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课题微生物的实验室培养ppt课 件
一、培养基的概念、种类及营养要素 1．概念：人们按照微生物对营_养_物__质_______ 的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养 基质。 2．种类
思考：
1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外 来微生物污染外，还有什么目的？
答：无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。
①平板划线法:通过接种环在琼脂固体培养基表面连 续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基 的表面.在数次划线后,可以分离到由一个细胞繁殖而 来的肉眼可见的子细胞群体,这就是菌落.
将接种环放在火
焰上灼烧，直到
接种环__烧__红___
在__火__wenku.baidu.com___旁冷
却接种环，并 打开棉塞
将试管口通过火焰
2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进 行划线？
答：以免接种环温度太高，杀死菌种。
3.在作第二次以及其后的划线操作时，为什么 总是从上一次划线的末端开始划线？
答：划线后，线条末端细菌的数目比线条起始 处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使 细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少， 最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。
2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。 如果需要，请选择合适的方法。 （1） 培养细菌用的培养基与培养皿 （2） 玻棒、试管、烧瓶和吸管 （3） 实验操作者的双手
答：（1）、（2）需要灭菌；（3）需要消毒。
三、实验操作
1、制备培养基
计算称量溶化灭菌倒平板
（二）纯化大肠杆菌
接种方法有：平板划线法和稀释涂布平板法
（三）是否进行了及时细致的观察与记录
培养12h与24h后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不 同
菌种的保藏
1、临时保藏：接种到固 体斜面培养基，菌落长 成后置于4℃冰箱保存。
2、长期保存：甘油冷冻 管藏法
将沾有少量酒 精的涂布器在 火焰上引燃
用涂布器将菌液均匀地 涂布在培养基表面。涂 布时可转动培养皿，使 涂布均匀
结果分析与评价
（一）培养基的制作是否合格
如果未接种的培养基在恒温箱中保温1～2d后无菌落生 长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。
（二）接种操作是否符合无菌要求
如果培养基上生长的菌落的颜色、形状大小基本一致， 并符合大肠杆菌菌落的特点，则说明接种操作是符合要 求的；如果培养基上出现了其他菌落，则说明接种过程 中，无菌操作还未达到要求，需要分析原因，再次练习。
板内，划__三___至__五___条平行线，
盖上皿盖。注意不要划破培养基。
划线分离法注意事项:
1.接种环只蘸一次菌液,但要在培养基不同位置连续划线多次. 2.划线首尾不能相接 3.划线后,培养皿倒置培养
其他画线分离图：
讨论：
1.为什么在接种前以及每次划线之前都要灼烧 接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接 种环吗？为什么？
②稀释涂布平板法:是指将菌液进行一系列的梯 度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼 脂固体培养基的表面，进行培养。
在稀释度足够的菌液里，聚集在一起的微生物 将分散成单个的细胞，从而能在培养基表面形 成单个菌落。
取少量稀释液滴 加到培养基表面
灼烧 待酒精燃尽后 冷却8～10s
涂布
将涂布器浸 在盛有酒精 的烧杯中
灼烧接种环，待其冷却后，从
第一区域划线的__末__端___开始
往第二区域内划线。重复以上 操作，在三、四、五区域内划 线。注意不要将最后一区的划 线与第一区相连。
.将已_冷__却___的接种环伸
入菌液中蘸取一环菌液
将平板_倒__置__放
入培养箱中培养。
左手将皿盖打开一条缝隙，右手
将沾有菌种的接种环迅速伸入平
答：操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种 环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线 前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接 种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环 上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通 过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目 逐渐减少，以便得到菌落。划线结束后灼烧接 种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免 细菌污染环境和感染操作者。
一、培养基的概念、种类及营养要素 1．概念：人们按照微生物对营_养_物__质_______ 的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养 基质。 2．种类
思考：
1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外 来微生物污染外，还有什么目的？
答：无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。
①平板划线法:通过接种环在琼脂固体培养基表面连 续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基 的表面.在数次划线后,可以分离到由一个细胞繁殖而 来的肉眼可见的子细胞群体,这就是菌落.
将接种环放在火
焰上灼烧，直到
接种环__烧__红___
在__火__wenku.baidu.com___旁冷
却接种环，并 打开棉塞
将试管口通过火焰
2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进 行划线？
答：以免接种环温度太高，杀死菌种。
3.在作第二次以及其后的划线操作时，为什么 总是从上一次划线的末端开始划线？
答：划线后，线条末端细菌的数目比线条起始 处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使 细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少， 最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。
2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。 如果需要，请选择合适的方法。 （1） 培养细菌用的培养基与培养皿 （2） 玻棒、试管、烧瓶和吸管 （3） 实验操作者的双手
答：（1）、（2）需要灭菌；（3）需要消毒。
三、实验操作
1、制备培养基
计算称量溶化灭菌倒平板
（二）纯化大肠杆菌
接种方法有：平板划线法和稀释涂布平板法
（三）是否进行了及时细致的观察与记录
培养12h与24h后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不 同
菌种的保藏
1、临时保藏：接种到固 体斜面培养基，菌落长 成后置于4℃冰箱保存。
2、长期保存：甘油冷冻 管藏法
将沾有少量酒 精的涂布器在 火焰上引燃
用涂布器将菌液均匀地 涂布在培养基表面。涂 布时可转动培养皿，使 涂布均匀
结果分析与评价
（一）培养基的制作是否合格
如果未接种的培养基在恒温箱中保温1～2d后无菌落生 长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。
（二）接种操作是否符合无菌要求
如果培养基上生长的菌落的颜色、形状大小基本一致， 并符合大肠杆菌菌落的特点，则说明接种操作是符合要 求的；如果培养基上出现了其他菌落，则说明接种过程 中，无菌操作还未达到要求，需要分析原因，再次练习。
板内，划__三___至__五___条平行线，
盖上皿盖。注意不要划破培养基。
划线分离法注意事项:
1.接种环只蘸一次菌液,但要在培养基不同位置连续划线多次. 2.划线首尾不能相接 3.划线后,培养皿倒置培养
其他画线分离图：
讨论：
1.为什么在接种前以及每次划线之前都要灼烧 接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接 种环吗？为什么？
②稀释涂布平板法:是指将菌液进行一系列的梯 度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼 脂固体培养基的表面，进行培养。
在稀释度足够的菌液里，聚集在一起的微生物 将分散成单个的细胞，从而能在培养基表面形 成单个菌落。
取少量稀释液滴 加到培养基表面
灼烧 待酒精燃尽后 冷却8～10s
涂布
将涂布器浸 在盛有酒精 的烧杯中
灼烧接种环，待其冷却后，从
第一区域划线的__末__端___开始
往第二区域内划线。重复以上 操作，在三、四、五区域内划 线。注意不要将最后一区的划 线与第一区相连。
.将已_冷__却___的接种环伸
入菌液中蘸取一环菌液
将平板_倒__置__放
入培养箱中培养。
左手将皿盖打开一条缝隙，右手
将沾有菌种的接种环迅速伸入平
答：操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种 环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线 前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接 种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环 上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通 过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目 逐渐减少，以便得到菌落。划线结束后灼烧接 种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免 细菌污染环境和感染操作者。