常用内分泌试验方法

第一节：腺垂体和神经垂体生理功能检查

一生长激素（GH）测定

1．原理：GH由腺垂体GH细胞分泌，正常情况下GH呈脉冲式分泌，大部分是在夜间睡眠时分泌，受下丘脑神经内分泌细胞分泌的生长激素释放激素和生长抑素调节。

2．标本采集：早晨安静状态下，空腹不抗凝静脉血2ml。

3．正常参考值(化学发光免疫分析法)：

空腹基础状态下0.06－5.0μg / L (0.16－13.0 mIU / L)

4．注意事项和影响因素：

⑴GH减少的因素有肥胖、甲减、、雌激素、生长抑素、脂肪酸、急性葡萄糖负荷。

⑵GH增加的因素包括抑制生长抑素、β受体阻滞剂、多巴胺能激动剂、胆碱能激动剂、α受体激动剂、生长激素释放激素、低血糖，此外，大手术、紧张、、胰高血糖素、输入氨基酸等也可引起GH增加。

5．临床应用和分析：

⑴评价腺垂体功能。

⑵用于GH瘤引起的肢端肥大症或巨人症的诊断和疗效观察，由微腺瘤引起的肢端肥大症，GH水平不一定升高，异位肿瘤分泌的GH或生长激素释放激素（少见）可引起GH水平升高。

⑶正常GH空腹基础值较低，与GH分泌缺乏有重叠，了解GH分泌减少和储备情况需要做激发试验，注意排除各种因素对生长激素分泌的影响，如药物、紧张、应激等。生理状态下，GH呈脉冲式分泌，这种分泌与垂体、下丘脑、神经递质以及大脑结构和功能的完整性有关，有明显个体差异，并受睡眠、运动、摄食和应急的影响，故单次测定血GH的水平不能真正反应机体GH分泌情况，需要结合GH刺激试验诊断。经典的GH刺激试验包括生理刺激试验(睡眠、运动)和药物刺激试验。

3.1生理刺激试验正常人于沉睡时或于进食、运动以后血清GH较原来增加，故可利用生理因素做l临床筛查试验。

3.1.1运动刺激试验：若小儿能合作，选择运动刺激最为方便，即令患儿空腹3～4 h后，先安静30 min，然后平地散步15 min，接着上下跑一层楼梯(约20级梯)上下跑动10～20个往返(5 min)。运动前抽血，运动后再抽血。80%～90%的正常儿童于运动后血浆GH浓度高峰≥5～6/μg/L，垂体性侏儒症患儿往往不增加或<3 μ

g/L，可进一步作确诊试验。

3.1.2深睡眠刺激试验：深睡眠试验必须在脑电图的监测下，于睡眠的第三期或第四期采血测GH才能得到正确的结果。

运动试验必须达到规定的强度，才能产生促进GH分泌的作用，而且由于年龄和运动强度的差异，有效率仅为70%左右。睡眠试验要求一定的条件和设备，因此生理试验在儿童中难以获得可靠的诊断依据。

3.2药物刺激试验是借助胰岛素、精氨酸、可乐定、胰高血糖素、左旋多巴、吡啶斯的明等药物可促进GH分泌而进行的。为排除外源性因素的影响，刺激试验前应禁食、卧床休息，于试验前放好留置针头，在上午8～10点进行。

3.2.1盐酸精氨酸：作用机制为兴奋α肾上腺素能受体，促进生长激素释放激素(GHRH)分泌。盐酸精氨酸0.5 g/kg(最大量不超过30 g)，按10%浓度溶于注射用水中，于基础状态下静脉滴注30 min以上，滴注前及滴注后30，60，90，120 min 采血。本试验一般无副作用，但也可有迟发性低血糖。

3.2.2胰岛素：作用机制为诱发低血糖，促进GH分泌，抑制生长激素释放抑制激素(GHRIH)分泌。胰岛素0.05～0.1 U/kg.加生理盐水1～2 ml静脉推注，注射前及注射后30，60，90，120 rain采血，分别测定血糖和GH，当血糖下降至<40 mg/cU 或为空腹血糖值的1/2时，刺激生长激素的分泌。此试验在年幼儿童易诱发低血糖抽搐，试验时必须有医务人员密切观察并及时处理低血糖反应。

3.2.3左旋多巴：机制为介导神经递质多巴胺能途径的兴奋或促进GHRH释放。左旋多巴10 ms/kg顿服，采血时间为0、30、60、90、120 min。副作用有恶心、呕吐、头痛和头晕。

3.2.4可乐定：机制为兴奋a肾上腺素能受体，促进GHRH分泌。可乐定4 μg/kg或0.15 mg/m2顿服，采血时间为0、30、60、90、120 min。副作用有低血压和疲乏。

3.2.5吡啶斯的明：机制为减少GHR/H分泌量，激发GH分泌。吡啶斯的明2 ms/kg口服，采血时间为0，30，60，90，120 min，副作用为腹痛、呕吐、头疼、面部和四肢肌肉震颤。

3.2.6 GHRH：可用来区别GH缺乏系下丘脑性或垂体性，垂体性者GH无明显

升高反应，而下丘脑性者则GH显著升高。机制为促进GH分泌。1～2 μg/kg，正常儿童在注射GHRH后30min出现GH峰值，而生长激素缺乏症(GHD)的患儿出现峰值时间延迟。副作用为颜面潮红。

3.2.7黄体生成素释放激素(LHRH)兴奋试验：对骨龄超过12岁者可作LHRH 兴奋试验。

3.2.8生长激素释放肽(GHRP)：GHRP在体内可促进GH分泌，对其它垂体激素的分泌几乎没有影响。

由于各种药物激发GH反应途径不同，各种试验的敏感性和特异性有差异，不同的刺激试验间都有一定的假阳性，任何一种激发试验均有15%失败的可能性，故对同一患者应采用至少两种作用途径不同的药物进行激发试验才能作为判断的结果。一般认为两种试验GH峰值均<5 μg/L为GH完全缺乏；5～9 μg/L为部分缺乏；10/μg/L即为GH不缺乏。

3.2.9多种药物联合激发试验：一般认为两种药物激发试验不能连续进行，这样需多次静脉取血给患儿带来诸多不便。近年来有作者报道可采用联合激发试验。联合激发试验的准确度、精确度明显的高于单药激发，敏感度与单药相近，可减少患儿的采血次数和减轻痛苦。①胰岛素、黄体生成素释放激素、可乐定垂体复合刺激试验：采用胰岛素0.075 U/kg、黄体生成素释放激素2.5 μg/kg静脉注射，可乐定100μg/m2口服复合刺激，在0、15、30、60、90 min采血。②吡啶斯的明与左旋多巴联合激发试验：吡啶斯的明1 ms/kg，左旋多巴10 mg/kg同时口服，于O、30、60、90、120 min静脉采血测GH。

生长激素激发试验在矮小儿童的诊断中具有重要价值，在临床中一直被广泛应用。但药物刺激不是生理过程，存在一定的缺陷，如假阳性反应、假阴性反应、可重复性差、部分药物刺激试验有一定的副作用。目前国内外将10 μg/L作为GHD 的诊断阈值，但这一标准是人为制定的，在正常儿童和部分GHD患儿之间存在GH峰值重叠现象，约15—25%正常儿童对GH刺激试验的反应<10 μgg/L，而被误诊为GHD。部分GH轴功能异常的患儿也可出项刺激试验结果正常，因此刺激试验在一定程度上也缺乏准确性甚至与临床相矛盾。目前还没有一个诊断生长激素缺乏症统一的“金”标准。近年来很多研究都在寻找儿童矮小症的最佳诊断方法，如生长激素-胰岛素样生长因子轴功能的检查。胰岛素样生长因子-I(IGF-I)、胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)与GH测定的综合分析可近一步提高诊断