第十三章莨菪烷类抗胆碱药物的分析
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第十三章 莨菪烷类抗胆碱药物的分析 (2)
第四节、含量测定
一、酸性染料比色法 原理:
在适当pH溶液中,有机碱（B）可以与氢离子成盐, 酸性染料（ HIn）可解离成阴离子 , 阴离子可与有机碱 盐阳离子定量地结合成有色离子对，而进入到有机相。 通过测定有机溶剂提取液的吸收度；或将有机溶剂提 取液酸化或碱化，使与有机碱结合的酸性染料释放出 来，测定染料的吸收度来测得有机碱的含量。
剂有氯仿、二氯甲烷、二氯乙烯、四氯化碳等。
(4)水分的影响：严防水分混入有机溶剂中，水相中有色酸性
染料，而影响测定结果；水分的混入使氯仿混浊，而影响比色
测定。一般加入脱水剂，或滤纸过滤的方法，除去混入的水分。
（5）酸性染料中的有色杂质：将缓冲液与酸性染料的混合
液先用有机溶剂萃取弃去。
二、非水溶液滴定法
2、酸性染料的选择 要求：常用酸性染料有溴麝香草酚蓝、甲基橙、 溴甲酚绿等。
（1）能与有机碱定量的结合 （2）生成的离子对在有机相中溶解度大 （3）染料自身在有机溶剂中不溶或很少溶解 （4）在最大波长处有较高的吸收度。
(3) 有机溶剂的选择：有机碱药物应对离子对提取率高，不
与水混溶，或能与离子对形成氢键的有机溶剂。常用的有机溶
乎不溶。加氯试液，再加氯 仿，氯仿层显黄色或红棕色
五、光谱鉴别法
紫外光谱法或红外光谱法
六、色谱法
高效液相色谱法或薄层色谱法，对照品对照。薄层固定相
需碱化，HPLC法流动相多离子对法。
第三节、特殊杂质与检查
一、氢溴酸东莨菪碱中有关物质的检查 1.酸度 2.易氧化物 3.其他生物碱 二、硫酸阿托品中有关物质的检查
硫酸盐在冰醋酸中可用高氯酸直接滴定，但只能
滴定至硫酸氢盐，
(BH+)2· SO4 ＋HClO4≒ BH+ClO4-+ BH+ HSO4反应摩尔比为1:1
13莨菪烷类抗胆碱药物分析.pptx
展开，晾干，喷以稀碘化铋钾试液-碘化钾
碘试液（1∶1）。供试品溶液所显主斑点位
置和颜色，应与对照品溶液的主斑点相同。
六、硫酸盐和溴化物的反应 氢溴酸盐：
1）硝酸酸性条件下与硝酸银生成淡黄色沉淀。 2）滴加氯试液，溴即游离，可被氯仿萃取，显
黄色或红棕色。
第三节 特殊杂质与检查
氢溴酸东莨菪碱中特殊杂质检查
莨菪醇
莨菪酸
2. 碱性 五元脂环含有叔胺氮原子。
3. 旋光性 阿托品外消旋化，无旋光性。氢溴酸东
莨菪碱为左旋体。
4.紫外吸收
第二节 鉴别反应
1 托烷生物碱的鉴别反应（Vitali反应）
鉴别 反应
2 与硫酸-重铬酸钾的反应 3 与生物碱显色剂和沉淀剂的反应 4 光谱鉴别法
5 色谱法
6 盐的反应
第二节 鉴别反应
第三节 特殊杂质与检查
酸度
强酸弱碱盐：取本品0.50g ，加水10ml溶解后，依法测 定（附录Ⅵ H），pH值应 为4.0～5.5。
阿扑东莨菪碱、其他 含有不饱和双键的有 机物质
氢溴酸东莨菪碱 中特殊杂质检查
－阿扑阿托品、颠茄碱
取本品0.15g,加水 易氧 5ml溶解后，在15～ 化物
20℃加高锰酸钾滴定
(BH+·In-)水相
有色离子对
(BH+·In-)有机相
UV
第四节 含量测定
• 1.离子对 2.染料空白（对照品平行测定，空白吸收可被 扣除） 3.阿托品（水溶液在420nm附近无吸收）
第四节 含量测定
酸性染料的选择及 其浓度
B
水相最佳pH值 A
的选择
酸性染料比 色法的影响
因素
C 有机试剂的选择
第十三章 莨菪烷类抗胆碱药物的分析
第三节 特殊杂质与检查
(一）氢溴酸东莨菪碱中特殊杂质检查
洋金花粗粉 乙醇/渗漉 渗漉液 减压蒸馏 浸膏 H2SO4/提取
酸性提取液 Na2CO3, CHCl3/提取 总生物碱 Na2CO3, CHCl3/分离 东莨菪碱 HBr/成盐
氢溴酸东莨菪碱（粗品）75% C2H5OH/精制 成品
根据其制备工艺，本 品可通过酸度、其它 生物碱、和易氧化物
质检查进行控制
1. 酸度 东莨菪碱碱性很弱，对石蕊试纸几乎不显碱性反应。
氢溴酸东莨菪碱为强酸弱碱形成的盐，通过其5%水溶
液的pH值为4.0～5.5，来控制本品中的酸性杂质。
2. 其他生物碱 本品水溶液+氨试液
不混浊 合格 混浊 存在其他生物碱
+KOH试液
混浊（东莨菪碱） 瞬间消失
3. 易氧化物 主要是检查本品在生产中可能引入的阿扑阿托品及 其它含有双键的有机物质，可使KMnO4溶液褪色。
（二）硫酸阿托品中有关物质的检查
硫酸阿托品为消旋体，无旋光性，而莨菪碱为左 旋体，可以利用旋光性对莨菪碱杂质进行检查
ChP用HPLC法检查其中有关物质，通过峰面积 的比值及保留时间来控制杂质限度
第四节 含量测定
莨菪烷类抗胆碱药物药理活性较强、临床使用剂 量较少，因此测定方法要专属、灵敏:
酸性染料 比色法
B C D E
E D A C
例题： 氢溴酸东莨菪碱中其他生物碱的检查方 法是（BE） （多选题）
A．水溶液加入氨试液产生浑浊 B．水溶液加入氨试液不得发生浑浊 C．加入氢氧化钾试液则有浑浊 D．加氢氧化钾试液无浑浊 E．加氢氧化钾试液数滴，只发生瞬即消失的 类白色浑浊
酸性染料及其浓度：定量结合，产物溶解性好；可 稍过量
13-莨菪烷类抗胆碱药物分析
莨菪烷类药物的分析
基本 结构 基本 性质 鉴别 含量 测定
莨菪烷与莨菪 碱性; 酸成脂 水解性 叔胺 旋光性； CH3 紫外吸收 N
H O O
2
vitali反应 与硫酸-重铬 酸钾反应 与氯化汞生成 沉淀
酸性染料比 色法 非水溶液滴 定法 HPLC
+ (BH ·In )水相 + (BH ·In )有机相
+
有色离子对
UV
第四节 含量测定
• 1.离子对 2.染料空白（对照品平行测定，空白吸收可被 扣除） 3.阿托品（水溶液在420nm附近无吸收）
第四节 含量测定
酸性染料的选择及 其浓度
第一节 莨菪烷类药物的结构和性质
颠茄生物碱的来源：从茄科植 物，如颠茄、莨菪和曼陀罗等 中提取的生物碱，由莨菪醇与 不同有机酸所成的酯。
作用：具有对M受体阻断作用
第一节 莨菪烷类药物的结构和性质 （一）典型药物的结构 莨菪醇与有机酸所成的酯
N CH3
N
CH3
第二节 鉴别反应
四、光谱鉴别法
UV ChP：丁溴东莨菪碱
IR
绝大多数生物碱原料药都 采用IR法鉴别
五、色谱法
Ch.P氢溴酸山莨菪碱注射液TLC鉴别：取 本品1ml，置水浴上蒸干。取残渣与消旋山 莨菪碱对照品，分别加甲醇制成10mg /ml的 溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶 液各10µ l，分别点于同一氧化铝薄层板上， 以三氯甲烷-无水乙醇（95∶5）为展开剂， 展开，晾干，喷以稀碘化铋钾试液-碘化钾 碘试液（1∶1）。供试品溶液所显主斑点位 置和颜色，应与对照品溶液的主斑点相同。
2
与硫酸-重铬酸钾的反应
莨菪烷类抗胆碱药物的分析ppt课件
OH
KOH
OH NO2
HOOC O2N
O N
OK
第十三章 莨菪烷类抗疟药物的分析
一、Vitali鉴别反应
➢Vitali鉴别反应系托烷生物碱类的特征反应。
➢原理：
水解
发烟硝酸
托烷生物碱
莨菪酸
三硝基衍生物
KOHaq（C2H5OH） 固体KOH 有色的醌型产物（深紫色）
➢ChP氢溴酸山莨菪碱的鉴别：
取供试品约10mg，加发烟硝酸5滴，置水浴上蒸干，得黄色的残渣，放冷， 加乙醇2～3滴，加固体氢氧化钾一小粒，即显深紫色。
2）取供试品溶液，滴加氯试液，溴即游离，加氯仿振摇，氯仿层显黄色 或红棕色。
第十三章 莨菪烷类抗疟药物的分析
第三节
CONTENTS
三、光谱鉴别法 ➢ 紫外光谱法
一般通过比较药物的λmax、λmin或吸收光谱的一致性进行鉴别，若不止 一个峰（谷），也可比较其吸光度或吸光系数的比值来鉴别。 ➢ ChP丁溴东莨菪碱的鉴别： 取本品，加0.01M盐酸溶液并稀释制成每1ml中含1mg的溶液，测定其紫外 吸收光谱，在252nm、257nm与264nm波长处有最大吸收。
第十三章 莨菪烷类抗胆碱药物的分析
制作人：沈阳药科大学 药学院 80K药物分析 陈丹丹 131080102
1 莨菪烷类药物的结构与性质 2 鉴别试验
目录
CONTENTS 3 特殊杂质与检查 4 含量测定
第十三章 莨菪烷类抗疟药物的分析
第一节
CONTENTS
莨菪烷类药物的 1 结构与性质
第十三章 莨菪烷类抗疟药物的分析
第十三章 莨菪烷类抗疟药物的分析
六、硫酸盐和溴化物的反应 ➢为了改善莨菪烷类生物碱药物的水溶性和稳定性，它们大都制成硫酸盐或
KOH
OH NO2
HOOC O2N
O N
OK
第十三章 莨菪烷类抗疟药物的分析
一、Vitali鉴别反应
➢Vitali鉴别反应系托烷生物碱类的特征反应。
➢原理：
水解
发烟硝酸
托烷生物碱
莨菪酸
三硝基衍生物
KOHaq（C2H5OH） 固体KOH 有色的醌型产物（深紫色）
➢ChP氢溴酸山莨菪碱的鉴别：
取供试品约10mg，加发烟硝酸5滴，置水浴上蒸干，得黄色的残渣，放冷， 加乙醇2～3滴，加固体氢氧化钾一小粒，即显深紫色。
2）取供试品溶液，滴加氯试液，溴即游离，加氯仿振摇，氯仿层显黄色 或红棕色。
第十三章 莨菪烷类抗疟药物的分析
第三节
CONTENTS
三、光谱鉴别法 ➢ 紫外光谱法
一般通过比较药物的λmax、λmin或吸收光谱的一致性进行鉴别，若不止 一个峰（谷），也可比较其吸光度或吸光系数的比值来鉴别。 ➢ ChP丁溴东莨菪碱的鉴别： 取本品，加0.01M盐酸溶液并稀释制成每1ml中含1mg的溶液，测定其紫外 吸收光谱，在252nm、257nm与264nm波长处有最大吸收。
第十三章 莨菪烷类抗胆碱药物的分析
制作人：沈阳药科大学 药学院 80K药物分析 陈丹丹 131080102
1 莨菪烷类药物的结构与性质 2 鉴别试验
目录
CONTENTS 3 特殊杂质与检查 4 含量测定
第十三章 莨菪烷类抗疟药物的分析
第一节
CONTENTS
莨菪烷类药物的 1 结构与性质
第十三章 莨菪烷类抗疟药物的分析
第十三章 莨菪烷类抗疟药物的分析
六、硫酸盐和溴化物的反应 ➢为了改善莨菪烷类生物碱药物的水溶性和稳定性，它们大都制成硫酸盐或
莨菪烷类抗胆碱药物分析
CHO
2O2
+2CO2↑＋H2O
三、与生物碱显色剂和沉淀剂的反应
阿托品＋氯化汞醇试液→黄色沉淀 东莨菪碱＋氯化汞醇→白色复盐沉淀
ChP2015氢溴酸东莨菪碱的鉴别：
取本品约10mg，加水1ml溶解后，置分液漏斗中 加氨试液使成碱性后，加三氯甲烷5ml，摇匀 分取三氯甲烷液，置水浴上蒸干，残渣中加二氯化汞 的乙醇溶液1.5ml 即生成白色沉淀（与阿托品及后马托品的区别）
表13-2 常用的生物碱沉淀试剂及反应 Tab. 13-2 The precipitation reagents and reaction for testing alkaloids
生物碱沉淀试剂
反应条件及结果
碘化铋钾试液（Dragendorff试剂）
橙红或棕红色沉淀
碘化钾碘试液(Wagnen试剂)
阿托品、莨菪碱等托烷类生物碱水解后生成莨 菪酸，均可发生Vitali反应
与发烟硝酸共热，得到黄色三硝基衍生物，放 冷，加醇制氢氧化钾少许，即脱羧
生成具有共轭结构的阴离子而显深紫色
COOH
CHCH2OH O2N
3HNO3
COOH
CHCH2OH NO2 O2N KOH C2H5OH
COOH
CCH2OH
第三节 有关物质与检查
一 氢溴酸东莨菪碱中特殊杂质检查
氢溴酸东莨菪碱来源：茄科植物颠茄、白曼陀罗、莨菪中等提取
（我国，白曼陀罗的干燥品：洋金花中提取东莨菪碱，制成氢溴酸盐）
制备方法：
洋金花粗粉 乙醇/渗漉 渗漉液 减压蒸馏 浸膏 H2SO4/提取
酸性提取液 Na2CO3, CHCl3/提取 总生物碱 Na2CO3, CHCl3/分离 东莨菪碱 HBr/成盐
第十三章莨菪烷类抗胆碱药物的分析
第十三章莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物是一类常用于治疗运动障碍、遗尿症和胃肠道疾病的药物。
这类药物的主要作用机制是通过抑制胆碱能神经传递，从而减少相应器官的运动和分泌功能。
在药物分析中，对莨菪烷类抗胆碱药物的分析主要包括药物含量分析、质量控制和研究药物的降解产物等方面。
本章将对这些方面进行详细介绍。
1.药物含量分析药物含量分析是对莨菪烷类抗胆碱药物配方中所含药物的含量进行定量分析。
常用的分析方法包括高效液相色谱法（HPLC）、气相色谱法（GC）和红外光谱法等。
其中HPLC是最常用的分析方法之一、在HPLC分析中，可以使用反相HPLC进行分离和定量，通过选择合适的色谱柱和流动相条件，可以得到高灵敏度和准确性。
2.质量控制质量控制是对莨菪烷类抗胆碱药物产品质量的评估和监控。
通过质量控制可以确保生产的药物产品是符合药典标准的。
常用的质量控制方法包括对药物外观、理化性质、含量、纯度等进行测试。
其中，对药物含量的测试是最基本的质量控制测试之一3.降解产物的研究药物在储存和使用过程中，可能会遭受环境条件的影响而发生降解。
研究药物的降解产物，有助于了解药物在不同条件下的稳定性，并指导药物的储存和使用。
常用的降解产物研究方法包括质谱分析和核磁共振谱分析等。
4.生物等效性评价莨菪烷类抗胆碱药物是通过抑制胆碱能神经传递来发挥作用的，其生物利用度和药物代谢动力学对药物疗效有重要影响。
生物等效性评价可以通过动物实验和人体临床试验来进行。
动物实验可以用于评估药物的生物利用度和代谢动力学，并指导药物剂量的确定。
而临床试验则可以进一步确认药物的疗效和安全性。
总结起来，莨菪烷类抗胆碱药物的分析主要包括药物含量分析、质量控制、药物降解产物研究和生物等效性评价等方面。
这些分析方法可以帮助确认药物的质量和安全性，并促进药物的研发和临床应用。
第十三章 莨菪烷类抗胆碱药物的分析
3、其他生物碱 原理：氢溴酸东莨菪碱水溶液加入氨试液不发生混浊，
而当有其他生物碱（如阿扑阿托品、颠茄碱存在
时），加入氨试液则会产生混浊
检查方法:取本品0.10g加水2m1溶解后，分 成两等份:一份中加氨试液2～3滴，不得发生 浑浊;另一份中加氢氧化钾试液数滴，只许发 生瞬即消失的类白色浑浊。
二、硫酸阿托品中莨菪碱和有关物质的检查 1、莨菪碱的检查 原理：利用药物主成分和杂质旋光性的差异 主成分：消旋体；杂质：左旋体 2、有关物质的检查 HPLC法 离子对色谱；不加校正因子的主成分自身 对照法
离子对试剂的浓度大约为：3 ~ 10 mmol/L
示例： 氢溴酸东莨菪碱原料、片剂、注射剂
75% C2H5OH/精制
成品
1、酸度
东莨菪碱的碱性很弱，对石蕊试纸几乎不显碱 性反应 控 制 氢 溴 酸 东 莨 菪 碱 的 5% 水 溶 液 的 pH 值 在 4.0～5.5之间，来控制药品中的酸性杂质
强酸弱碱
2、易氧化物 杂质：阿扑阿托品 含有不饱和双键的有机物质 原理：杂质会使高锰酸钾溶液褪色（ChP） 紫外法（BP2003） 检查方法（ChP） :取本品0.15g加水5 m1溶解 后 ， 在 15 ～ 20℃ 下 加 高 锰 酸 钾 滴 定 液 (0.O2mo1/L) 0.05ml，lOmin内红色不得完全消 失。
第十三章 莨菪烷类抗胆碱
药物的分析
第一节 莨菪烷类药物的结构和性质 一、典型药物 莨菪烷类药物是从茄科植物中提取的生物 碱， 由莨菪烷衍生的氨基醇和不同有机酸 缩合成酯。
典型药物为（表13-1）：
硫酸阿托品 氢溴酸东莨菪碱
二、主要化学性质 1、水解性：含有酯结构，易水解
CH3 N
CH3 H OH N
第十三章莨菪烷类抗胆碱药物的
色
第三节 特殊杂质检查
一、氢溴酸东莨菪碱中有关物质的检查
洋金花粗粉 乙醇/渗漉 渗漉液 减压蒸馏 浸膏 H2SO4/提取
酸性提取液 Na2CO3, CHCl3/提取 总生物碱 Na2CO3, CHCl3/分离 东莨菪碱 HBr/成盐
氢溴酸东莨菪碱（粗品） 75% C2H5OH/精制 成品
根据其制备工艺，本 品可通过酸度、其它 生物碱、和易氧化物
即可进行含量测定
（二）影响因素
1.水相最佳pH值的选择：使得BH+和In-最多
水相最佳pH
2.酸性染料及其浓度：定量结合，产物溶解性好；可 稍过量
一般认为对测定结果影响不大，只要量足够大就可 以。但浓度过高的话就会形成严重的乳化层，且不
易于除去，往往影响测定结果。
磺酸酞类指示剂
• 溴麝香草酚蓝(BTB)
稀释至刻度，摇匀，用干燥滤纸过滤，收集续滤液，即得。
测定法：精密量取对照品溶液和供试品溶液各2ml，分别置预先精密 加入三氯甲烷l0ml的分液漏斗中，各加溴甲酚绿2.0ml，振摇提取两分钟
后，静止分层，分取澄清的三氯甲烷液，在420nm波长处分别测定吸光
度，计算，即得本品(C17H23NO3).H2SO4.H2O相当标示量的百分含量。
N H3C
O CH2
O
HO (杂质Ⅱ)
示例13-6氢溴酸东莨菪碱易氧化物检查
易氧化物
可能杂质为阿扑东莨菪碱、及其 它含有不饱和双键的有机物，他 们的紫外吸收波长会红移、可使
高锰酸钾溶液褪色
3.其它生物碱
本品水溶液加入氨水试液不得发 生混浊。当有其它生物碱存在时，
则易产生混浊。
本品水溶液
检查方法：
固定相
第三节 特殊杂质检查
一、氢溴酸东莨菪碱中有关物质的检查
洋金花粗粉 乙醇/渗漉 渗漉液 减压蒸馏 浸膏 H2SO4/提取
酸性提取液 Na2CO3, CHCl3/提取 总生物碱 Na2CO3, CHCl3/分离 东莨菪碱 HBr/成盐
氢溴酸东莨菪碱（粗品） 75% C2H5OH/精制 成品
根据其制备工艺，本 品可通过酸度、其它 生物碱、和易氧化物
即可进行含量测定
（二）影响因素
1.水相最佳pH值的选择：使得BH+和In-最多
水相最佳pH
2.酸性染料及其浓度：定量结合，产物溶解性好；可 稍过量
一般认为对测定结果影响不大，只要量足够大就可 以。但浓度过高的话就会形成严重的乳化层，且不
易于除去，往往影响测定结果。
磺酸酞类指示剂
• 溴麝香草酚蓝(BTB)
稀释至刻度，摇匀，用干燥滤纸过滤，收集续滤液，即得。
测定法：精密量取对照品溶液和供试品溶液各2ml，分别置预先精密 加入三氯甲烷l0ml的分液漏斗中，各加溴甲酚绿2.0ml，振摇提取两分钟
后，静止分层，分取澄清的三氯甲烷液，在420nm波长处分别测定吸光
度，计算，即得本品(C17H23NO3).H2SO4.H2O相当标示量的百分含量。
N H3C
O CH2
O
HO (杂质Ⅱ)
示例13-6氢溴酸东莨菪碱易氧化物检查
易氧化物
可能杂质为阿扑东莨菪碱、及其 它含有不饱和双键的有机物，他 们的紫外吸收波长会红移、可使
高锰酸钾溶液褪色
3.其它生物碱
本品水溶液加入氨水试液不得发 生混浊。当有其它生物碱存在时，
则易产生混浊。
本品水溶液
检查方法：
固定相
莨菪烷类抗胆碱药物的分析
第二节
【示例】
鉴别试验
Ch.P氢溴酸山莨菪碱注射液TLC鉴别 取本品1ml，置水浴上蒸干。取残渣与消旋山莨菪 碱对照品，分别加甲醇制成10mg /ml的溶液。照薄层 色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同 一氧化铝（中性，活度Ⅱ-Ⅲ级）薄层板上，以三氯 甲烷-无水乙醇（95∶5）为展开剂，展开，晾干，喷 以稀碘化铋钾试液-碘化钾碘试液（1∶1）。供试品溶 液所显主斑点位置和颜色，应与对照品溶液的主斑点 相同。
二、非水溶液滴定法
三、高效液相色谱法
第四节 含量测定
一、酸性染料比色法 （一）基本原理 该法是利用碱性药物，在一定pH条件下，可与某 些酸性染料结合显色，随后用分光光度法测定药物 含量的方法。 该法样品用量少，灵敏度高 适用于少量供试品、尤其是小剂量药物制剂的定 量分析 具有一定的专属性和准确度
第三节 特殊杂志与检查
一、氢溴酸东莨菪碱中有关物质的检查
3.其他生物碱
.
因东莨菪碱在碱性条件下可以水解，生成东莨菪醇和莨菪酸 ，前者在水中溶解，后者生成钾盐在水中也能溶解，故可使 瞬即发生的混浊消失。
第三节 特殊杂志与检查
一、氢溴酸东莨菪碱中有关物质的检查
其他类生物碱还常有TLC和HPLC法检查。期杂质限量判断 主要有标准品对照法、自身稀释对照法等方法。 【示例】BP采用TLC自身稀释对照法检查氢溴酸东莨菪碱中 其他生物碱和分解产物：取本品0.2g，加甲醇溶解并稀释至 10ml，为供试品溶液；精密量取1ml，加甲醇稀释至100ml， 为对照液（a）；取对照液（a）5ml，加甲醇稀释至10ml， 为对照液（b）。照薄层色谱法试验，吸取上述溶液各10ul， 分别点于同一硅胶G薄层板上，以浓氨水-甲醇-丙酮-三氯甲 烷（2：10:30:50）为展开剂，展开，晾干，于105℃干燥 15分钟，冷却后，喷碘化铋钾试液显色。供试品溶液除主斑 点及起点处的黄色斑点外，其他杂质斑点的颜色与对照液 （a）的主斑点比较不得更深（1.0％），比对照液（b）主 斑点颜色更深的杂质斑点数不得多于1个（0.5%）。
第十三章 莨菪烷类抗胆碱药物的分析
中国药典中托烷类药物采用溴甲酚绿作酸性染料。
酸性染料的浓度对测定结果影响不大，只要足够量即可。
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2 、影响因素
（3） 有机溶剂的种类
常用的有机溶剂有：CHCl3、CH2Cl2、苯、甲苯等 苯、甲苯毒性大，污染环境
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2 、影响因素
（4） 水分
如果水分进入有机层，可引入有色的酸性染料，影响比
如果水相pH值过高，则生物碱几乎全部以游离碱的形式
存在，离子对浓度减小，有机溶剂萃取的不是离子对，而是 生物碱本身。 故应选择一个水相的最适pH值。
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2 、影响因素
（2） 酸性染料及其浓度
常用：溴甲酚绿(BCG)、溴麝香草酚蓝（BTB）、溴甲酚紫 （BCP）、溴酚兰(BPB)、甲基橙等。
庚烷磺酸钠、十二烷基磺酸钠，还有高氯酸、磷酸、十二烷基 硫酸钠等 分析酸性物质时：季铵盐阳离子对试剂，如四丁基溴化铵、 四丁基氢氧化铵等
注意：
流动相水相由具有适宜pH值的缓冲溶液所构成，同时含有 3～10mmol/L适宜的离子对试剂
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O
硫酸莨菪碱
左旋体
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HO
N H3 C H
O
H O
OH HBr
氢溴酸山氢溴酸东莨菪碱
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O H3C H 3C H N O H O OH Br
甲溴酸东莨菪碱
OH N H3C H O O HBr
氢溴酸后马托品
第十三章
莨菪烷类抗胆碱药物的分析
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第一节 结构与性质
莨菪烷(Tropane) 莨菪醇(Tropine)
莨菪烷类抗胆碱药物的分析-20200217
OH HOOC
CH2 －H2O HOOC H2SO4
CHO
2O2
+2CO2↑＋H2O
三、与生物碱显色剂或沉淀剂反应
沈阳药科大学
➢ 生物碱在酸性溶液中与重金属盐或大分子酸生成难溶性盐、复盐或配合 物沉淀。不同沉淀剂与生物碱反应的灵敏度不同。
生物碱沉淀试剂 碘化铋钾试液 碘化钾碘试液 碘化汞钾试液 三硝基苯酚试液
乙醇/渗漉
减压蒸馏
洋金花粗粉
渗漉液
浸膏
H2SO4/提取
酸性提取液
Na2CO3, CHCl3/提取
Na2CO3, CHCl3/分离
HBr/成盐
总生物碱
东莨菪碱
75%
氢溴酸东莨菪碱（粗品）
C2H5OH/精制
成品
生产和贮藏过程中可能引入的有关物质可通过酸度、其他生物碱和易氧化物 检查进行控制。
一、氢溴酸东莨菪碱中有关物质的检查
含量测定。
一、酸性染料比色法 ➢反应示意式：
沈阳药科大学
➢也可将呈色的有机相经碱化（如加入醇制氢氧化钠），使与有机碱结合的
酸性染料释放出来，测定其吸光度，在计算出碱性药物的含量。
一、酸性染料比色法
沈阳药科大学
➢影响因素：
1）水相最佳pH的选择 只有选择合适的pH，使有机碱性药物均成阳离子（BH+），而同一pH条件下
KOH +3H2O
C2H5OH
NO2
OH NO2
HOOC O2N
O N
OH
KOH
OH NO2
HOOC O2N
O N
OK
沈阳药科大学
一、Vitali鉴别反应
沈阳药科大学
➢Vitali鉴别反应系托烷生物碱类的特征反应。
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第十三章 莨菪烷类抗胆碱药物的分析
本章基本要求
一、掌握莨菪烷类抗胆碱药物的结构特征、 理化性质，鉴别方法与原理，特殊杂质检查方 法与条件。 二、熟悉本类药物含量测定的酸性染料比色法 、非水滴定法和HPLC法。 三、了解本类药物的其它分析方法。
莨菪烷类药物
莨菪烷类抗胆碱药物：是由莨 菪烷衍生物的氨基醇与不同有机酸 缩合成酯的生物碱。如：颠茄生物 碱，古柯生物碱。
以阿托品为例，水解生成莨菪醇(Ⅰ)Tropine和 莨菪酸(Ⅱ) Tropicacid。
2. 碱性
阿托品和东莨菪碱的结构中，五元脂环上含有 叔胺氮原子,具有较强的碱性,易与酸成盐。如 阿托品的pKb1为4.35。
3. 旋光性
氢溴酸东莨菪碱结构中含有不对称碳原子，呈左旋 体，比旋度为-24ο至-27ο，而阿托品结构中虽然也含有不 对称碳原子，但因外消旋化而为外消旋体，无旋光性。利 用此性质可区别阿托品与东莨菪碱。
三、特殊杂质检查
(一）氢溴酸东莨菪中特殊杂质检查
氢溴酸东莨菪碱 + KOH
瞬间浑浊
异东莨菪醇 + 莨菪酸
(水解)
生成碱式盐后也能溶于水
Ch.P 本品加氨试液→不得发生浑浊 本品加KOH →只发生瞬间浑浊
BP TLC检查其它生物碱及分解产物
三、特殊杂质检查
(二）硫酸阿托品中特殊杂质检查 1.莨菪碱：硫酸阿托品为外消旋体，无旋光性； 莨菪碱为左旋体，采用测定旋光度来检查。
二、鉴别试验
（一）托烷生物碱的Vitaili鉴别反应
托烷生物碱 水解
发烟硝酸
莨菪酸 Δ
三硝基衍生物(黄)
KOH（C2H5OH） 固体KOH 共轭的醌式产物
(脱羧)
深紫色
二、鉴别试验
（一）托烷生物碱的Vitaili鉴别反应
二、鉴别试验
（二）与硫酸-重铬酸钾的反应（氧化反应）
本类药物水解后，生成的莨菪酸，可与硫酸和重铬 酸钾在加热的条件下，发生氧化反应，生成苯甲醛， 而逸出类似苦杏仁的臭味。其反应式为：
二、鉴别试验
(三)沉淀反应
本类药物具有碱性，可与生物碱沉淀剂生成 沉淀。见课本P336表13-2.
如：阿托品+氯化汞醇试液
黄色沉淀
东莨菪碱+氯化汞醇试液
白色复盐
沉淀
二、鉴别试验
（四）硫酸盐与溴化物反应
阿托品+氯化钡溶液
白色沉淀
氢溴酸东莨菪碱+硝酸银溶液 淡黄色沉淀
滴加氯试液，溴即游离，加氯仿振摇，氯仿 层显黄色或红棕色。
二、鉴别试验
（五）光谱法
紫外
红外
（六）色谱法---已知生物碱 注意点：加碱性试剂
三、特殊杂质检查
(一）氢溴酸东莨菪碱中特殊杂质检查
制法：从茄科植物白曼陀罗的干燥品（洋金花）中提取 东莨菪碱，然后制成氢溴酸盐。
三、特殊杂质检查
(一）氢溴酸东莨菪中特殊杂质检查
1.酸度
东莨菪碱碱性很弱，对石蕊试纸几乎不显碱性反 应。氢溴酸东莨菪碱为强酸弱碱形成的盐，通过 其5%水溶液的pH值为4.0～5.5，来控制本品中的 酸性杂质。
二、非水溶液滴定法 原理、方法
三、HPLC法 离子对色谱法
第一节 莨菪烷类药物的结构与性质
一、基本结构与化学性质
（一）典型药物的结构
N CH3
O H OH ,H2SO4,H2O O O
2
N CH3
O O HO H
,HBr,3H2O
硫酸阿托品 （atropine sulfate）
氢溴酸东莨菪碱 ( copolamine hydrobromide）
OH
N
O
2.其它有关物质：HPLC供试品自身稀释对照法
四、 含量测定
（1）酸性染料比色法
1.基本原理
B +H+
适当pH
BH+
HIn H+ + In-
(BH+·In-)水相
(BH+·In-)有机相
2.影响因素*
（1） 水相最佳pH 值的选择：恰当 （2） 酸性染料及其浓度：溴甲酚绿等 （3） 有机溶剂的选择：氯仿 （4） 水分的影响：严防混入：脱水剂或干燥滤纸过滤 （5） 酸性染料中的有色杂质：先萃取弃去
H3C
H
O
HBr
氢溴酸后马托品
CH3 N
H H
OH
O
O
硫酸莨菪碱
.H2SO4.2H2O
2
HO
N H3C
H O
HOBiblioteka OH HBr氢溴酸山莨菪碱
O
H3C + N
H3C
H O
H
O
OH Br-
甲溴东莨菪碱
O
H3C
+ N H3C
H O
H
O
OH Br-
丁溴东莨菪碱
（二）主要理化性质
1.水解性 本类药物分子结构中具有酯的结构，易水解。
三、特殊杂质检查
(一）氢溴酸东莨菪中特殊杂质检查
2.易氧化物
杂质来源：生产过程中可能引入的杂质阿扑阿托品及其它含有 不饱和双键的有机物质
Ch.P 加入一定量高锰酸钾，10分钟内红色不得消失
BP 利用紫外吸光度进行限量控制
3.其他生物碱
氢溴酸东莨菪碱
其他生物碱(阿扑阿托 品、颠茄碱)
+ 氨试液
澄清 浑浊
本章基本要求
一、掌握莨菪烷类抗胆碱药物的结构特征、 理化性质，鉴别方法与原理，特殊杂质检查方 法与条件。 二、熟悉本类药物含量测定的酸性染料比色法 、非水滴定法和HPLC法。 三、了解本类药物的其它分析方法。
莨菪烷类药物
莨菪烷类抗胆碱药物：是由莨 菪烷衍生物的氨基醇与不同有机酸 缩合成酯的生物碱。如：颠茄生物 碱，古柯生物碱。
以阿托品为例，水解生成莨菪醇(Ⅰ)Tropine和 莨菪酸(Ⅱ) Tropicacid。
2. 碱性
阿托品和东莨菪碱的结构中，五元脂环上含有 叔胺氮原子,具有较强的碱性,易与酸成盐。如 阿托品的pKb1为4.35。
3. 旋光性
氢溴酸东莨菪碱结构中含有不对称碳原子，呈左旋 体，比旋度为-24ο至-27ο，而阿托品结构中虽然也含有不 对称碳原子，但因外消旋化而为外消旋体，无旋光性。利 用此性质可区别阿托品与东莨菪碱。
三、特殊杂质检查
(一）氢溴酸东莨菪中特殊杂质检查
氢溴酸东莨菪碱 + KOH
瞬间浑浊
异东莨菪醇 + 莨菪酸
(水解)
生成碱式盐后也能溶于水
Ch.P 本品加氨试液→不得发生浑浊 本品加KOH →只发生瞬间浑浊
BP TLC检查其它生物碱及分解产物
三、特殊杂质检查
(二）硫酸阿托品中特殊杂质检查 1.莨菪碱：硫酸阿托品为外消旋体，无旋光性； 莨菪碱为左旋体，采用测定旋光度来检查。
二、鉴别试验
（一）托烷生物碱的Vitaili鉴别反应
托烷生物碱 水解
发烟硝酸
莨菪酸 Δ
三硝基衍生物(黄)
KOH（C2H5OH） 固体KOH 共轭的醌式产物
(脱羧)
深紫色
二、鉴别试验
（一）托烷生物碱的Vitaili鉴别反应
二、鉴别试验
（二）与硫酸-重铬酸钾的反应（氧化反应）
本类药物水解后，生成的莨菪酸，可与硫酸和重铬 酸钾在加热的条件下，发生氧化反应，生成苯甲醛， 而逸出类似苦杏仁的臭味。其反应式为：
二、鉴别试验
(三)沉淀反应
本类药物具有碱性，可与生物碱沉淀剂生成 沉淀。见课本P336表13-2.
如：阿托品+氯化汞醇试液
黄色沉淀
东莨菪碱+氯化汞醇试液
白色复盐
沉淀
二、鉴别试验
（四）硫酸盐与溴化物反应
阿托品+氯化钡溶液
白色沉淀
氢溴酸东莨菪碱+硝酸银溶液 淡黄色沉淀
滴加氯试液，溴即游离，加氯仿振摇，氯仿 层显黄色或红棕色。
二、鉴别试验
（五）光谱法
紫外
红外
（六）色谱法---已知生物碱 注意点：加碱性试剂
三、特殊杂质检查
(一）氢溴酸东莨菪碱中特殊杂质检查
制法：从茄科植物白曼陀罗的干燥品（洋金花）中提取 东莨菪碱，然后制成氢溴酸盐。
三、特殊杂质检查
(一）氢溴酸东莨菪中特殊杂质检查
1.酸度
东莨菪碱碱性很弱，对石蕊试纸几乎不显碱性反 应。氢溴酸东莨菪碱为强酸弱碱形成的盐，通过 其5%水溶液的pH值为4.0～5.5，来控制本品中的 酸性杂质。
二、非水溶液滴定法 原理、方法
三、HPLC法 离子对色谱法
第一节 莨菪烷类药物的结构与性质
一、基本结构与化学性质
（一）典型药物的结构
N CH3
O H OH ,H2SO4,H2O O O
2
N CH3
O O HO H
,HBr,3H2O
硫酸阿托品 （atropine sulfate）
氢溴酸东莨菪碱 ( copolamine hydrobromide）
OH
N
O
2.其它有关物质：HPLC供试品自身稀释对照法
四、 含量测定
（1）酸性染料比色法
1.基本原理
B +H+
适当pH
BH+
HIn H+ + In-
(BH+·In-)水相
(BH+·In-)有机相
2.影响因素*
（1） 水相最佳pH 值的选择：恰当 （2） 酸性染料及其浓度：溴甲酚绿等 （3） 有机溶剂的选择：氯仿 （4） 水分的影响：严防混入：脱水剂或干燥滤纸过滤 （5） 酸性染料中的有色杂质：先萃取弃去
H3C
H
O
HBr
氢溴酸后马托品
CH3 N
H H
OH
O
O
硫酸莨菪碱
.H2SO4.2H2O
2
HO
N H3C
H O
HOBiblioteka OH HBr氢溴酸山莨菪碱
O
H3C + N
H3C
H O
H
O
OH Br-
甲溴东莨菪碱
O
H3C
+ N H3C
H O
H
O
OH Br-
丁溴东莨菪碱
（二）主要理化性质
1.水解性 本类药物分子结构中具有酯的结构，易水解。
三、特殊杂质检查
(一）氢溴酸东莨菪中特殊杂质检查
2.易氧化物
杂质来源：生产过程中可能引入的杂质阿扑阿托品及其它含有 不饱和双键的有机物质
Ch.P 加入一定量高锰酸钾，10分钟内红色不得消失
BP 利用紫外吸光度进行限量控制
3.其他生物碱
氢溴酸东莨菪碱
其他生物碱(阿扑阿托 品、颠茄碱)
+ 氨试液
澄清 浑浊