着在胞浆内有酶活性的部位，可在显微镜下观察并计数阳性细胞百分比。【参考值】正常成人的阳性细胞数在10％以下。若有 10％以上中性粒细胞能还原 NBT ，即为 NBT 还原试验阳性；低于10％则为阴性。
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三、血清溶菌酶活性试验【原理】溶菌酶能水解革兰氏阳性球菌的细胞壁乙酰氨基多糖成分，使细胞失去细胞壁而破裂。以对溶菌酶较敏感的微球菌悬液为作用底物，根据微球菌的溶解程度来检测血清或尿中溶菌酶的活性。【参考值】血清（5－15）mg／L 尿（0－2）mg／L（比浊法）
第四节
【临床评价】吞噬细胞分大吞噬细胞和吞噬细胞两大类。前者包括组织中的巨噬细胞和血循环中的大单核细胞，后者主要是中性粒细胞。本试验可了解中性粒细胞的吞噬功能。如吞噬率和吞噬指数增高，反映中性粒细胞吞噬异物功能的增强，常见于细菌性感染。对疑有中性粒细胞吞噬功能低下者，有帮助确诊的价值。

白细胞计数实验

计数池内如细胞分布严重不均，应重新充池。数RBC用高倍镜，计数WBC用低倍镜。
计数大方格内的压线细胞，遵循数上不数下、数左不数右的原则。
WBC过多时，可加大稀释倍数的方法; WBC过少时，可扩大计数区域，计数8个或9个大方格；也可采用减少稀释倍数的方法。
白细胞稀释液不能破坏有核红细胞，因此有核红细胞可使白细胞计数结果偏高。
考核评价【质量控制】
用显微镜计数法计数白细胞的质量控制，除严格遵守操作规程，掌握操作计数外，至今尚无完善精确的质控方法，目前应用的方法有：【1】经验质控：
将白细胞计数结果与血涂片中的分布情况相对照，看两者是否相符，不符者，说明计数结果可能存在偏差，应予复查。
【1】经验质控：白细胞总数与白细胞分布的关系
白细胞计数实验
目理
用白细胞稀释液将血液稀释一定的倍数，将稀释液充入血细胞计数板，在显微镜下计数一定体积内的白细胞数，经换算求出每升血液中的白细胞数量。
器材：一次性微量吸管、乳胶吸头、试管、棉球、 2ml移液管，显微镜、改良Neubauer计数板
6. 计数：在低倍镜下计数四角4个大方格内的WBC总数。
7. 计算：白细胞 = N/4×10 ×20 ×106/L = N/20 ×109/L
注意事项
因第l滴血混有组织液，应擦去。不能过度挤压，以免组织液混入引起血液凝固或造成计数结果不准确。
保证计数板和盖玻片清洁。如充池过少、过多或有气泡，拭净计数板及盖玻片后重新操作。
四大格所见白细胞数平均值
评价: 白细胞≤ 4×109/L者，白细胞在（4.1~14.9）×109/L 白细胞≥15 ×109/L者超过上述标准者为不合格
RCS＜30% RCS＜20% RCS＜15%

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26、要使整个人生都过得舒适、愉快，这是不可能的，因为人类必须具备一种能应付逆境的态度。——卢梭
▪பைடு நூலகம்
27、只有把抱怨环境的心情，化为上进的力量，才是成功的保证。——罗曼·罗兰
▪
28、知之者不如好之者，好之者不如乐之者。——孔子
▪
29、勇猛、大胆和坚定的决心能够抵得上武器的精良。——达·芬奇
▪
30、意志是一个强壮的盲人，倚靠在明眼的跛子肩上。——叔本华
白细胞检验的基本方法
1、舟遥遥以轻飏，风飘飘而吹衣。 2、秋菊有佳色，裛露掇其英。 3、日月掷人去，有志不获骋。 4、未言心相醉，不再接杯酒。 5、黄发垂髫，并怡然自乐。
▪

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【临床评价】趋化性是粒细胞到达炎症局部所必需的。本试验是观察粒细胞向感染灶运动能力的一项重要检测方法。趋化功能异常可见于Wiskot-Aldrich综合征、幼年型牙周炎、糖尿病、烧伤、新生儿、慢性皮肤粘膜白色念珠菌病、高IgE综合征、先天性鱼鳞病、膜糖蛋白（相对分子质量 11000）缺陷症、肌动蛋白功能不全症、Chediak-Hisashi 综合征。
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【临床评价】 1．急性淋巴细胞白血病（B-ALL除外）可检出较高的 TdT活性，慢性粒细胞性白血病急性变时，约有1／3的病例在原始细胞中能检出高活性的TdT。 2．恶性淋巴瘤中，原始淋巴细胞性淋巴瘤的淋巴结细胞中能检出高的TdT活性。 3．此酶检查在研究造血细胞的分化与白血病的关系、白血病细胞的起源、白血病的治疗药物选择上都有较重要的价值。
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第四节
【临床评价】 l . 血清溶菌酶含量增高可见于部分急性髓细胞白血病。①急性单核细胞白血病 ②急性粒-单核细胞白血病 ③急性粒细胞白血病 2．血清溶菌酶含量减低急性淋巴细胞白血病多数减低，少数正常。慢性粒细胞白血病血清溶菌酶含量正常，但急变时下降。
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第四节
【原理】以3H或14C标记的脱氧核苷三磷酸等的dXTP为基质，用低聚脱氧核苷（dA）等人工同聚物作为引物，由于酶反应与引物重合，使基质不溶于三氯醋酸，可用玻璃纤维盘将其吸附，从未被放射性核素标记的反应基质中分离出反应的生成物，计测放射活性。除去不加引物所测定的内源性反应所引起的活性之后，可测算酶的活性。【参考值】正常人骨髓细胞的活性为dGTP掺入l〓108个细胞的量为（0－0.09）mmol／L。
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T细胞白血病的血象
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【原理】血细胞中的酸性 α- 醋酸酯酶（ANAE），在弱酸性（pH5.8）条件下能将基质液中的 α-醋酸萘酯水解，产生 α-萘酚。产生的 α-萘酯酚再与六偶氮副品红偶联形成不溶性暗红色偶氮副品红萘酚沉淀，定位于胞质内酶活性处，呈现单一的或散在的红色点块状或颗粒状。
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酸性磷酸酶染色
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【临床评价】 l.有助于区分T细胞和B细胞ANAE染色在T细胞胞质中呈现点状颗粒或大块局限阳性反应中细胞大多数为阴性反应，偶见稀疏弥散细小颗粒。 2.鉴别急性白血病类型急性T细胞白血病细胞为点状或块状阳性，局限分布；急性粒细胞白血病细胞ANAE染色大部分呈阴性或弱阳性反应，颗粒增多的早幼粒白血病细胞阳性反应较强，为弥散性分布；急单呈强阳性反应，胞质为均匀一致的弥散样淡红色或深红色，无点状颗粒。
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【原理】用P-硝基酚磷酸盐作为细胞碱性磷酸酶总活性检测的基质，在反应中生成P-硝基酚，测量400nm时的吸光密度，借以检测出细胞A-Pase的总活性。此外，可通过CASP作为基质来测定N-碱性磷酸酶的活性。通过酶反应，生成半胱胺，这是用二硝基苯臵换5-硫-硝基酚酸；检测412nm的吸光密度，借以检测N-APase的总活性。在基质液中加人用N-丁醇：水（1：3）的混合液提取粗酶液，室温下放臵60分钟，记录酶反应，求出酶反应的速度。一般情况下，N-APase的P-NPP与CASP的水解速度之比（VP-NPP／VCASP）在1.1－2. 0的范围内，平均为 1．8。因此，N-APase的活性可用 VP-NPP-1.8VCASP求出，再从VP-NPP计算 N-APase的百分率。
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M5骨髓象的墨汁吞噬试验
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二、白细胞吞噬功能试验【原理】分离白细胞悬液，将待测的吞噬细胞与某种可被吞噬而又易于查见计数的颗粒物质如葡萄球菌混合，温育一定时间后，细菌可被中性粒细胞吞噬，可在镜下观察中性粒细胞吞噬细菌的情况，根据吞噬率和吞噬指数即可反映吞噬细胞的吞噬功能。
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五、白细胞趋化性试验
【原理】在微孔滤膜的一侧放入粒细胞，另一侧放入趋化因子（细菌毒素、补体 C3a、淋巴因子等），检测离体粒细胞潜过滤膜到达趋化因子这一侧定向移动的能力。【参考值】趋化指数 3 .0－3. 5
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第二节白细胞代谢及其产物检验
一、末端脱氧核苷酰转移酶检测（一）酶标免疫细胞化学显示法（二）同位素检测法二、N-碱性磷酸酶检测三、酸性α-醋酸酯酶检测
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【原理】末端脱氧核苷酰转移酶（TdT）是一种DNA聚合酶，它不需要模板的指导，就可以催化细胞的脱氧核苷酸，使其转移到低聚核苷酸或多聚核苷酸的3’-OH端，合成单链DNA。兔抗牛TdT抗体能和人细胞的TdT产生交叉反应，可采用免疫荧光技术或酶标免疫细胞化学技术，用辣根过氧化物酶-抗酶复合物在细胞涂片上定位，显示细胞内的TdT。【结果】阳性反应为棕黄色颗粒，定位在细胞核上。 TdT为早期 T淋巴细胞的标志，在正常情况下不成熟的胸腺淋巴细胞出现阳性反应，正常人外周血细胞中极少或无活性。
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【临床评价】粒细胞的吞噬功能仅限于成熟阶段，单核细胞幼稚型和成熟型都具有吞噬能力。急性单核细胞白血病M5a为弱阳性，M5b吞噬指数明显增高。急性粒细胞白血病（M2 ）、急性淋巴细胞白血病和急性早幼粒细胞白血病的原始及幼稚细胞多无吞噬能力，吞噬试验为阴性。急性粒-单核细胞白血病呈阳性反应，对鉴别有一定价值。慢性粒细胞白血病的成熟中性粒细胞吞噬能力明显减低。
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四、硝基四氮唑蓝还原试验【原理】硝基四氮唑蓝（NBT）是一种染料，其水溶性呈淡黄色。当被吞入或掺入中性白细胞后，有产生过氧化物酶的作用，可接受葡萄糖中间代谢产物葡萄糖-6磷酸在已糖磷酸旁路代谢中NADPH氧化脱下的氢，而被还原成非水溶性的蓝黑色甲颗粒，呈点状或片状沉着在胞浆内有酶活性的部位，可在显微镜下观察并计数阳性细胞百分比。【参考值】正常成人的阳性细胞数在10％以下。若有 10％以上中性粒细胞能还原NBT，即为NBT还原试验阳性；低于10％则为阴性。
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【临床评价】 1.用于中性粒细胞吞噬杀菌功能异常的过筛鉴别和辅助诊断儿童慢性肉芽肿，葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症，髓过氧化物酶缺乏症和 Job综合征，NBT还原试验阳性。 2.用于细菌感染的鉴别 3.器官移植后发热的鉴别 4.无丙种球蛋白血症、镰状细胞病、恶性营养不良等 NBT还原阳性细胞比例可降低。 5．新生儿、小儿成骨不全症、心肌梗死急性期、淋巴肉瘤、NBT还原阳性细胞比例可增高。
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第三节白细胞动力学检验
一、氚标记脱氧胸苷测定二、泼尼松刺激试验三、肾上腺素激发试验四、二异丙酯氟磷酸盐标记测定五、流式细胞仪检测DNA合成及含量六、粒细胞抗体检测
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【参考值】吞噬百分率（62.77〒1.38）％吞噬指数1.058〒0.049 【临床评价】 l.吞噬细胞吞噬功能低下主要见于各种恶性肿瘤，吞噬率常低于45％，手术切除好转后可以上升，故可作为肿瘤病人化疗、放疗、免疫治疗疗效的参考指标。 2.一些免疫功能低下的病人，吞噬率降低，可作为预测感染发生的概率。并观测疗效、判断预后的指标。
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第十章白细胞检验的基本方法
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第一节白细胞功能检验
一、墨汁吞噬试验二、白细胞吞噬功能试验三、血清溶菌酶活性试验四、硝基四氮唑蓝还原试验五、白细胞趋化性试验六、吞噬细胞吞噬功能试验
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一、墨汁吞噬试验【原理】血液中中性粒细胞及单核细胞对细菌、异物等具有吞噬作用。在一定量的肝素抗凝血中，加人一定量的墨汁，经37℃温育4小时，涂片染色镜下观察吞噬细胞对墨汁的吞噬情况，并计算吞噬率及吞噬指数。【参考值】成熟中性粒细胞吞噬率74％〒15％，吞噬指数 126〒60；成熟单核细胞吞噬率95％〒15％，吞噬指数313 〒86。

第十章 白细胞检验的基本方法

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