植物生理指标
植物生理生化指标测定
植物生理生化指标测定植物生理生化指标测定是研究植物生长发育和适应环境的重要手段之一、通过测定植物的生理生化指标，可以了解植物的代谢活动、光合作用强度、水分状况、营养状况等，从而为植物生长调控、抗逆性研究提供依据。
下面将从光合作用测定、水分状况测定和营养状况测定三个方面对植物生理生化指标测定进行详细介绍。
光合作用是植物生长发育的重要过程之一，也是植物蓄积养分和能量的主要途径。
常用的光合作用测定指标有净光合速率、光饱和点、光补偿点和光抑制。
净光合速率是指单位时间内单位叶面积净光合产物的量，可以通过测定二氧化碳吸收量和氧气释放量来计算。
光饱和点是指植物的净光合速率达到最大值时的光强度，可以通过测定不同光强下的净光合速率来得出。
光补偿点是指净光合速率和呼吸速率相等的光强度，可以通过测定不同光强下的净光合速率和呼吸速率来确定。
光抑制是指过高或过低的光强度对植物光合作用的影响，可以通过测定光强对净光合速率的影响来评价。
水分状况是植物生理生化指标测定的重要方面之一，也是植物生长发育和适应环境的关键因素之一、常用的水分状况测定指标有相对含水量、蒸腾速率和水分利用效率。
相对含水量是指植物组织中的相对含水量与干重的比值，可以通过称量植物组织的湿重和干重来计算。
蒸腾速率是指单位时间内单位叶面积水分蒸腾的量，可以通过测定植物的蒸腾量和叶面积来计算。
水分利用效率是指植物单位干物质产量所需要的水分量，可以通过测定植物的干物质产量和水分消耗量来计算。
营养状况是植物生理生化指标测定的另一个重要方面，也是植物生长发育和代谢活动的基础。
常用的营养状况测定指标有叶绿素含量、叶绿素荧光参数和土壤养分含量。
叶绿素含量是评价植物叶绿素合成和叶绿素降解的指标之一，可以通过植物叶片中叶绿素的提取和测定来得出。
叶绿素荧光参数是评价光能利用效率和光能转化效率的重要指标之一，可以通过叶绿素荧光仪来测定。
土壤养分含量是评价土壤中不同营养元素含量的指标之一，可以通过土壤样品的提取和测定来得出。
植物生理生化指标测定（精）
植物生理生化指标测定（精）小黑豆相关生理指标测定1. 表型变化:鲜重、株高、主根长和叶面积鲜重:取处理好的植株,擦干根和叶表面水分,测量整株植物的重量,每个测 6个重复。
株高:取处理好的植株,测量从根和茎分隔处到植株最高点的高度,记录,每个测6个重复。
主根长:取处理好的植株,测量从根和茎分隔处到主根最远点长度,记录,每个测6个重复。
叶面积:取处理好的植株,选择第二节段的叶片,测量叶面积,叶面积测量方法是测每个叶片最宽处长度作为叶的长, 测叶片最窄处长度作为叶的宽, 叶片长和宽的乘积即为叶表面积。
每个测 6个重复。
2. 总蛋白、可溶性糖、丙二醛(MDA 和 H2O2含量测定样品处理:取 0.5g 样品(叶片要去除叶脉、根要先用清水清洗干净 ,速在液氮中冻存,在遇冷的研钵中加液氮研磨,然后加入1.5ml 的Tris-HCl (pH7.4 抽提, 将抽提液转移到 2ml 的 EP 管中, 于4℃, 12000rpm 离心15min , 取上清, 保存在-20℃下,上清液可用于总蛋白、丙二醛(MDA 、可溶性糖和 H2O2含量测定。
总蛋白测定(Bradford 法:样品反应体系(800ul H2O+200ul Bradford+5ul样品, 空白对照为(800ul H2O+200ul Bradford 。
测定后带入标准曲线 Y=32.549X-0.224(Y代表蛋白含量, X 代表 OD595 ,计算得出蛋白含量。
可溶性糖测定:样品反应体系(1ml 蒽酮+180ul ddH2O+20ul样品提取液 ; 空白对照 (1ml 蒽酮 +180ul ddH2O , 测定 OD625后带入标准曲线 :Y=0.0345X+0.0204(Y代表 OD625, X 代表可溶性糖含量(ug蒽酮配方:称取100mg 蒽酮溶于100ml 稀硫酸(76ml 浓硫酸+30mlH2O . 注意:浓硫酸加入水中时,一点一点递加,小心溅出受伤。
植物生理指标测定
植物生理指标测定1.叶绿素含量测定叶绿素是植物进行光合作用的关键分子，它的含量可以反映植物的光合能力和叶片的健康状况。
叶绿素含量的测定可以通过光谱分析或色度法进行。
其中，光谱分析通过测量叶片吸收和反射的可见光波段来计算叶绿素含量；色度法则是通过提取叶片中的叶绿素，然后用乙醇或乙酸乙酯进行溶解，最后通过比色法来测定其含量。
2.蒸腾速率测定蒸腾是植物通过叶片气孔释放水分的过程，蒸腾速率可以反映植物水分的利用和调节能力。
蒸腾速率的测定方法有多种，常用的有质量法和热法。
质量法是通过称量植物在不同时间段内的重量变化来计算蒸腾速率；热法则是利用蒸腾过程中产生的热量来测定蒸腾速率。
3.气孔导度测定气孔是植物调节气体交换的关键结构，气孔导度可以反映植物对环境中各种因素的响应和适应能力。
气孔导度的测定可以通过气体交换技术进行，常用的方法有蒸腾流速法和扩散阻力法。
蒸腾流速法通过测定气孔腔中水蒸气和二氧化碳的浓度来计算气孔导度；扩散阻力法则是通过测定气孔腔中水蒸气的扩散阻力来计算气孔导度。
4.抗氧化酶活性测定氧化应激是植物面临的常见环境胁迫，而抗氧化酶是植物对抗氧化应激的主要防御系统。
抗氧化酶活性的测定可以通过比色法、荧光法和电化学法等进行。
比色法是基于酶催化反应产生的物质的颜色变化来测定酶活性；荧光法是通过检测酶催化反应产生的荧光信号来测定酶活性；电化学法则是通过测量酶催化反应中释放或吸收的电荷来测定酶活性。
这些测定方法可以用于研究植物对不同环境因子的响应和适应能力，也可以用于评估植物的生长和发育状态。
通过测定植物生理指标，研究人员可以更好地了解植物的生理机制和适应策略，为植物的种植和管理提供科学依据。
植物生理指标测定方法
植物生理指标测定方法植物生理指标是指用来衡量植物生理状况的具体参数或指标，在植物生理研究中起到了非常重要的作用。
植物生理指标测定方法主要包括以下几个方面：光合作用指标、呼吸作用指标、蒸腾作用指标、叶绿素指标、产量指标和抗逆性指标等。
1.光合作用指标的测定方法：(1)净光合速率的测定方法：通过光合速率仪测定植物叶片在光照条件下的净光合速率；(2)光饱和点和CO2抗饱和点的测定方法：通过对光合速率与光照强度或CO2浓度的关系进行测定，确定光饱和点和CO2抗饱和点；(3)光合色素含量的测定方法：通过分光光度计或高效液相色谱法测定叶片中的叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素等光合色素的含量；(4)光合机构有效光能利用率的测定方法：通过光合色素荧光分析仪测定叶片的光能利用效率。
2.呼吸作用指标的测定方法：(1)总呼吸速率的测定方法：通过呼吸速率仪或气体分析仪测定植物组织在不同温度条件下的总呼吸速率；(2)细胞内呼吸速率的测定方法：通过氧和二氧化碳分压差法或氧电极法测定细胞内的呼吸速率。
3.蒸腾作用指标的测定方法：(1)蒸腾速率的测定方法：通过蒸腾速率仪测定植物叶片在不同光照和湿度条件下的蒸腾速率；(2)水分利用效率的测定方法：通过测量蒸腾速率和光合速率的比值来反映植物对水分的利用效率。
4.叶绿素指标的测定方法：(1)叶绿素含量的测定方法：通过叶绿素荧光分析仪或高效液相色谱法测定叶片中叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素的含量；(2)叶绿素荧光动力学特性的测定方法：通过荧光指数、叶绿素荧光参数和叶绿素荧光成像等技术来评估叶绿素在光抑制和光保护状态下的变化。
5.产量指标的测定方法：(1)单株产量的测定方法：通过对植株生物量、籽粒数或实际产量的测定来计算出单株产量；(2)单穗产量的测定方法：通过对穗长、穗粒数和粒重的测定来计算出单穗产量；(3)单粒产量的测定方法：通过对单穗粒数和粒重的测定来计算出单粒产量。
6.抗逆性指标的测定方法：(1)抗氧化酶活性的测定方法：通过测定植物组织中抗氧化酶活性，如超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和抗坏血酸过氧化物酶等的活性来反映植物的抗氧化能力；(2)渗透调节物质含量的测定方法：通过测定植物组织中渗透调节物质（如脯氨酸、脯氨酸激酶等）的含量来评估植物的胁迫适应能力；(3)膜脂过氧化程度的测定方法：通过测定植物组织中膜脂过氧化程度的指标，如丙二醛和过氧化氢含量来评估植物膜的稳定性。
植物抗旱生理指标测定原理及方法
植物抗旱生理指标测定原理及方法
（1）水分主要能量指标，包括蒸腾量、蒸发力、蒸发强度、蒸腾强
度以及气孔导度等；
（2）水分利用指标，包括水分利用效率、蒸散发相对于叶片重量的
比率、水分充分度指数、叶片含水量和土壤水分饱和度等；
（3）抗旱抗性指标，包括水分拦截能力、水位调节能力、耐旱抗性
降低等；
（4）水分吸收调控指标，包括根冠界面水分拉力、根须分布调控指数、根须结构调控指数、根系活动调控指数等；
（5）水分平衡指标，包括水分主客场平衡指数、水分平衡偏差指数、植株水分贮存和调控指数等；
（6）干旱耐受指标，包括强光耐受指数、植株水分平衡能力、水分
适应状态能力、旱作物叶片蒸发潜力、水分适应性耐受等；
（7）组织构型指标。
植物抗病 生理指标
植物抗病生理指标植物抗病生理指标植物作为生物体，同样会受到各种病原体的侵袭，从而引发疾病。
为了提高植物的抵抗力，科学家们研究出了一些植物抗病的生理指标。
这些指标可以帮助我们了解植物的抗病机制，从而为植物病害的防治提供理论依据。
本文将介绍几个常见的植物抗病生理指标。
1. 植物抗氧化能力植物在遭受病原体侵袭时，会产生一系列的氧化反应。
这些反应会导致细胞内氧自由基的积累，进而破坏细胞结构和功能。
因此，植物能否抵御氧化反应的发生，成为评估其抗病能力的重要指标之一。
一般来说，抗病能力强的植物具有较高的抗氧化酶活性，如超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和抗坏血酸过氧化物酶等。
2. 植物抗病物质的积累植物在受到病原体侵袭时，会产生一些抗病物质，如抗菌肽、抗氧化物质和次生代谢产物等。
这些物质能够抑制病原体的生长和繁殖，从而起到保护植物的作用。
因此，抗病物质的积累情况可以作为评估植物抗病能力的指标之一。
一般来说，抗病能力强的植物在受到病原体侵袭时，会产生更多的抗病物质。
3. 植物免疫系统的激活程度植物免疫系统是植物对抗病原体的重要防线。
免疫系统的激活程度可以通过测量植物体内一些重要的免疫相关基因的表达水平来评估。
一般来说，抗病能力强的植物在受到病原体侵袭时，免疫相关基因的表达水平会显著增加。
4. 植物细胞壁的厚度和强度植物细胞壁是植物细胞外层的一层坚硬的保护壳。
细胞壁的厚度和强度可以影响病原体的侵入和扩散。
一般来说，细胞壁厚度和强度较高的植物具有较强的抗病能力，能够有效阻止病原体的入侵。
5. 植物内源激素的水平变化植物内源激素在植物的抗病过程中起到重要的调节作用。
不同的激素在不同的抗病阶段发挥不同的作用。
因此，通过测量植物体内一些重要内源激素的水平变化，可以评估植物的抗病能力。
一般来说，抗病能力强的植物在受到病原体侵袭时，会出现内源激素水平的变化。
总结起来，植物抗病生理指标主要包括植物的抗氧化能力、抗病物质的积累、免疫系统的激活程度、细胞壁的厚度和强度以及内源激素的水平变化等。
植物生理生态指标对氮、干旱、盐处理的响应
植物生理生态指标对氮、干旱、盐处理的响应
植物生理生态指标是用来评价植物生长状况和适应环境的指标，包括叶绿素含量、相对含水量、气孔导度、净光合速率、总非结构
性碳水化合物含量、根系生物量等多个指标。
下面是植物生理生态
指标对氮、干旱、盐处理的响应：
1. 氮
氮是植物生长所必需的元素之一，但过量的氮会对植物产生负
面影响。
在氮限制的条件下，植物的叶绿素含量和净光合速率都会
下降。
而过量的氮则会增加净光合速率，提高植物的生长速度，但
会影响植物的品质和营养价值。
2. 干旱
干旱是植物面临的一种重要的压力因素。
在干旱条件下，植物
的相对含水量下降，气孔导度减小，净光合速率和叶绿素含量也会
降低。
同时，在干旱条件下，植物会积累更多的总非结构性碳水化
合物，从而提高植物对干旱的耐受性。
3. 盐
盐胁迫是植物面临的另一种常见的压力因素。
在高盐浓度下，
植物的相对含水量下降，气孔导度减小，净光合速率和叶绿素含量
也会降低。
与干旱类似，植物在盐胁迫下也会积累更多的总非结构
性碳水化合物，从而提高植物对盐胁迫的耐受性。
此外，在高盐浓
度下，植物的根系生物量会增加，以便更好地吸收水分和养分。
植物生理生化指标的测定方法与意义解读
植物生理生化指标的测定方法与意义解读植物生理生化指标的测定方法与意义解读对于研究植物生长、适应环境以及疾病防治等领域至关重要。
本文将介绍几种常用的植物生理生化指标的测定方法，并解读其意义。
一、叶绿素含量的测定方法与意义解读叶绿素是植物光合作用的关键物质，反映了植物的光合能力和光合效率。
常用的测定叶绿素含量的方法有多种，如色素提取法、光度法和荧光法等。
其中，色素提取法是最常用的方法之一。
该方法通过乙醇提取叶片中的叶绿素，然后用紫外-可见光谱仪分析提取液的吸光度，从而计算出叶绿素含量。
叶绿素含量的测定对植物的研究具有重要意义。
首先，叶绿素含量可以直接反映植物的光合能力和光合效率。
一般来说，叶绿素含量越高，植物的光合作用效率越高，并且可以更好地利用阳光进行光合作用。
其次，叶绿素含量也可以作为植物受到生态环境和生理状态变化的指示器。
例如，在氮素缺乏的条件下，植物体内的叶绿素含量会下降，表明植物养分供应不足。
因此，测定叶绿素含量有助于了解植物在不同环境和条件下的光合适应能力和生长状态。
二、抗氧化酶活性的测定方法与意义解读抗氧化酶是植物体内起重要保护作用的一类酶，包括超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）和抗坏血酸过氧化物酶（APX）等。
这些酶能够清除植物体内产生的有害氧自由基，保护细胞免受氧化损伤。
常用的抗氧化酶活性测定方法有多种，如显色法、发光法和酶活测定法等。
抗氧化酶活性的测定在研究植物的环境适应能力和应对氧化胁迫方面具有重要意义。
首先，抗氧化酶活性可以反映植物受到氧化胁迫的程度。
当植物受到氧化胁迫时，抗氧化酶活性会显著增加，以应对有害氧自由基的累积。
其次，抗氧化酶活性还可以用来评估植物的环境适应能力。
例如，在干旱或高温等胁迫条件下，植物体内的抗氧化酶活性通常会增加，以维持细胞内的氧化-还原平衡。
三、渗透调节物质含量的测定方法与意义解读渗透调节物质是植物在干旱、盐碱等逆境环境下维持细胞渗透平衡和稳态的重要物质。
植物生理指标测定方法
植物生理指标测定方法1、叶片持水率择植株上部枝条健康完整的定型叶，每种依据叶片大小摘取叶片，混均匀后分成三份即时称量鲜重，后置入40℃恒温烘箱中，烘40 min，取出称重，再置入85℃烘箱中恒温烘至恒重。
离体叶片，在单位时间内，水分损失的大小，反映叶片持水能力的高低，水分损失越小，其叶片保水能力就越高，就越耐干旱。
故失水率的大小，表示叶片持水能力的高低，失水率越小，其持水能力就越高。
计算公式如下：失水率=[（鲜重－40℃烘40 min重）÷（鲜重－85℃烘至恒重）]×100%。
2、植物暂时萎蔫率测定观测植株叶片萎蔫下垂、翌日晨不能恢复正常者，即取盆中土壤测定。
其方法为，将植株连土团倒出，用小刮铲，小心而迅速从根的周围取土，剔除粗粒沙石及残根等杂物，装入已称重的备用铝盒，及时称重，带回室内置于105℃烘箱内烘至恒重。
取样后，及时复盆并淋透水，置于棚内继续养护，观察能否生还，如能生还，数据可用，如果植株死亡，则需重做。
每种植物每次测试一盆，（做3次重复）按下式计算暂时萎蔫率：暂时萎蔫率=[（土壤湿重－土壤干重）÷土壤干重]×100%。
3、叶片相对含水量取各植株相同部位叶片，首先测定植物叶片的鲜重M1，后将叶片浸入蒸馏水中5-6 h，使叶片吸水达到饱和状态，取出擦干叶片至表面无水分残留，再称重，得植物叶片的饱和鲜重M2，最后将植物叶片放进烘箱，105℃杀青半小时，再于85℃环境下烘至恒重，得叶片干重M3。
叶片相对含水量按公式计算。
式中： M1：为叶片的鲜重，M2为叶片的饱和鲜重，M3为叶片干重4、相对电导率用DDS—6700型电导率仪测定，取各植株相同部位叶片，用蒸馏水拭净叶片表面和背面，用剪刀去除叶片中脉，余下部分剪成大小为5mm×5mm的叶片。
取0.20g各3份放入锥形瓶中并加入30ml蒸馏水，放于真空干燥器中，用真空泵抽气10min，以抽出细胞间隙空气。
植物各项生理指标
植物各项生理指标植物的生理指标是指用来反映植物健康状态和生长发育过程的各种参数，可以通过测量和分析这些指标来评估植物的营养状况、生理功能和环境适应能力。
下面详细介绍几个常见的植物生理指标：1.光合作用：光合作用是植物对阳光能量的利用过程，可以通过测量光合速率来评估植物的自养能力。
光合速率受到光照强度、温度、二氧化碳浓度和水分等因素的影响，可以通过光合作用速率仪或测量叶片的气体交换来进行测定。
2.蒸腾作用：蒸腾作用是植物水分和气体交换的过程，通过叶片的气孔释放水分和二氧化碳，并吸收大气中的二氧化碳。
蒸腾速率可以通过测量蒸腾速率仪或水分损失来进行评估，反映植物的水分利用效率和胁迫适应能力。
3.叶绿素含量：叶绿素是植物中主要的光合色素，可以通过测量叶片的叶绿素含量来评估光能的吸收和光合作用的活性。
叶绿素含量可以通过叶绿素仪或酸碱提取法进行测定。
4.叶片氮含量：氮是植物生长所必需的关键元素，叶片的氮含量可以反映植物的养分状况和营养利用效率。
可以通过测量叶片的氮含量来评估植物的营养状态和生长潜力。
5.相对水分含量：相对水分含量是指植物叶片组织中的水分含量与完全脱水状态下的干重之比，可以反映植物体内的水分利用能力和胁迫适应能力。
可以通过测量叶片的相对水分含量来评估植物的水分状况和干旱耐受性。
6.温度响应曲线：温度响应曲线是通过测量植物在不同温度条件下的生理生化指标来研究植物对温度的响应，可以评估植物的热耐性、光合作用活性和生长发育过程。
7.水势：水势是指植物体内和周围环境之间的水分差异，可以通过测量植物的叶片水势来评估植物的水分利用能力和胁迫适应能力。
除了以上提到的指标，还有许多其他的植物生理指标，如叶片气孔导度、叶片蛋白含量、叶片潜热释放率等，这些指标可以更全面地评估植物的生理状态和环境适应能力。
综合应用这些生理指标可以帮助我们更好地了解植物的生长机理和生态功能，并为植物育种、农业生产和生态恢复等提供科学依据。
植物生理学中各项生理指标的测定方法
植物生理学中各项生理指标的测定方法. 实验内容实验1 MDA（丙二醛）含量测定所需试剂：10%三氯乙酸（TCA （纯）0.25% 硫代巴妥酸（纯）实验2：可溶性蛋白含量测定所需试剂：考马斯亮蓝G-250 95% 乙醇85% 磷酸实验3：SOD超氧化物歧化酶）酶活性测定所需试剂：dl- 甲硫氨酸（Met）NBT EDTA-Na2 核实验4：CAT过氧化氢酶）活性（过氧化氢酶）测定所需试剂：PBS（PH=7.0）30% H2O2实验五：Apx（抗坏血酸过氧化物酶）活性（即ASA- POD 活性）测定所需试剂：ASA（分子量167.12 ）（乙=胺四乙酸二钠）EDTA -Na2 PBS （pH7.0） 30%H2O 实验6：ASA（维生素C）含量测定偏磷酸95% 乙醇磷酸4% 2,2- 二联吡啶FeCI3 （或FeCI3 ・6H2O实验7：GSH谷胱甘肽,媚力肽GSH GSH是由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸结合而成的三肽化合物）含量测定所需试剂：NaH2PO4 2H2O DTNB （二硫代硝基苯甲酸）PBS （PH6.8）实验8：脯氨酸测定所需试剂：磺基水杨酸甲苯茚三酮冰乙酸85%磷酸试验9：叶绿素含量测定。
80% 丙酮试验9: GF活性测定试验10：过氧化氢含量测定。
三氯乙酸试验11：超氧阴离子含量测定二．酶液和母液提取1. 酶液提取所需试剂：50mmol/L 磷酸缓冲液（PH=7.8）（内含1% （m/v）聚乙烯吡哆烷酮PVP ），O.lmmol/LEDTANa或EDTA,也可为（内含2%（m/v）PVP）,0.2mmol/L EDTA Na或EDTA （先配制后用缓冲液定容）2. ASA . GSH 母液提取所需试剂：5%偏磷酸1．抗氧化酶酶液提取（SOD.POD.CAT：1g （根据样品的量，少的可以适当减少）叶片加入预冷5ml. 50mmol/L 磷酸缓冲液（PH=7.8）4 °C冷冻15000g离心20分钟上清液即为酶液（5C下保存一两天内备用，中短期用-20 C保存）2. ASA . GSH母液提取：0.1g 叶片加入3ml 预冷5%偏磷酸溶液4C冷冻14000g离心10分钟上清液即为母液（5 °C下保存备用）（偏磷酸可显著沉淀蛋白质和保护ASA）酶液提取所需试剂：PVP（聚乙烯吡哆烷酮）：1%（1g溶于100ml水），1000ml需称取10g，此处用PBS EDTA-Na2 : 0.1mmol/L （37.2mg EDTA-Na2 溶于1000ml 蒸馏水），此处用PBS PBS（缓冲液）配制方法：① Na2HPO4 12H2O ② NaHPO4・2H2O取①71.64g，蒸馏水定容至1L,取②31.21g 定容至1L,放置4C冰箱备用PH=7.8 取① 91.5ml+ ② 8.5ml=100ml （浓度0.2mol/L）需要0.05mol/L f 将上述溶液烯释至400ml（0.2mol/L*0.1=0.05mol/L*V ）母液提取所需试剂：5%偏磷酸：称5g 纯偏磷酸，定容至100 ml 蒸馏水（需加热溶解，温度在50-60C）偏磷酸有剧毒（偏磷酸难溶解，先得用研钵提前研碎，后用磁力搅拌器溶解一到两天后再定容）（现所用为38%HPQ所以需称65.7895g，定容至500ml）三．实验步骤实验1: MDA含量测定1.1所需试剂：10%三氯乙酸（TCA （纯）称10g定容至100ml0.25%硫代巴妥酸（纯）称0.25g 用10%TCA定容至100ml（配制时，可一次完成，先配TCA不要定容，再加入硫代巴比妥酸，然后定容，若难溶解，可以在磁力搅拌器上微热）1.2 步骤：取0.3g 叶片，加4ml 磷酸缓冲液研磨，加入4ml 0.25% 的硫代巴比妥酸（溶于10%的三氯乙酸）溶液J摇匀95 °C加热15分钟J快速冷却3000g 离心15 分钟取上清测定OD532 ，OD600 ，OD450 值按公式求MDA 浓度=6.45 X （OD32-OD。
植物生理生化指标的监测与评价研究
植物生理生化指标的监测与评价研究植物的生理生化指标是评估其健康状况和适应性的重要依据。
通过监测和评价这些指标，我们可以了解植物对环境的响应和适应能力，为植物生理学和生态学研究提供有力支持。
本文将综述植物生理生化指标的常用监测技术和评价方法。
一、光合作用相关指标光合作用是植物进行养分合成的关键过程。
通过测量光合作用相关指标，我们可以获得植物的光合效率和养分利用效率等信息。
常用的光合作用相关指标包括净光合速率（Pn）、蒸腾速率（Tr）和光合有效辐射利用率等。
监测这些指标可使用便携式测光仪、气孔仪等设备，评价方法可采用比较分析或建立模型进行预测。
二、叶绿素荧光指标叶绿素荧光是植物光合过程中释放的能量。
通过监测叶绿素荧光指标，我们可以了解植物的光合效率和受逆境胁迫的程度。
常用的叶绿素荧光指标包括最大光化学效率（Fv/Fm）、有效光量子产量（ΦPSII）和非光化学淬灭（NPQ）等。
测量叶绿素荧光指标可使用便携式叶绿素荧光仪，评价方法可采用比较分析或构建响应模型。
三、抗氧化酶活性指标抗氧化酶是植物抵抗氧化胁迫的关键因子。
通过监测抗氧化酶活性指标，我们可以了解植物对氧化应激的防御能力。
常用的抗氧化酶活性指标包括超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）和抗坏血酸过氧化物酶（APX）等。
测量抗氧化酶活性可使用酶活测定试剂盒，评价方法可采用比较分析或建立反应模型。
四、生长代谢指标生长代谢是植物生长发育的基础过程。
通过监测生长代谢指标，我们可以了解植物的营养吸收和有效利用能力。
常用的生长代谢指标包括根系活力、可溶性糖含量和叶片叶绿素含量等。
监测生长代谢指标可使用土壤养分测定仪、高效液相色谱仪等设备，评价方法可采用比较分析或构建模型。
五、生理生化指标的评价方法评价植物生理生化指标常采用比较分析和数理统计方法。
比较分析可通过对不同栽培条件下植物指标的差异进行比较，进而判断其对环境的响应和适应能力。
数理统计方法可通过建立回归模型或分类模型，对监测数据进行拟合和预测，提高评价的准确性。
植物生理指标--最新实验原理与方法
1、氮蓝四唑（NBT）法测定超氧化物岐化酶（SOD）2、POD（过氧化物酶）活性的测定——愈创木酚法3、CAT(过氧化氢酶)测定4、抗坏血酸过氧化物酶（APX）活性的测定5、谷胧甘肽还原酶(GR)的活力测定:6、O2-产生速率的测定7、过氧化氢(H2O2)含量的测定——碘化钾分光光度法8、丙二醛（MDA）含量的测定9、还原型抗坏血酸（ASA）和脱氢抗坏血酸（DHA）的测定10、谷胱甘肽还原酶测定11、MDAR(单脱氢抗坏血酸还原酶)活性的测定12、可溶性总糖的测定13、考马斯亮蓝G-250染色法测定可溶性蛋白含量14、叶绿素含量的测定15、石蜡制片的制作16、激素Indole-3-Acetic Acid（IAA）、Abscisic Acid（ABA）、GA3和ZA的测定17、cDNA扩增片段长度多态性技术（cDNA-AFLP）18、3′/5′RACE 扩增基因全长19、根系活力的测定（TTC法）一氮蓝四唑（NBT）法测定超氧化物岐化酶（SOD）【实验原理】SOD是含金属辅基的酶。
高等植物含有两种类型的SOD：Mn－SOD和Cu.Zn－SOD，它们都催化下列反应：由于超氧自由基（O2.－）为不稳定自由基，寿命极短，测定SOD活性一般为间接方法。
并利用各种呈色反应来测定SOD的活力。
核黄素在有氧条件下能产生超氧自由基负离子O2.－，当加入NBT后，在光照条件下，与超氧自由基反应生成单甲月替（黄色），继而还原生成二甲月替，它是一种蓝色物质，在560nm波长下有最大吸收。
当加入SOD时，可以使超氧自由基与H+结合生成H2O2和O2，从而抑制了NBT光还原的进行，使蓝色二甲月替生成速度减慢。
通过在反应液中加入不同量的SOD酶液，光照一定时间后测定560nm 波长下各液光密度值，抑制NBT光还原相对百分率与酶活性在一定范围内呈正比。
反应液蓝色愈深，说明酶活性愈低。
【仪器、材料与试剂】（一）仪器1. 分光光度计2. 台式离心机（二）材料1. 磷酸氢二钠2. 磷酸二氢钠3. 甲硫氨酸4. EDTA-Na25. 核黄素6. 氮蓝四唑(NBT)7. 陶瓷小研钵8. 4-5ml 离心管9. 10ml 玻璃试管（三）试剂1. 0.05mol/L磷酸缓冲液(PBS，pH7.8)：A母液：0.2mol/L磷酸氢二钠溶液: 取Na2HPO4·12H2O（分子量358.14）71.7g；B母液：0.2mol/L磷酸二氢钠溶液：取NaH2PO4·2H2O（分子量156.01）31.2g。
植物生理指标
植物叶片过氧化氢酶活力
土壤脲酶活力
土壤酸性磷酸酶活力
1：20160527 2：20170813 3：室内
土壤过氧化氢酶活力
பைடு நூலகம்
植物体内影响其生长发育、产量以及品质最主要的 两大代谢过程：碳代谢、氮代谢。
可溶性糖是植物光合作用的直接产物，也是植物体 内多糖、蛋白质、脂肪等大分子化合物的物质基础， 在植物碳代谢中发挥着非常重要的作用。
当可溶性糖含量提高时，细胞质浓度提高，质膜透性降低， 膜完整性提高，保证细胞正常生理活动与功能的进行，为 细胞抵御不良外界环境提供了良好的生理基础。
过氧化氢酶(CAT)广泛存在于动物、植物、微生物和培养 细胞中，是最主要的H2O2清除酶，在活性氧清除系统中具 有重要作用。 过氧化物酶(POD)广泛存在于动物、植物、微生物和培养 细胞中，可催化过氧化氢氧化酚类和胺类化合物，具有消 除过氧化氢和酚类、胺类毒性的双重作用。
胁迫会影响植物的光合作用、膜稳定性和线粒体呼吸等正 常的生理活动，其中重要的一个方面是使体内活性氧(ROS) 的产生与超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧 化氢酶(CAT)等保护酶系统和抗氧化剂类的清除作用失去 动态平衡，导致活性氧的累积，造成氧化伤害，影响植株 正常的生长和发育。并显著增加了丙二醛(MDA)的含量， 从而加剧了膜脂过氧化程度。
NO3－在植物体内先还原成NH4+，最后才能转化为植 物体可直接利用的有机物谷氨酰胺。由NO3－还原成 NH4+这一代谢过程需要由硝酸还原酶(NR)和亚硝酸 还原酶(NiR)参与完成。 NR及NiR与光合作用都有着极为密切的联系，NR是 一种光诱导酶，并且硝酸还原反应的进行需要 NADH提供还原力，而NADH正是由光反应产生的 NADPH 转换而来；NiR则是直接需要光反应中产生 的铁氧还蛋白(Fd)才能进行还原反应，将NO2－还原 成NH4+。
常用作物生理指标测定方法
常用作物生理指标测定方法作物生理指标是衡量作物生长发育和生理功能的重要参数，对于研究作物生理特性、生长速度、抗逆性能以及优化农业管理具有重要价值。
下面是一些常用的作物生理指标测定方法：1.叶绿素含量测定：叶绿素是作物光合作用的重要生化指标，常用的方法包括醋酸镁法、乙醇法和非破坏性叶绿素测定仪等。
2.叶片相对含水量测定：叶片相对含水量是反映植物水分状况的指标，常用的方法包括重量法、酒精浸泡法等。
3.叶片相对电导率测定：叶片相对电导率是反映作物膜系统完整性的指标，常用的方法包括浸泡法和浸渍法。
4. 叶片蛋白质含量测定：叶片蛋白质含量是反映植物生长和抗逆性的指标，常用的方法包括Lowry法、Bradford法和Biuret法等。
5.叶片活性氧含量测定：活性氧对植物生长和逆境抗性具有重要影响，常用的方法包括过氧化氢测定法、超氧化物歧化酶测定法和丙二醛含量测定法等。
6.叶片抗氧化酶活性测定：抗氧化酶是植物抵御氧化应激的重要酶系，常用的方法包括超氧化物歧化酶活性测定法、过氧化氢酶活性测定法和过氧化物酶活性测定法等。
7.土壤水分含量测定：土壤水分含量是影响作物生长和产量的重要因素，常用的方法包括烘干法、容量法和驻挠仪测定法等。
8.根系活力测定：根系活力是作物吸收水分和养分的重要指标，常用的方法包括三苯四氮唑蓝法和碘化钠法等。
9.气孔导度测定：气孔导度是作物水分调节和碳代谢的重要参数，常用的方法包括气体交换仪测定法和树脂浸泡法等。
10.叶盘蒸腾速率测定：叶盘蒸腾速率是反映作物水分蒸腾能力的指标，常用的方法包括测定叶盘失重法和石蜡浸渍法等。
以上是一些常用的作物生理指标测定方法，这些方法提供了了解作物生长发育和生理功能的重要信息，为作物生理机制的深入研究和农业管理的优化提供了依据。
同时，为提高作物抗逆性能和增加农业产量提供了重要的支持。
植物生理测定指标
植物生理测定指标植物作为人类重要的资源，在社会经济发展过程中发挥了极其重要的作用，但在生物学上，它们却是一个被忽视的学科。
此外，植物在其结构与功能演变中也受到了多种外界因素的影响，因此，要客观有效地掌握植物生理学的状态，对植物生理学的相关指标进行准确测定是必不可少的。
植物生理学测定指标，指的是植物发育过程中，其形态、营养、生长、繁殖能力等所受到的外界因素的影响，以及它们所表现出来的各种生命状态的指标。
具体指标包括体积、重量、根深度、叶绿素、植物激素、酶活性、光合产物、氮素含量、植物逆境胁迫指数、生长天数等。
植物体积是植物发育过程中的重要指标，能反映出植物的形态发育差异和变化趋势。
一般来说，植物的体积可以采用能量释放法测量，将植物放在一定温度、压力和浓度的气体中，使其释放能量，以测量出它的体积。
植物重量可以通过秤法测量，该方法可用于测量植物体内营养素含量的差异。
植物根深度也可以通过量出植物根部深度并进行重量测定进行计算，以了解其营养物质在土壤中的分布情况和分布量。
植物叶绿素含量可以用克弗拉特光度仪来测量，可以测定植物片的叶绿素含量并反映植物的光合作用水平。
植物激素测定仪可以测量植物体内的激素含量，以了解植物体内细胞生长及其发育的调节状态。
酶活性的测定可以测量植物体内的酶的活性，以及酶的类别和体内各酶活性的相对比例，从而更好地掌握植物表型及其发育水平。
光合产物的测定可以测量植物体内光合产物的含量，反映植物体内光敏反应调节状态，以及衡量植物的光合能力水平。
氮素含量测定可以测量植物体内的氮素含量，以了解植物的基本生理活动情况以及植物对土壤氮素的利用情况。
植物逆境胁迫指数也可以通过对植物体内多种生理指标的测定，分析植物对外界环境变化的适应能力来测定。
另外，植物生长天数也是植物发育及生长水平的重要指标，其通过测量植物发育时间来定义。
综上所述，植物生理学测定指标包括体积、重量、根深度、叶绿素、植物激素、酶活性、光合产物、氮素含量、植物逆境胁迫指数，以及植物生长天数等多种指标。
植物各项生理指标
二，便携式光合测定仪
呼吸作用的测定
• 两个密闭容器，分别放植株和空白，利用氢氧化 钡溶液吸收植株呼吸过程中产生的二氧化碳，再 用草酸溶液滴定残留的氢氧化钡，从空白和植株 两者消耗的草酸溶液之差，即可计算出呼吸过程 中释放的二氧化碳。
蒸腾强度的测定
• 一，钴纸法：氧化钴纸在干燥时是蓝色，吸收水 分后成粉红色，根据氧化钴纸变色时所需时间的 长短，然后按钴纸吸水量计算ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ作物的蒸腾强度
植物各项生理指标的测定
植物的生理指标包括： 光合作用 呼吸作用 蒸腾强度 叶面积指数 叶绿素含量
一，改良半叶法：将植物对称叶片的一部分遮光或 取下至于暗处，另一部分则留在光下进行光合作 用，一段时间后，在这两片叶子的对应部位取等 同面积，分别烘干称重。差值为光合作用产物的 产量。
光合作用强度为
干重增加总数/（切取叶面积和*光照时间）
• 叶绿素a=（12.7A665-2.69A645）V/1000W • 叶绿素b=（12.7A645-2.69A665）V/1000W • 总叶绿素=（20.0A645+8.02A665)V/1000W • 或总叶绿素含量=(A652/34.5)V/1000W
叶水势
• 水势代表水的能量水平，水总是从水势高处流向低处。水进入植物体 内并分布到各组织器官中的快慢或难易由水势差来决定，水势越高， 植物组织的吸水能力越差，而供给水能力越强。当植物组织与一系列 浓度递增的溶液接触后，如果植物组织水势大于（或小于）外液的水 势，则组织失水（或吸水），使外液浓度变低（或变高），密度变小 （或变大）。如果植物组织的水势等于外液的水势时，植物组织既不 失水也不吸水，外液浓度不变。当取浸泡过植物组织的溶液的小滴 （亦称小液流，为便于观察应先染色），分别放入原来浓度相同而未 浸泡植物组织的溶液中部时，小液流就会因密度不同而发生上升或下 沉或不动的情况。小液流在其中不动的溶液的水势（该溶液为等渗浓 度），即等于植物组织的水势。
植物生理指标
植物生理指标
植物生理指标是植物研究的一个重要课题，也是目前国内外植物学家们争论最多的一个问题。
其目的在于，通过对植物活动的各种生理行为指标的研究，来深入了解植物的特性和发育规律，从而来提升人类对植物的利用效率与应用技术。
植物生理指标一般指植物体内生理功能的活动或反应，它包括光敏性、温度敏感性、水分依赖性、空气密度对植物生长影响等指标。
这些特性指标可以帮助我们了解植物体内不同细胞和组织之间的关系，以及植物如何适应环境变化，以及植物的生长发育过程中细胞分化的特性等。
光敏性是指植物受到光照的反应，它会影响植物的生长发育，有利的光照环境可以促进植物的生长，而有害的光照会抑制植物的生长。
温度敏感性是指植物对温度变化的适应性，维持正常的温度环境可以有利于植物的生长发育，而过高或过低的温度则会影响植物的生长发育。
水分依赖性是指植物对水分的依赖性，过少的水分会使植物受损，而过多的水分也会影响植物的生长发育。
空气密度对植物生长的影响也很大，空气密度过低时，植物
的根系和叶片会受到损害，而空气密度过高会使植物体内的氧气含量减少，从而影响植物的生长发育。
此外，植物生理指标还包括植物体内生理物质的含量，如脯氨酸、蛋白质、氨基酸、维生素、糖类等，它们都是植物体内重要的物质，它们的含量会影响植物的生长发育，并且也会影响植物对环境变化的适应性。
另外，植物生理指标还包括植物的系统性表现，如植物的生长速度、叶形、光合特性、代谢活性等，这些特性指标可以帮助我们了解植物的发育特性，以及植物对环境变化的适应性。
总之，植物生理指标是研究植物的一个重要课题，它可以帮助我们更好地了解植物的特性，以及植物对环境变化的适应性，并有助于提高植物的利用效率和应用技术。
植物生理指标
丙二醛(MDA)是膜脂过氧化最重要的产物之一，它的产生 还能加剧膜的损伤，会引起蛋白质、核酸等生命大分子的 交联聚合，具有细胞毒性，因此在植物衰老生理和抗性生 理研究中MDA含量是一个常用指标。
超氧化物歧化酶(SOD)广泛存在于动物、植物、微生物和 培养细胞中，催化超氧化物阴离子发生岐化作用，生成 H2O2和O2。SOD不仅是超氧化物阴离子清除酶，也是H2O2 主要生成酶，在生物抗氧化系统中具有重要作用。
植物叶片过氧化氢酶活力
土壤脲酶活力
土壤酸性磷酸酶活力
1：20160527 2：20170813 3：室内
土壤过氧化氢酶活力
胁迫会影响植物的光合作用、膜稳定性和线粒体呼吸等正 常的生理活动，其中重要的一个方面是使体内活性氧(ROS) 的产生与超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧 化氢酶(CAT)等保护酶系统和抗氧化剂类的清除作用失去 动态平衡，导致活性氧的累积，造成氧化伤害，影响植株 正常的生长和发育。并显著增加了丙二醛(MDA)的含量， 从而加剧了膜脂过氧化程度。
植物叶片可溶性蛋白含量
植物叶片可溶性糖含量
1：20160510(13d) 2：20160517(20d) 3：20160527(30d) 4：20170729(15d) 5：20170813(30d)
植物叶片总叶绿素含量
植物叶片硝态氮含量
Hale Waihona Puke 植物叶片丙二醛含量1：20160510(13d) 2：20160517(20d) 3：20160527(30d) 4：20170729(15d) 5：20170813(30d)
植物叶片中约有50%的可溶性蛋白是光合作用的关键 酶RuBP羧化酶，因此可溶性蛋白被广泛用作叶片衰 亡和光合能力高低的指标。
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植物生理指标
1、植物酶液提取：
1)PVPP(固体,PVP单体与金属元素结合) 酚类吸附剂，酚的羟基与蛋白质
的羰基形成氢键，醌导致蛋白质聚合。
或polyclarAT（Polyclar-AT is insoluble PVP, also called as PVPP (PolyVinyl PolyPyrrolidine).
It binds phenols etc more efficiently than PVP and is easily
removable by filtration or a low speed spin）去除酚的毒害防止醌
颜色干扰。
PVP的肽键中的氧与酚羟基上的质子牢固结合，防止酚与酶
中肽键结合，保护了酶。
2)母液制备：0.1mol/L二硫苏糖醇DTT: 100mg至微量离心管，+650ul 水
0.5mo/L EDTA : 93gEDTANa,10g NaOH,定容到500ml
10mg/ml BSA：100mgBSA于9.5ml 水中
2、可溶性总糖测定（蒽酮比色法）
（1）原理：糖+硫酸—糠醛，其与蒽酮形成绿色络合物，620nm下显色。
本实验采用浓硫酸，倒入水中产生大量热，促进反应发生。
（2）标准曲线绘制：取略大于0.01g的葡萄糖，105度烘干至恒重，取0.01g 定容至100ml，配成100ug/ml的溶液。
取200mg蒽酮，溶于100ml 浓硫酸，冷却，保存于棕色瓶。
（注意：不需定容，量取100ml硫酸倒入烧杯即可，定容混匀时产气热溅出。
注意硫酸中是否存在杂质。
蒽酮非常敏感，不能用勺等挖取，只能直接倒，否则就会污染。
溶液配后呈亮黄色，放置
620nm.
实验结果：实际上并不理想，因abs均偏低，可试将标糖浓度适当升高。
葡萄糖含量ug 20 40 60 80 100
abs 0.09 0.169 0.259 0.332 0.427
3、电导率（DDS-11A）
1)接通电源前观
否指零，若有偏
差调节表头下
方凹孔，使其恰
指零。
2)接通电源，仪器预热10分钟。
3)将电极浸入去离子水中，须确保极片浸没，校正零。
4)根据数值选择量程，我选10ms
5)常数设为1
4、培养液PH测定(PHS-3C)
1)PH计在不使用时需使用KCL浸泡液浸泡，用枪从上小孔和帽注满，至
少浸泡24h。
将PH4.0缓冲剂包定容至250ml,再加入56g分析纯KCL，
加热溶解。
2)仪器使用前至少预热30min.
3)首先进行定位调节、斜率调节：将测量头用蒸馏水洗后，根据所测溶液
性质不同，放入不同溶液，待示数平衡，再分别调节定位、斜率至
6.86,4.00.
5、细胞活力测定（TTC法）
1)《植物生理学通讯》TTC法测定红豆杉细胞活力刘华[1] 梅兴园[2][1]湖北
省卫生职工医学院生物教研室，湖北荆州434000 [2]华中理工大学生命科学与技术学院，武汉430074）
2)药品配置：0.4%(m/v)TTC红四氮唑溶液：0.2gTTC, 加1.5ml 95%乙醇溶解，
用蒸馏水定容至50ml。
随配随用，不宜久藏，遮光，变红不可用。
3)原理：TTC氧化态为无色，被呼吸作用产生的H还原成红色的三苯基甲
4)步骤：10ml试管：2.5ml 0.4% TTC+2.5ml PH7.0 0.1mol/L PBS+0.2g鲜细胞,25
度避光13-16h,倒掉液体，以蒸馏水洗细胞三次，加5ml 95%乙醇使细胞完全脱色，70度水浴20min,以乙醇为对照，测485nm处吸光度，此数值可直接作为细胞活力的衡量标准。
一般所得值1-2
6、可溶性蛋白含量测定（考马斯亮蓝G250染色）
1)原理：
2)溶液配置：
a)考马斯亮蓝溶液：100mg G250,溶于50ml 95%乙醇，加入100ml 85%(w/v)的
磷酸，定容至1000ml。
于棕色瓶常温保存30天。
蓝黑色过滤后形成棕褐色稀释成淡蓝色；
b)50mmol/LPBS PBS直接稀释对PH无太大影响。
c)100ug/ml标准蛋白溶液：精确称取牛血清蛋白10mg,加水定容至100ml
3)步骤：
a)标准曲线绘制：6ml反应体系，盖盖摇匀程度均一，放置反应3分钟，
测595nm处吸光度。
比色在1h内完成。
b)样品测定：100ul 样品提取液
900ul 蒸馏水
5ml G250溶液
7、苯丙氨酸解氨酶PAL（陈建勋）
1)原理：PAL催化苯丙氨酸的脱氨反应，使氨释放形成反式肉桂酸，反式肉桂
酸在290nm处有重要吸收。
此酶在植物体内次生物质代谢如木质素等起重要作用。
2)药品配置：PH8.8 0.1mol/L 硼酸缓冲液
0.02mol/L L-苯丙氨酸：0.330g L-苯丙氨酸,上述缓冲液定容至100ml
3)步骤：1ml 0.02mol/L L-苯丙氨酸
2ml PH8.8 0.1mol/L 硼酸缓冲液
100ul 酶液（2份ck : 100ul 提取缓冲液）
混匀，290nm处测起始OD，精确计时，30度保温30分钟后，290nm处测吸光度。
以每30min 吸光度增加0.01所需酶量为1U.
4)计算：PAL活性（U/gFW）= 30min内OD差值*酶液总体积
0.1ml（酶液）*提取酶液时样品重*0.01
5）注意：
a)PAL为诱导酶，除光诱导外，切割受伤，病害感染等也能诱导此酶活性升高。
b)除直接用新鲜材料提取进行测定外，也可将诱导好的材料制成丙酮粉，然后
再提取测定。
8、过氧化氢酶CAT
德]B．施特尔马赫著．钱嘉渊译．酶的测定方法[M]．第1版．中国轻工业出版社，1992．p186-188
1)原理：CAT催化H2O2 分解，240nm处检测H2O2 减少量。
CAT以PH7.0，
37度时活性最高，冷冻，阳光，氧气降低酶活。
2)药品：0.18%H2O2 ：600ul 30% H2O2 用PH7.0 PBS稀释至100ml.现配。
（一般情况下，配置的双氧水冬天两周用完，夏天一周，避光）
25度预热的蒸馏水
3)步骤：
a)为检查在不加酶的情况下吸光度是否也降低，以蒸馏水为参比，用移液
管将1.0ml底物溶液和1.9ml蒸馏水滴入一只1厘米比色皿，并调水温
至25℃。
在连续5分钟内240nm处测定吸光度，若吸光度的降低幅度超
过0.01，则在计算主值时须减去此值。
b)以蒸馏水为对照，实验组：1ml0.18%H2O2 +1.9ml蒸馏水+100ul酶液，在
连续5分钟内240nm处测定吸光度。
（每隔1分钟读取一次结果，直至
每分钟吸光度的降低值达到稳定为止）
c)计算：在上述条件下，每分钟酶促分解1umol过氧化氢的酶量定为1个
酶活力单位。
×3 ／0.0436×Ew
U/mg = E
240
式中：E240—240nm处每分钟内吸光度的降低值
Ew—每0.10ml所用酶液中含酶的重量（mg）
0.0436—240nm处1umol过氧化氢的吸光度
3—反应混合液的总体积。
4)注意：酶液浓度应为5-20u/ml
8、超氧化物歧化酶SOD（NBT光还原法陈建勋）
1)原理：NBT在Met和核黄素存在下，照光后发生光化还原反应生成蓝色甲
腙，蓝色甲腙在560nm处有最大光吸收。
SOD能够抑制这个还原反应，抑制强度与酶活性在一定范围内成正比。
2)药品配制：
a)50mmol/L PH7.8 PBS
b)220mmol/L Met: 3.2824g Met,用50mmol/L PH7.8 PBS溶解定容至100ml.
现配现用，于4度冰箱保存1-2d.
c) 1.25mmol/L NBT（氯化硝基四氮唑兰）溶液：避光现配，0.102gNBT,用
50mmol/L PH7.8 PBS溶解定容至100ml. 于4度冰箱保存2-3d.
d)0.033mmol/L核黄素：2.52mg核黄素，用50mmol/L PH7.8 PBS溶解定容
至200ml于棕色瓶，4度冰箱保存8-10d.
3）步骤：反应总体积5ml ,两个光对照，两个暗对照
比色时终浓度每个管中：50mmol/L PH7.8 PBS 4.05ml
220mmol/L Met 300ul 13mmol/L
1.25mmol/L NBT 300ul 75umol/L
0.033mmol/L核黄素300ul 2umol/L
酶液50ul 对照以缓冲液混匀后，光对照与样品均置于4000lx日光灯（我置于3根2000lx）反应20min,保证受光一致！否则严重影响结果。
以暗对照为参比，检测560nm处吸光度。
4）计算：以抑制NBT光化还原的50%为一个酶活单位。
SOD总活性(u/gFW)= （光对照吸光值—样品吸收值）*酶液总体积
光对照吸光值*0.5*样品重*样液体积（此处为50ul）SOD比活力（u/mg Pro）= SOD总活性
蛋白质浓度
5）加入酶量以抑制反应的50%为最佳？。