人染色体观察
人类外周血染色体标本制备及G带观察及核型分析
实验报告课程名称：分子医学实验 指导老师： 成绩： 实验名称： 人类外周血染色体标本制备G 带观察及核型分析 同组学生姓名：一、实验目的及原理三、实验结果二、操作步骤 四、讨论分析一、 实验目的及原理熟悉人类外周血淋巴细胞的培养方法。
初步掌握人类染色体标本培养和制备的基本方法。
通过实验掌握Ｇ带标本制备的基本方法，学会在显微镜下直接观察G 带分裂相。
在细胞周期的不同阶段，染色体的结构不同，在细胞分裂间期，染色体呈现细长的丝状结构，分散于细胞核中，且交织成网状，难以识别其数目和每个染色体特有的结构；在细胞有丝分裂中期,染色体凝缩形成短的棒状结构，排列在赤道板上，此时染色体的形态、数目最清楚，所以一般选择有丝分裂中期的细胞来观察染色体的形态、数目。
在人类遗传分析中，普遍采用外周血培养的方法制备染色体标本。
但是在正常情况下，外周血中的淋巴细胞，几乎都处在G1期或G0期，因而外周血细胞中是没有分裂相的。
在细胞培养过程中加入植物血凝素(phytohaemagglutinin, PHA) ，可以刺激外周血淋巴细胞转变为淋巴母细胞，进行有丝分裂，再通过秋水仙素处理，将细胞阻断在有丝分离中期。
再通过离心、低渗、固定和滴片，就可以获得大量有丝分裂相。
最后通过染色就可以观察染色体的结构和数目。
本方法已为临床医学、病毒学、药理学、遗传毒理学等方面广泛应用。
有许多显示Ｇ带的方法，最常用的是将已经过老化的染色体制片放到37℃胰酶中进行处理，然后用Giemsa 染色。
胰酶可以从染色体上抽取蛋白特定的组成部分。
通过胰酶处理使Ｇ带区的疏水蛋白被除去或使它们构型变为更疏水状态。
由此可见在Ｇ带区中抽取的蛋白往往是疏水蛋白。
关于显带机理有多种论点，总的来说，还不能完全解释显带的机理问题。
二、操作步骤人类外周血染色体标本制备１、采血２、培养RPMI1640培养液，37℃ 0.5℃恒温中培养72小时。
3、秋水仙素(colchicine)处理在终止培养前２-３小时，加入秋水仙素。
染色体检查怎么做哪些人适合做
染色体检查怎么做哪些人适合做染色体检查怎么做?染色体检查是用外周血在细胞生长刺激因子——植物凝集素(PHA)作用下经37℃，72小时培养，获得大量分裂细胞，然后加入秋水仙素使进行分裂的细胞停止于分裂中期，以便染色体的观察;再经低渗膨胀细胞，减少染色体间的相互缠绕和重叠，最后用甲醇和冰醋酸将细胞固定于载玻片上，在显微镜下观察染色体的结构和数量。
正常男性的染色体核型为44条常染色体加2条性染色体X和Y，检查报告中常用46，XY来表示。
正常女性的常染色体与男性相同，性染色体为2条XX，常用46，XX表示。
46表示染色体的总数目，大于或小于46都属于染色体的数目异常。
缺失的性染色体常用O来表示。
染色体检查怎么做哪些人需要做染色体检查：1、白血病及其它肿瘤患者白血病及其它肿瘤时出现的染色体异常可使血细胞的癌基因表达，使血细胞无控制的恶性生长。
不同的白血病常有各自的特征性染色体异常，因此染色体检查有助于白血病的诊断和预后判定。
(1)急淋巴细胞白血病：染色体检查可发现8号和14号染色体相互易位，4号和11号染色体相互易位，9号和22号染色体相互易位形成的6条异常染色体并增加一条21号染色体。
(2)急性髓系细胞白血病：染色体改变主要为8号和21号染色体相互易位，以及15号和17号染色体相互易位，形成4条异常染色体。
(3)慢性粒细胞白血病：Ph染色体是其标记染色体，由9号和22号染色体部份片段相互易位形成的。
Ph染色体的出现为慢性粒细胞白血病的确诊指标，治疗过程中Ph染色体的出现或消失，还可作为疗效和愈后的参考指标。
2、接触过有害物质者辐射、化学药物、病毒等可以引起染色体的断裂，如果染色体裂后原来的片段未在原来的位置上重接，将形成各种结构异常的染色体，如缺失、易位、倒位、重复、环形染色体等，这些畸变如发生在体细胞可以引起一些相应的疾病，例如肿瘤。
如畸变发生在生殖细胞就发生遗传效应，殃及子代，可以引起流产、死胎、畸形儿。
实验六 人类染色体核型分析
每个染色体长度 单倍染色体长度
×100%
（2）臂指数（arm index），指长臂与短臂之比。
按Levan（1964）划分标准，臂指数在1.0~1.7之间为中部 着丝粒染色体，1.7~3.0之间为亚中着丝粒染色体，3.0~7.0 之间为亚端着丝粒染色体，＞7.0为端部着丝粒染色体。
（3）着丝粒指数（centromere index），指短臂占 该染色体长度的比率，决定着丝粒的相对位置。
实验六 人染色体核型分析
一、实 验 目 的
掌握人类染色体核型分析的方法。 了解人类染色体数目和结构特征。
二、实 验 原 理
核型（Karyotype）是指一个细胞内有 丝分裂中期所有染色体的表型，如：数 目、大小和形态特征等。 通常将显微摄影得到的照片进行剪贴， 使整套染色体按照一定的顺序排列构成 图像。以核型图(karyogram)的方式表示。 有四种方法：
A：1，2，3对染色体，体积大，易于区别，有中 央着丝粒。第2对的着丝粒略偏离中央。无随 体，1号常见次缢痕。 B：4，5两对，体积大，有亚中部着丝粒，无随 体，彼此不易区分。 C：包括6—12对常染色体和X染色体，中等大小， 为亚中部着丝粒染色体。第6对的着丝粒靠近 中央，X染色体大小接近介于第6，7对之间。 第9对染色体长臂上有一次缢痕，第11对染色 体的短臂较长，第12对染色体的短臂较短。
R带：与G带明暗相反（Reverse G-bands）
目前所用的R显带方法是RBG法 (R-band by BrdU using Giemsa)，即经BrdU处理后用 Giemsa染色。 意义： G带染色体的两末端都不显示深染，而在 R带中则被染上深色，因此R带有利测定染色体 长度和末端区域结构的变化。对揭示染色体末端 缺失、重复、易位和断裂点的异常等有很高的价 值。
【医学遗传学试题及答案】三、人类染色体形态观察和非显带核型分析
三、人类染色体形态观察和非显带核型分析实验学时：5 学时实验类型：综合性每组人数： 1 人／组一、实验目的通过实验掌握染色体核型分析的常用方法以及G分带的带型特征，初步会识别G分带人类染色体。
二、实验原理将一个细胞内的染色体按照一定的顺序排列起来构成的图像就称之为该细胞的核型(karyotype)，这通常是用显微摄影得到的染色体相片剪贴而成。
在显带技术问世以前，人们主要根据染色体的大小、着丝粒的位置，将人类染色体顺次由1编到22号，并分为七组。
但要想精确、有把握地鉴别每条染色体是比较困难的。
70年代初出现了染色体显带技术，不仅解决了染色体识别困难的问题，而且为深入研究染色体异常及基因定位创造了条件。
将染色体标本用显带方法处理后，再用Giemsa染色，这类技术就称为G分带，通过显微摄影，就可得到G带染色体的显微相片。
三、主要仪器及试剂实验材料显微相片2张。
实验器材镊子、剪刀、胶水、实验报告纸。
四、实验方案1．取人体淋巴细胞有丝分裂中期染色体核型照片，用剪刀沿着每条染色体的四周按直线一一剪下（呈长方形），放在白纸上。
首先按每条染色体的大小顺序排列，然后参照着丝粒在染色体上的相对位置，仔细地一一进行配对。
一般先找出1、2、3号染色体进行配对，再依次为B组、G组、F组、E组，最后为C组。
配对完毕后，用浆糊按照一定的格式要求（附后），分别贴于实验报告纸上。
2．在分析结果中，写出该细胞的核型式，注明性染色体。
五、实验报告剪贴正常男性或女性染色体显微相片一张。
附人类染色体特征描述在进行染色体照片分析时，必须初步掌握人体各对染色体的形态特征，这是对常规标本进行核型分析的主要依据，现描述如下：A组：1－3号。
1号：是最大的染色体，具有中央着丝粒（约在染色体全长的1/2处。
以下简略为1/2、1/4、3/8等），在长臂近着丝粒处，偶可见到一个狭窄的次縊痕。
2号：较1号稍短，亚中着丝粒（3/8）。
3号：比2号短，为中央着丝粒（1/2）。
人类染色体核型分析
1．染色方法
Q—染色法 G—染色法 R—染色法 又称反转G染色法 C—染色法 又称着丝粒异染色质带 Cd-染色法 N—染色法
2．染色体带的区分和命名
带：是染色体上的一部分，它能通过某种染色方法显示出 较深或较浅的染色，以至于能很清楚的与其相邻的节段区 分开来，染色体上没有带间区，深染浅染都是带。
一秃二蛇三蝶飞， 四像炮竹五黑腰，六是一、四小白脸， 七上八下九苗条， 十号长臂近腰好， 十一低来十二高， 十三、十四、十五三个样，十六中央次缢痕好，十七脚上带镣铐， 十八人小白肚皮， 十九中央一点红， 二十头重脚又轻， 二十一像个葫芦瓢，二十二一点y黑脚， X-pq竹节一担挑， 1-9-16有次缢痕；13、14、15端部着丝点有随体，21、22有随体。
⑴按大小分：从大到小排列下去，x相当于6号（即x长短 相当于6），y相当于12号
⑵按着丝点位置分组：A（1-3），B（4-5），C（6-12）， D（13-15），E（16-18），F（19-20），G（21-22）。
⑶据带纹，每条染色体都分区分带，每区之间都有界标 隔开。
4．人类各染色体的特征
界标：具有鉴别染色体的重要、一致而明显的形态特点， 包括染色体两臂的末端、着丝粒和某些染色带。
染色体区：就是指位于相邻的界标之间的染色体区域，界பைடு நூலகம்标被标为那个区的第一带。
在一个特定的染色体带定名时，有四种符号：染色体号， 臂的符号，区号，在该区内的带号。如：1p33。
3. 国际体制的几个原则
实验九 人类染色体观察
一、实验目的
学习人类染色体G带识别方法； 了解核型鉴定技术； 初步了解人类染色体命名的基本原则。
二、实验原理
人X染色质的观察
染色质是细胞间期核周期不同阶段的存在形式。染色质主 要有两种类型：在细胞分裂期凝缩而在间 期松散(成为弥散状)的称为常染色质；在所 有时期一直凝缩着的称为异染色质。
• 实际上异染色质又可分为两类：一类是在 各种细胞中都处于凝缩状态，最晚进行复 制的异染色质，这类异染色质不含有结构 基因，没有什么“功能”，称之结构异染 色质；另一类则是在有些细胞或在一定的 发育时期和生理条件下才表现为凝缩状态 的异染色质，这类异染色质虽含有结构基 因，但从生理上讲，绝大多数基因是失活 的，称为兼性异染色质。如X染色质就是一 种兼性异染色质
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主要仪器、材料及试剂
（１）材料 口腔上皮细胞
（２）主要仪器 显微镜、载玻片、盖玻片、牙签、滤纸、 吸管。
（３）主要试剂 ①固定液 ②染色液
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主要仪器、材料及试剂
（１）材料 口腔上皮细胞
（２）主要仪器 显微镜、载玻片、盖玻片、牙签、滤纸、 吸管。
（３）主要试剂 ①固定液 ②染色液
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实验方法及实验步骤
（1） 清水漱口三次以上，用灭菌牙签的钝 头刮取口腔颊部细胞(将第一次刮取物弃 去），涂于干净的载波片上使成一薄层，空 气中干燥。
（2）固定：60%冰醋酸中固定20min. （3）染色：加几滴改良苯酚品红染液染色
10-15min.清水冲去浮色。
（4）镜检： 在低倍镜下，可见口腔粘膜上皮细胞核为圆形或 卵圆形．细胞质不着色；换油镜，选择典型的可 计数细胞进一步观察，可计数细胞的判断标准是： 核较大、染色清晰、轮廓清楚、无皱褶及缺损， 染色质为细丝状或均匀的细粒，核膜周围无细菌 污染：在可计数细胞内，仔细寻找X染色质：X染 色质的特征是：染色深，轮廓消晰，平凸形、半 圆形、扁平形或三角形，大小为1—1.5um．多位 于核膜内侧缘：统计X染色质的阳性率(至少应观 察100个细胞)。
实验六 人类性染色体小体的制备与观察0
人类性染色体小体的制备与观察
实验原理
一、什么是人体X—染色体（1949，美，巴尔；1961，
英，莱昂，剂量补偿效应的X染色体失活假设 ）
常染色体和性染色体，常染色质和异染色质
二、X—染色质数目
克氏综合症XXY，特纳氏综合症XO
三、X—染色质的部位 (靠近核仁、在核质中、靠近核膜)
四、X—染色质的几种名称介绍
① 口腔颊部粘膜细胞：
取材→涂片→染色（3min）→压片
② 毛发根部细胞观察：
取材→45%冰乙酸（软化5分钟）→水洗
→染色（5min）→压片
正常女性头发毛囊细胞X－染色质
正常女性头发毛囊细胞X－染色质
作 业
绘口腔颊部粘膜细胞和毛发根部细胞
Байду номын сангаас
X—染色质，男女同学分别做对照。
①核仁卫星 ⑤X—染色质 ②性染色质 ③Barr小体 ④X—小体
实验目的
实验材料
1、口腔颊部粘膜细胞
2、头发毛囊细胞
实验器具与药品
1、用具：显微镜、镊子（2）、载玻片、盖 玻片、滤纸、刀片（4）、消毒牙签、小 烧杯（1）等 2、药品：45％醋酸（每大组一瓶）、改良 品红染液 （每小组一瓶）
实验步骤
人类染色体G带观察与核型分析
人类染色体G带观察与核型分析一、实验目的掌握人类体细胞染色体组型分析的方法二、实验原理○1核型：染色体组型又称核型，是指将动物、植物、真菌等的某一个体或某一分类群(亚种、种、属等)的体细胞内的整套染色体，按它们相对恒定的特征排列起来的图像。
核型模式图是指将一个染色体组的全部染色体逐个按其特征绘制下来，再按长短、形态等特征排列起来的图像。
核型( karyotype )是指一个细胞内的整套染色体按照一定的顺序排列起来所构成的图像,通常是将显微摄影得到的染色体照片剪贴面成。
正常细胞的核型能代表个体的核型。
组型( idiogram )是以模式图的方式表示,它是通过对许多细胞染色体的测量取其平均值绘制而成的,是理想的、模式化的染色体组成。
它代表了一物种染色体组型的特征,核型的研究对人类医学遗传研究及临床应用,对探讨动植物起源、物种间亲缘关系、鉴定远缘杂种等方面都有重大意义。
○2带染色技术也称为改良的 iemsa 染色法。
因用 iemsa 染色,所以称为带。
它是目前应用最广泛的染色体分带技术之一。
染色体标本放到37℃胰酶中是带显示的一种预处理方式,它可以从染色体上抽取蛋白质特定的成分,从而经 iemsa 染色后获得良好一致的分带类型。
带的形成与 iemsa 染料的组成及染色特性分不开。
iemsa 染料即噻嗪-曙红染料,染色首先取决于两个噻嗪分子同DNA 的结合,在此基础上它们结合一个曙红分子,其次取决于一个有助于染料沉淀物积累的疏水环境。
通过胰前预处理可以使阴性带区的疏水蛋白被除去或使它们的构型变为更疏水状态。
从而造成了染色体蛋白质的差异,这种差异就是明暗相间的染色体带。
染色体带技术为染色体遗传病诊断、杂种细胞检定、特殊细胞株标记、染色体的识别等开创了一系列检测方法,大大加速了染色体研究的进展。
○3对任何一个染色体的基本形态学特征来说，重要的参数有3个：描述染色体的三个参数: 1.相对长度：指单个染色体长度与包括X（或Y）染色体在内的单倍染色体总长之比，以百分率表示。
人类染色体的识别与核型分析(精选)
人类染色体的识别与核型分析应用人类染色体分析，为诊断疾病、探讨病因和发病机制，针对具体情况采取必要的措施提供了科学的依据。
因此染色体的研究已成为临床医学中一个不可缺少的组成部分。
人类染色体分析与鉴定是否可靠，直接关系到遗传咨询和产前诊断的准确性。
因此如何准确识别染色体，鉴别正常与异常染色体是十分必要的。
(一)染色体的命名和常用命名符号人类细胞遗传学标准化国际命名体制(ISCN1985)包括了1960年、1963年、1968年、1971年、1978年、1981年、1985年7次人类细胞遗传学国际命名会议的结果。
主要决议的文本是人类细胞遗传学的国际法规，为了简便地记述人类染色体及染色体畸变，制定了统一的命名符号，详见表13-5。
表13-5染色体常用命名符号表示符号说明表示符号说明ace→bcen：：：csctdelderdirdicdisdup无着丝粒片段从→到断裂着丝粒断裂断裂与重接染色体染色单体缺失衍生染色体正位双着丝粒体远侧端重复/+-？minmospph1przqrrcprearec将不同的细胞分开多余丢失不能确定微小点嵌合体染色体短臂费城染色体粉碎染色体长臂环形染色体相互易位重排重组染色体(续表)表示符号说明表示符号说明eendffrafemghiinvmalmar互换内复制断片脆性位点女性裂隙次缢痕等臂染色体插入倒位男性标记染色体robsscettantertrivar；罗伯逊易位随体姊妹染色单体互换易位串联易位染色体末端三射体三着丝粒体染色体可变区在涉及一个以上染色体重排中，用来分开各染色体1.非显带染色体的命名：一个典型的中期染色体由2条姊妹染色单体组成，2条姊妹染色单体借着丝粒(次缢痕)相连，着丝粒将染色体分为长臂和短臂，根据着丝粒在染色体上所处的位置不同分为中着丝粒、亚中着丝粒和近端着丝粒染色体。
人类的1号、9号、16号染色体长臂近着丝粒端有1个次缢痕。
在近端着丝粒染色体上，常借1个纤细的染色质丝连接上1粒状结构称随体。
18、x染色人类染色体g显带标本的制备及观察
观察
四、实验结果
液水冲洗。 染色：Giemsa染液（pH7.4 磷酸缓冲液 5ml + Giemsa原
液 11滴（毛细滴管）染色8～10min，流水冲洗。
空气干燥、镜检。
注意事项
首先取决于染色体本身的质量，染色体要较长， 以早中期为宜，且中期相丰富、分散好，无胞浆 背景。 片龄不宜太长。时间越长，细胞对胰酶处理的抵 抗性越强，片龄过长的标本染色后会导致斑点状 而非带纹。 胰酶温度和处理时间需控制好，一般胰酶处理时 间不少于30S
Giemsa染料是由噻嗪和曙红组成的，着色时DNA 先与2个 噻嗪分子结合，然后再与一个曙红分子结合，形成沉淀物， 而DNA的某些部位对染料不敏感，由此形成明暗相间的条 带。
G显带的方法很多，最常用的是将已固定的染色体制片进 行预处理，再用Giemsa染色。预处理的方法非常多，可用 热、碱、各种蛋白酶、尿素等，其中最常用的是胰蛋白酶 进行预处理。方法简便，周期短。 G显带区的DNA有较丰富的A-T对，有相当一部分中度重复 序列DNA可能在G带区，Giemsa染料在G带区的结合与其相 应的DNA 和非组蛋白有关。
2，X染色质制备
标本制作与染色
取材: 口腔粘膜上皮涂片。 玻片晾干后置入固定液(甲醇：冰醋酸 3:1)中10min。 晾干，置入5mol/L HCl中，室温下水解20min。 在新鲜的蒸馏水中涮洗四次，以充分去HCl，以免影响染
色液的pH。 Giemsa染液中染色约5min。 先后用蒸馏水冲洗，晾干。
实验四 X染色质、人类染色
体G显带标本的制备及观察
一、实验目的
学习X染色质的标本制作。 观察X染色质、形态特点。 了解人类染色体G显带技术方法
二、实验原理
实验八 人类染色体G带观察与组型分析
实验八 人类染色体G 带观察与组型分析 2017.11.24一、实验目的1. 熟悉观察人类染色体G 带。
2. 掌握任磊体细胞染色体组型分析的方法。
二、实验原理1. G 显带是指Giemsa 染液染色后，使每条染色体上显示出深浅交替横纹的技术。
A-T 相对丰富的区域染为深带，G-C 相对丰富的区域染为浅带。
2.组型是以模拟图的方式表示，它是通过对许多细胞染色体的测量取其平均值绘制而成的，是理想的、模式化的染色体组成。
它代表了一种染色体组型的特征。
3.染色体特征参数：（1）相对长度=每个染色体的长度/（单倍体+X 染色体）×100％（2）臂指数=长臂长度/短臂长度（3）着丝粒指数=（短臂长度/该染色体总长）×100三、实验材料与用具人类染色体G 带标本、正常人类染色体标本、显微镜四、实验方法取装片于光学显微镜下观察，找到处于分裂期的染色体，观察形态、数目与大小，并拍照记录。
五、结果与分析（1）实验结果1 3 4 56 12 13 16 18 D E 19 21 G图1.正常女性染色体核型1520 F A B CX 22表1.正常女性染色体的基本形态特征参数群组号染色体号长臂长度短臂长度相对长度％着丝粒长度1 1.5 0.9 8.1 37.5A 2 1.3 1.1 8.1 45.83 1 1 6.7 50B 4 1.4 0.5 6.4 26.35 1.2 0.6 6.1 33.36 1 0.7 5.7 41.27 1 0.5 5.1 33.38 0.8 0.5 4.4 38.59 0.8 0.5 4.4 38.5C 10 0.8 0.5 4.4 38.511 0.7 0.5 4.1 41.712 0.5 0.5 3.4 50X 0.9 0.6 5.1 4013 1.1 0.1 4.1 8.33D 14 1 0.1 3.7 9.115 0.9 0.1 3.4 1016 0.6 0.3 3.1 33.3E 17 0.5 0.4 3.1 44.418 0.5 0.3 2.7 37.5F 19 0.4 0.3 2.4 42.820 0.3 0.3 2.1 50G 21 0.5 0.1 2.1 16.722 0.4 0.1 1.7 20(2)结果分析答：通过对染色体的核型分析可以知道，1-3号染色体最大，4-5号次大，6-15号（和X染色体）中等长度，16-18号较小，19-20号小，21-22号最小。
遗传学课件遗传学实验-人类染色体核型分析
[3] Smith J, Johnson M, Levine A. Karyotyping in clinical practice.
American Journal of Human Genetics, 2017, 91(6): 987-998.
附录：相关图表和数据
图1
人类染色体核型图谱
表1
染色体异常类型及临床表现
障碍等问题。
倒位
染色体倒位是指染色体局部发 生倒转的现象，可能导致胎儿 智力障碍、生长发育迟缓等问 题。
缺失
染色体缺失是指染色体部分缺 失的现象，可能导致胎儿智力 障碍、生长发育迟缓等问题。
重复
染色体重复是指染色体部分重 复的现象，可能导致胎儿智力 障碍、生长发育迟缓等问题。
染色体异常的遗传机制
染色体异常的遗传机制主要包括基因突变和染色体畸变。基因突变是指在基因序 列中发生碱基对的增添、缺失或替换等现象，可能导致胎儿发育畸形、智力障碍 等问题。
实验材料准备
准备好染色体标本、显微镜、染色剂、载玻片、 盖玻片、显微操作器等实验器材和试剂。
实验环境设置
确保实验室环境整洁、无尘，并保持适宜的温度 和湿度。
实验人员要求
实验人员应具备基本的遗传学知识和实验技能， 熟悉实验操作流程和注意事项。
实验操作流程
01
02
03
04
标本制备
采用适当的细胞培养和固定方 法，制备染色体标本。
遗传学课件-人类染色体核型 分析
目录
• 人类染色体介绍 • 染色体核型分析技术 • 人类染色体核型异常 • 染色体核型异常与疾病 • 实验操作和注意事项 • 参考文献和附录
01
人类染色体介绍
染色体的组成和功能
人类X染色体的制备与观察
人类X染色质的制备与观察摘要：本实验旨在掌握鉴定人类X染色质的方法，通过将人体口腔颊部粘膜细胞和毛囊细胞解离、染色等步骤制片，在显微镜下正确识别X染色质，即Barr小体的形态特征及所在部位。
同时了解X染色体失活的有关假说以及为失活X染色体上的基因所控制的遗传性状地特点。
1引言：1949年加拿大学者Barr和Bertram在一些雌猫神经原细胞核中, 发现在核膜内缘有一个染色较深的近似三角形的小体, 在雄猫中没有发现。
根据后来的深入研究发现，这个染色较深的小体和性别有关。
直到1971年巴黎会议上正式被命名为X 染色质。
以后的研究表明巴氏小体是一个异染色质化的失活的x 染色体。
在正常的男性细胞中只有一个X 染色体,是正常有活性的, 因此男性细胞中没有巴氏小体。
而在正常女性细胞中有二个X 染色体, 其中一个正常, 另一个异染色质化因此在女性细胞中可见到一个巴氏小体。
巴氏小体的个数= X 染色体个数一1 ，大都出现在核膜边缘。
性染色质在人类中，正常男性个体出现的比例约为1%，正常女性约为17-39%，在由性染色体数目异常而引起的性别畸型( X O 除外) 患者的细胞中, 可见到一个或一个以上巴氏小体。
因而通过巴氏小体检查可鉴别胎儿的性别和诊断性染色体异常引起的遗传疾病。
1961 年, 英国遗传学家Lyon 根据前人和自己的研究发表了莱昂假说, 明确提出了单个X染色体随机失活从而在两性间保证X 连锁基因转录水平一致的论点, 并为现在的科学家所普遍接受。
普遍认为, 巴氏小体的形成是与一个非编码RNA XIST 的大量且特异表达有关, 大量的XIST 顺式作用在其中一条X染色体上, 引发了该条染色质的广泛甲基化从而导致异染色质的形成, 使其上的基因出现表达沉默现象。
2 实验材料和方法：2.1实验材料和仪器：1）显微镜、镊子、载玻片、盖玻片、吸水纸、牙签；2）硫瑾染液；3）1mol/L的HCl、蒸馏水；4）口腔颊部粘膜细胞和毛囊细胞。
人类染色体的识别及核型分析
人类染色体的识别及核型分析人类染色体的识别及核型分析一直是遗传学和医学领域的重要研究内容。
染色体是生物体内储存遗传信息的主要结构，它们的异常会导致多种疾病，如唐氏综合症、染色体异常等。
因此，对人类染色体的识别及核型分析具有重要的理论和实际意义。
本文将详细介绍人类染色体的识别方法和核型分析技术。
人类染色体识别的方法主要包括染色体观察、核型分析和分子遗传学方法。
染色体观察是最基本的方法，通过直接观察染色体的形态和数量来判断是否有染色体异常。
这可以通过显微镜下染色体的结构特征、染色体带分析、核型分析和染色体画图等技术来实现。
染色体带分析是一种常用的方法，可以使用各种染色剂对染色体进行着色，并根据染色体上的不同带纹来识别染色体的类型。
核型分析是确定染色体数量和结构的方法，通过计数染色体的数量，并观察其带纹图案，从而确定核型的类型。
另外，染色体画图是将染色体的形态特征展示在图上，通常配合核型分析，可以更直观地显示染色体的结构。
分子遗传学方法是一种高效且准确的识别染色体的方法，包括荧光原位杂交(FISH)和基因组微阵列分析(CGH)。
FISH是一种常用的技术，它通过标记具有特定序列的探针，与待测样本中的染色体特异序列发生互补杂交，从而标记特定染色体或染色体区域。
FISH技术可用于检测染色体异常、染色体重排及部分基因扩增或缺失等。
CGH是一种高通量全基因组检测方法，可以检测得到全部或部分染色体的大的扩增或缺失。
CGH技术主要通过比较待测样品的DNA和对照DNA的荧光信号强度来判断染色体的异常情况。
核型分析是对染色体数量和结构的综合评估，可以通过核型分析来判断是否存在染色体异常。
核型分析的方法主要包括常规细胞培养和染色体制备、胚胎分期和染色体分析等。
常规细胞培养是指在培养基中培养活细胞，使其进入有丝分裂期，然后对细胞进行取样，制备出细胞的染色体。
胚胎分期是通过观察胚胎的形态特征来判断其发育阶段，然后对其进行染色体分析。
遗传学实验人类染色体的识别及核型分析.ppt
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遗传学实验 2008-3
二、实验原理——人类染色体
2．人类的单倍体染色体组〔n=23〕上约有3000040000个结构基因。平均每条染色体上有上千个基因。 各染色体上的基因都有严格的排列顺序，各基因间的
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遗传学实验 2008-3
表1 人类染色体的主要特征
组别 染色体序号 形态大小 着丝粒位置
次缢痕
随体
A
1-3
B
4-5
最大 次大
M(1、3） SM（2）
SM
I号染色体常见
C 6-12,X（介于7-8 中等 SM 之间）
D
13-15
中等 ST
9号染色体常见 有
E
16-18
F
19-20
小 次小
M（16） SM
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遗传学实验 2008-3
3、关于剪贴、原那么排列
排列——原那么： 从大到小； 短臂向上； 着丝粒在一条线上； 性染色体单排。
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遗传学实验 2008-3
五、实验要求
1、对给出的图象进行测量、配对填表2。 2、按照Denver体制规定，分组贴图。
表2 人类染色体分析数据
编号
绝对 长度
相对 长度
G带是目前被广泛应用的一种带型。因为它主要是 被Giemsa染料染色后而显带，故称之为G显带技术 ，其所显示的带纹分布在整个染色体上。
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遗传学实验 2008-3
G显带
实验二人类染色体核型分析ppt课件
十号染色体
十号长臂三条带
亚中着丝粒染色体
长臂上有三条深染带，近侧的 第一条深带最深
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采 用 PP管 及 配 件： 根据给 水设计 图配置 好PP管 及配件 ，用管 件在管 材垂直 角切断 管材， 边剪边 旋转， 以保证 切口面 的圆度 ，保持 熔接部 位干净 无污物
十一号染色体
采 用 PP管 及 配 件： 根据给 水设计 图配置 好PP管 及配件 ，用管 件在管 材垂直 角切断 管材， 边剪边 旋转， 以保证 切口面 的圆度 ，保持 熔接部 位干净 无污物
实验目的
❖熟悉人类染色体G显带的带型特征 ❖初步掌握G显带核型分析的基本方法
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采 用 PP管 及 配 件： 根据给 水设计 图配置 好PP管 及配件 ，用管 件在管 材垂直 角切断 管材， 边剪边 旋转， 以保证 切口面 的圆度 ，保持 熔接部 位干净 无污物
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采 用 PP管 及 配 件： 根据给 水设计 图配置 好PP管 及配件 ，用管 件在管 材垂直 角切断 管材， 边剪边 旋转， 以保证 切口面 的圆度 ，保持 熔接部 位干净 无污物
五黑腰
五号染色体
亚中着丝粒染色体 长臂上有四条深染带，其中 间三条深带常集中在一起
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染色体观察及核型分析
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采 用 PP管 及 配 件： 根据给 水设计 图配置 好PP管 及配件 ，用管 件在管 材垂直 角切断 管材， 边剪边 旋转， 以保证 切口面 的圆度 ，保持 熔接部 位干净炮五黑腰。 六号短臂小白脸，七上八下九苗条。 十号长臂三条带，十一低来十二高。 十三十四十五号，三个一样一二一。 十六长臂近点深，十七远端带脚镣。 十八人小肚皮大，十九中间一点腰。 二十头重脚底轻，二十一象葫芦瓢。 二十二一点Y黑腰，X pq 一肩挑。
实验一人类染色体观察优秀课件
医学生物学与遗传学教研室
油镜（×1000）
医学生物学与遗传学教研室
根据着丝粒的位置，染色体可分为四种：
①中央着丝粒染色体（m）; ②亚中着丝粒染色体（sm）; ③亚端着丝粒染色体（st）; ④端部着丝粒染色体（t）。
中央着丝粒染色体m 亚Hale Waihona Puke 着丝粒染色体sm 亚端着丝粒染色体st
低倍镜下寻 找分散良好 染色体
2、采血与培养 3、秋水仙素处理 4、低渗处理 5、预固定 6、固定 7、制片
实验步骤1
➢ 正常人体细胞染色体标本的观察分析 取片→低倍镜下找到分裂相→选分散良好的分裂
相→依次转换到高倍镜、油镜下观察。
医学生物学与遗传学教研室
低倍（×100）
医学生物学与遗传学教研室
高倍（×400）
实验一人类染色体观察优秀课件
染色质 （Chromatin) 染色体(Chromosome)
核型分析时对细胞进行特殊 处理，使较多细胞处于有丝 分裂中期，获得有丝分裂中 期的染色体
一、实验目的
1.了解培养细胞染色体标本的制备技术。 2.观察染色体的数目以及形态特征。 3.学习独立完成一个实验的操作和分析。
实验步骤2
油镜下仔 细观察分 析染色体
先计数 染色体 总数
注明染色体 核型、横纵 坐标号
标注最小 近端着丝 粒染色
体，判断 男女性别
描绘染色 体线条图
46,XY
红色小箭头指的是最小的近端着丝粒染色体
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人染色体观察
一、 实验原理
染色体是细胞遗传物的研究对象，分析染色体行为对于认识遗传物质的传递、复制、畸变等都有得要的意义。
所谓外周血培养即是将外周血接种在适当的培养基中进行培养。
人类外周血细胞本来是终末分化细胞，一般没有分裂能力，但经PHA（植物血球凝集素）或ConA等药物刺激后，转变成可分裂的转化细胞。
向培养物中加入适量的秋水仙素，使纺锤体微管解聚，这样细胞停留在中期，可以获得大量的分裂细胞。
用低渗盐溶液（一般是0.075mol/L的KCl）处理，使其中的红细胞及分裂相细胞膜和一部分细胞质除去，最后以气干法制片，可获得较好的染色体标本。
二、实验用品
1、材料：人血
2、试剂：RPMI1640（TC199或F10均可）培养液、小牛血清、肝素、PHA、10μg/ml秋水仙素、5%NaHCO
3、0.075mol/L KCl、青、链霉素、1NHCl、姬姆萨染液、pH6.8磷酸盐缓冲液、冰醋酸、甲醇。
3、仪器设备：超净工作、显微镜、恒温水浴箱、冰载玻片、酒精灯等。
三、实验步骤
1、培养液的配制和分装：在超净工作上，用吸管吸取RPMI1640液40ml、小牛血清10ml，用1ml注射器取肝素0.3ml、PHA0.5~1.0ml、青、链霉素0.3ml （各10000单位/ml）混合均匀后，用NaHCO3或1N HCl调整pH为7.2~7.4，分装于培养瓶中，每瓶ml，用胶布封口。
2、培养：用小瓶接种全血0.3~0.5ml左右，摇匀。
在37℃培养箱中培养68~72小时，培养终止前6~7小时加10μg/ml秋水仙素2-3滴。
3、收集细胞：自培养箱取出培养瓶，用吸管将培养物混匀，并移至10ml 刻度离心管内，以1000rpm离心6-8分钟。
4、低渗处理：吸去上清液，加入预热至37℃的O.4%KCl液7-8ml，用吸管吸打沉淀，使之混匀，放入37℃水浴箱中，静置20-30分钟。
5、预固定：加入新配制的固定液（甲醇：冰醋酸=3：1）1ml，吸打均匀，
立即以1000rpm离心6-8分钟。
6、固定：除去上清液，加入5-6ml固定液，打匀细胞团块，室温下静置20分钟，以1000rpm离心6-8分钟，除去上清液，重复6步1-2次。
7、滴片：视细胞数量的多少，加入0.5~1ml左右的固定液，将沉淀吸打成细胞悬液，用吸管吸取细胞悬液2-3滴，滴于冰水浸泡过的冷、湿的载玻片上，在酒精灯上略加烘烤，使其干燥，（或用电吹风机吹干载玻片）。
8、染色：将载玻片放在染色架上，滴加姬姆萨染液染色10-20分钟。
自来水冲洗，干后镜检。
四、实验结果
取上述制备好的正常人体细胞染色体玻片标本，先在低倍镜下观察，选择染色体分散良好，无重叠的分裂中期细胞（此时已看不到细胞膜与核膜）。
然后转至油镜下仔细观察分析。
首先数该细胞染色体总数，再注意观察染色体的形态，每条染色体含有两条染色单体，两染色单体连接处为着丝粒，注意每条染色体的大小和着丝粒的位置。
区分中央着丝粒染色体、亚中央着丝粒染色体和端着丝粒染色体。
五、注意事项
1、PHA的用量要适中，否则会出现溶血或凝血现象。
2、秋水仙素的处理时间要适当，否则会使染色体不易观察。
3、滴片时，吸管与载玻片距离高一点，这样分裂相分散良好，尽量避免染
色体重迭。
六、思考题
在外周血培养及染色体制片过程中加入PHA、秋水仙素及0.4%KCl溶液的作用是什么？。