5-核苷酸酶检测试剂盒(钼蓝微板法)
5′—核苷酸酶检测试剂盒(酶比色法)产品技术要求中山标佳
试剂R1溶液应呈淡黄色、无颗粒、无杂质、无沉淀和悬浮物；R2溶液无色、无颗粒、无杂质、无沉淀和悬浮物；质控品为白色冻干粉末。
2. 2净含量
试剂盒各试剂装量应不小于标示值。
2. 3试剂空白
2. 3.1试剂空白吸光度
用蒸馅水作为样品加入试剂测试，试剂空白吸光度A54finm WO. 200o
2. 3. 2试剂空白吸光度变化率
用蒸馅水作为样品加入试剂测试，试剂空白吸光度变化率应W0. 02o
2. 4分析灵敏度
测试25 U/L被测物时，吸光度变化率(△A/min)范围为0. 005〜0. 040。
2. 5线性范围
应在(0-100) U/L内满足线性相关系数rN 0. 990,浓度N12U/L时，相对偏差
W20%；浓度V12 U/L时，绝对偏差W2 U/L。
2. 6测量精密度
2. 6. 1重复性
变异系数CV应W6. 0%。
2. 6. 2批间差
变异系数CV应W 10. 0%0
2. 7准确度
用产品配套的2个浓度的定值校准品作为样本进行检测，其相对偏差应W
10. 0%o
2. 8分析特异性
当样品中甘油三酯浓度W10g/L,胆红素浓度W200 MW1/L,血红蛋白浓度W5 g/L,抗坏血酸^260 mg/L浓度时，测试结果的干扰偏差应在± 10%范围内。
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5’-核苷酸酶测定试剂盒(过氧化物酶法)产品技术要求dm
5’-核苷酸酶测定试剂盒（过氧化物酶法）适用范围：本试剂盒用于体外定量测定人血清中5’-核苷酸酶的活性。
试剂1：1×30ml；试剂2：1×10ml试剂1：2×30ml；试剂2：1×20ml试剂1：1×60ml；试剂2：1×20ml试剂1：3×80ml；试剂2：4×20ml试剂1：4×60ml；试剂2：4×20ml试剂1：2×60ml；试剂2：2×20ml试剂1：2×30ml；试剂2：2×10ml试剂1：6×60ml；试剂2：2×60ml2.1 外观试剂1为无色至浅褐色液体，无可见异物，试剂2为无色至浅褐色液体，无可见异物。
2.2 净含量试剂净含量不少于标称装量。
2.3 试剂空白2.3.1 试剂空白吸光度用生理盐水作为样本加入试剂测试时，试剂空白吸光度应＜0.200A。
2.3.2 试剂空白吸光度变化率用生理盐水作为样本加入试剂测试时，试剂空白吸光度变化率的绝对值应＜0.020△A/min。
2.4 分析灵敏度5’-NT含量为50U/L时，测定吸光度变化率的绝对值应>0.005△A/min。
2.5 线性区间试剂（盒）线性在[5,100]U/L区间内：2.5.1 线性相关系数（r）应不小于0.990；2.5.2 [5,20]U/L区间内，线性绝对偏差不超过±4U/L；(20,100]U/L区间内，线性相对偏差不超过±10%。
2.6 精密度2.6.1 重复性用相同批号试剂盒测试两个水平的样本，所得结果的变异系数（CV）应不大于10%。
2.6.2 批间差用3个不同批号试剂盒测试两个水平的样本，试剂（盒）批间相对极差应不大于10%。
2.7 准确度与已上市的同类产品比对，用40个在[5,100]U/L区间内不同浓度的人源样本，用线性回归方法计算两组结果的相关系数（r）不小于0.990;[5,20]U/L区间内，线性绝对偏差不超过±4U/L；(20,100]U/L区间内，线性相对偏差不超过±10%。
5′-核苷酸酶测定试剂盒(过氧化物酶法)产品技术要求baiding
5′-核苷酸酶测定试剂盒（过氧化物酶法）适用范围：用于体外定量测定人血清中5′-核苷酸酶的含量。
1.1规格
1.2组成
2.1 外观
2.1.1试剂1：无色至淡红色液体，无浑浊，无不溶物；
2.1.2试剂2：无色至淡红色液体。
2.1.3包装外观应整洁，标签字迹清晰，不易脱落。
2.2 净含量
液体试剂的净含量不低于标示体积。
2.3 试剂空白
2.3.1试剂吸光度
试剂空白吸光度≤0.5。
2.3.2试剂白吸光度变化率
试剂空白吸光度变化率（ΔA/分）≤0.005。
2.4 分析灵敏度
样本浓度为100 U/L时，ΔA/分≥0.015。
2.5 线性区间
在[5，300] U/L范围内，线性相关系数r≥0.990；测试浓度在[5，40] U/L 时，绝对偏差不超过±4 U/L，测试浓度在（40，300] U/L时，相对偏差不超过±10%。
2.6 精密度
2.6.1 批內精密度
用高、低2个浓度的样本测试试剂盒，各重复测试10次，其变异系数（CV）应不大于10%。
2.6.2批间差
用样本分别测试3个不同批次的试剂盒，每个批次测试3次，其相对极差（R）应不大于10%。
2.7 准确度
回收率在85%-115%范围内。
2.8 稳定性
原包装试剂盒在2℃～8℃避光保存条件下有效期为12个月。
有效期满后3个月内测试，应满足2.3、2.4、2.5、2.6.1和2.7的要求。
5'-核苷酸酶测定试剂盒(过氧化物酶法)产品技术要求beijian
5＇-核苷酸酶测定试剂盒（过氧化物酶法）适用范围：本产品用于体外定量测定人血清中5’-核苷酸酶的活性。
1.1 规格具体产品规格见下表:1.2 组成成分1.2.1 试剂的组成试剂1：GOOD’S缓冲液 100mmol/L 4-氨基安替比林 2mmol/L核苷酸磷酸化酶 0.1U/ml黄嘌呤氧化酶 0.2U/ml过氧化物酶 0.6U/mlBSA 1g/L试剂2：GOOD’S缓冲液 100mmol/L5’-次黄嘌呤核苷酸 10mmol/LTOOS 0.15g/L1.2.2 校准品的组成（选配）5’-核苷酸酶（5.0～100.0）U/L该校准品为血清基质冻干校准品1.2.3 质控品的组成（选配）5’-核苷酸酶（5.0～100.0）U/L该质控品为血清基质冻干质控品校准品、质控品有批特异性，具体靶值见靶值表。
2.1 外观2.1.1 外包装完整无破损；2.1.2 试剂1：无色或淡黄色澄清透明无杂质的液体；2.1.3 试剂2：无色或黄色澄清无杂质的液体；2.1.4 校准品：白色或浅黄色冻干粉，复溶后为浅黄色溶液，无不溶物；2.1.5 质控品：白色或浅黄色冻干粉，复溶后为浅黄色溶液，无不溶物。
2.2 净含量净含量不低于标示值。
2.3 试剂空白2.3.1 试剂空白吸光度在主波长546nm、副波长800nm、37℃条件下，试剂空白吸光度小于0.4；2.3.2 试剂空白吸光度变化率在主波长546nm、副波长800nm、37℃条件下，试剂空白吸光度变化率不大于0.01。
2.4 线性2.4.1 线性范围[5.0，100.0]U/L，相关系数r＞0.990。
2.4.2 线性偏差（20.0，100.0]U/L线性范围内，相对偏差不超过±10%；[5.0，20.0]U/L线性范围内，绝对偏差不超过±2.0U/L。
2.5 分析灵敏度检测浓度为67.8U/L的样本时, 吸光度变化率不小于0.01。
2.6 重复性2.6.1 试剂重复性测试高、低浓度的血清样本或质控品，重复测试10次,CV≤10%；2.6.2 校准品重复性用试剂测定1瓶校准品，重复测定10次，CV≤10%；2.6.3 质控品重复性用试剂测定1瓶质控品，重复测定10次，CV≤10%。
5′-核苷酸酶测定试剂盒(过氧化物酶法)产品技术要求莱帮
5′-核苷酸酶测定试剂盒（过氧化物酶法）适用范围：该产品用于体外定量测定人血清中5′-核苷酸的酶活力。
1. 产品型号/规格及其划分说明1.1 产品型号：试剂1（R1）：1×40ml 试剂2（R2）：1×20ml；试剂1（R1）：2×40ml 试剂2（R2）：2×20ml；试剂1（R1）：2×60ml 试剂2（R2）：2×30ml ；2.1外观试剂盒文字符号清晰；试剂1为淡黄色液体；试剂2为无色清澈液体。
2.2净含量试剂净含量不低于标示值。
2.3试剂空白2.3.1试剂空白吸光度用蒸馏水作为样品进行检测，其空白吸光度≤1.0。
2.3.2试剂空白吸光度变化率用蒸馏水作为样品进行检测，其空白吸光度≤0.01△A/min。
2.4分析灵敏度测定指定浓度为62.0U/L时，其吸光度差值的绝对值应≥0.0001△A/min。
2.5线性范围本试剂盒线性（0,300）U/L区间内，其相关系数r≥0.9900；在（0,20]U/L区间内，绝对偏差不超过±3U/L，在（20,300）U/L区间内，相对偏差不超过±15%。
2.6精密度2.6.1重复性用高低两个浓度的血清样本测试同一批号试剂盒，其变异系数（CV）应≤10%。
2.6.2批间差用高低两个浓度的血清样本测试三个不同批号试剂盒，其批间差应≤10%。
2.7准确度比对试验：在线性范围（0,300）U/L内，线性相关系数r不低于0.975，其中（0,20]U/L范围内，绝对偏差不超过±3U/L，（20,300）U/L范围内，相对偏差不超过±15%。
2.8稳定性试剂盒在2-8℃条件可保存12个月，取效期末的试剂盒，检测其试剂空白吸光度，试剂空白吸光度变化率，分析灵敏度，准确度，线性和重复性等，其质量指标应符合2.1，2.2，2.3，2.4，2.5，2.6.1，2.7的要求。
5′-核苷酸酶测定试剂盒(过氧化物酶法)产品技术要求北京科美生物
5′-核苷酸酶测定试剂盒(过氧化物酶法)适用范围：本试剂盒用于体外定量测定人血清或血浆中5′-核苷酸酶 (5′-NT)的活性。
1.1 包装规格1)试剂1：5×40mL，试剂2：5×20mL；2)试剂1：4×40mL，试剂2：4×20mL；3)试剂1：2×40mL，试剂2：2×20mL。
1.2 主要组成成分试剂1：Good’s缓冲液(100mmol/L)，4-氨基安替比林(2mmol/L)，PNP(0.1KU/L)，XOD(0.2KU/L)，POD(0.6KU/L)。
试剂2：Good’s缓冲液(100mmol/L)，5′-IMP(10mmol/L)，EHSPT(2mmol/L)。
2.1 外观2.1.1 试剂1应为无色至淡粉红色溶液，无混浊，无未溶解物；2.1.2 试剂2应为无色至淡粉红色溶液，无混浊，无未溶解物。
2.2 净含量液体试剂的净含量应不少于标示值。
2.3 试剂空白2.3.1 试剂空白吸光度5′-NT试剂盒在波长546nm处测定试剂的吸光度应小于0.5000。
2.3.2 试剂空白吸光度变化率5′-NT试剂盒在波长546nm处测定试剂的空白吸光度变化率应小于0.0100。
2.4 分析灵敏度5′-NT试剂盒测试50U/L 5′-NT时，吸光度变化率应大于0.0100。
2.5 准确度用本公司5′-NT试剂盒和已上市其他公司5′-NT试剂盒同时测定40个临床样本，相关系数(r2)应不小于0.95，在[2，20]U/L区间内，绝对偏差应不超过±2U/L；在(20，120]U/L区间内，相对偏差应不超过±15%。
2.6 精密度2.6.1 重复性重复测试(7±3)U/L和(30±5)U/L的样本，所得结果的变异系数CV应不大于5%。
2.6.2 批间差测试(30±5)U/L的样本，所得结果的批间相对极差应不大于10%。
5‘-核苷酸酶(5’-NT)测定试剂盒(过氧化物酶法)产品技术要求lepu
5‘-核苷酸酶（5’-NT）测定试剂盒（过氧化物酶法）适用范围：本试剂盒用于体外定量测定人血清中5’-核苷酸酶的活性。
1.1 规格试剂盒是由试剂1和试剂2组成的液体双试剂,校准品和质控品均为冻干粉。
规格及装量见表1。
表1 规格及装量1.2 主要组成成分试剂1主要成分：试剂2主要成分：校准品主要组分：质控品主要组分：2.1 净含量应不低于试剂瓶标示装量。
2.2 外观试剂1：无色或淡黄色透明溶液，试剂2：无色或淡黄色透明溶液 ,校准品：白色至浅黄色冻干粉，复溶后为无色至浅黄色透明液体，质控品：白色至浅黄色冻干粉，复溶后为无色至浅黄色透明液体。
外包装完好、无破损，标签完好、字迹清晰。
2.3 试剂空白2.3.1 试剂空白吸光度在546nm（546nm-550nm）处测定试剂空白吸光度，应＜0.6。
2.3.2 试剂空白吸光度变化率试剂空白吸光度变化率△A/min≤0.15。
2.4 分析灵敏度测试80U/L的被测物时，吸光度变化率（ΔA/min）应不低于0.004。
2.5 准确度参照EP9-A2的方法，用比对试剂盒同时测试40例线性区间内的不同浓度的血清样本。
其相关系数（r）不小于0.990。
每个浓度点在（1，15）U/L区间内绝对偏差不超过±2.25U/L；[15，95]U/L区间内相对偏差不超过±15%。
2.6 重复性变异系数（CV）应不超过10%。
2.7 线性2.7.1在(1，95]U/L区间内，线性回归的相关系数r应不低于0.990；2.7.2（1，15）U/L区间内绝对偏差不超过±2.25U/L；[15，95]U/L区间内相对偏差不超过±15%。
2.8 批间差对同一份样品进行重复测定，相对极差＜15%。
2.9校准品批内瓶间差变异系数（CV）应≤10%。
2.10 质控品批内瓶间差变异系数（CV）应≤10%。
2.11溯源性根据GB/T 21415-2008的规定，本试剂盒内校准品溯源至企业工作校准品，与已上市公司试剂盒进行比对赋值。
5‘-核苷酸酶测定试剂盒(过氧化物酶法)产品技术要求九州泰康
5‘-核苷酸酶测定试剂盒(过氧化物酶法)适用范围：用于体外定量测定人血清中5'-核苷酸酶的（5'-NT）活性。
1.1规格试剂Ⅰ（R1）:60ml×3，试剂Ⅱ（R2）:20ml×3；试剂Ⅰ（R1）:60ml×2，试剂Ⅱ（R2）:20ml×2；试剂Ⅰ（R1）:60ml×1，试剂Ⅱ（R2）:20ml×1；试剂Ⅰ（R1）:45ml×3，试剂Ⅱ（R2）:15ml×3；试剂Ⅰ（R1）:90ml×2，试剂Ⅱ（R2）:15ml×4。
1.2主要组成成分2.1 外观试剂盒外观应整洁，文字符号标识清晰；试剂均为澄清溶液，无未溶解物。
2.2 净含量用通用量具测量，液体试剂的净含量应不少于标示值。
2.3试剂空白2.3.1试剂空白吸光度用纯化水作样本，在波长A550nm，比色光径1cm,反应温度37℃下，试剂空白吸光度测定值，应≤0.80A。
2.3.2试剂空白吸光度变化率在波长A550nm,比色光径1cm,反应温度37℃下，试剂空白吸光度变化率（│A/min │）应≤0.100。
2.4分析灵敏度测试浓度80U/L的样本时，吸光度变化值不低于0.002。
2.5 线性在[0.01，200]U/L范围内，线性相关系数r应≥0.990。
在[0.01，50）U/L范围内，线性绝对偏差应不超过±5.0U/L；在[50，200]U/L范围内，线性相对偏差不超过±10%。
2.6 重复性用低、高二个水平的样本检测，检测结果批内变异系数（CV）应不超过10％。
2.7 批间差用三个批号的试剂盒测定同一质控血清，试剂盒批间相对极差≤15%。
2.8 准确度使用美国sigma公司的纯品，进行回收试验，计算回收率，应介于85%-115%之间。
2.9 稳定性试剂在未开瓶状态下，于2℃～8℃可保存12个月。
有效后两个月内进行测定，检测结果应符合2.3、2.4、2.5、2.6、2.8的要求。
5’-核苷酸酶测定试剂盒(过氧化物酶法)产品技术要求北京九强
5’-核苷酸酶测定试剂盒（过氧化物酶法）适用范围：用于体外定量测定人血清或血浆中5’-核苷酸酶的含量。
1.1 包装规格试剂1:1×50mL、试剂2:1×25mL；430测试/盒（试剂1:1×52mL、试剂2:1×26mL）；质控品（1水平，选配）：1×1mL；1×2mL；1×3mL。
1.2 主要组成成分2.1 外观试剂1为无色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；试剂2为浅褐色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；质控品为白色或淡黄色粉末状物质，复溶后为无色至淡黄色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；试剂盒标签标识清晰，外包装完整无损。
2.2 净含量液体试剂的净含量应不少于标称量。
2.3 试剂空白2.3.1 试剂空白吸光度A下测定的空白吸光度应≤0.0800。
546nm2.3.2 试剂空白吸光度变化率下测定的空白吸光度变化率（ΔA/min）应≤ 0.0050。
A546nm2.4 准确度与已上市的产品进行比对试验：在[5.0，300.0] U/L区间内，相关系数r≥0.975，在[5.0，40.0]U/L区间内测定的偏差应不超过±4U/L，在（40.0，300.0]U/L区间内测定的偏差应不超过±10%。
2.5 分析灵敏度样本浓度为80U/L时，其吸光度变化率应不小于0.0100。
2.6 线性在[5.0，300.0] U/L区间内，线性相关系数r≥0.990，在[5.0，40.0]U/L区间内测定的偏差应不超过±4U/L，在（40.0，300.0]U/L区间内测定的偏差应不超过±10%。
2.7 测量精密度2.7.1 重复性使用高、低不同浓度的样本重复测定10次，其测定值的变异系数（CV％）应不大于10％。
2.7.2 批间差随机抽取三批试剂盒的批间相对极差（R）应不大于10%。
5-核苷酸酶(5-NT)测定试剂盒(过氧化物酶法)产品技术要求sainuopu
5-核苷酸酶（5-NT）测定试剂盒（过氧化物酶法）适用范围：用于体外定量测定人体血清中5 ˊ -核苷酸酶的活性。
1.1试剂盒包装规格试剂1：1×15ml，试剂2：1×5ml；试剂1：2×54ml，试剂2：2×18ml；试剂1：3×45ml，试剂2：3×15ml；试剂1：4×54ml，试剂2：4×18ml；试剂1：2×300ml，试剂2：1×200ml；试剂1：1×9L，试剂2：1×3L；试剂1：2×30ml，试剂2：2×10ml；试剂1：1×25ml，试剂2：1×5ml。
质控品（选配，冻干品）：1×1ml。
1.2 试剂盒主要组成成分2.1 外观液体双试剂：试剂1浅黄或红色澄清液体；试剂2无色或浅黄色透明液体。
质控品：冻干品，溶解后为无色至浅黄色透明液体。
2.2 净含量液体试剂的净含量不得低于标示体积。
2.3 试剂空白2.3.1试剂空白吸光度：在37℃、546nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度应不大于0.6。
2.3.2试剂空白吸光度变化率：在37℃、546 nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度变化率（ΔA/min）应不大于0.03。
2.4 分析灵敏度测定活性为40U/L样本时，吸光度变化值（ΔA/min）应不小于0.01。
2.5 线性范围在（0，300）U/L范围内，线性相关系数r不小于0.996。
（30，300）U/L区间内线性相对偏差不大于±10%；在（0，30]U/L区间内线性绝对偏差不大于±3U/L。
2.6 重复性重复测试两份高低浓度的样本，所得结果的变异系数（CV%）应不大于5%。
2.7 批间差不同批号试剂测试同一份样本，测定结果的批间相对极差应不大于10%。
2.8 准确度与已上市产品进行比对试验：在检测浓度（0，300）U/L范围内，与比对系统的相关系数r不小于0.975；在（30，300）U/L区间内与比对系统的相对偏差不大于±10%；（0，30]U/L区间内与比对系统的绝对偏差不大于±3U/L。
5'-核苷酸酶测定试剂盒(过氧化物酶法)说明书
【产品名称】5′核苷酸酶测定试剂盒-5′NT（过氧化物酶法）【包装规格】R1:2×60mL；R2: 2×30mL；R1:1×60mL；R2: 1×30mL。
R1:1×40mL；R2: 1×20mL；R1:1×30mL；R2: 1×15mL。
R1:2×40mL；R2: 2×20mL；R1:3×40mL；R2: 1×60mL。
【预期用途】5'-NT测定试剂盒测定试剂盒临床上用于检测血清中5'-NT 的活性。
一般用于肝胆疾病的鉴别诊断，阻塞性黄疸、肝内占位性病变和浸润性病变时5'-NT活性通常会升高（仅供参考）。
【检验原理】应用5’-NT偶联嘌呤核苷磷酸化酶，黄嘌呤氧化酶和过氧化物酶反应连续监测法。
5’-NT水解次黄苷酸生成次黄苷;再通过偶联PNP的作用，生成次黄嘌呤;后者在XOD 氧化下生成尿酸和过氧化氢;最后在POD的作用下H2O2通过Trinder反应，生成紫红色的有色醌。
通过动态测量有色醌546nm处吸光度上升的速度计算5’-NT活性。
【储存条件及有效期】原包装R试剂在（2-8）℃条件下保存有效期为12个月，失效期见产品标签所示。
开瓶后，如放置于仪器中应在一周内使用，每次使用完毕及时盖上瓶盖。
【适用仪器】本试剂盒适用于奥林帕斯OlympusAU400、日立Hitachi7060、日立Hitachi7180、日立Hitachi7600、贝克曼Beckman Unicel DxC 800、贝克曼Beckman AU680、雅培16000、西门子Dimension xpand。
【样本要求】1、样本种类：标本为血清。
2、样本采集：常规静脉采血约3ml，置于试管中，样本采集后，立即密封送检，严格避免溶血。
3、样本干扰：对反应吸光度有干扰的样本，包括溶血和脂血的样本都可能影响检测结果，遇上述情况建议重新采集。
5′-核苷酸酶测定试剂盒(过氧化物酶法)产品技术要求haifeng
5′-核苷酸酶测定试剂盒（过氧化物酶法）适用范围：本产品适用于体外定量测定人血清中5’-核苷酸酶（5’-NT）的含量。
1.1 产品规格1.2 主要组成成分注：质控品具有批间、赋值特异性，具体值详见靶值单。
2.1 外观2.1.1试剂盒标签标识清晰，外包装完整无破损；2.1.2试剂1为无色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；2.1.3试剂2为浅褐色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；2.1.4质控品：无色或浅黄色干粉，复溶后不得有任何沉淀及絮状悬浮物。
2.2 净含量净含量不低于标示值。
2.3 试剂空白2.3.1空白吸光度在主波长546nm、副波长800nm、37℃条件下：A≤0.2。
2.3.2空白吸光度变化率在主波长546nm、副波长800nm、37℃条件下：试剂空白吸光度变化率≤0.01。
2.4 线性范围(5,200)U/L范围内，相关系数r≥0.990；(5,40]U/L范围内，绝对偏差不超过±6U/L；(40,200)U/L范围内，相对偏差不超过±15%。
2.5 分析灵敏度在产品说明书规定参数设定条件下，测定样本(质控品)浓度为80U/L时，其吸光度变化率不小于0.010/min。
2.6 精密度2.6.1批内重复性CV≤10%2.6.2 批间差相对极差R≤10.0%。
2.7 准确度与已上市产品比对：相关系数（r）应不低于0.990；(5,40]U/L 线性范围内，绝对偏差不超过±6U/L；(40,200)U/L线性范围内，相对偏差不超过±15%。
2.8 质控品2.8.1赋值有效性测定值在质控靶值范围内2.8.2均一性CV≤5%。
2.8.3瓶间差：CV≤5%。
2.9 稳定性未开封试剂2℃~8℃储存，可稳定12个月。
取到效期后2个月内产品进行检测，检测结果应满足2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7、2.8.1的要求。
核苷酸酶检测试剂盒(钼蓝比色法)
5´-核苷酸酶(5´-NT)检测试剂盒(钼蓝比色法)简介：5´-核苷酸酶(5´-NT 或NTP)广泛分布于肝脏、胆道及其他各种组织中，该酶活性变化常与ALP 活性相平行。
但在骨骼系统的疾病中，如肿瘤骨转移、畸形性骨炎、甲亢、佝偻病等，ALP 活力增高，但是5´-NT 活力正常。
Leagene 5´-核苷酸酶(5´-NT)检测试剂盒(钼蓝比色法)先检测ALP 和5´-NT 总的活性，利用镍离子能选择性的抑制5´-NT 的特性，用总活性减去ALP 活性即获得5´-NT 活性。
通过分光光度计检测680nm 处吸光度。
该酶的检测对于研究自由基代谢平衡，抗衰老和肿瘤发病机制具有一定的价值。
该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：操作步骤(仅供参考)：1、 准备样品：① 血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备，可以直接用于本试剂盒的测定，尿液通常也可以直接用于测定，-70℃冻存，用于5´-NT 的检测。
② 细胞或组织样品：取恰当细胞或组织进行裂解，可以采用Leagene Western 及IP细胞裂解液，如果有必要需进行适当匀浆，低速离心取上清，-70℃冻存，用于5´-NT 的检测。
③ 高活性样品：如果样品中含有较高活性的5´-NT ，可以使用 AMP 酸性缓冲液稀释。
④ (选做)样品准备完毕后可以用BCA 蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度，以便于后续计算单位蛋白重量组织或细胞内的5´-NT 含量。
2、 配制对照NT Assay 工作液：取适量的NT Assay buffer Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ，按Ⅰ：Ⅱ：Ⅲ的比例，配制对照NT Assay 工作液，4℃保存备用。
编号 名称TE0263 100T Storage试剂(A): NT Assay buffer Ⅰ 70ml RT 试剂(B): NT Assay buffer Ⅱ 10ml RT 试剂(C): NT Assay buffer Ⅲ 5ml RT 避光 试剂(D): 5´-AMP buffer 10ml 4℃ 试剂(E): AMP 酸性缓冲液 120ml 4℃ 避光 试剂(F): 磷标准(6mmol/L) 1ml 4℃ 试剂(G): 定磷酸性液 180ml4℃ 使用说明书1份3、配制磷标准工作液：取磷标准(6mmol/L)，按磷标准(6mmol/L)：AMP酸性缓冲液=99：1的比例，配制磷标准工作液(0.06mmol/L)。
核苷酸酶测定试剂盒标准操作程序.
5'-核苷酸酶测定标准操作程序1. 摘要5'-核苷酸酶的测定主要是用于肝胆系统疾病的诊断。
2. 适用范围程序适用于日立7600自动生化分析仪检测血清、血浆中5'-核苷酸酶的浓度。
3. 职责使用日立7600自动生化分析仪进行测定5'-核苷酸酶浓度的工作人员要严格按照本SOP 程序进行,室负责人监督管理；本SOP 的改动，可由任一使用本SOP 的工作人员提出，并报经生化室负责人、科主任签字批准生效。
4. 检测方法上海科华生物工程股份有限公司生产的5'-核苷酸酶试剂盒采用的是速率法。
5. 原理5'-次黄苷单磷酸（IMP ）和水在5'-核苷酸酶和嘌呤核苷磷酸化酶的催化作用下反应，生成次黄嘌呤，次黄嘌呤和水和氧气在黄嘌呤氧化酶的催化作用下反应，生成尿酸和过氧化氢（H 2O 2），最后过氧化氢在过氧化物酶的催化下与4-氨基安替比林和TOPS 反应生成红色醌亚胺化合物。
OH TOPS O H O H O O H O H IMP 22222225'-24-42222-1-5'-+−−−→−+++−−−−→−+++−−−−−−−−→−++醌亚胺氨基安替比林尿酸次黄嘌呤磷酸核糖次黄嘌呤）次黄苷单磷酸（过氧化物酶黄嘌呤氧化酶嘌呤核苷磷酸化酶核苷酸酶6. 仪器日立7600自动生化分析仪7. 试剂7.1 试剂来源：上海科华生物工程股份有限公司提供 7.2 试剂瓶内主要成分：R1：Good ’s 缓冲液、嘌呤核苷酸氧化酶、黄嘌呤氧化酶、过氧化物酶、4-氨基安替比林。
R2：Tris 缓冲液、5'-次黄苷单磷酸、TOPS7.3 试剂稳定性：试剂避光保存于2-8℃，若无污染，可稳定至失效期，本试剂有效期为12个月。
试剂不可冰冻。
7.4 试剂准备：试剂为即用式。
8. 标准品和质量控制8.1 校准程序：使用某某公司提供的标准品对自动分析仪进行校准。
按照公司标准品使用要求，并以9g/L氯化钠溶液或去离子水为空白，经校准测定，仪器自动对标准品响应量通过合适的数学模型绘制校准曲线。
5`-核苷酸酶测定试剂盒(过氧化物酶法)产品技术要求艾威德
5`-核苷酸酶测定试剂盒（过氧化物酶法）适用范围：用于体外定量测定人血清中5`-核苷酸酶的活性。
1.1 包装规格a) 试剂1：1×15mL 试剂2：1×5mLb) 试剂1：2×45mL 试剂2：2×15mLc) 试剂1：4×60mL 试剂2：4×20mLd) 试剂1：2×60mL 试剂2：2×20mL1.2 主要组成成分1.2.1试剂1主要组分三羟甲基氨基甲烷缓冲液30 mmol/L 抗坏血酸氧化酶 2 KU/L嘌呤核苷磷酸化酶(PNP) 2.8 KU/L 4-氨基安替吡啉(4-AA) 1 mmol/L 黄嘌呤氧化酶(XOD) 1.5 KU/L 过氧化物酶(POD) 3 KU/L表面活性剂及稳定剂适量1.2.2试剂2主要组分三羟甲基氨基甲烷缓冲液30 mmol/L 3,5-二氯-2-羟基苯磺酸钠(DHBS) 3 mmol/L 5`-次黄嘌呤核苷酸(5`-IMP) 12 mmol/L 表面活性剂及稳定剂适量2.1 外观试剂1应为无色至浅黄色澄清液体。
试剂2应为无色至浅黄色澄清液体。
2.2 试剂装量应不低于试剂瓶标示装量。
2.3 试剂空白2.3.1试剂空白吸光度在546nm波长处测定试剂空白吸光度，应≤0.8。
2.3.2试剂空白吸光度变化率在546nm波长处测定其空白吸光度变化率|△A/min|＜0.08。
2.4 分析灵敏度测定5`-NT含量为10 U/L样本时，其|△A/min|应≥0.002。
2.5 线性范围2.5.1在（0～200）U/L范围内，线性回归的确定系数应不低于0.990；2.5.2测试浓度在（0～20] U/L范围内，线性绝对偏差应不超过±2 U/L；测试浓度在（20～200）U/L范围内，线性相对偏差应不超过±10%。
2.6 测量精密度2.6.1重复性：用两个水平质控血清重复测试其变异系数（CV）应不超过5％。
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简介：
5´-核苷酸酶(5´-NT 或NTP)广泛分布于肝脏、胆道及其他各种组织中，该酶活性变化常与ALP 活性相平行。
但在骨骼系统的疾病中，如肿瘤骨转移、畸形性骨炎、甲亢、佝偻病等，ALP 活力增高，但是5´-NT 活力正常。
Leagene 5´-核苷酸酶(5´-NT)检测试剂盒(钼蓝微板法)先检测ALP 和5´-NT 总的活性，利用镍离子能选择性的抑制5´-NT 的特性，用总活性减去ALP 活性即获得5´-NT 活性。
通过酶标仪检测680nm 处吸光度。
该酶的检测对于研究自由基代谢平衡，抗衰老和肿瘤发病机制具有一定的价值。
该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、 准备样品：
① 血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备，可以直接用于本试剂盒的
测定，尿液通常也可以直接用于测定，-70℃冻存，用于5´-NT 的检测。
② 细胞或组织样品：取恰当细胞或组织进行裂解，可以采用Leagene Western 及IP
细胞裂解液，如果有必要需进行适当匀浆，低速离心取上清，-70℃冻存，用于5´-NT 的检测。
③ 高活性样品：如果样品中含有较高活性的5´-NT ，可以使用AMP 酸性缓冲液稀释。
④ (选做)样品准备完毕后可以用BCA 蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度，以便于后续
计算单位蛋白重量组织或细胞内的5´-NT 含量。
2、 配制对照NT Assay 工作液：取适量的NT Assay buffer Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ，配制对照NT Assay
工作液，4℃保存备用。
3、 配制测定NT Assay 工作液：取适量的NT Assay buffer Ⅰ、Ⅱ，配制测定NT Assay 工
作液，4℃保存备用。
编号 名称
TE0261 100T Storage
试剂(A): NT Assay buffer Ⅰ 15ml RT 试剂(B): NT Assay buffer Ⅱ 2ml RT 试剂(C): NT Assay buffer Ⅲ 1ml RT 避光 试剂(D): 5´-AMP buffer 2ml 4℃ 试剂(F): 磷标准(6mmol/L) 1ml 4℃ 试剂(H): 定磷还原液 3ml
4℃ 避光 使用说明书
1份
4、配制磷标准工作液：取磷标准(6mmol/L)，按磷标准(6mmol/L)：AMP酸性缓冲液
=99：1的比例，配制磷标准工作液(0.06mmol/L)，4℃保存1个月。
5、定磷工作液：按定磷酸性液：定磷还原液=7：1混匀，即为定磷工作液工作液，4℃保
存1个月。
6、酶促反应：按照下表设置对照管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生
气泡。
如果样品中的酶活性过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。
加入物对照管测定管
待测样品0.02 0.02
对照NT Assay工作液(ml) 0.16 －
测定NT Assay工作液(ml) －0.16
混匀，置于水浴保温5min。
5´-AMP buffer(ml) 0.02 0.02
混匀，置于水浴保温30min。
AMP酸性缓冲液(ml) 0.2 0.2
上表中各管充分混匀，离心，取上清液进行显色反应。
7、显色反应：按照下表设置空白管、标准管、对照管、测定管溶液应按照顺序依次加入，
并注意避免产生气泡。
如果样品中的酶活性过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。
加入物空白管标准管对照管测定管蒸馏水(ml) 0.050.05－－
标准工作液(ml) －0.05 －－
对照管上清液(ml) －－0.1 －
测定管上清液(ml) －－－0.1
AMP酸性缓冲液(ml) 0.05－－－
定磷工作液(ml) 0.2 0.2 0.2 0.2
4、混匀，静置，酶标仪检测680nm处吸光度，蒸馏水调零，读取各管吸光度值。
一般应数小时内检测完毕。
计算：
5´-NT活性单位的定义：在37℃条件下1L血清与底物作用，1min催化产生1μmol磷酸(以磷计)为一个5´-NT酶活力单位。
根据酶活性定义，计算出样品中的5´-NT活性。
血清、血浆、尿液中5´-NT活力计算公式：
血清5´-NT活力(U/L)=｛(A测定－A对照)/(A标准－A空白)｝×0.06×1000×N/(30×0.1)
=(A测定－A对照)/(A标准－A空白)×5
组织、细胞中5´-NT活力计算公式：
5´-NT活力(U/mg)=｛(A测定－A对照)/(A标准－A空白)｝×0.06×1000×N/(30×0.1×10-3)/待测样品蛋白浓度(mg/L)
注意事项：
1、本试剂盒亦可用酶标仪进行检测，但检测的样本数相应增多。
如果有条件，尽量采用
分光光度计检测。
2、待测样品中不能含有5´-NT抑制剂，同时需避免反复冻融。
3、用血浆测定有可能引起浑浊。
4、溶血有轻度影响，脂血症不会引起酶活性改变，但可能影响吸光度。
5、与金属螯合的抗凝剂会干扰金属离子的激活作用，因此不宜采用金属螯合抗凝剂。
6、离心管或试管必须清洁，否则感染显色反应。
7、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期：12个月有效。
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