薄层色谱法鉴别荭草中黄酮类化学成分

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薄层色谱法分离鉴定食品中的黄酮类化合物

实验一薄层色谱法分离鉴定食品中的黄酮类化合物一实验目的通过卡玛薄层色谱仪分析食品中黄酮类化合物的实验，了解薄层色谱分离方法的原理及薄层色谱仪的大致结构；掌握使用薄层色谱仪的及其相关软件的方法。

二实验原理将黄酮类粗提物采用半自动上样法，借助于混合物中的组分，在互不相容的组分件进行吸附或分配，以达到分离的目的。

三仪器与药品瑞士卡玛（CAMAG，Switzerland）薄层色谱仪构造如下图所示（本实验室薄层色谱仪包含除6之外的所有部件）。

色谱展开流动相为：氯仿:甲醇=9:1。

四实验方法及操作步骤1. 薄层板使用前先活化，如有特殊要求，还应预洗。

活化方法：将硅胶板移入烘箱，缓慢升温至105-110℃恒温活化半小时，取出放入干燥器中备用。

2. 点样点样是平面色谱中最重要的步骤，点样过程中产生的误差无法通过色谱展开和计算来校正。

本设备采用喷雾点样，条带状等多种方式点样。

其中条带状点样适合中药分析。

3. 展开展开式薄层色谱中受影响因素最多的步骤，展开剂的选择、不同展开方式、温度、展开距离对成分分离的影响。

其中展开湿度的影响值得重视且较难控制。

本实验室使用的为全自动展开系统。

4. 色谱后衍生化本实验室使用的薄层色谱仪器带热激发反应，可短时间内将展开板进行烘干。

5. 图谱记录和评价该系统优点：曝光时间自动侦测、曝光时间课手动调节、专业图像增强—图像校正、专业图像增强—空白板背景扣除。

五软件设定导入双击软件设定参数新建 1.点样器2.展开器3. 观察器1. 点样器设置：进入Linomat 5 General 界面调整Sequence.defaults 进入Sequence界面（调整Number of tracks、Band length、点样位置x，y轴、样点间隔、点样量、点样顺序等等）2. 展开器设置：新建进入界面设定参数（预饱和时间、预饱和液所需体积、展开剂体积、展开距离、吹干体积）开始提示加预报和液加预饱和液过程中加展开剂展开完毕，待吹干、取出、放入观察室3. 观察设置：新建选择所需要用观察光，如“254nm，360nm，R，T，RT等等点击将要观察所需的光照条件点击开始拍照拍照完成。

三叶青片剂的质量标准研究

•176 •药学研究• Journal of Pharmaceutical Research 2021 Vol.40，No.3•制剂研究•三叶青片剂的质量标准研究周煜恒I ，2,徐惠龙I ，2,苏澜I ，2,余佳敏1,许文l ，2* ,范世明l ，2* ,徐伟“2(1.福建中医药大学药学院，福建福州350122;2.福建中医药大学生物医药研发中心，福建福州350122)摘要：目的研究三叶青片剂的质量标准，为其质量控制奠定基础。

方法采用薄层色谱（TLC)法鉴别三叶青片剂中荭草苷、异荭草苷、牡荆素、牡荆素鼠李糖苷及异牡荆素；采用三乙胺显色紫外-可见分光光度（UV-Vk)法，测定三叶青片剂中总黄酮的含量；建立高效液相色谱（HPLC)法测定三叶青片剂中8个主要成分（荭草苷、异荭草苷、牡荆素、牡荆素鼠李糖苷、异牡荆素、绿原酸、新绿原酸及隐绿原酸）的含量，Wekh Ukimate XB-C I8色谱柱(4.6 mmX 150 mm ，2.7 pm )，祥度洗脱，检测波长：330 nm ，流速:0.4 mL . min -1。

结果薄层色谱法鉴别三叶青片剂中荭草苷、异荭草苷、牡荆素、牡荆素鼠李糖苷、异牡荆素的展开剂为乙酸乙酯：曱酸：曱苯：水=8 :1 : 1 : 1， A1C13显色后紫外光365 nm 下检视；紫外-可见分光光度法测定总黄酮含量，以牡荆素计，在1.85〜11.1邮.mL -1范围内与吸光度值呈良好的线性关系，平均加样回收率为98.43%，兄为2.46%。

建立的高效液相色谱法，在考察的浓度范围内，8个成分的浓度与峰面积呈良好的线性关系（r>0.999 0)，平均回收率为96.88%〜99.25%，兄为 1.94%〜2.47%。

结论本试验建立薄层色谱法鉴别三叶青片剂中荭草苷、异荭草苷、牡荆素、牡荆素鼠李糖苷及异牡荆素，用紫外-可见分光光度法测定三叶青片剂中总黄酮含量，用高效液相色谱法测定8个主要成分含量，为三叶青片剂的质量控制提供参考。

黄酮类化合物薄层色谱展开剂

黄酮类化合物薄层色谱展开剂
黄酮类化合物是一类具有黄酮骨架结构的天然产物，具有广泛的生物活性。

在薄层色谱分析中，为了实现黄酮类化合物的有效展开与分离，常常需要添加一定的展开剂。

常用的黄酮类化合物薄层色谱展开剂包括：
1. 二氯甲烷：是一种非极性溶剂，适用于分离较非极性的黄酮类化合物。

2. 乙酸乙酯：是一种中极性溶剂，适用于分离中等极性的黄酮类化合物。

3. 醇类溶剂（如乙醇、甲醇）：是一种中极性溶剂，适用于分离较极性的黄酮类化合物。

4. 醋酸：可将黄酮类化合物的植物色素掩盖，便于观察和分析。

除了添加展开剂外，还可以通过改变展开剂的比例或者使用多种展开剂的混合物，来调整薄层色谱分离黄酮类化合物的条件。

此外，选择适当的展开剂还可以调整色谱斑点的形状和色谱效果的选择。

需要注意的是，展开剂的选择应根据具体的分析目标来确定，以达到最佳的分离效果。

在实验过程中，可以通过尝试不同的展开剂或不同的展开剂比例，来找到最适合的条件。

中药中黄酮类化学成分提取分离技术

1、讪酮：基本结构为苯并色原酮（双苯吡酮），是一种特殊类型的黄酮类化合物，如石韦、芒果叶及知母叶中都含有的止咳祛痰成分芒果苷和异芒果苷。
2、高黄酮类：基本结构为苯甲基色原酮，C 环与B环间多了一个2-；如中药麦冬中的麦冬高异黄酮A。
黄酮类化合物的生物活性
1. 对心血管系统的作用样作用：芦丁、橙皮苷等有样作用，能降低
（四）碱义
备注
氢氧化钠溶液
黄酮 — 黄 ~ 橙色
查耳酮、橙酮 — 红 ~ 紫红
二氢黄酮 — 黄~橙色（冷）
母核类型鉴别
深红~ 紫红（较长时间或加热）
黄酮醇 — 黄色 [O] 棕色
稀氢氧化钠邻三酚羟基黄酮类暗绿~蓝绿色纤维状邻三酚羟基鉴别
氨蒸气或碳酸钠溶液颜色变化
黄烷醇类二氢异黄酮（耳无或微黄色）
二氢异黄酮
（三）溶解性
黄酮类化合物的溶解度因结构及存在的不同而有很大差异。 1）苷元：难溶于水，易溶于有机溶剂（甲醇、乙醇、醋酸乙酯、丙酮）及稀碱水中； 1、黄酮（醇）、查耳酮等平面性强的分子，使分子与分子间排列紧密，分子间引力较大，更难溶于水；
2、二氢黄酮及二氢黄酮醇等，无交叉共轭体系，由于吡喃酮环已被氢化成为类似于半椅式结构，破坏了分子的平面性，为非平面型分子。分子与分子间排列不紧密，分子间引力下降，溶解度稍大；
血管脆性及异常通透性，可用作防治高血压及动脉硬化的辅助治疗剂。扩冠作用：芦丁、槲皮素、葛根素、人工合成的力可定。降血脂及胆固醇：木樨草素
芦丁片
芦丁是从中国所独有的国槐的花蕾中提取的植物药，也称维生素P，具有降低毛细血管的异常通透性和脆性的作用，是心脑血管保护药，国内用于心脑血管药品制剂的主要成分，国外还大量用于食品添加剂和化妆品。

黄酮薄层

摘要】黄酮类化合物是一类植物次生代谢产物，因其在医药、食品及化工方面有着重要的研究价值而得到了广泛关注。

各种用于研究黄酮类化合物的分离分析技术也在迅速发展，薄层色谱技术仍以其快速、简便、准确度高等优点而成为鉴别黄酮类化合物的首选方法。

文章综述了薄层层析技术在植物黄酮类化合物中的应用。

【关键词】黄酮类化合物；薄层层析；分离分析技术Application of Thin layer Chromatography in Flavonoids of PlantsTANG Li juan，LIU Wei wei，SHI Da hua，ZHAO Yue qiang，TAO Chuan zhouDept. of Chemical Engineering ，Huaihai Institute of Technology ，Lianyungang 222005 ，ChinaAbstract∶Flavonoids which are a kind of secondary plant metabolites have been widely investigated for their potential of medicine，food and chemical engineering. And separation analysis technologies applied in flavonoids are developing rapidly. Thin layer chromatography is firstly selected in identification of flavonoids for the rapid，simple and highly accurate advantages. Application of thin layer chromatography in flavonoids of plants was reviewed in this paper.Key words∶Flavonoids；Thin layer chromatography；Separation analysis technologies黄酮类化合物属植物多酚化合物，是植物次生代谢产物，该类化合物在医药、食品及化工方面有着重要的研究价值，已报道其有抗氧化性、抗炎抗菌、抑制血小板凝集及肥大细胞组胺释放等作用，在癌症及心脏病等疾患上也显示出治疗潜力，因其在花色素中的存在而可能用来代替毒性合成颜料［1］。

黄酮含量测定的方法

黄酮含量测定的方法
黄酮是一类天然的植物次生代谢产物，具有多种生物活性，包括抗氧化、抗炎、抗癌等作用。

因此，测定黄酮含量是对植物提取物、草药或食物中黄酮类化合物进行研究和评价的重要手段。

目前常用的黄酮含量测定方法包括色谱法、分光光度法和高效液相色谱法等。

1. 色谱法：色谱法常用的分离技术有薄层色谱法（TLC）和气相色谱法（GC）。

其中TLC常用于初步筛选和分离样品中的黄酮类化合物，GC常用于定量分析。

2. 分光光度法：分光光度法是通过黄酮类化合物吸收特定波长处的紫外光来间接测定其含量。

这种方法简单、快速，但对样品的成分和色素的影响较大。

3. 高效液相色谱法（HPLC）：HPLC是目前最常用的分析方法。

通过选择合适的柱型、流动相和检测波长，可以实现对不同黄酮类化合物的分离和定量。

此外，还可以结合质谱（MS）等技术，用于黄酮类化合物的结构鉴定和定量分析。

需要注意的是，不同的黄酮类化合物在不同的测定方法中可能表现出不同的灵敏度和选择性，因此在选择测定方法时需要考虑到样品中的主要成分和相关性质。

同时，还应注意样品的前处理、提取和色谱条件等因素，以获得准确可靠的测定结果。

黄酮的鉴定实验报告

一、实验目的本实验旨在通过化学和色谱方法对黄酮类化合物进行鉴定，验证样品中是否含有黄酮类成分，并对其结构进行初步分析。

二、实验原理黄酮类化合物是一类广泛存在于植物中的天然酚类化合物，具有多种生物活性。

其结构特点为含有两个苯环通过三碳链相连。

本实验采用以下方法进行鉴定：1. 紫外光谱法：黄酮类化合物在紫外光区有特征吸收峰，可通过测定其紫外光谱图进行鉴定。

2. 薄层色谱法（TLC）：利用黄酮类化合物在特定溶剂中的分配系数差异，将其与其他物质分离，并通过与标准品进行对比鉴定。

3. 高效液相色谱法（HPLC）：对黄酮类化合物进行定性和定量分析。

三、实验材料与仪器材料：1. 样品：茶叶、水果皮、植物提取物等。

2. 标准品：槲皮素、芦丁等黄酮类化合物。

3. 试剂：甲醇、乙酸乙酯、乙醇、浓盐酸、镁粉等。

4. 仪器：紫外可见分光光度计、薄层色谱仪、高效液相色谱仪、电子天平等。

四、实验步骤1. 紫外光谱法鉴定（1）将样品用甲醇溶解，配制成一定浓度的溶液。

（2）用紫外可见分光光度计测定溶液在200-400nm范围内的吸收光谱。

（3）与标准品的光谱图进行对比，确定样品中是否含有黄酮类化合物。

2. 薄层色谱法鉴定（1）将样品用甲醇溶解，制成一定浓度的溶液。

（2）取少量溶液点于薄层板上，并将标准品溶液点在同一薄层板上作为对照。

（3）将薄层板置于展开缸中，加入适宜的展开剂，进行展开。

（4）取出薄层板，晾干，用紫外灯照射，观察样品斑点与标准品斑点的对应关系，鉴定黄酮类化合物。

3. 高效液相色谱法鉴定（1）将样品用甲醇溶解，制成一定浓度的溶液。

（2）用高效液相色谱仪对溶液进行检测，记录色谱图。

（3）与标准品的色谱图进行对比，鉴定黄酮类化合物。

五、实验结果与分析1. 紫外光谱法结果通过紫外光谱法，样品在200-400nm范围内有特征吸收峰，与标准品的光谱图相似，表明样品中可能含有黄酮类化合物。

2. 薄层色谱法结果在薄层色谱板上，样品斑点与标准品斑点位置一致，表明样品中可能含有黄酮类化合物。

黄酮类化合物区分方法

黄酮类化合物区分方法黄酮类化合物是一类具有广泛生物活性的天然产物，广泛存在于植物中，包括蔬菜、水果、茶叶等。

由于其具有抗氧化、抗炎、抗菌、抗肿瘤等多种生物活性，黄酮类化合物在药物研究和食品保健品开发中备受关注。

然而，黄酮类化合物种类繁多，结构复杂，因此如何进行有效的区分和鉴定成为了研究人员面临的挑战之一。

黄酮类化合物的区分方法多种多样，可以从不同的角度进行考虑。

下面将介绍一些常用的黄酮类化合物区分方法。

一、色谱法色谱法是一种常用的化学分析方法，包括高效液相色谱（HPLC）、气相色谱（GC）等。

通过色谱法可以将复杂的混合物分离出各个成分，并通过检测器进行定性和定量分析。

在黄酮类化合物的区分中，可以根据色谱图谱的峰形、保留时间等特征进行分析和判断。

二、质谱法质谱法是一种可以确定物质分子结构和分子量的技术。

在黄酮类化合物的区分中，可以利用质谱法对其分子结构进行分析。

常用的质谱技术包括质谱仪、电喷雾离子源、飞行时间质谱等。

通过质谱法的应用，可以在黄酮类化合物中快速准确地确定目标成分。

三、红外光谱法红外光谱法是一种常见的分析方法，可用于研究物质的结构和组成。

黄酮类化合物的红外光谱特征主要包括吸收峰的位置和强度，通过对比样品的红外光谱图谱，可以确定黄酮类化合物的种类和结构。

四、核磁共振法核磁共振（NMR）是一种常用的分析技术，可以确定物质的分子结构和组成。

通过核磁共振谱图的分析，可以确定黄酮类化合物的种类和结构。

常见的核磁共振技术包括质子核磁共振（1H-NMR）、碳-13核磁共振（13C-NMR）等。

五、紫外-可见吸收光谱法紫外-可见吸收光谱法是一种常用的分析方法，通过测量物质在紫外-可见光谱范围内的吸收特性，可以判断黄酮类化合物的存在和浓度。

通过比对样品和参考物质的吸收光谱图谱，可以区分不同的黄酮类化合物。

除了以上几种常用的区分方法，还可以采用质谱成像技术、X射线晶体衍射分析等方法来对黄酮类化合物进行区分和鉴定。

鉴别生药中黄酮类成分的常用方法

鉴别生药中黄酮类成分的常用方法一、引言生药中含有丰富的化学成分，其中黄酮类成分是其中一类重要的活性成分。

黄酮类成分具有多种生物活性，如抗炎、抗氧化、抗菌、抗肿瘤等作用，因此对于鉴别生药中黄酮类成分的常用方法的了解，对于生药的分析和质量评价至关重要。

本文将从简单到复杂，逐步介绍鉴别生药中黄酮类成分的常用方法，帮助读者深入理解并掌握相关知识。

二、物理性质鉴别法1.1 外观特征我们可以通过观察生药的外观特征来初步判断是否含有黄酮类成分。

黄酮类化合物多为黄色结晶物质，具有明显的颜色特征。

如果生药呈现明显的黄色或黄褐色，那么很可能含有黄酮类成分。

1.2 紫外可见光谱法紫外可见光谱法是一种常用的物理性质鉴别方法。

黄酮类化合物在紫外可见光谱中有较为明显的特征吸收峰，常在220-400nm波长范围内出现。

通过与标准品进行对比，可以确定生药中黄酮类成分的存在与含量。

三、化学性质鉴别法2.1 化学反应法化学反应法是一种常用的化学性质鉴别方法。

黄酮类化合物通常具有特有的化学反应，如与酸性溶液产生颜色变化、与碱性溶液生成盐类等。

通过与已知的黄酮类标准品进行反应比对，可以鉴别生药中是否存在黄酮类成分。

2.2 薄层色谱法薄层色谱法是一种常用的化学性质鉴别和定性定量分析方法。

通过将生药样品与标准品一同进行薄层色谱分离，比对色谱图的相对位置、色带的颜色和Rf值等，可以确定生药中黄酮类成分的类型和含量。

四、仪器分析法3.1 高效液相色谱法高效液相色谱法是一种常用的仪器分析法，用于分离、鉴定和定量生药中的黄酮类成分。

通过高效液相色谱仪的分离柱和检测器，可以得到黄酮类化合物的保留时间和峰面积，从而确定其存在与含量。

3.2 气相色谱法-质谱联用气相色谱法-质谱联用是一种高级的仪器分析方法，用于分离、鉴定和定量复杂化合物。

通过气相色谱仪和质谱仪的联用，可以得到黄酮类成分的质谱图和质谱峰，进一步确认其分子结构和碎片。

结语：通过物理性质鉴别法、化学性质鉴别法和仪器分析法，我们可以对生药中的黄酮类成分进行多层次、多角度的分析。

黄酮类化合物--鉴定

＞( )＞( ) 比较这四种化合物在如下三种色谱中Rf值大小顺序: (1)硅胶TLC(条件CHCl3—MeOH 4:1展开),
Rf值( )＞( )＞( )＞( ) (2)聚酰胺TLC(条件60%甲醇—水展开),
Rf值( )＞( )＞( )＞( ) (3)纸色谱(条件8%醋酸水展开),
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第6章黄酮类化合物
----黄酮类的鉴定
鉴
定
一、薄层色谱法（TLC）二、纸色谱法（PC)
一、薄层色谱法
一般采用吸附薄层，吸附剂大多用硅胶和聚酰胺。
（1）硅胶薄层色谱: 用于分离与鉴定弱极性黄酮类化合物分离苷元常用展开剂：甲苯-甲酸甲酯-甲酸；氯仿-甲
醇等。（2）聚酰胺薄层色谱：分离含游离酚羟基的黄酮苷与苷元。
TBA t-BuOH: HOAc: H2O=3:1:1 水饱和n-BuOH 层析行为: Rf值: 苷元>单糖苷>双糖苷一般:苷元在0.70以上，而苷则小于0.7。
纸色谱
A
苷元B
D
C
第二相展开采用水性展开剂
B
C
如：2~6% HOAc水溶液
3% NaCl 水溶液
HOAc:浓HCl:H2O= 30: 3 : 10
苷元
层析行为: 连接糖链越长, Rf 越大(>0.5);
A
D
苷元Rf较小，有的留在原点。
7
双相色谱
第I向醇性展开剂 II向水性展开剂
（BAW、TBA、水饱和正丁醇）
第
（2~8%HAc、3%NaCl、1%HCl）
正相色谱反相色谱 Rf固规定律相：（极水性）小极的性化合> 物流R动f大相附原理）苷元>单糖苷>双糖苷规律与左边相反母核相同，二-OH>三-OH>四-OH>五-OH黄酮

黄酮类含量测定方法

黄酮类含量测定方法
黄酮类是一种常见的植物次生代谢产物，具有多种生物活性，如抗氧化、抗炎、抗肿瘤等作用。

因此，测定黄酮类的含量对于研究植物的生物活性和药用价值具有重要意义。

以下是测定植物中黄酮类含量的常用方法：
1. 酸水解法
通过酸水解将黄酮骨架中的糖部分裂解，然后用紫外光谱法（UV）或高效液相色谱法（HPLC）等方法测定莽草中黄酮类的总含量。

但是，该方法会破坏一部分黄酮类化合物的结构、消耗大量的试剂和时间。

2. 高效液相色谱法（HPLC）法
由于黄酮类化合物的分子结构复杂，所以HPLC法是测定黄酮类含量的有效方法之一。

通过将样品在特定条件下分离、纯化，利用紫外或荧光探测器分析检测出样品中的黄酮类含量并计算。

该法具有分离效率高、检测灵敏度、可靠度高等优点。

3. 毛细管电泳法（CE）法
毛细管电泳法是利用毛细管对混合物进行分离，将混合物分离为单独的组分的方法，实现其含量分析。

该方法抗干扰性强、检测速度快，适用于对样品含量分析较低且复杂的情况。

综上所述，不同的样品或应用领域需要不同的黄酮类含量测定方法，研究者可以
根据自己的需要选用不同的方法进行研究。

两种中药黄酮类成分的微乳薄层色谱鉴别

【中药研究】两种中药黄酮类成分的微乳薄层色谱鉴别邬浩杰浙江省奉化市中医院　浙江奉化315500关键词　微乳液　展开剂　黄酮类　薄层色谱　菟丝子　苦丁茶色谱法是药物分析广为应用的经典方法,而薄层色谱法是最常应用的方法,其展开剂多为有机溶剂。

以微乳液为流动相进行的色谱分析称为微乳色谱。

微乳液是由表面活性剂、助表面活性剂、油和水按适当比例自发生成的无色透明、各向同性、低粘度的热力学稳定体系,与有机溶剂相似而有增溶作用[1]。

康纯等[2-3]首次将微乳液应用到了薄层色谱技术中,研究分离和鉴定中药中的黄酮。

与传统的方法相比,该法分离效率和检测灵敏度高,且斑点圆而集中,重现性好,毒性小且价格低廉。

本文以不同含水量的SDS2正丁醇2正己烷2水微乳液为流动相[4],聚酰胺薄膜为固定相,对菟丝子、苦丁茶2种中药材的黄酮成分进行了鉴别,考察了微乳液类型、酸度、温度、时间因素对分离层析效果的影响,得到了理想的结果。

1　实验材料与仪器111　材料:菟丝子、苦丁茶中药样品均于2008年9月购于浙江省奉化市中医院,由医院药房鉴定。

112　试剂:十二烷基硫酸钠(SDS)、正丁醇、正己烷、甲醇、甲酸、苯、乙酸乙酯、丁酮、乙酸、丙酮、无水乙醇、乙腈、盐酸、氨水(以上均为分析纯),硝酸铝、重蒸馏水、芦丁对照品(购自国药集团化学试剂有限公司)。

113　仪器:WF H–203B型三用紫外分析仪(上海精科实业有限公司);层析用聚酰胺薄膜(浙江台州市四青生化材料厂);P-1型薄层色谱展开缸(上海信谊仪器厂);SK-2510HB超声波清洗器(上海科导超声仪器有限公司);ZN-100高速中药粉碎机(长沙市岳麓区中南制药机械厂);YP2001N电子天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司);硅胶G薄层板(自制)。

2　实验方法211　溶液的配制:分述如下。

21111　微乳液展开剂的配制:在保证SDS、正丁醇、正己烷为27∶63∶10(质量比)的条件下,改变水量,配制系列微乳液。

黄酮类化合物的含量测定方法

黄酮类化合物的含量测定方法作者：吴婷妮来源：《中外医疗》2014年第24期[摘要] 该文综述了近年黄酮类化合物含量测定时常见的方法，分光光度法、薄层色谱法、高效液相色谱法、毛细管电泳法，分析了各种方法的优缺点，并介绍了一些应用比较少的方法。

[关键词] 黄酮类化合物；含量；测定；方法[中图分类号] R19 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742（2014）08（c）-0197-02黄酮类化合物是广泛分布于自然界中的一类化合物，生活中常见的食品茶叶、豆类、蔬菜、蜂蜜等都含有大量的黄酮类化合物。

黄酮类化合物具有C6-C3-C6的基本骨架，是许多植物成分的活性化合物，具有抗菌、抗病毒、抗氧化、抗肿瘤等药理作用。

该文综述了近年黄酮类化合物分析中主要应用的方法，为广大同行提供一些参考。

1 分光光度法分光光度法主要适用于总黄酮的测定，具有操作简便、快速、准确度及精密度较好的特点。

目前黄酮类化合物测定法有直接测定法和比色法。

直接测定法直接以黄酮类化合物为对照物测定样品中的此成分的含量，比色法是将化合物加入显色剂后测定吸光度再进行换算测定，其中常用的显色剂有Al（NO3）3和AlCl3。

直接测定法和比色法的选择要综合考虑，样品中成分是否会与显色剂发生沉淀反应、样品成分的复杂性等都会影响结果的准确性，在NaNO2-Al（NO3）3-NaOH体系中，碱性条件经常会影响结果的准确性和稳定性，只有物质中含有邻二酚羟基，并且邻二酚羟基的邻位没有取代时， Al（NO3）3比色法才在 510 nm左右有最大吸收[1]。

王东升等[2]、李春红等[3]采用紫外分光光度法分别测定了淫羊藿、黄芪中总黄酮的含量。

吕凛等[4]比较了直接测定法和NaNO2-Al（NO3）3-NaOH显色法测定桔皮中总黄酮含量，结果表明显色法检测，会出现浑浊现象；直接法检测，操作简便，结果准确，重现性好。

时维静等[5]研究直接测定法和NaNO2-Al（NO3）3-NaOH法测定中药复方总黄酮含量，结果表明NaNO2-Al（NO3）3-NaOH法测定中药复方总黄酮含量稳定可靠，快速准确。

双波长薄层扫描法测定冬凌草片中总黄酮的含量

双波长薄层扫描法测定冬凌草片中总黄酮的含量（作者： _________ 单位：___________ 邮编： ___________ ）【摘要】目的采用双波长薄层扫描法测定冬凌草片中总黄酮的含量。

方法采用日本岛津CS-9301双波长飞点薄层扫描仪，硅胶GF254薄层板，展开剂：醋酸乙酯拟甲酸拟水（8 ： 1 ：1）,激发波长269 nm。

结果片剂中其它成分对测定无干扰。

总黄酮的点样量（X）在1〜6 a g范围内与峰面积（Y线性良好，Y =133.3X+80.416, r=0.999 2，n=5,平均回收率是98.67%, RSD=1.50%实验的精密度、稳定性、重现性都很好。

结论该法操作简便，精密度好，结果准确可靠。

【关键词】双波长薄层扫描法；总黄酮；含量测定Abstract:ObjectiveTo determine the total flavonoid in Rabdosia rubescens Tablets by TLCS.MethodsTheshimadzu CS-9301 TLC scanner was selected with silic-gelthin-layer.The develop ing solve nt was ethyl acetate-formic acid ft'；water （8 :1 : 1）, and the excitation wavelength was 269 nm.ResultsThe determ in ati on of the total flav onoid was not disturbed by other components in the Rabdosia rubescebs tablets. The calibration curves was linear in the range of 1 〜6 卩g for totalflavonoid（r=0.999 25） and the average recovery was 98.67%. The precision, stability,and reproducibility of the experimentwere very good. Con clusi on The method is rapid,accurate and reliable.Key words:TLCS; Total flav ono id; Quan titative determ in ati on冬凌草为唇形科香茶菜属植物，又名冰凌草，以地上部分入药。

检识黄酮类化合物的常用化学方法

黄酮类化合物是一类在天然植物中广泛存在的化合物，具有多种生物活性，如抗氧化、抗炎、抗肿瘤等作用。

其分离纯化和结构表征具有重要意义。

针对黄酮类化合物的检测与分析，常用的化学方法有以下几种：1. 薄层色谱法薄层色谱法是一种简单、快速、有效的化学方法，适用于黄酮类化合物的分离和检测。

其原理是利用物质在固定相和流动相之间的分配和吸附作用，通过不同物质在固定相和流动相中的迁移速度差异，实现物质的分离和检测。

薄层色谱法具有样品用量小、操作简便、分离效果好等优点，是检测黄酮类化合物的常用方法之一。

2. 高效液相色谱法高效液相色谱法是一种高分辨率、高灵敏度、高效率的分离和检测方法，适用于黄酮类化合物的分离和定量分析。

其原理是利用样品在流动相和固定相之间的分配系数和吸附作用，通过不同物质在固定相和流动相中的迁移速度差异，实现物质的分离和检测。

高效液相色谱法具有分离效果好、检测灵敏度高、操作简便等优点，是检测黄酮类化合物的常用方法之一。

3. 气相色谱法气相色谱法是一种高分辨率、高选择性、高灵敏度的分离和检测方法，适用于黄酮类化合物的分离和定量分析。

其原理是利用样品在气相和液相之间的分配系数和吸附作用，通过不同物质在气相和液相中的迁移速度差异，实现物质的分离和检测。

气相色谱法具有检测灵敏度高、分离效果好、操作简便等优点，是检测黄酮类化合物的常用方法之一。

4. 质谱法质谱法是一种高灵敏度、高特异性、高准确性的分析方法，适用于黄酮类化合物的结构表征和定量分析。

其原理是利用物质在质谱仪中的分子离子生成、离子荧光和质谱检测，通过离子质荷比的比较和分析，实现物质的分离和检测。

质谱法具有结构表征准确、检测灵敏度高、分析速度快等优点，是检测黄酮类化合物的常用方法之一。

以上列举了几种常用的化学方法，用于检测和分析黄酮类化合物。

这些方法各有优缺点，可以根据实际情况和需求选择合适的方法进行分析。

在实际应用中，也可根据具体情况采用多种方法相结合，以提高分析的准确性和可靠性。

薄层色谱法鉴别荭草中的黄酮类化学成分

薄层色谱法鉴别荭草中的黄酮类化学成分【摘要】目的：建立荭草中黄酮类化学成分的鉴别方法。

方法：利用酸水解得到黄酮苷元的提取条件，以槲皮素和山奈酚为对照品，增加了荭草中黄酮类化学成分的薄层色谱鉴别。

结果：在供试品色谱与两种对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的清晰荧光斑点，分离度高。

结论：所建立的方法能很好地对荭草中的黄酮类成分进行质量控制。

【关键词】荭草；槲皮素；山奈酚；薄层色谱荭草为蓼科植物红草Polygonum orientale L．的干燥果穗及带叶茎枝，具有清热解毒，祛风除湿，活血消肿功能，临床上用于风湿性关节炎，冠心病，心胃气痛等，为贵州少数民族用药[1]。

国内不少学者利用高效液相色谱法（HPLC）对荭草的指纹图谱进行了大量的研究[2]，而以荭草为君药研制的注射剂已批准进入临床研究。

另据文献报道，荭草花的活性成分主要有黄酮类成分和四环三萜类皂苷，如荭草素和荭草苷、异荭草素及其苷、山柰素-3-O-β-D-葡萄糖苷、1,3,5-三羟基苯、3,3′-二甲氧基鞣花酸-4-O-β-D-葡萄糖苷、山柰素-3-O-α-L-鼠李糖苷、槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷、山柰素等[3]。

然而，荭草作为中药材却缺乏完善的质量标准和普遍适用于县级市的有效分析手段。

因此，为控制该中药材质量，本文利用薄层色谱法（TLC）对荭草药材花类部分的黄酮类化学成分进行了研究。

现报道如下。

1仪器与试药1.1仪器薄层色谱扫描仪-成像系统（生产厂家：瑞士CAMAG公司；型号：REPROSTAR 3），Sartorius BP211D电子天平，超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司，250W/40kHz）。

1.2试药荭草（批号：20111123，购于东莞市国药有限公司）；地榆对照药材（批号：121286-200402，购于中检所）；槲皮素对照品（来源：中检所，批号：槲皮素110081-200304），山奈素对照品（来源：中检所；批号：110861-200002）；硅胶G薄层板（德国Merck公司），甲醇为分析纯（广州市化学试剂厂），水为超纯水，其余试剂均为分析纯。

荭草提取物中总黄酮含量测定方法研究

荭草提取物中总黄酮含量测定方法研究陈思颖;谭丹;朱迪;郑林;兰燕宇【摘要】目的:建立荭草提取物中总黄酮含量测定方法.方法:采用紫外分光光度法,以荭草素为对照品,对荭草提取物中总黄酮进行含量测定.结果:建立紫外分光光度法测定荭草提取物中的总黄酮,荭草素对照品浓度在0.003 3～0.053 0 g/L范围内与吸光度线性关系良好,A=0.023 33C-0.000 61,r =0.999 9;平均回收率为101.3％,RSD为2.0％.结论:建立的分析方法操作简便、准确可靠,可作为荭草提取物的质量检测方法.【期刊名称】《贵阳医学院学报》【年(卷),期】2014(039)004【总页数】3页(P463-465)【关键词】荭草;黄酮类;分光光度法,紫外线【作者】陈思颖;谭丹;朱迪;郑林;兰燕宇【作者单位】贵阳医学院贵州省药物制剂重点实验室,贵州贵阳550004;贵阳医学院贵州省药物制剂重点实验室,贵州贵阳550004;贵阳医学院民族药与中药开发应用教育部工程研究中心,贵州贵阳550004;贵阳医学院贵州省药物制剂重点实验室,贵州贵阳550004;贵阳医学院民族药与中药开发应用教育部工程研究中心,贵州贵阳550004【正文语种】中文【中图分类】R285.5荭草为蓼科植物荭草(Polygonum orientale L.)的干燥果穗及带叶茎枝，具有清热解毒，祛风除湿，活血止痛的功效，常用于治疗风湿性关节炎、冠心病、疝气等，是贵州少数民族用药[1]。

荭草中含有丰富的黄酮类成分，如荭草素、异荭草素、荭草苷、叶绿醌、牡荆素等[2-3]。

据文献报道，黄酮类化合物具有抗急性心肌缺血、抗衰老、抗肿瘤、增强机体免疫力、抑制高血压及止痛镇痛等多种药理活性[4]。

然而对荭草中总黄酮的含量测定却未见报道。

本研究以荭草素为对照品，采用紫外分光光度法[5-7]对荭草提取物中总黄酮进行了含量测定研究，提高其质量控制水平，为荭草药材进一步的开发研究提供依据。

【执业药师】黄酮类化合物（常见问题汇总）

【执业药师】黄酮类化合物（常见问题汇总）1）如何用色谱法鉴别黄酮类化合物？1.纸色谱（pc）：适用于分离各种天然黄酮类化合物及其苷类混合物。

混合物的鉴定常采用双向色谱法。

以黄酮苷类来说，一般第一向展开采用某种醇性溶剂，如正丁醇-醋酸-水（4：1：5，上层）等，主要是根据分配作用原理进行分离。

第二向展开溶剂则用水或其他含水溶液，如2～6%醋酸等，主要是根据吸附作用原理进行分离。

黄酮类化合物苷元中，平面性分子如黄酮、黄酮醇、查耳酮等，用含水溶剂如3%～5%hoac展开时，几乎停留在原点不动（rf＜0.02）；而非平面性分子如二氢黄酮、二氢黄酮醇、二氢查耳酮等，因亲水性较强，rf 值较大（0.10～0.30）。

黄酮类化合物分子中羟基苷化后，极性随之增大，在醇性展开剂中rf 值相应降低，同一类型苷元，rf值依次为：苷元＞单糖苷＞双糖苷。

但在用水或2～8%醋酸、3%氯化钠水溶液或1%盐酸展开时，则苷元几乎停留在原点不动，rf 值大小顺序为：苷元＜单糖苷＜双糖苷。

2.硅胶薄层色谱：用于分离和鉴定弱极性黄酮类化合物。

分离黄酮苷元常用的展开剂是甲苯-甲酸乙酯-甲酸（5：4：1）。

3.聚酰胺薄层色谱：特别适合于分离含游离酚羟基的黄酮及其苷类。

展开剂中多含有醇、酸和水。

2）用紫外及可见光谱对黄酮类化合物进行结构测定的一般程序是什么？（1）测定样品在甲醇溶液中的uv光谱。

（2）测定样品在甲醇中加入各种诊断试剂后得到的uv及可见光谱。

常用的诊断试剂有甲醇钠（naome）、醋酸钠（naoac）、醋酸钠-硼酸（naoac-h3bo3 ）、三氯化铝（alcl3）、三氯化铝-盐酸（al？鄄cl3-hcl）等。

（3）样品如为黄酮苷类，需先进行水解或甲基化后水解，得到苷元或甲基化苷元，再测定苷元或其衍生物的uv光谱。

3）黄酮类化合物在甲醇溶液中的uv光谱有何特征？1.黄酮及黄酮醇类：黄酮、黄酮醇等多数黄酮类化合物，因分子中存在桂皮酰基及苯甲酰基组成的交叉共轭体系，故其甲醇溶液在200～400nm的区域内存在两个主要的紫外吸收带，称为峰带ⅰ（300～400nm）及峰带ⅱ（220～280nm）。

执业中药师专业知识二中药化学成分辅导：黄酮及其甙类

黄酮及其甙类（1）盐酸-镁粉反应：+HCl-Mg →红⾊（2）三氯化铝反应：+AlCl3 →黄⾊（3）浓氨⽔反应：+NH3→亮黄或橙⾊（4）薄层层析检查：吸附剂——聚酰胺或硅胶G （1）盐酸⼀镁（或锌）粉试验：取检品的⼄醇溶液1ml，加放少量镁粉（或锌粉），然后加浓盐酸4－5滴，置沸⽔浴中加热2－3分钟，如出现红⾊⽰有游离黄酮类或黄酮甙（以同法不加镁或粉做⼀对照，如两管都显红⾊则有花⾊素存在。

如继续加碳酸试液使成碱笥即变成紫⾊双转变为蓝⾊，即证明含花⾊素）。

黄酮类的⼄醇溶液，在盐酸存在的情况下，能被镁粉还原，⽣成花⾊甙元⽽呈现红⾊或紫⾊反应（个别为淡黄⾊、橙⾊、紫⾊或蓝⾊）。

这是由于酮类化合物分⼦中含有⼀个碱性氧原⼦，致能溶于稀酸中被还原成带四价的氧原⼦即锌盐。

本法是鉴别黄酮类的⼀个反应。

但花⾊素本⾝在酸性下（不需加镁粉）呈红⾊，应加以区别。

【注】①此反应仅在化学结构中，第三位上带羟基的酮醇类显⾊较明显，⽽其它黄酮烷酮类均不甚明显。

因此试验呈阴性反庆是不能做出否定的结论，尚需结合其他实验再做结论。

②试验应在醇中进⾏，⽔分多会影响颜⾊的⽣成。

此反庆较慢，有时需置⽔浴上加热，以促使反应的进⾏。

（2）荧光试验： ①三氯化铝试验：取检品的⼄醇溶液点于滤纸⽚上（⼲后再点1次，使其浓度庥中），⼲后，喷雾1％三氯化铝⼄醇试液，在紫外光灯下观察，呈现黄⾊、绿⾊、橙⾊等荧光为黄酮类；呈现天蓝⾊或黄绿⾊；荧光，则为⼆氢黄酮类。

这是区别⼆氢黄酮类化合物的⼀种鉴别反应。

②硼酸丙酮枸橼酸丙酮试验：取检品的⼄醇溶液1ml，在沸⽔浴上蒸⼲加⼊饱和硼酸丙酮溶液及10％枸橼酸丙酮溶液各0.5ml，蒸去丙酮后，在紫外光灯下观察，管内呈现强烈的绿⾊荧光（黄酮或其甙类）。

（3）碱液试验：取检品的⼄醇溶液点于滤纸⽚上（⼲后，再点⼀次，使其溶液集中），⼲后，喷1％碳酸钠溶液或在氨蒸⽓中熏⼏分钟，呈现亮黄、绿或橙黄⾊。

如将氨⽓熏过的滤纸露置空⽓中，颜⾊逐渐裉去⽽变为原有的颜⾊（黄酮或其甙类）。