流感病毒分离鉴定-精选文档

0.5%鸡红细胞 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2
0.2
0.2
摇匀置室温60～90分钟
结果
++++ ++++ ++++ +++ ++ ++
+－
－
－
(6)结果观察 观察时要轻拿、勿摇，首先观察对照管应无凝集，然 后再观察试验管，各管出现的凝集程度以“ ++++”、
“+++”、“++”、“+”、“—”表示，判断标准如下： “++++”：全部红细胞凝集，凝集的红细胞铺满管底，
边缘不整齐。
“+++：”大部分红细胞凝集，在管底铺成薄膜状，但尚有少数红细胞不
凝，在管底中心形成小红点。
“++”：约有半数红细胞凝集，在管底铺成薄膜，面积较小，不
凝集的பைடு நூலகம்细胞在管底中心聚成小圆点。
“+”：只有少数红细胞凝集，不凝集的红细胞在管底中心聚成小
圆点，凝集的红细胞在小圆点的周围。
“—”：不凝集，红细胞沉于管底，呈一边缘整齐的致密圆点。
? 实验材料 ? (1)接种流感病毒的鸡胚。 ? (2)质量分数为0．5％的鸡红细胞悬液。 ? (3)流感病毒型与亚型免疫血清。 ? (4)碘酒，酒精消毒棉球。 ? (5)灭菌的镊子、剪刀。 ? (6)无菌小试管，毛细滴管，吸管。 ? (7)生理盐水。 ? (8)试管、试管架。
? 实验方法： ? 1、血细胞凝集实验 (1)收获尿囊液：鸡胚孵育 3d后,放4度冰箱过夜 ,次日
0.2
弃0.2
病毒稀释度 1:20 1:40 1:80 1:160 1:320 1:640 1:1280 1:2560 1:5120 对
照
0.5%鸡红细胞 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2
0.2
0.2
摇匀置室温60～90分钟
结果
++++ ++++ ++++ +++ ++ ++
） “和而不同”，多元发展。近年来
，中医 药在防 治非典 、禽流 感和艾 滋病方 面发挥 的独特 作用也 证实了 二者的 有机结 合，具 有肯定 的临床 疗效。
编辑本段东西方医学交融（
df 高血压 958 心脏 病 983u6 糖尿 病87fr ）
不管是中医学还是西医学，从二
者现有 的思维 方式的 发展趋 势来看 ，均是 走向现 代系统 论思维 ，中医 药学理 论与现 代科学 体系（ 45 传染 病q566 丙肝964jo 乙肝 28jgsx 甲肝 gh ）之间 具有系 统同型 性，属 于本质 相同而 描述表 达方式 不同的 两种科 学形式 。可望 在现代 系统论 思维上 实现交
慢性胃炎的命名很不统一。依据 慢性胃炎大体可分为三种类型：
不同的 诊断方 慢性肥 厚性胃
法而有 慢性浅 炎、慢 性浅表
表性胃 炎、慢 性胃炎 以及慢
性糜烂 性胃炎 性萎缩 性胃炎
、慢性 萎缩性 。慢性 肥厚性
胃炎、 慢性胆 胃炎在 临床上
汁返流 性胃炎 较为少 见，一
、慢性 疣性胃 般也不 会发生
炎、药 物性胃 癌变。 慢性浅
2、血细胞凝集抑制试验
按表加入材料和试剂
试管
1 待测 2 待测 3 血清对照 4 抗原对照 5 红细胞对照
生理盐水 －
－
0.2
1：5血清 0.2 0.2
0.2
4u病毒液 0.2 0.2
－
0.5％鸡红 0.2 0.2
0.2
细胞
0.2
0.4
－
－
0.2
－
0.2
0.2
结果观察 先观察3支对照管，如抗原对照管出现完全凝集，血清对照和红 细胞对照不发生凝集，再观察试验管。 血凝抑制效价：完全抑制红细胞凝集的血清最高稀释度，即该 血清的抑制效价。 鉴定病毒时，效价应与原免疫血清效价相等或相似，血凝抑制 试验亦可用已知病毒抗原，测定病人血清抗体以进行血清学诊 断，恢复期比初期抗体效价增高4倍以上才有诊断意义。
+－
－
－
→ → → → → → → →→
㈠ ㈡ ㈢ ㈣ ㈤㈥ ㈦ ㈧ ㈨㈩
试管号 10
12 3 4 5
67
8
9
生理盐水
0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2
0.2
0.2
病毒液 (1:10) 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2
0.2
弃0.2
病毒稀释度 1:20 1:40 1:80 1:160 1:320 1:640 1:1280 1:2560 1:5120 对照
? 目的：熟悉病毒血凝、血凝抑制试验的方法及其应用。
?原理：流感病毒颗粒表面有血凝素 ,具有使鸡、豚鼠 等血细胞凝集的能力。把一定浓度的鸡红细胞加到待 检的鸡胚尿囊液或羊水中，如出现血细胞凝集现象， 即表示有病毒存在；如血凝阳性，则可进一步用血凝 抑制试验进行病毒鉴定，流感病毒的血凝性，可被免 疫血清中的特异性抗体所抑制，使其失去凝集作用， 借此可用已知抗体鉴定未知病毒及病毒的型、亚型。
(5)稀释完毕后加人体积分数为 0．5％的压积鸡红 细胞悬液，每管 0．2mL,室温放置 30~60mn 。
流感病毒血凝试验
试管号 10
12 3 4 5
67
8
9
生理盐水
0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2
0.2
0.2
病毒液 (1:10) 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2
取出鸡胚,消毒气室端卵壳 ,用小镊子在无大血管处 撕破卵膜,以无菌毛细管吸取尿囊液 ,放入无菌试管 中。
(2) 取尿囊液 0．1mL, 作1：10稀释。
(3)取10支小试管，按给各管加入生理盐水 0.2mL。
(4)取1：10稀释的尿囊液 0．2mL，加人第 1个试管 中，混匀后，再吸出 0．2mL加入第2个试管中； 混匀后，从第 2个试管吸出 0．2mL加入第3个试 管……依次作倍比稀释至第九管，混匀后自第 9 个试管中取出 0．2mL弃掉。这样各管液体量均 为0．2mL，从第1-9个试管的尿囊液稀释度为 1:20 ，1:40 ， …，1:5120 ，第 10个试管为生理 盐水对照管。
凝集效价：能使红细胞呈“++”凝集的病毒最高稀释
度为凝集效价，表示含有一个单位血凝抗原。 如表，第6个试管为“++”，且病毒稀释度最高，则该病 毒悬液效价为1:640，即该病毒悬液稀释到1：640时，每 0．2mL中含有一个血凝单位，配制4个血凝单位的病毒悬 液时，病毒液应稀释成(1：640)X4，即1：160。