杂交瘤细胞筛选原理
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杂交瘤细胞筛选原理
1.融合:将癌细胞和免疫细胞以一定的比例混合,并经过刺激,使其融合成杂交瘤细胞。刺激方法可以采用化学物质(如聚乙二醇)或电脉冲等。
2.杂交瘤细胞培养:将融合后的细胞在含有足够营养物质的培养基中进行培养。由于杂交瘤细胞一般具有对培养条件要求较高且很容易生长,所以培养基的选择和培养方式等需要进行优化。
3.筛选:为了筛选出能够分泌目标抗体的杂交瘤细胞,常会进行抗体的检测。最常用的方法是酶联免疫吸附测定(ELISA),将培养液中的抗体与特异抗原结合,然后用酶标记的二抗结合,通过酶作用的颜色反应来检测抗体的存在。
4.单克隆化:通常通过稀释法将筛选出的杂交瘤细胞进行单克隆化。即将细胞进行限稀化,使得每个培养皿上只有一个细胞。然后扩大单个细胞的培养,并进行抗体检测和细胞鉴定,最终得到稳定的分泌目标抗体的单克隆细胞株。
杂交瘤细胞筛选的原理基于杂交瘤细胞的特性,由于是细胞的融合,杂交瘤细胞可以同时继承两种源细胞的特性。癌细胞提供了高增殖能力,可以快速扩大细胞数目,从而提高抗体的生产能力;而免疫细胞提供了抗体的生产能力。通过对杂交瘤细胞的筛选,可以选择出分泌高水平目标抗体的细胞株,从而用于大规模生产特定抗体。
总之,杂交瘤细胞筛选是一种利用细胞融合技术筛选特定细胞株的方法。通过融合癌细胞和免疫细胞形成杂交瘤细胞,再通过抗体检测的方式筛选出特定抗体分泌细胞,最终可以得到稳定的杂交瘤细胞株。这种技术
在生物医学和制药领域中具有广泛的应用前景,可以用于生产高效、稳定的蛋白质和抗体等重组产物。