高中生物选修3优质学案9：2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体

动物细胞融合与单克隆抗体

【学习目标】

1、掌握动物细胞融合与植物体细胞杂交的区别和联系。

2、简述动物细胞融合和单克隆抗体制备的过程。

3、了解单克隆抗体在医学实践中的应用，并说其应用实例。

【学习重难点】单克隆抗体的制备

【学习过程】

基础知识梳理(阅读教材，将空白处内容填写上)

（一）动物细胞融合

1、概念：_______或_______动物细胞结合形一个细胞的过程，也称细胞杂交。

2、结果：形成___________。

3、过程：两个或多个细胞__________________________________。

4、意义：克服了_________的不亲和性，成为研究_________、_________、肿瘤和_________培育的重要手段。

（二）单克隆抗体

1、抗体

（1）产生细胞：_________________。

（2）成分：__________。

（3）特点：从__________中分离出的抗体产量低、纯度低、特异性差。

2、单克隆抗体的制备

(1)过程

（2）杂交瘤细胞的特点：____________________、____________________。

（3）单克隆抗体的优点：____________、____________、____________。

（三）单克隆抗体的应用

1、作为诊断试剂，具有__________、__________、__________、__________的优点。

2、用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗_______、可制成___________。

合作探究（结合已学知识，思考以下问题。将不能完成的问题用红笔画出来，并在小组内讨论交流，将交流的结果整理在学案上。）

【探究一】动物细胞的融合

1、植物体细胞杂交和动物细胞融合的主要区别是什么？

2、不灭活的病毒能作为诱导剂吗？

【拓展】植物体细胞杂交和动物细胞融合的区别

【探究二】单克隆抗体制备的原理

1、抗体由什么细胞产生的？

2、一种B淋巴细胞能产生几种抗体？

3、在体外培养的条件下，一个B淋巴细胞有没有可能无限增殖？

4、什么细胞是可以无限增殖的？

5、有什么办法让B淋巴细胞也具有这样的能力？

6、杂交瘤细胞的有什么特点?

小结以下内容：

◆利用_____________产生特异性抗体的功能。

◆利用_____________无限增殖的特性。

◆利用_____________技术将两种细胞融合获得杂交瘤细胞。

◆利用_____________技术大量培养杂交瘤细胞。

【探究三】单克隆抗体制备的过程

1、用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的应该是什么细胞?

2、如果把B淋巴细胞和骨髓瘤细胞放在一起时，会有几种融合方式（类型）？

3、在这过程中进行了几次筛选？分别在哪个步骤进行筛选？整个制备过程要经过两次筛选的目的各是什么？

4、单克隆抗体制备的过程中用到了哪两种技术?

5、单克隆抗体有什么优点?

小结以下内容：

生产单克隆抗体三个“一”

一个诱导细胞融合的新方法:______________________

一个新细胞:_____________________________

一个优势:________________________________

拓展资料杂交瘤细胞的抗体检测及克隆化培养介绍

融合后的细胞经选择性培养基培养后，能存活的细胞就是杂交瘤细胞，但这些杂交瘤细胞并

非都是能分泌所需抗体的细胞，通常用“有限稀释法”来选择。将杂交瘤细胞稀释，用多孔细胞培养板培养，使每孔不超过一个细胞，通过培养让其增殖。然后检测各孔上清液中细胞分泌的抗体，那么上清液可与特定抗原结合的培养孔为阳性孔。阳性孔中的细胞还不能保证是来自单个细胞，挑选阳性孔的细胞继续进行有限稀释，一般需进行3～4次，直至确信每个孔中增殖的细胞为单克隆细胞。该过程即为杂交瘤细胞的克隆化培养。

【探究四】单克隆抗体的应用

1、单克隆抗体的应用有哪些？

2、生物导弹的组成及优点

检测练习

1、基因型为Aa与基因型为Bb的动物体细胞混合，用灭活的仙台病毒处理后，不可能获得下列哪种基因型的细胞( )

A．AAaa B．AaBb C．Aabb D．BBbb

2、动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是( )

①诱导融合的方法完全相同②所用的技术手段不相同③所采用的原理完全相同

④都能形成杂种细胞

A.①②

B.①③

C.②④

D.③④

3、单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在

这种培养基上不能存活增殖的细胞是（）

①淋巴细胞②小鼠骨髓瘤细胞③B淋巴细胞自身融合细胞

④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞⑤杂交瘤细胞

A．②④B．①③⑤C．①②③④D．②③

4、关于单克隆抗体，下列叙述不正确的是( )

A．可以制成诊断盒．用于疾病的珍断

B．可以与药物结合，用于病变细胞的定向治疗

C．可以利用基因工程技术生产

D．可以在生物体内生产，不能体外生产

5、“生物导弹”是指( )

A．单克隆抗体B．带有特定药物的单克隆抗体

C．杂交细胞D．B淋巴细胞

6．1975年科学家首次利用B淋巴细胞杂交瘤技术制备出单克隆抗体。请观察下图，回答问题：

（1）单克隆抗体是指，其特点是。（2）1984年以来，科学家针对如右图所示的单克隆抗体来自，应用于人体，会作为___________产生，加速排斥反应，以及完整的抗体分子的相对分子质量过大，难以穿透肿瘤组织，达不到有效治疗的浓度等问题，制备出可用于肿瘤治疗的相对分子质量小的单克隆抗体。

（3）制备单克隆抗体的B淋巴细胞一般从_______（器官）

中采集。从下表看，用于筛选杂交瘤细胞的是特定的培养基。

（4）大量制备单克隆抗体的方法主要有两种：

①体外培养法，可获得10μg/mL的抗体；②动物体内诱生法可获得5~20mg/mL的抗体。你选择的方法及原因是。

7、下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。