最新课题微生物的实验室培养ppt课件
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微生物的实验室培养ppt课件
选择培养基
加入青霉素的培养基 不加氮源的无氮培养基
分离酵母菌、霉菌等真菌 分离金黄色葡萄球菌 分离固氮菌 分离自养型微生物
加入高浓度食盐的培养基
不加含碳有机物的无碳培养基
（三）培养基
固体培养基 （1）按物理状态分： 半固体培养基 液体培养基 （2）按功能分： （3）按成分分： 选择培养基 鉴别培养基 天然培养基 合成培养基
3.常用的消毒与灭菌的方法
3.常用的消毒与灭菌的方法 消毒的方法： ①煮沸消毒法：100℃煮沸5-6min。 ②巴氏消毒法：70-75℃下煮30min或 80℃下煮15min。 ③化学药剂消毒法：用75%酒精、新洁 尔灭等进行皮肤消毒；氯气消毒水源。
④紫外线消毒。
消毒的方法 （1）日常生活经常用到的是 煮沸 消毒 法； （2）对一些不耐高温的液体，则使用 巴 氏 消毒法（例如牛奶） ； （3）对接种室、接种箱或超净工作台首 先喷洒 石炭酸或煤酚皂 等溶液以增强消毒 效果，然后使用 紫外线 进行物理消毒。 （4）实验操作者的双手使用 酒精 进行消 毒； （5）饮水水源用 氯气 进行消毒。
2.细菌的结构
特殊结构（有时 包括芽孢）
其成分为肽聚糖
拟核，大型环状DNA
质粒(小型环状DNA，含抗 生素，抗药性，固氮基因)
有些细菌在一 定的条件下，细胞 里面形成一个椭圆 形的休眠体，叫做 芽孢。芽孢的壁很 厚，对干旱、低温、 高温等恶劣的环境 有很强的抵抗力。 （抗逆性极强） 注：不是繁殖体
（四）无菌技术
1.无菌技术的概念 无菌操作泛指在培养微生物的操 作中，所有防止杂菌污染的方法。 成功地培养微生物的关键。
2.消毒与灭菌的概念及两者的区别
微生物的实验室培养公开课ppt课件
微生物的实验室培养公 开课ppt课件
2024/1/30
1
contents
目录
2024/1/30
• 微生物实验室培养概述 • 微生物培养基制备 • 微生物接种与培养技术 • 微生物分离纯化技术 • 微生物鉴定与保藏技术 • 实验安全与防护知识
2
微生物实验室培养
01
概述
20义
法生长的情况。
2024/1/30
17
其他分离纯化方法
单细胞挑取法
利用显微操作技术，从混杂的微生物群体中挑取单个细胞进行培养 ，获得纯培养物。
选择培养基法
利用微生物对营养物质或生长条件的需求差异，配制特定的选择培 养基，使目标微生物能够生长而杂菌受到抑制，达到分离纯化的目 的。
膜过滤法
利用微孔滤膜过滤微生物悬液，将微生物截留在滤膜上，然后将滤膜 转移到培养基表面进行培养，获得纯培养物。
2024/1/30
27
THANKS.
2024/1/30
28
20
生理生化鉴定方法
生长条件测定
测定微生物在不同温度、 pH值、氧气条件下的生长 情况，了解其生理特性。
2024/1/30
代谢产物分析
通过分析微生物的代谢产 物，如酸、碱、气体等， 推断其代谢途径和类型。
酶反应试验
利用特定的酶反应试验， 检测微生物体内酶的活性 和种类，进一步确定其分 类地位。
21
微生物的生长需要一定的营养物质，包括碳源、氮源、无机盐等。需 要根据微生物的需求设置合适的营养条件。
13
生长曲线测定与分析
生长曲线的测定
通过定期测量微生物的数量或生物量 ，可以绘制出生长曲线。常用的测量 方法包括显微镜计数法、比浊法等。
2024/1/30
1
contents
目录
2024/1/30
• 微生物实验室培养概述 • 微生物培养基制备 • 微生物接种与培养技术 • 微生物分离纯化技术 • 微生物鉴定与保藏技术 • 实验安全与防护知识
2
微生物实验室培养
01
概述
20义
法生长的情况。
2024/1/30
17
其他分离纯化方法
单细胞挑取法
利用显微操作技术，从混杂的微生物群体中挑取单个细胞进行培养 ，获得纯培养物。
选择培养基法
利用微生物对营养物质或生长条件的需求差异，配制特定的选择培 养基，使目标微生物能够生长而杂菌受到抑制，达到分离纯化的目 的。
膜过滤法
利用微孔滤膜过滤微生物悬液，将微生物截留在滤膜上，然后将滤膜 转移到培养基表面进行培养，获得纯培养物。
2024/1/30
27
THANKS.
2024/1/30
28
20
生理生化鉴定方法
生长条件测定
测定微生物在不同温度、 pH值、氧气条件下的生长 情况，了解其生理特性。
2024/1/30
代谢产物分析
通过分析微生物的代谢产 物，如酸、碱、气体等， 推断其代谢途径和类型。
酶反应试验
利用特定的酶反应试验， 检测微生物体内酶的活性 和种类，进一步确定其分 类地位。
21
微生物的生长需要一定的营养物质，包括碳源、氮源、无机盐等。需 要根据微生物的需求设置合适的营养条件。
13
生长曲线测定与分析
生长曲线的测定
通过定期测量微生物的数量或生物量 ，可以绘制出生长曲线。常用的测量 方法包括显微镜计数法、比浊法等。
微生物的实验室培养公开课ppt
培养基选择原则
根据微生物的营养需求、生长条件 以及实验目的等因素，选择合适的 培养基类型和配方。
无菌操作技术要点
无菌操作概念与重要性
无菌操作是指在无菌室或超净工作台上进行的，防止微生 物污染的实验操作，对于保证实验结果的准确性和可靠性 至关重要。
无菌操作技术要点
包括实验前准备、实验过程中保持无菌、实验后处理等方 面，如实验器具的灭菌处理、操作过程中的避免交叉污染 等。
染等。
污染识别方法
02
掌握细胞污染的识别方法，如观察培养基颜色变化、细胞形态
变化等。
污染处理策略
03
学会针对不同污染类型采取相应的处理策略，如更换培养基、
使用抗生素等。
细胞在微生物研究中的应用实例
病原菌研究
利用细胞培养技术研究病原 菌的生长特性、毒力因子等 ，为疾病防治提供理论依据 。
抗病毒药物筛选
通过细胞培养技术建立病毒 感染模型，筛选具有抗病毒 活性的药物。
疫苗研发
利用细胞培养技术生产疫苗 ，提高疫苗的安全性和有效 性。
基因工程研究
将外源基因导入细胞中表达 ，研究基因功能及调控机制 。
06
实验设计与数据分析
实验设计原则和方法
对照原则
设置对照组和实验组，以消除非处理因素对实验 结果的影响。
微生物在自然界中的作用
微生物在自然界中扮演着重要角色， 参与物质循环、能量流动等生态过程 。
微生物分类
根据形态、结构、生理生化特性等， 微生物可分为细菌、真菌、病毒、原 生动物等大类。
实验室常用设备介绍
显微镜
用于观察微生物形态、 结构等特征的仪器，包 括光学显微镜和电子显
微镜等。
培养箱
提供稳定的温度、湿度 等环境条件，用于微生
根据微生物的营养需求、生长条件 以及实验目的等因素，选择合适的 培养基类型和配方。
无菌操作技术要点
无菌操作概念与重要性
无菌操作是指在无菌室或超净工作台上进行的，防止微生 物污染的实验操作，对于保证实验结果的准确性和可靠性 至关重要。
无菌操作技术要点
包括实验前准备、实验过程中保持无菌、实验后处理等方 面，如实验器具的灭菌处理、操作过程中的避免交叉污染 等。
染等。
污染识别方法
02
掌握细胞污染的识别方法，如观察培养基颜色变化、细胞形态
变化等。
污染处理策略
03
学会针对不同污染类型采取相应的处理策略，如更换培养基、
使用抗生素等。
细胞在微生物研究中的应用实例
病原菌研究
利用细胞培养技术研究病原 菌的生长特性、毒力因子等 ，为疾病防治提供理论依据 。
抗病毒药物筛选
通过细胞培养技术建立病毒 感染模型，筛选具有抗病毒 活性的药物。
疫苗研发
利用细胞培养技术生产疫苗 ，提高疫苗的安全性和有效 性。
基因工程研究
将外源基因导入细胞中表达 ，研究基因功能及调控机制 。
06
实验设计与数据分析
实验设计原则和方法
对照原则
设置对照组和实验组，以消除非处理因素对实验 结果的影响。
微生物在自然界中的作用
微生物在自然界中扮演着重要角色， 参与物质循环、能量流动等生态过程 。
微生物分类
根据形态、结构、生理生化特性等， 微生物可分为细菌、真菌、病毒、原 生动物等大类。
实验室常用设备介绍
显微镜
用于观察微生物形态、 结构等特征的仪器，包 括光学显微镜和电子显
微镜等。
培养箱
提供稳定的温度、湿度 等环境条件，用于微生
微生物的实验室培养(课件)
详细描述
分批培养是将微生物接种到一定量的培养基中，在一 定时间内完成生长繁殖的过程。该方法可以控制微生 物的生长环境，便于观察和控制。连续培养则是让微 生物在恒定条件下持续生长繁殖的方法，通过不断地 补充新鲜的培养基和排除老的培养基，使微生物在恒 定的条件下快速生长繁殖。该方法适用于大规模工业 生产，可以提高生产效率和产品质量。
微生物培养
在适宜的温度、湿度、 pH等条件下，将纯化 的微生物菌株接种到培 养基中，让其生长繁殖 。根据需要，可以选择 不同的培养方式和培养
基类型。
微生物观察与检测
在培养过程中，定期观 察微生物的生长情况， 记录生长曲线、菌落形 态等数据，并进行相关 的检测和鉴定，如生化 反应、抗原抗体反应等
。
微生物保藏与利用
微生物的生长需求。
培养基的pH值
培养基的pH值对微生物的生长具 有重要影响，不同微生物对pH值 的要求不同，因此需根据实际情况 调整。
培养基的灭菌
灭菌是培养基制备的重要环节，通 过高温或高压灭菌，消除培养基中 的杂菌，保证微生物纯种培养。
实验室设备与器材
显微镜
观察微生物形态和生长情况，是微生物实验 室的基本设备。
实验室安全防护措施
实验室应配备必要的安全设施， 如灭火器、急救箱、洗眼器等，
并定期进行检查和维护。
实验室应保持通风良好，确保空 气流通，以降低感染和污染的风
险。
实验室应定期进行消毒和清洁， 确保实验环境的卫生和安全。
实验废弃物的处理与环保要求
实验废弃物应按照规定进行分类和处 理，避免对环境和人类健康造成危害 。
培养获得的微生物可以 用于后续的研究和应用 ，如生产生物制品、进 行疾病诊断和治疗等。 同时，对于有价值的菌 种可以进行长期保藏，
2-1 微生物的实验室培养 (共22张PPT)
（二）无菌技术
自学课本P15-P16页，完成导 学案1、2、3部分内容
（二）无菌技术 1.无菌技术的关键 2.无菌技术的注意事项 3.消毒与灭菌的概念及两者的区别 4.常用的消毒与灭菌的方法
你这节课学到了些 什么呢？ 小结一下！
课后作业： 完全解读：智能提升训练
碳源 提供碳元素，用来构成细胞结构和一些代
谢产物，有些是异养微生物的能源物质
无机碳源：CO2、NaHCO3、CaCO3等 有机碳源：糖类、脂肪、牛肉膏、蛋白胨等
氮源 提供氮元素，用来合成蛋白质、核酸以及
含氮的代谢产物
无机碳源：N2、NH3、硝酸盐、等 有机氮源：尿素、牛肉膏、蛋白胨
牛肉膏(牛肉)
一、基础知识
（一）培养基：
自学课本P14页及P15页1段，自学 完成导学案1、2部分的学习内容
1、培养基（培养液）：是由人工方法配制而成 的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养基质。
2、微生物的营养 营养物质的种类
讨论：你知道 这些成分能构 成哪些物质吗？
➢碳源、氮源、水和无机盐
CO2能作为碳源吗？ N2能作为氮源吗？
（1）根据物理性质分 固体培养基 半固体培养基
需加入凝固剂， 如琼脂
液体培养基
主要用于工业生产
主要用于微生物的 分离、计数等
主要用于观察微 生物的运动、分 类、计数
微生物的菌落
单个微生物在固体培养基上大量繁殖时，会形成一个 肉眼可见的、具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。 (一种微生物形成一种菌落。)
–选择培养基——允许特定种类的微生物生长， 同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基 。
选择培养基
• 加入青霉素的培养基 细菌不生长，酵母菌、霉菌等真菌能生长
微生物的实验室培养(课件)
无机盐种类
Cncnc-micro
微生物生长不可缺少的 微量有机物质叫生长因子。 维生素 氨基酸 碱 基
Cncnc-micro
生长因子
有的微生物自己不能合成维生素，需要外加，主要是B族维生素、硫胺素、叶酸、泛酸、核黄素等，如生产味精需加生物素（是B族中的一种即VH）。
四大营养类型
C、H、O、N、P、S
微生物主要的化学元素组成：
4、微生物的五种营养要素
碳源 （carbon source）
氮源（nitrogen source）
生长因子（growth factor）
无机盐（mineral salts）
水（wahtor）
Cncnc-micro
凡能为微生物提供生长繁殖所需碳元素的营养物质都称为碳源 。
维生素
Cncnc-micro
有些微生物自己不能合成某种氨基酸，必须给予补充，如赖AA发酵所用的黄色短杆菌不能合成环丝AA，为环丝AA缺陷型菌株，在培养基中必须添加含环丝AA的氮源。如豆饼水解液或毛发水解液等。
氨基酸
Cncnc-micro
嘧啶和嘌呤是核酸和辅酶的重要组分，是许多微生物必须的生长因素。 有些微生物不仅不能合成嘧啶和嘌呤，而且不能将补充的嘧啶和嘌呤结合在核苷酸上，还必须供给核苷酸，有的菌需补充卟啉或其衍生物，还有的菌需供给（低碳）脂肪酸等。
天然培养基有血清、血浆、和组织提取液（如鸡胚和牛胚浸液）。
优点：营养成分丰富，培养效果好
天然培养基：
2.营养
碳源 氮源 水 无机盐
另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质,例如:生长因子(即细菌生长必需，而自身不能合成的化合物,如维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。
Cncnc-micro
微生物生长不可缺少的 微量有机物质叫生长因子。 维生素 氨基酸 碱 基
Cncnc-micro
生长因子
有的微生物自己不能合成维生素，需要外加，主要是B族维生素、硫胺素、叶酸、泛酸、核黄素等，如生产味精需加生物素（是B族中的一种即VH）。
四大营养类型
C、H、O、N、P、S
微生物主要的化学元素组成：
4、微生物的五种营养要素
碳源 （carbon source）
氮源（nitrogen source）
生长因子（growth factor）
无机盐（mineral salts）
水（wahtor）
Cncnc-micro
凡能为微生物提供生长繁殖所需碳元素的营养物质都称为碳源 。
维生素
Cncnc-micro
有些微生物自己不能合成某种氨基酸，必须给予补充，如赖AA发酵所用的黄色短杆菌不能合成环丝AA，为环丝AA缺陷型菌株，在培养基中必须添加含环丝AA的氮源。如豆饼水解液或毛发水解液等。
氨基酸
Cncnc-micro
嘧啶和嘌呤是核酸和辅酶的重要组分，是许多微生物必须的生长因素。 有些微生物不仅不能合成嘧啶和嘌呤，而且不能将补充的嘧啶和嘌呤结合在核苷酸上，还必须供给核苷酸，有的菌需补充卟啉或其衍生物，还有的菌需供给（低碳）脂肪酸等。
天然培养基有血清、血浆、和组织提取液（如鸡胚和牛胚浸液）。
优点：营养成分丰富，培养效果好
天然培养基：
2.营养
碳源 氮源 水 无机盐
另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质,例如:生长因子(即细菌生长必需，而自身不能合成的化合物,如维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。
微生物的实验室培养 上课用(共47张PPT)
菌落：
单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖 时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定 形态结构的子细胞群体，叫做菌落。
菌落是鉴定菌种的重要依据。
菌落
细菌的菌落特征因 种而异
菌落
霉菌的菌落 特征
因种而异
接种环
接种针
1.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼 烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？ 为什么？
涂布器
涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。 结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想 一想，第2步应如何进行无菌操作？
应从操作的各个细节保证“无菌”。 例如，酒精灯与培养皿的距离要合适、吸 管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒 精灯火焰周围等等。
• 真菌pH为：。
3、培养基的营养构成
不管哪种培养基，一般都含有： 水、碳源、和氮源、无机盐等
另外还需要满足微生物生长对pH、特殊 营养物质,例如:生长因子(即细菌生长必 需，而自身不能合成的化合物,如维生素 、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧气、 二氧化碳、渗透压等的要求。
碳源、氮源、生长因子的比较
2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后 再进行划线？
答：以免接种环温度太高，杀死菌种。
3.在作第二次以及其后的划线操作时，为什么
总是从上一次划线的末端开始划线？
答：划线后，线条末端细菌的数目比线条起 始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能 使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少， 最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。
配制特点
主要应用
固体培养基 物理性质 半固体培养基
加入琼脂较多 加入琼脂较少
菌种分离,鉴定, 计数
菌种保存
化学组成
液体培养基 合成培养基 天然培养基
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灼烧接种环，待其冷却后，从
第一区域划线的__末__端___开始
往第二区域内划线。重复以上 操作，在三、四、五区域内划 线。注意不要将最后一区的划 线与第一区相连。
.将已_冷__却___的接种环伸
入菌液中蘸取一环菌液
将平板_倒__置__放
入培养箱中培养。
左手将皿盖打开一条缝隙，右手
将沾有菌种的接种环迅速伸入平
①平板划线法:通过接种环在琼脂固体培养基表面连 续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基 的表面.在数次划线后,可以分离到由一个细胞繁殖而 来的肉眼可见的子细胞群体,这就是菌落.
将接种环放在火
焰上灼烧，直到
接种环__烧__红___
在__火__焰___旁冷
却接种环，并 打开棉塞
将试管口通过火焰
（三）是否进行了及时细致的观察与记录
培养12h与24h后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不 同
菌种的保藏
1、临时保藏：接种到固 体斜面培养基，菌落长 成后置于4℃冰箱保存。
2、长期保存：甘油冷冻 管藏法
2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进 行划线？
答：以免接种环温度太高，杀死菌种。
3.在作第二次以及其后的划线操作时，为什么 总是从上一次划线的末端开始划线？
答：划线后，线条末端细菌的数目比线条起始 处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使 细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少， 最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。
答：操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种 环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线 前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接 种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环 上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通 过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目 逐渐减少，以便得到菌落。划线结束后灼烧接 种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免 细菌污染环境和感染操作者。
将沾有少量酒 精的涂布器在 火焰上引燃
用涂布器将菌液均匀地 涂布在培养基表面。涂 布时可转动培养皿，使 涂布均匀
结果分析与评价
（一）培养基的制作是否合格
如果未接种的培养基在恒温箱中保温1～2d后无菌落生 长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。
（二）接种操作是否符合无菌要求
如果培养基上生长的菌落的颜色、形状大小基本一致， 并符合大肠杆菌菌落的特点，则说明接种操作是符合要 求的；如果培养基上出现了其他菌落，则说明接种过程 中，无菌操作还未达到要求，需要分析原因，再次练习。
课题微生物的实验室培养ppt课 件
一、培养基的概念、种类及营养要素 1．概念：人们按照微生物对营_养_物__质_______ 的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养 基质。 来防止实验室的培养物被其他外 来微生物污染外，还有什么目的？
答：无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。
2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。 如果需要，请选择合适的方法。 （1） 培养细菌用的培养基与培养皿 （2） 玻棒、试管、烧瓶和吸管 （3） 实验操作者的双手
答：（1）、（2）需要灭菌；（3）需要消毒。
三、实验操作
1、制备培养基
计算称量溶化灭菌倒平板
（二）纯化大肠杆菌
接种方法有：平板划线法和稀释涂布平板法
②稀释涂布平板法:是指将菌液进行一系列的梯 度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼 脂固体培养基的表面，进行培养。
在稀释度足够的菌液里，聚集在一起的微生物 将分散成单个的细胞，从而能在培养基表面形 成单个菌落。
取少量稀释液滴 加到培养基表面
灼烧 待酒精燃尽后 冷却8～10s
涂布
将涂布器浸 在盛有酒精 的烧杯中
板内，划__三___至__五___条平行线，
盖上皿盖。注意不要划破培养基。
划线分离法注意事项:
1.接种环只蘸一次菌液,但要在培养基不同位置连续划线多次. 2.划线首尾不能相接 3.划线后,培养皿倒置培养
其他画线分离图：
讨论：
1.为什么在接种前以及每次划线之前都要灼烧 接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接 种环吗？为什么？