无菌检查法方法验证记录

无菌检验方法验证记录

1.适用范围

本方案适用于本公司各品种无菌检验方法的验证。

2.目的

通过验证确认所采用的方法适合于该药品的无菌检查，确保该产品无菌检查结果的正确性。

3.职责

项目责任人：负责验证方案的起草及具体实施。

验证管理员：负责验证工作的组织、协调及管理。

QA现场监控员：负责验证实施过程中的监督检查，取样，确保结果的可靠性。

QC负责人：负责验证方案中检验方法的审核及按照规定的取样计划对标准检验操作程序的准确执行，负责组织实施。

QC检验员：负责验证方案的起草与参与实施，并对所测数据准确性负责。

质量部经理：负责验证方案及报告的审核和批准。

4. 概述

通过验证以确认所采用的方法适合于该药品的无菌检查。根据样品特性制订检验方法和检验条件，按制定的方法进行实验，根据实验结果判断是否符合验证标准。若符合，按验证的方法和条件进行药品的无菌检查；若不符合，重新建立制订检验方法和检验条件，再进行验证，直至验证结果符合设立的验证标准。

5.检查和确认

5.1无菌检验室，洁净级别1万级；超净工作台，局部100级（确认方法：审阅相关的验证资料）。

无菌检验室（洁净级别1万级）验证报告

超净工作台（洁净级别100级）验证报告

检查结论：验证资料完整，符合相应洁净度要求且在有效期内。

检查人：日期：

5.2与验证相关的文件（确认方法：检索）。

无菌检查法操作规程和检定菌传代操作规程

净化工作台使用操作规程

无菌检验室清洁消毒规程

培养箱标准操作规程

检查结论：验证所需资料齐全、完整，符合验证要求。

检查人：日期：

5.3检验用仪器设备（确认方法：检查、核对）。

符合3Q（IQ、OQ、PQ）要求。

5.3.1 智能集菌仪

型号：WJ-6

生产厂家：杭州高得泰林公司

蠕动泵转速：140 rpm

5.3.2 集菌培养器

型号：KSF330

生产厂家：杭州高得泰林公司

批号：

5.3.3 培养箱

型号：HP400S

生产厂家：武汉瑞华仪器设备有限公司

校验有效期至：年月日

设定温度：32.5℃

型号：PYX-280S-A

生产厂家：KELI 科力仪器

校验有效期至：年月日

设定温度：25.5℃

5.3.4超级净化层流台

型号：YJ-875

生产厂家：苏州市姑苏空调净化有限公司

验证有效期至：年月日

检查结论：符合要求

检查人：日期：

5.4检验用菌种、培养基和试液（确认方法：检查、核对）

金黄色葡萄球菌[CMCC（B）26003] 批号生产厂：中检所

铜绿假单胞菌[CMCC（B）10104] 批号生产厂：中检所

枯草芽孢杆菌[CMCC（B）63501] 批号生产厂：中检所

生胞梭菌[CMCC（B）64941 ] 批号生产厂：中检所

白色念珠菌[CMCC（F）98001] 批号生产厂：中检所

β-内酰胺酶：2ml（大于200单位/ml）批号生产厂：中检所

硫乙醇酸盐流体培养基批号：生产厂：北京三药科技开发公司改良马丁培养基批号：生产厂：北京三药科技开发公司营养肉汤培养基批号：生产厂：北京三药科技开发公司改良马丁琼脂培养基批号：生产厂：北京三药科技开发公司检查结论：符合要求

检查人：日期：

6. 准备

6.1培养基配制

•硫乙醇酸盐流体培养基：取本品30克，加蒸馏水1L，浸泡10分钟，加热溶解；分装至500ml玻璃瓶中，装量为200ml，加塞轧盖。

•改良马丁培养基：取本品30克，加蒸馏水1L，浸泡10分钟，加热溶解；分装至500ml玻璃瓶中，装量为200ml，加塞轧盖。

•营养肉汤培养基：取本品22.8克，加蒸馏水1L，浸泡10分钟，加热溶解；分装至250ml三角烧瓶中，装量为100ml，加塞封盖。

•改良马丁琼脂培养基：取本品42.4克，加蒸馏水1L，浸泡10分钟，加热溶解；分装至250m l玻璃瓶中，装量为100ml，加塞封盖。

配制人：配制日期：

6.2培养基灭菌

•硫乙醇酸盐流体培养基、改良马丁培养基、改良马丁琼脂培养基经115℃30分钟湿热灭菌（该灭菌程序已通过验证）。

•营养肉汤培养基经121℃20分钟湿热灭菌（该灭菌程序已通过验证）。

灭菌人：灭菌日期：灭菌釜编号为

6.3培养基贮存

•已经灭菌好的培养基，待冷却后置冰箱保存，保存温度为2～8℃，有效期为一个月。

6.4培养基的适用检查

6.4.1培养基的无菌性检查

注：“+”为生长，“-”为不生长

6.4.2培养基的灵敏度检查 菌液制备：

（1）金黄色葡萄球菌新鲜肉汤培养物1ml

[CMCC(B)26003] 第_____代

9ml0.9%无菌NaCl 溶液 10倍系列稀释 至_______含菌量_______CFU/ml

（2）枯草芽孢杆菌新鲜肉汤培养物1ml

[CMCC(B)63501]第_____代

9ml0.9%无菌NaCl 溶液 10倍系列稀释 至_______含菌量_______CFU/ml

（3）铜绿假单胞菌新鲜肉汤培养物1ml

[CMCC(B) 10104]第_____代

9ml0.9%无菌NaCl 溶液 10倍系列稀释 至_______含菌量_______CFU/ml

（4）生孢梭菌新鲜硫乙醇酸盐培养物1ml

[CMCC(B)64941]第_____代

9ml0.9%无菌NaCl 溶液 10倍系列稀释 至_______含菌量_______CFU/ml （5）白色念珠菌新鲜改良马丁培养物1ml

[CMCC(F)98001]第_____代

9ml0.9%无菌NaCl 溶液 10倍系列稀释 至_______含菌量_______CFU/ml

（6）黑曲霉新鲜孢子洗脱液1ml

[CMCC(F)98003]第_____代

9ml0.9%无菌NaCl 溶液 10倍系列稀释

至_______含菌量_______CFU/ml

每毫升菌液含菌量的计数：

取稀释后的菌液1ml （剩余的菌液冷藏保存）,置直径90mm 的无菌平皿中，注入15-20ml 已经过适用性检查确认的温度不超过45℃的溶化的营养琼脂培养基（细菌类别计数选用该培养基）或玫瑰红钠琼脂培养基（霉菌、酵母菌类别计数选用该培养基），混匀，凝固，倒置培养。每稀释级每种培养基至少制备2个平板。细菌类别培养温度为32.5℃；霉菌、酵母菌类别培养温度为25.5℃。细菌类别培养3天，霉菌、酵母菌类别培养5天，

灵敏度检查结果

细菌培养温度__ __℃ 3天 霉菌及酵母菌培养温度_ ___℃ 5天