月季的花药离体培养
生物高中人教版选修1检测：专题3 课题2 月季的花药培养 含解析
课题2 月季的花药培养基础巩固1下列是被子植物花粉发育经历的各阶段排序,正确的是()A.小孢子四分体时期→双核期→单核居中期→单核靠边期→花粉粒B.小孢子母细胞→单核靠边期→单核居中期→双核期→花粉期C.小孢子母细胞→小孢子四分体时期→单核居中期→单核靠边期→花粉粒D.小孢子四分体时期→小孢子母细胞→双核期→单核期→花粉期[解析]:小孢子母细胞经减数分裂形成四个小孢子,先后经历小孢子四分体时期、单核居中期、单核靠边期、双核期,发育成花粉粒。
[答案]:C2某名贵花卉用种子繁殖会发生性状分离,为了防止性状分离并快速繁殖,可以利用该植物的一部分器官或组织进行培育,发育成完整植株。
进行离体培养时不应采用该植物的()A.茎尖B.子房壁C.叶片D.花粉粒[解析]:花粉粒是由花粉母细胞经减数分裂形成的,细胞内的遗传物质与亲本相比减少了一半,培育出的植株是单倍体。
所以利用植物组织培养技术繁殖名贵花卉时,不能用花粉粒。
[答案]:D3下列说法错误的是()A.镜检选择花药时需用醋酸洋红将花粉细胞核染成红色或用焙花青—铬矾溶液染成蓝黑色B.花期早期的花蕾营养状态及生理状态较好,可提高花粉诱导的成功率C.用于花蕾消毒的药品有体积分数为90%的酒精、无菌水及质量分数为0.1%的氯化汞溶液等D.除去消毒后的花药上的萼片和花瓣、剥离花药到将花药接种到培养基上,整个过程都需要在无菌条件下进行[解析]:用于花蕾消毒的酒精的体积分数应为70%。
[答案]:C4产生花粉植株的两种途径中,得到胚状体或愈伤组织都是通过哪个过程进行的?()A.分化B.脱分化C.再分化D.诱导[解析]:通过花药离体培养形成单倍体植株的过程中,通过脱分化得到胚状体或愈伤组织。
[答案]:B5下列关于花药接种和培养的实验操作,错误的是()A.每瓶接种花药7~10个,20~30 d后,花药开裂形成幼小植株后才给予光照B.花药培养至开裂后,将长出的愈伤组织及时转移到分化培养基上C.花药培养至开裂后,将释放出的所有胚状体整体移到新的培养基上继续培养D.对培养出来的植株作进一步鉴定和筛选[解析]:花药培养至开裂后,将释放出的胚状体尽快分开,并分别转移到新的培养基上,否则,这些植株将很难分开。
高中生物选修一：3.2月季的花药离体培养
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单单核核期期选花之之择瓣前后完松的的全动花花未后药药开，，，放微质花的生地瓣花物幼已蕾就嫩有可，些能极松侵易动入破，碎又。给材料 的消毒到带花来药困，难给。材料的消毒带来困难。.Biblioteka 11一. 基础知识
（四）影响花药培养的因素
2．在使用焙花青－铬钒溶液时，需要首先 将花药用_卡__诺__氏__固__定__液___固定20min。该试剂 的配制方法是将____无__水__酒__精__与__冰__醋__酸按体积 比为____3__：_1的比例混合均匀。
.
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二. 实验操作
（二）材料的消毒
阅读“（二）材料的消毒”，填写下列流程图：
2 生殖
有丝
居中 靠边
生殖 有丝
营养 花粉管
1个小孢子母细胞产生几个花粉粒？最终产生几个精子？
.
8
一. 基础知识 （三）产生花粉植株的两种途径
1.途径
脱分化
分化
花粉
胚状体
丛芽
脱分化
再分化
花粉
愈伤组织
丛芽
生根 移栽
脱愈形再分状化分伤分态成化组化的根： 织 ：薄或：由脱壁芽高分细细等度化胞胞器分产排官化生列的的的疏过植愈松程物伤而组组无织织规或继则细续，胞进为先产行高芽生培度愈养液伤，泡组又化织可的的以呈过重无程新定
2.外因 1）培养基的组成
MS培养基
2) 其他外因
➢ 亲本植株的生长条件 环境理想的人工气候室
➢ 材料的低温预处理 4-10℃，10-20d
➢ 接种的密度
.
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二. 实验操作
（一）材料的选取
课题2-月季的花药培养(精华)
课堂练习
1.在月季花药培养成单倍体植株的过程中，哪个时期最易成
活?
（C ）
A、单核期前的花药
B、单核期后的花药
C、单核期花药
D、双核期
2.关于月季的花药培养技术与菊花的组织培养技术的不同，
下列说法不正确的是
(
)
A．花药培养需发育时期适宜的花C蕾
B．花药培养对培养基配方的要求更为严格
C．培养基配制方法完全不同
2.为什么花瓣松动会给消毒带来困难？ 花瓣松动后，微生物就可能侵入到花药，给材料的消毒带来困难。
（三）接种和培养
思考：1、为何不能损伤花药且要彻底去除花丝？
①损伤花药，容易从受伤部位产生二倍体的愈伤组织， 即得不到单倍体。 ②与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体形成
2、培养时需要注意哪些事项？
①温度控制在25℃左右，不需要光照。幼小植株形成后才需要光照。
如果利用花药培养的技术，在F1代产生的花粉中就可能有 Asu的组合，再将花粉植株进行染色体加倍，就可以直接得到 紫色甜玉米的纯合体（AAsusu）。这种方法可以大大缩短育 种周期。
2. 菊花茎的组织培养与月季花药培养技术的异同 二者都是快速、大量繁殖花卉的技术手段。
菊花茎的组织培养 月季花药培养
外植体细胞
诱导花粉植株能否成功及成功率的高低，主要影响因
素是 培养基的组和成
材。料的选择
a.材料选择什么时期最好，为什么？ 花期为初花期，花粉发育在单核靠边期，成功率最高。
b.如何选择单核期细胞？
选择完全未开放的花蕾
c.为什么花瓣松动会给消毒带来困难？
d.还有哪些影响花药培养的因素？
亲本植株的生长条件、材料的预处理及接种密度等。
高中生物 专题3 植物的组织培养技术 课题2 月季的花药培养精练(含解析)新人教版高二选修1生物试题
课题2 月季的花药培养一、选择题1．花药中的花粉发育为单倍体植株时，脱分化既可以形成愈伤组织也可以形成胚状体，对此起决定作用的因素是( )A．培养基中激素的种类及其浓度配比B．选取离体花药的时期C．培养基是固体培养基还是液体培养基D．培养花粉的时间长短解析：选A 通过花粉培养产生花粉植株一般有两种途径，一种是花粉通过胚状体阶段发育为植株，另一种是花粉在诱导培养基上先形成愈伤组织，再将其诱导分化成植株。
这两种途径之间本身并没有绝对的界限，主要决定因素是培养基中激素的种类及其浓度配比。
2．在花粉的发育过程中，选择下列哪个时期的花药培养成功率最高( )A．小孢子四分体时期B．单核居中期C．单核靠边期D．双核期解析：选C 单核期之前，花药质地幼嫩，容易破碎；单核期之后，花瓣开始松动，消毒困难；在单核靠边期花药培养成功率最高。
3．(2019·某某期中)下列说法错误的是( )A．被子植物的花粉发育依次经历了四分体时期、单核期、双核期B．被子植物的花粉是由花粉母细胞经有丝分裂而形成的，因而含有与体细胞中数目相同的染色体C．被子植物花粉是单倍体的生殖细胞D．被子植物花粉粒内有两个精子解析：选B 被子植物的花粉是由花粉母细胞经减数分裂而形成的，因此，花粉是单倍体的生殖细胞，含有比体细胞中数目减半的染色体。
4．下列关于花药培养产生花粉植株的两个途径，叙述错误的是( )A．花粉可通过诱导形成愈伤组织发育成植株B．花粉可通过胚状体阶段进一步分化成植株C．两种途径依据的原理都是植物细胞的全能性D．产生胚状体是花药离体培养中特有的途径解析：选D 通过花药培养产生花粉植株一般有两种途径：一是花粉通过胚状体阶段发育成植株；二是花粉在诱导培养基上先形成愈伤组织，再将其诱导分化成植株。
产生胚状体并不是花药离体培养中特有的途径。
5．(2019·鹤岗期中)将二倍体玉米的幼苗用秋水仙素处理，待其长大后用其花药进行离体培养得到了新的植株，下列有关新植株的叙述正确的是( )①是单倍体②体细胞内没有同源染色体③不能形成可育的配子④体细胞内有同源染色体⑤能形成可育的配子⑥可能是纯合子也可能是杂合子⑦一定是纯合子⑧是二倍体A．④⑤⑦⑧B．①④⑤⑥C．①②③⑥ D．①④⑤⑦解析：选B 二倍体玉米的幼苗用秋水仙素处理后得到的是四倍体，用四倍体的花药进行离体培养得到的是单倍体，但其单倍体体内含有同源染色体，可以形成可育配子，该单倍体可能是纯合子，也可能是杂合子。
月季花药离体培养
菊花茎的组织培养和月季的花药培养比较
（1）相同点 ①理论基础：植物细胞的全能性 ②基本过程：脱分化→再分化 ③影响因素：营养、激素、pH、温度、光照等
菊花组织培养
材料
选取 未开花植株的茎上 部新萌生的侧枝 无性生殖 每日用日光灯照 12 h
月季的花药培养 选择完全未开放 的花蕾 有性生殖 开始不需光照，幼 小植株形成后才需 光照
实验操作
一、材料的选取 二、材料的消毒 三、接种和培养
（一）材料选取
1、从花药看：月季的初花期 从花粉看：单核期 1.我们怎样选择想要的花粉呢？ 从花蕾看：完全未开放的
2、通过镜检来确定是否处于适宜的发育期。 方法：醋酸洋红法(将染色体染成红色)（学案探究主题二1）
花药（载玻片上）→1%的醋酸洋红1滴→用镊柄将花药捣碎， 盖上盖玻片 →镜检（花粉粒的细胞核被染成红色） 2.我们怎样保证所选的材料处于单核期？
自主预习 一、1．花药 花粉 2．(１)花粉母细胞 (２)小孢子四分体 双核期 (３)减数 小孢子四分体 单核居中 单核靠边 有丝 生殖 花 粉管 有丝 两 二、1．愈伤组织 分化 再分化 诱导 2．(1)激素 (2)浓度配比 三、1．(1)初花期 (2)单核期 (3) 完全未开放 2．培养基 3．生长条件 接种密度 四、1．（1）镜检 （2）红色 蓝黑色 2．70%酒精 无菌水 无菌吸水纸 0．1%的氯化汞溶液 无菌水 3．（1）①无菌 容易从受伤部位产生愈伤组织 不利于愈伤组织或胚 状体的形成 ②培养基 7～10 （2） ①MS ②25 ③光照 ④分化培养基
（三）接种和培养
思考：1、为何不能损伤花药且要彻底去除花丝？ ①损伤花药，容易从受伤部位产生愈伤组织，即得不到单倍体 ②因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成。 2、培养时需要注意哪些事项？ ①每瓶接种花药7~ 10个，温度控制在250C左右，不需要光 照。幼小植株形成后才需要光照。 ②花药开裂长出愈伤组织或释放胚状体。长出愈伤组织要及时 转移到分化培养基上，释放的胚状体，必须在花药开裂后尽快 将幼小植株分开，否则这些植株将很难分开 ③在花药培养中，特别是通过愈伤组织形成的花粉植株，染色 体组的数目常常会发生变化.（主要原因是营养核和生殖核融合 造成的）所以还需要对培养出来的植株作进一步的鉴定和筛选。
高考生物一轮复习生物技术实践专题精练(6)植物的组织培养技术
（6）植物的组织培养技术——2023届高考生物一轮复习生物技术实践小题通关练【通用版】学校：___________姓名：___________班级：___________考号：___________一、单选题1、下列有关月季花药离体培养的说法，错误的是( )A.对材料的选择最常用的方法是焙花青—铬矾法，这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色B.接种花药后一段时间内不需要光照，但幼小植株形成后需要光照C.接种的花药长出愈伤组织或释放出胚状体后，要适时转换培养基，以便进一步分化成再生植株D.理论上经花药离体培养得到的植物均为单倍体2、下列有关影响植物组织培养的因素的叙述，错误的是( )A.同一种植物材料的年龄、保存时间的长短等都会影响实验结果B.无菌技术是植物组织培养能否获得成功的关键，所以外植体要进行高温灭菌C.植物激素的浓度、使用的先后顺序以及用量的比例等都会影响实验结果D.培养过程中的pH、温度、光照等条件也是影响植物组织培养的重要因素3、培养胡萝卜根组织可获得试管苗，获得试管苗的过程如图所示，下列叙述错误的是( )A. 胡萝卜根段进行组织培养可以形成试管苗，是因为植物细胞具有全能性B. 步骤③切取的组织块中要带有形成层，原因是形成层容易诱导形成愈伤组织C. 步骤⑥要进行照光培养，其作用是诱导叶绿素的形成D. 步骤⑤和步骤⑥的培养基中所需的生长素和细胞分裂素的比例不同4、某植物有甲、乙两品种。
科研人员在设计品种乙组织培养实验时，参照品种甲的最佳激素配比（见下表）进行预实验。
为确定品种乙的Ⅱ阶段的最适细胞分裂素浓度，参照表中a2（a2>2.0μmol/L），以0.5μmol/L为梯度，设计5个浓度水平的实验，其中细胞分裂素最高浓度设为M。
下列有关叙述错误的是( )B.确定品种乙Ⅱ阶段最适细胞分裂素浓度的实验中，M为a2+2μmol/LC.生长素和细胞分裂素协调促进细胞分裂的完成，表现出协同作用D.生长素和细胞分裂素的配比是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键因素5、植物组织培养技术是指将离体的植物器官、组织或细胞等,在人工配制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其形成完整植株的技术。
月季的花药离体培养
月季花药离体培养
一、材料的选取
1、选择花药一般通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。
2、确定花粉发育时期最常用方法：醋酸洋红法；焙花青－铬矾法。
注：花粉细胞核内有染色体，染色体主要由DNA和蛋白质组成，醋酸洋红为碱性染色剂，染色体容易被染色。
通过染色，可以确定细胞核为单核期还是双核期，是单核居中期还是单核靠边期。
一般单核靠边期的花药培养成功率最高。
二、材料的消毒
1、花蕾用V/V为70%的酒精浸泡30秒
2、无菌水清洗
3、无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分
4、放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中2~4分钟（也可质量分数为1%的次氯酸钙溶液或饱和漂白粉溶液）
5、无菌水冲洗3~5次
用于培养花药，实际上多数未熟，由于它的外面有花萼、花瓣或颖片保护，通常处于无菌状态，所以只要将整个花蕾或幼穗消毒即可。
三、接种和培养
灭菌后花蕾，要在无菌条件下除去萼片和花瓣，并立即将花药接种到培养基上。
在剥离花药时，要尽量不损伤花药（否则接种后，容易从受伤部位产生二倍体的愈伤组织），同时还要彻底去除花丝，因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成。
通常每瓶接种花药7-10个，温度控制在25℃左右，不需要光照。
幼小植株形成后才需要光照。
一般经过20-30天培养后，会发现花药开裂，长出愈伤组织或释放出胚状体。
将愈伤组织及时转移到分化培养基上，以便进一步分化出再生植株。
人教版高中生物选修一《月季的花药培养》基础练习卷【含答案】
人教版高中生物选修一《月季的花药培养》基础练习卷一、选择题1．被子植物花粉的发育依次经过()①双核期②四分体时期③单核居中期④单核靠边期A．①②③④B．②③④①C．②④③①D．②①③④解析被子植物花粉发育过程为：小孢子母细胞→四分体时期→单核居中期→单核靠边期→双核期营养细胞生殖细胞→两个精子答案 B2．从小孢子母细胞到形成精子，经历的分裂方式是()A．有丝分裂B．减数分裂C．先有丝分裂后减数分裂D．先减数分裂后有丝分裂解析小孢子母细胞先经过减数分裂形成4个小孢子，每个小孢子形成一个具单细胞核的花粉粒，每个花粉再经过有丝分裂形成两个精子。
答案 D3．对产生花粉植株的途径的叙述，错误的是()A．花粉通过胚状体阶段发育成植株B．花粉先形成愈伤组织再诱导分化成植株C．花粉培养产生花粉植株主要取决于培养基的激素种类及浓度配比D．花粉经脱分化形成胚状体，再分化出根，然后诱导生芽解析花粉植株形成过程中先是经脱分化形成胚状体，再分化出芽，然后诱导生根，故D错误。
答案 D4．选择月季花粉最佳时期为()A．盛开期的月季花B．略微开放的月季花C．完全未开放的花蕾D．近败时期的月季花解析不同植物的诱导成功率很不相同。
就同一植物来说，亲本植株的生理状况对诱导成功率也有直接影响。
花期早期时的花药比后期的更容易产生花粉植株。
最适合花药培养的小孢子发育时期为单核中、晚期，为了挑选到单核期花药，最好用完全未开放的花蕾。
答案 C5．下列关于花药培养的注意事项中正确的是()A．花药培养成功与否与材料选择无关B．花药培养成幼苗后，一定不能分瓶培养C．花药培养成幼苗的过程中，除了适宜的温度、pH等，还要注意照光D．一般地讲，材料选择单核期时花药培养成功率较高解析本题要从影响花药培养的因素、培养过程、培养条件等方面进行分析。
花粉植株能否培育成功受多种因素影响，其中材料的选择与培养基组成是主要影响因素；对一般植物来讲，选择单核期往往成功率最高；在花粉的幼苗阶段，由于无叶绿体，所以不需照光；当培养获得愈伤组织或幼小植株时必须分瓶培养，才能诱导愈伤组织分化或幼苗分开。
3.2月季的花药离体培养
(花粉粒) 生殖细胞核→生殖细胞
2个精子
思考:1个花粉母细胞最终可发育形成几个精子？
1花粉母细胞
减数
4个小孢子
有丝
4个花粉管细胞核→ 4个营养细胞
1个花粉→2个精子
4个生殖细胞核 有丝 8个精子 1个花粉母细胞→8个精子
练习： 1.假如一种被子植物体细胞有２０条染色那么它的小孢子母细胞、 小孢子、花粉管细胞核、生殖细胞核各有多少条染色体？ 2.如果小孢子母细胞的基因型为AａBｂ（两对基因位于两对同源 染色体上）则其小孢子的基因型是什么？ 以基因型为AB的小孢子为例，其花粉管细胞核和生殖细胞核的 基因型是什么？
（二）产生花粉植株的两种途径 花粉植株：利用花粉发育的植株，是单倍体植株
胚状体：在组织培养过程中，某些体细胞在形态上转变为与合 子发育成的胚非常相似的结构，发育过程亦与合பைடு நூலகம்胚类似，被
称为体细胞胚（胚状体）
（三）影响因素
内部因素： 不同种类的植物——诱导成功率不同 同一植物不同生理状况 ——诱导成功率不同
1.花粉发育的场所： 花粉囊
阅读教材37-38页（一）被子植物的花粉发育， 小组讨论，总结花粉发育的流程图
1个花粉母细胞（小孢子母细胞） 减数分裂 4个花粉（小孢子） 集合在一起 小孢子四分体时期 （四个单倍体细胞连在一起）
彼此分离
单核期(一个小孢子）
单核居中期 单核靠边期
有丝分裂 双核期 花粉管细胞核→营养细胞(为花粉管生成、生长提供营养)
⑴花期： 初花期
生长旺盛、营养充足、诱导成功率高 盛开或略开的花瓣松动、消毒困难
⑵花蕾： 完全未开放
⑶花粉： 单核靠边期 原因： 单核期对离体刺激敏感 之前：花药质地幼嫩，易破碎
高三生物克隆技术试题答案及解析
高三生物克隆技术试题答案及解析1.下图表示菊花的嫩枝和月季的花药离体培养过程，请据图回答下面的问题。
（1）对菊花来说，要选取的嫩枝来进行组织培养。
对月季来说，小孢子母细胞形成精子首先要经过“小孢子四分体时期”，这里的“四分体”是指________________。
为确定该花粉是否处于该时期，最常用的方法是。
（2）在培养嫩枝组织和花粉的培养基中都要加入一定的植物激素，常用的植物激素有。
（3）某同学在培养过程中发现培养基上感染了几种细菌。
若在以尿素为唯一氮源的培养基中加入指示剂培养几种菌后，指示剂变红就可以鉴定其中含有能够分解尿素的细菌。
为了避免微生物对培养造成的影响，所以在进行接种时应注意。
①接种室要消毒②只要戴口罩，操作时便可说话③外植体可预先用体积分数为70%的酒精浸泡，取出用无菌水冲洗后，再用0．1%的氯化汞溶液消毒，并用无菌水冲洗干净④接种操作要在酒精灯火焰旁进行⑤接种完毕应立即盖好瓶盖A．①②③④⑤B．①②③④C．①③④⑤D．②③④⑤（4）进行菊花组织培养的基本实验操作步骤是：制备MS固体培养基、________、接种、培养、移栽、栽培。
（5）不同植物对各种条件的要求往往不同，进行菊花组织培养一般将温度控制在℃，并且对光照的控制为【答案】（1）生长旺盛四个小孢子连在一起醋酸洋红法（2）细胞分裂素和生长素（3）酚红 C（4）外植体消毒（5）18-22 每天12小时光照【解析】（1）因为生长旺盛的嫩枝生理状况好，容易诱导脱分化和再分化，所以对菊花来说，要选取生长旺盛的嫩枝来进行组织培养；对月季来说，小孢子母细胞形成精子首先要经过“小孢子四分体时期”，这里的“四分体”是指四个小孢子连在一起。
确定该花粉发育时期的最常用的方法有醋酸洋红法．（2）决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例，特别是生长素和细胞分裂素的协同作用在组织培养过程中非常重要．因此在培养嫩枝组织和花粉的培养基中都要加入细胞分裂素和生长素．（3）在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养几种菌后，指示剂变红就可以鉴定其中含有能够分解尿素的细菌。
生物人教版高二选修1素材：教材梳理_专题3课题2月季的花药培养_word版含解析
庖丁巧解牛知识•巧学一、被子植物的花粉发育1.发育场所：被子植物雄蕊的花药中。
2.分裂方式：花粉是由花粉母细胞经减数分裂而形成的，因而花粉是单倍体的生殖细胞。
3.发育过程：四分体时期———→单核期———→双核期在四分体时期，4个单倍体细胞连在一起，进入单核期时，四分体时期的4个单倍体细胞彼此分离，形成4个具有单细胞核的花粉粒。
这时的细胞含浓厚的原生质，核位于细胞的中央（单核居中期）。
随着细胞不断长大，细胞核由中央移向细胞一侧（单核靠边期），并分裂成1个生殖细胞核和1个花粉管细胞核，进而形成两个细胞，一个是营养细胞，一个是生殖细胞。
生殖细胞再分裂一次，形成两个精子。
要点提示花粉母细胞形成花粉粒的过程是减数分裂。
花粉粒形成营养细胞、两个精子的过程是有丝分裂。
二、产生花粉植株的两种途径这两种途径之间并没有绝对的界限，主要取决于培养基中激素的种类及其浓度配比。
知识拓展在植物组织培养过程中，某些体细胞在形态上会转变为与合子发育成的胚非常相似的结构，它的发育过程也和合子胚类似，胚芽、胚根、胚轴等结构完整，就像一颗种子，这种结构就叫做体细胞胚或胚状体。
制作人工种子选用的是体细胞胚，因为它与亲本的遗传物质相同，而花粉胚则为单倍体。
三、影响花药培养的因素1.材料的选择不同的植物、同一种植物的不同生理状况、花期的早晚、花粉发育的不同时期等因素都会影响诱导花粉植株能否成功及诱导成功率的高低。
疑点突破对花期而言，选择早期的花药培养更容易产生花粉植株。
对花粉的发育时期而言，选择单核期的花药培养成功率最高，为选到单核期的花药，要选择完全未开放的花蕾。
2.培养基的组成、亲本植株的生长条件、材料的低温预处理以及接种密度等对诱导成功率都有一定影响。
四、实验操作：月季的花药培养1.材料的选取选择花药时，一般要通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。
方法：醋酸洋红法，焙花青－铬矾法。
2.材料的消毒体积分数为70％的酒精浸泡—→无菌水清洗—→放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液—→无菌水冲洗。
3.2月季的花药离体培养(终稿)
• 利用植物组织培养技术可以实现优良品种的快 速繁殖，保持遗传性状的一致。但这种方法同 时也存在着一定的缺陷——繁殖出来的新植株 往往无法获得一些新的性状。
• 1964年，印度科学家在培养毛叶曼陀罗的花药 时，首次获得了由花药中的花粉粒发育而来的 单倍体植株，这个实验说明生殖细胞和体细胞 一样，在离体条件下也具有发育成完整植株的 潜能。
√ 苗形成之与前花丝（相需连的要花、药不不利于需愈要伤组）织光或胚照状体。的形成
二. 实验操作
（三）接种和培养
阅读“（三）接种和培养”，回答下列问题：
4．培养20－30d后，花药开裂，长出愈__伤__组__织 或形成_胚__状__体_ 。前者还要转移到分_化__培__养__基_ 上进行分化培养成再生植株；后者要尽快_在__花_ 药 _开_裂__后__将__幼__小__植__株__分开__并转移到新的培养基上， 否则这些植株将很难分开。 5．通过愈伤组织形成的植株，常常会出现 _染__色__体__组__数__目 _的变化，因而需要鉴定和筛选。
3.应用： 人工种子：胚状体包以人工胚乳和人工种皮
3.形成与发育：
体细胞 单倍体性细胞
体细胞胚 花粉胚
植株 单倍体植株
花粉植株的特点？
用单于倍单体倍植体株育种，，植通株过人弱工小诱导， 使（染弱色小体/数高目大加）倍，。一明显般缩高短度育种
√ 周（期不，育培/育可纯育合）新。品种。
三、影响花药培养的因素
选择单核期以前的花药接种，质地幼嫩，极 易破碎；
选择单核期之后的花药接种，花瓣已有些 松动，又给材料的消毒带来困难，且难以挑选 到单核期的花药。
高中课堂新坐标生物人教版选修一同步讲义：专题3 微专题突破 含答案
微专题突破植物组织培养技术比较及应用1．菊花茎段组织培养与月季花药培养比较2.植物组织培养技术的应用(1)微型繁殖，微型繁殖就是用于快速繁殖优良品种的植物组织培养技术，也叫快速繁殖技术。
繁殖过程中的分裂方式是有丝分裂，亲、子代细胞内DNA 不变，所以能够保证亲、子代遗传特性不变。
(2)作物脱毒：作物脱毒是利用茎尖、根尖等无毒组织，进行微型繁殖，由于微型繁殖操作过程必须在无菌条件下，所以所获幼苗是无毒的。
(3)人工种子①制作方法：人工种子又称为人造种子、合成种子或无性种子，就是将组织培养所产生的体细胞胚、不定芽、顶芽、腋芽或小鳞茎等繁殖体，包裹在能够提供养分的胶囊(人工胚乳)里，再在腔囊外面包上一层具有保护功能和防止机械损伤的外膜(人工种皮)，造成一种类似于种子的结构。
如图人工种子能在一定条件下萌发生长，形成完整植株。
②优点：可使在自然条件下不结实或种子昂贵的植物得以繁殖；保持亲本的优良性状，因该过程为无性繁殖；节约粮食，减少种子的使用；可以控制添加一些物质，如除草剂、农药、促进生长的激素、有益菌等。
(4)细胞产物的工厂化生产：用人工培养的愈伤组织提取细胞中的某种成分，如紫草素、香料等。
1．菊花的组织培养和月季的花药培养都是利用组织培养技术，下列关于两者的叙述中，正确的是()C．①②④D．①②③④[解析]菊花的组织培养用茎段来培养，比较容易，不必添加植物激素；在菊花组织培养中不会发生染色体倍性的变化；需要每天日光灯照射12 h；形成愈伤组织或胚状体后不必更换培养基。
月季花药的离体培养需要添加细胞分裂素和生长素等植物激素；在花药培养中，通过愈伤组织形成的植株会出现染色体倍性的变化，所以需要染色体倍性的鉴定；最初不需要光照，幼小植株形成后需要光照；形成愈伤组织或胚状体后需要转移到分化培养基上进一步分化培养。
[答案] D2．用菊花的茎尖进行植物组织培养可培育出试管苗。
下面关于这一过程的说法正确的是()A．进行培养时，一次性加足营养物质以防止污染B．整个培养过程应在光下进行，有利于长叶C．要根据培养过程的实际情况，更换培养基D．整个培养过程都应在密闭条件下进行，以免杂菌的污染[解析]进行植物组织培养时，外植体不能进行光合作用，因此培养基中要加入有机物。
河南省洛阳市伊川县第三高级中学高二生物期末试卷含解析
河南省洛阳市伊川县第三高级中学高二生物期末试卷含解析一、选择题（本题共40小题，每小题1.5分。
在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。
）1. 如果某精原细胞有三对同源染色体A和a、B和b、C和c，下列哪四个精子来自同一个精原细胞A． AbC、Abc、abc、ABC B．AbC、aBC、abc、abcC．aBc、AbC、aBc、AbC D．abC、abc、aBc、ABC参考答案：C2. 某人做深呼吸动作后呼吸频率会减慢，这是因为（）A．呼吸肌疲劳 B．血液pH变小C．呼吸中枢兴奋 D．血液中CO2浓度降低参考答案：D3. 当人在秋风中瑟瑟发抖时，不会明显升高的激素是A．促甲状腺激素释放激素B．促甲状腺激素C甲状腺激素D．胰岛素参考答案：D4. 将月季花的花药进行离体培养获得了许多完整幼小植株，下列说法正确的是A．细胞内染色体数量高度一致B．都是纯合体C．彼此性状极其相似D．需要进一步鉴定和筛选D5. 水母发光蛋白由236个氨基酸构成，其中有三种氨基酸构成发光环，现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记。
在转基因技术中，这种蛋白质的作用是（）A. 促使目的基因导入宿主细胞中B. 促使目的基因在宿主细胞中复制C. 使目的基因容易被检测和选择D. 使目的基因容易成功表达参考答案：C试题分析：标记基因的作用是用于检测目的基因的导入，水母发光蛋白也具有相应的作用，即标记基因和目的基因连在一起，如果水母发光蛋白表达，则说明目的基因也已经进入细胞．考点：基因工程的原理及技术6. 下列对“人类胚胎干细胞” 这一概念的理解,正确的一项是( )A、人类胚胎干细胞是人类胚胎发育早期囊胚外表的扁平细胞和囊胚腔内侧的内细胞群B、人类胚胎干细胞就是人类胚胎发育早期囊胚腔内侧的内细胞群C、人类胚胎干细胞是人类胚胎中可发育成胚盘、肝、肺、骨骼、皮肤等的全能性细胞D、人类胚胎干细胞不仅指人类囊胚中未分化的细胞,也指成人身上的成年干细胞参考答案：B7. 杂交育种依据的主要遗传学原理是（）A.基因突变B.基因自由组合C.染色体交叉互换D. 染色体结构变异C8. 生长在同一地区的两种杜鹃花的开花时间不同，自然状态下不能交配，这种现象属于A．优胜劣汰 B．适者生存 C．生殖隔离 D．性状分离参考答案：C9. 人们常用注射垂体制备物的方法，促使鱼类排卵，这是由于垂体内含有A．促性腺激素 B．促甲状腺激素C．生长激素 D．性激素参考答案：A10. 下图是甲、乙两种生物的体细胞内染色体情况示意图，则染色体数与图示相同的甲、乙两种生物体细胞的基因型可依次表示为A．甲：AaBb 乙：AAaBbbB．甲：AaaaBBbb 乙：AaBBC．甲：AAaaBbbb 乙：AaaBBbD．甲：AaaBbb 乙：AAaaBbbb参考答案：C11. 在一个随机交配的中等大小的种群中，经调查发现控制某性状的基因型只有两种：AA 基因型的频率为40%，Aa基因型的频率为60%，aa基因型(致死型)的频率为0，那么随机交配繁殖一代后， AA基因型的个体占 ( )A. B. C. D.参考答案：A12. 10个卵原细胞和10个精原细胞全部发育成熟，受精后，最多能产生合子（）A．10个B．5个C．40个D．20个参考答案：A【考点】61：细胞的减数分裂．【分析】精子形成过程：1个精原细胞1个初级精母细胞2个次级精母细胞4个精细胞4个精子．卵细胞的形成过程：1个卵原细胞1个初级卵母细胞1个次级卵母细胞+1个极体1个卵细胞+3个极体．【解答】解：（1）一个卵原细胞减数分裂只能产生一个卵细胞，因此10个卵细胞减数分裂只能形成10个卵细胞；（2）一个精原细胞减数分裂可形成4个精子，因此10个精原细胞减数分裂可形成40个精子．综合以上可知，10个卵原细胞和10个精原细胞分别经过了减数分裂后形成的成熟生殖细胞，可结合成10个受精卵．故选：A．13. 下列有关育种的说法，正确的是A. 用基因型为DdTt的植株进行单倍体育种，所育的新种自交后代约有1/4为纯合子B. 用辐射的方法进行诱变育种，诱变后的植株一定比诱变前的具备更多的优良性状C. 用杂交的方法进行育种，从F1自交后代中可筛选出符合人类需要的优良品种D. 用基因型DdTt的植株进行多倍体育种，所育的新种和原品种杂交一定能产生可育后代参考答案：C【分析】杂交育种的原理是基因重组，其育种方法为：杂交→自交→筛选→自交→直至后代不再发生性状分离为止，由此可见F2中就会出现具有优良性状的个体。
月季的花药离体培养
课题2 月季的花药培养学习目标1.识记被子植物花粉发育的过程2.通过学习花药培养的基本技术，培养设计试验、动手操作、分析解释实验现象的能力学习重点难点重点:1.被子植物花粉发育过程2.花药离体培养过程难点: 1.被子植物花粉发育过程2.花药离体培养过程自主学习一．被子植物花粉发育过程1．被子植物的花粉是在中由经过分裂形成的。
所以，花粉是的生殖细胞。
2．结合教材内容填下列示意图：[思考1]由此可见，被子植物的花粉的发育要经历时期，期和期等阶段。
[思考2]在正常情况下，一个小孢子母细胞可以产生 8 个精子；在一枚花药中可以产生很多个花粉。
二．产生花粉植株的两条途径1．产生花粉植株（即单倍体植株）的两种途径：一是花粉通过阶段发育为植株，二是通过阶段发育为植株。
这两种途径的区别主要取决于培养基中的种类及其的配比。
2．填写培育花粉植株的途径图解：3．胚状体的结构及其发育过程与种子相似，所以把胚状体到从芽的过程称为，而把从愈伤组织到从芽的过程称为。
4.植物体细胞发育而来的胚状体又叫，花粉发育而来的胚状体叫，可发育为植物，要使其成为纯合的正常植株，可用处理发育中的幼苗。
三．影响花药培养的因素1．影响花粉植株成功与否和成功率的主要因素：和等。
2．材料的选择：①从花药来看，应当选择（初花期、盛花期、晚花期）的花药；②从花粉来看，应当选择（四分体期、单核期、双核期、萌发期）的花粉，因为单核期以前的花药，选择单核期以后的花药接种，。
；③从花蕾来看，应当选择（完全未开放、略微开放、完全盛开）的花蕾。
[思考3]除此之外，你认为影响花粉诱导成功率的因素还有哪些？[思考4]为什么花瓣松动会给材料消毒带来困难？四．实验设计1.材料的选择选择花药时一般通过确定花粉发育时期，此时需要对花粉细胞核进行染色，最常用的染色剂是和，它们分别可以将细胞核染成色和色。
2.材料的消毒3.接种和培养（1）．剥取花药：消毒后的花蕾，要在条件下除去花萼、花瓣。
2019-2020学年高二生物人教版选修一教学案：专题3 课题2 月季的花药培养 Word版含答案
一、被子植物的花粉发育（阅读教材P37～38）1．发育场所：被子植物雄蕊的花药中。
2．花粉的形成：由花粉母细胞经过减数分裂形成，因此，花粉是单倍体的生殖细胞。
3．花粉的发育经历小孢子四分体时期、单核期和双核期等阶段。
(1)小孢子四分体时期：4个单倍体细胞连在一起。
(2)单核期：①四分体的4个单倍体细胞彼此分离，形成4个具有单细胞核的花粉粒。
②单核期分为单核居中期和单核靠边期两个时期。
(3)双核期：细胞中含有生殖细胞核和花粉管细胞核，它们进而形成一个生殖细胞和一个营养细胞，其中的生殖细胞再分裂一次形成两个精子。
二、产生花粉植株(即单倍体植株)的两种途径（阅读教材P38）1．过程图示2．形成原因：主要取决于培养基中激素的种类及其浓度配比。
三、影响花药培养的因素（阅读教材P38～39）1．主要因素(1)材料的选择①不同植物的诱导成功率很不相同。
②同一种植物，花期早期时的花药比后期的更容易产生花粉植株。
③花粉发育时期也是影响花药培养的重要因素，一般来说，在单核期，细胞核由中央移向细胞一侧的时期，花药培养成功率最高。
(2)培养基的组成：培养基的成分及比例对花药培养也有影响。
2．其他因素：亲本植株的生长条件、材料的低温预处理以及接种密度等对诱导成功率都有一定影响。
四、实验操作（阅读教材P39～40）1．材料的选取(1)取材：对绝大多数植物而言，适宜花粉培养的时期是单核期。
(2)花药发育时期的确定：一般通过镜检来确定花粉是否处于适宜的发育期。
(3)镜检方法：①最常用的是醋酸洋红法。
②但某些植物的花粉细胞核不易着色，需采用焙花青－铬矾法。
2．消毒3．接种和培养(1)接种要求：将在无菌条件下除去萼片、花瓣和花丝的花药立即接种到培养基上。
(2)培养条件：培养温度在25_℃左右，幼小植株形成后才需要光照。
(3)鉴定和筛选：在花药培养中，特别是通过愈伤组织形成的花粉植株，常常会出现染色体组数目的变化，因此需要对培养出来的植株作进一步的鉴定和筛选。
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特点：1 明显缩短育种年限 2 后代植株都为纯合子。
一、被子植物的花粉发育 雄蕊
花丝 花药：囊状结构，内有很多花粉
花粉 花粉粒是由花粉母细胞经过减数分裂而形 成，因此，花粉粒是单倍体的生殖细胞。
被子植物花粉的发育要经历：
四分体时期、单核期和双核期等阶段。
造孢细胞
小孢子四分体
单核
双核
花粉母细胞 （小孢子母细胞）
⑦花药培养时间
一般月季的花药培养时间选在5月初到5月的中 旬，即月季的初花期。初花期的花蕾营养状态 及生理状态会比较好，可提高花粉的诱导成功 率。
月季花药培养时的花粉粒最好是（ A、四分体时期 B、单核居中期
C）
C、单核靠边期
2、培养基：
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
D、二核或三核花粉粒
花药培养基所采用的培养基可能因植物的不同 而有所变化小麦为N6培养基，马铃薯、月季 为MS培养基，油菜为B5培养基。
4、鉴定和筛选 在花药培养中，特别是通过愈伤组 织形成的花粉植株，常常会出现染 色体倍性的变化（主要原因是营养 细胞核和生殖细胞核融合造成的）。
5、植物组织培养技术与花药培养技术的异同点：
项目 相同点 不同点
植物组织 离体的植物组 外植体为体细胞，染色 培养技术 织经脱分化形 体数无需加倍。 成愈伤组织， 花药培养 再分化成丛芽， 取材为花药，培养的为 诱导出根，然 单倍体幼苗，植株弱小， 技术 后进行移栽。 高度不育，必须用秋水 仙素处理，使染色体加 倍，恢复正常植株的染 色体数，而且为纯种。
细胞核和生殖细胞核。（精子在花粉管中形成） ②三核花粉粒：有些植物的花粉，在成熟前， 生殖细胞进行一次有丝分裂，形成两个精子， 这样的花粉在成熟时，含有一个营养核和两个 精子。 ③两个精子和一个营养核的基因型相同。
1、关于被子植物花粉发育的说法，不正确的是（ BD ） A、花粉粒是在花药中的花粉囊里形成的 B、被子植物精子的形成是直接减数分裂的结果 C、被子植物的花粉的发育要经历四分体时期、单核 期、双核期等阶段 D、花粉粒在发育过程中，核先位于细胞一侧，再移 到细胞中央
⑤单核期花药的挑选 为了挑选到单核期的花药，通 常选择完全未开放的花蕾。盛 开的或略微开放的花，都不宜 选作实验材料。 ⑥选择完全未开放花蕾的 原因 完全未开放的花蕾，可挑 选到单核期的花药，菌少、 易消毒
⑦为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难？ 花瓣松动后，微生物就可能侵入到花药， 给材料的消毒带来困难。
花药（在卡诺氏固定液中处理20min）→取出，置于 载玻片上→焙花青－铬矾溶液染色→盖上盖玻片→镜检 （花粉粒的细胞核被染成蓝黑色）
（二）材料的消毒
1、花蕾用体积分数为70%的酒精浸泡30秒 2、无菌水清洗 3、无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分 4、放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中2～4分钟 （质量分数为1%的次氯酸钙溶液或饱和漂白粉溶液）
2、焙花青—铬钒法 ①卡诺氏固定液的配制方法 将无水酒精与冰醋酸按体积比为3 ：1的比例混匀
②焙花青—铬钒溶液的配制方法
将5g铬明矾[K2SO4Cr2(SO4)· 24H2O]加入 90ml蒸馏水中，溶解后加入0.1g焙花青，混匀 并加热至沸腾，煮沸5分钟后冷却至室温，过滤， 加蒸馏水定容至100ml。 ③染色操作
有丝分裂
减数分裂
4个小孢子
1个小 孢子
（单细胞花粉粒）
花粉粒 （双核）
花 粉 粒
小孢子四分体
单核
双核
花粉母细胞 （小孢子母细胞）
有丝分裂
减数分裂
4个小孢子
营养细胞核
1个小 孢子
营养细胞
花粉粒 （双核）
生殖细胞核
2个精子
花粉是单倍体的生殖细胞
花粉囊
花药
成熟 花粉
小孢子母细胞
8个精子
小孢子
花粉粒 （双核期）
③花药培养时期的选择 一般来说，在单核期，细胞核由中央移向细胞 一侧的时期，花药培养的成功率最高。即：最 适合花药培养的小孢子发育时期为单核靠边期
④其它时期选择的缺点
选择单核期以前的花药接种，质地幼嫩，极易 破碎； 选择单核期之后的花药接种，花瓣已有些松动， 又给材料的消毒带来困难，且难以挑选到单核 期的花药。
二、产生花粉植株的两条途径
取决：培养基中的激素种类及浓度配比
体细胞胚（胚状体）： 在组织培养过程中，某些体细 胞在形态上转变为与合子发育成的 胚非常相似的结构，发育过程亦与 合子胚类似，被称为体细胞胚（胚 状体）。
三、影响花药培养的主要因素
能否成功： 1、材料的选择 2、培养基的组成
（ MS培养基+不同比例的植物生长调节激素） •此外，植株生长条件、材料低温预处理、接种密度等
5、无菌水冲洗3～5次
花药的外面有花萼、花瓣保护，通常处于无菌状态
（三）接种和培养
1、剥取花药 在无菌条件下除去萼片和花瓣用镊子取出花药 注意： ①勿损伤花药，否则接种后容易从受伤部位产 生愈伤组织。 ②要彻底去除花丝，因为与花丝相连的花药 不利于愈伤组织或胚状体的形成。 2、接种
立即将花药接种于培养基上，通常每瓶接种花 药7-10个。
2、醋酸洋红法 ①醋酸洋红法染色机理
醋酸洋红为碱性染色剂，而花粉细胞内有染色 体，染色体主要成分是DNA和蛋白质,易被碱性 染料着色染成红色 。
②醋酸洋红的配置
将体积分数45％的醋酸100ml煮沸，缓缓加入1g 洋红，在加热回流8h，冷却至50℃，过滤即可。
③染色操作
花药（载玻片上）→1%的醋酸洋红1滴→用镊 柄将花药捣碎，盖上盖玻片→镜检（花粉粒的细 胞核被染成红色）
2、其他因素 亲本植株的生长条件、材料的低温预处理 以及接种的密度等对诱导成功都有一定的影响
月季花药培养时的花粉粒最好是（ C ）
A、四分体时期 B、单核居中期
C、单核靠边期
D、二核或三核花粉粒
五、实验操作
（一）材料的选取 选择花药时，一般要通过镜检来确定其中的花粉 是否处于适宜的发育期。 1、方法 ①最常用的方法有醋酸洋红法 ②某些植物的花粉细胞核不易着色，需采用焙 花青-铬矾法，这种方法能将花粉细胞核染成 蓝黑色。
课题2
月季的花药培养
花中皇后—月季又称“月月红”，自然花期5至11月
主要知识
（一）、被子植物的花粉发育和产生 花粉植株的两条途径 （二）、月季花药离体培养的操作过 程 （三）、影响花药培养的因素
知识回顾
单倍体育种的过程？
正常植株（2N） 花药离体培养（N） 植株（2N） 单倍体植株（N） 秋水仙素处理， 使染色体翻倍
1、材料的选择： ⑴不同种类植物的诱导成功率不同。 ⑵同一种植物，亲本植株的生理状况对诱导成功 率有直接影响。 ⑶合适的花粉发育时期：花期早期时的花药最佳。 ⑷选择最合适的花粉发育时期
①不选择单核期之前花药原因：花药质地幼嫩，容易 破碎； ②不选择单核期之后花药原因：花瓣开始松动，给材 料消毒带来困难； ③挑选单核期花药方法：应当选择完全未开放的花蕾， 菌少，易消毒。
1、材料的选择
选材是否成功是花药培养成功的关键 ⑴不同种类植物的诱导成功率不同。 ⑵同一种植物，亲本植株的生理状况对诱导 成功率有直接影响。 ⑶合适的花粉发育时期：花期早期时的花药 比后期的更容易产生花粉植株
②选择合适的花粉发育时期是提高诱导成功率 的重要因素
因为并不是任何时期的花粉都可以经过培养 产生愈伤组织或胚状体，花粉发育的过程中， 只有某一个时期对离体刺激敏感。
3、培养 ①培养条件：温度控制在25℃左右，不需要 光照。幼小植株形成后才需要光照。 ②培养：一般经过20-30天培养后，会发现花药 开裂，长出愈伤组织或释放出胚状体。 长出愈伤组织则将愈伤组织及时转移到分化培养 基上，以便进一步分化出再生植株。
③注意：如果花药开裂释放出胚状体，则一个 花药内就会产生大量幼小植株，必须在花药开 裂后尽快将幼小植株分开，分别移植到新的培 养基上，否则这些植株将很难分开。
小孢子母细胞 2N
（ N
2 ）个精子
（ 减数 ）分裂
（ 有丝 ）分裂 生殖 ）细胞 （ N （ 营养 ）细胞 N
（ ）时期 小孢子四分体 N
单核（ 中 ）期 N
花粉管 ）细胞核 （ 生殖）细胞核 （ N N 双核期
（ 有丝 ）分裂 单核（ 边 ）期 N
注意：
①二核花粉粒：成熟的花粉粒中，只含花粉管