探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化
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§探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化
一.材料用具:酵母菌贮用培养液、无菌葡萄糖溶液、血细胞计数板、盖玻片、移液管、滴管、有螺旋盖的试管、试管架、记号笔、直尺、坐标纸、比浊计(比色计)、显微镜。二.材料简介:
1.选用酵母菌的原因:1.酵母菌是单细胞真核生物;
2.生长周期短,繁殖速度快,世代间不重叠。
2.血球计数板:
具体操作方式:用滴管从试管中取1滴培养液到血球计数板的方格区,盖上盖玻片,让培养液自行渗入。(多余的培养液用滤纸吸去)
★计数板:
五点取样法1个大方格=16个中方格
=400个小方格(16×25)
3.比浊计(比色计):测定溶解度。
三.实验步骤
Ⅰ.配置样品并分组(配置2个样品):用记号笔标记有螺旋盖的试管A、B;
A组(10mL无菌葡萄糖溶液+0.1mL酵母菌贮用培养液)
B组(10mL无菌葡萄糖溶液)
注:酵母菌可以用液体培养基培养。
Ⅱ. 细胞计数(抽样检验方法)
1.拧紧试管盖将试管A 轻轻震荡几次(目的:使酵母菌分布均匀,减少误差)。
2. 用滴管从试管中取1滴培养液到血球计数板的方格区,盖上盖玻片,让培养液自行
渗入。静待片刻,待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部,将计数板放在显微镜的载物台上,计数一个小方格内的酵母菌数量。
3.试管B 重复该步骤;
4.样品2重复2、3。
★计数注意事项:
盖
1.计数顺序:左上 右上 右下 左下;
2.压在方格线上的细胞,只计左线和上线上的细胞数;
3.细胞间若有粘连(死亡),则数出团块中的每一个细胞;
4.出芽酵母的芽体体积若超过细胞体积的1/2,则算独立个体。
芽体
出芽生殖——无性生殖
5.用比浊计测定各试管的浑浊程度(探究酵母菌数量变化与其浑浊度之间的关系) 细胞总数计算方法:
每方格内细胞数(细胞数÷方格数)×2500×10
2500:每方格体积=2mm×2mm×0.1mm=0.4mm2
1mL=1cm2=1000mm2
1000÷0.4=2500个(每毫升方格数)
10:一试管大约为10mL 。