骨髓的病理诊断

免疫组化标本的来源
石蜡包埋组织切片
保存时间长，回顾性诊断
细胞涂片
外周血，骨髓，胸水，腹水等 迅速，保存时间短
结果判定
对HE切片有初步认识，明确病变区域
及细胞形态特点 阳性强弱 DAB强阳性为棕褐色，弱阳 性为淡黄色 阳性细胞分布 散在，灶性及弥漫性， 可作为某些淋巴瘤分型的重要依据。
Biomid BM II
骨&骨髓活检针 BIOSYSTEM II
骨穿针产品机理
该针是同轴套管针，由 针体及手柄构成。手持 该针穿透骨皮质，达到 骨髓腔，取出针芯后， 连接标准注射器抽取骨 髓细胞，供细胞学病理 诊断使用。
ISAN骨穿针 临床优势
与传统复用型骨穿包比较
一次性使用杜绝交叉感染 防止潜在的病毒传播，导致患者体质下降 而发生的并发症，从而预防可能发生的高 额诊治费用 减轻医护人员的劳动强度，提高工作效率 减少科室材料成本，平衡药械费用比例
髓系异常增生
‘Pince-nez’
正常中性粒 •假的Pelger-Huet核 •和分叶过多或者异常核形 •颗粒减少，增多，或异常颗粒
巨核细胞的异常增生
•细胞变小 •核形的简单化 •核小叶之间的分离
铁粒幼细胞贫血 SIDEROBLASTIC ANEMIA

遗传性铁粒幼细胞性贫血

伴X染色体遗传 (ALA合酶缺陷) 常染色体遗传 线粒体损伤
需要大量的辅助检查

血液病理的诊断要求：

病史 形态学：
结构：骨髓活检 细胞学：骨髓涂片 骨髓血凝块


免疫分型：

流式细胞或免疫组化

遗传学和FISH 分子生物学

免疫分型

流式细胞学

诊断性检查
急性白血病 小B细胞淋巴瘤 多发性骨髓瘤 微小残留病变 (MRD)


辅助性检查
正常骨髓细胞的形态学
Myeloblast
Lymphoblast
Monoblast
Promyelocyte
原始粒细胞
原始红细胞
AML M5b
幼稚单核细胞
原始单核细胞
骨髓中的其他细胞
IV 骨髓活检的适应症：肿瘤性或反应性

血细胞减少

营养性贫血还是MDS
血细胞增多 副蛋白血症 肿瘤分期

骨&骨髓活检针
特性 特制Trocar针头、高性能不锈钢材质 圆锥形、锋利梅花状5面切割套管 临床优势 保证针尖和套管坚硬、锋利，微创穿刺， 快速采集高品质样本 圆锥形套管保证样本向下滑出，从而可以 快速采集更多样本；梅花刀省力，同时保 证样品质量，提高诊断准确率
配有样本推取针、推样引导器、手柄帽 便于取出样本，保护医生操作安全
检。
3137例骨髓活检标本分析
长度 ≥2.0cm 1.5-2.0cm 1-1.5cm 0.5-1cm 例数 28 234 1234 1291 百分比 0.9% 7.5% 39.3% 41.1%
＜0.5cm
350
11.2%
骨&骨髓活检针 BIOMID BM & BIOMID BM II
Biomid BM
免疫组化
是免疫学与组织化学相结合的一个分支学
科。 特异性抗体（一抗）与组织中相应抗原反 应后，加入酶标记的第二抗体，形成抗原抗体-酶标抗体复合物，用所标记的酶的底 物与酶反应生成有色产物，产物生成的部 位即抗原所在部位。 在显微镜下，达到确定细胞成分，定位准 确，定性可靠，定量可能的目的

MPN VS. MDS
有效造血
MPN
骨髓增生活跃 正常的细胞形态 血细胞增多 器官肿大

无效造血
MDS MDS/ MPN
骨髓增生活跃 异常的细胞形态 血细胞减少 无器官肿大

MDS: 结构异常
红系异常
‘发芽酵母’
•巨幼细胞性改变 (核/浆发育失衡) •空泡形成 •双核仁，核出芽，核膜不规则

获得性铁粒幼细胞性贫血

原发性: MDS 继发性:

有毒因素：酒精、铅、锌中毒 药物因素：抗结核药物（异烟肼，吡嗪 酰胺， 环丝氨酸），氯霉素，青霉胺 营养因素：维生素B6、铜缺乏 慢性疾病：炎症、感染、癌症。 低温
MDS的辅助检查
可以用于确诊的异常遗传学结果

典型的如 -5, -7, del(5q), +8, del(20q), del(17q) 有些只是具有轻度形态学改变的MDS病例
淋巴细胞


淋巴细胞在儿童的骨髓中可占到30-60% ，有的具有原始细胞的特点， 被称作hematogones （成血细胞，B系祖细胞） 成人中的淋巴细胞<20%. 淋巴小结 异常淋巴细胞的聚集，与良性淋巴结界区别 （部位，有无生发中心， 免疫组化）
‘骨髓纤维化’ 或 “骨髓的纤维化增加”
特殊染色:

PAS 网状纤维 铁染色
增生程度

通过活检检查最准确 具有主观性 表达方式：

造血细胞/总细胞

皮质骨下的区域为低增生区， 不宜于评价增生程度 增生程度随年龄递降，并明 显表现在儿童期。在成年期 相对稳定，到老年期又有明 显减少

红系细胞

占有核细胞的20-25% 在低氧状态下可增加到正常状态 的5-7倍
骨髓病理
南京医科大学第一附属医院 江苏省人民医院 血液科
血液病理的特点

多种检测方法，分析不同数据，系统化的整合 一个具有挑战性但是也有成就感的病理专科 大胆假设，小心求证


I. 骨髓病理的基本原则

骨髓是一个“液体”型的器官，没有明显的大体解剖 的要求：

大小，颜色，特征

骨髓与其他造血器官处于一个动态平衡的过程中
HIV, HCV
自身免疫病 血红蛋白病 肿瘤


累及骨髓 (如骨髓瘤，毛细胞白血病) 髓外其他部位实体瘤引起的骨髓MDS样改变
IV 骨髓活检的适应症：肿瘤性或反应性
血细胞减少 血细胞增多

MPN还是反应性增多
副蛋白血症 临床分期所需
MPN
慢性粒细胞白血病
(CML) 真性红细胞增多症 (P Vera) 原发性血小板增多症 (ET) 原发性骨髓纤维化 (慢性特发性) 少见病理类型
散在阳性
小片阳性
灶性阳性
弥漫阳性
+
++
+++
++++
免疫组化的应用
主要用于淋巴造血系统的诊断，鉴别诊
断及免疫分型 髓系肿瘤免疫表型分化阶段不如淋系的 明显，所以髓系肿瘤主要依靠血象，骨 髓象及遗传检查进行鉴别
取材要求
1.骨髓长度1.5CM及以上（2-2.5CM） 2.取出后放置于装有固定液的EP管内送

Baidu Nhomakorabea
DLBCL T细胞淋巴瘤 MDS的异常表达

免疫组化

骨髓干抽，未提供流式样品，特殊抗体(cyclin D1), 与形态 学的相关性
遗传学/分子病理检查
遗传学检查

遗传学可以提供克隆型的证据 (MDS) 影响疾病的分类
分子病理

可以验证遗传学的发现 比遗传学和FISH更加敏感 不能在脱钙后的样品上进行 改变疾病的预后及分类 （尤其是2008WHO分类）
描述性词汇，定义为增加的网状纤维
变) 或胶原纤维(不可逆改变)
reticulin and trichrome 染色
(可逆性改
非常广泛的鉴别诊断：
任何髓系肿瘤 淋巴瘤 (尤其是毛细胞性白血病) 转移肿瘤 炎症性疾病 (自我免疫性疾病，感染尤其是HIV) MDS MPN 原发性骨髓纤维化Primary myelofibrosis

慢性中性粒细胞白血病 慢性嗜酸粒细胞白血病，非特指型 (高嗜酸粒细胞 综合征) 肥大细胞增生症 骨髓增殖性肿瘤，不能分类
血象增高的骨髓检查
白细胞增多

CML仅能用分子学的方法诊断 (bcr/abl) PV的诊断应以临床诊断标准为基础 需要鉴别 MPN, MPN/MDS 重叠综合征, MDS (5q综合征), 反应性血小板增多 骨髓形态学对于巨核细胞的评估非常有帮助。


红系细胞聚集成团，远离小梁骨， 并具有特殊的形态学特点
髓系细胞

占有核细胞的50-70% 在感染/炎症等发生时，可以快 速增生达10倍以上

幼稚粒细胞聚集于血管周围和小 梁骨周围，而成熟粒细胞位于中 心区域
ALIP

巨核细胞

占有核细胞的~1% 位于髓窦附近 2-4/高倍镜下 活检上的评价最为准确， 幼稚/小巨核细胞很难发现
一系或多系
5-9% 骨髓 <5% 外周 血 10-19% 骨 髓；5-19% 外周血 <5% <5%
有或无
18
一系或多系
有或无
10
巨核细胞显 著增多 单系列
有或无 有或无
37+ 未知
容易误诊为MDS的几种情况
药物 有毒物质


接触砷或重金属 酗酒
维生素B12，叶酸，铜缺乏 病毒感染



如何估算有大量假象的骨髓增生 度:

1 – 脂肪% 避开皮质骨下的位置.
III 骨髓的病理分析
活检: 骨髓凝血块: 骨髓涂片:

结构 无法取骨髓组织，如儿童 细胞学
造血细胞的结构
增生程度
（Cellularity）
造血成分的结构:

幼稚粒细胞倾向聚集小梁骨周围 红系幼稚细胞倾向于成团而聚 巨核细胞单个存在并表现为按顺序成熟
红细胞增多

血小板增多

IV 骨髓活检的适应症：肿瘤性或反应性
血细胞减少 血细胞增多 副蛋白血症 又称单克隆免疫球蛋白血症 临床分期所需

骨髓中副蛋白所见
病理所见
浆细胞骨髓瘤 NHL
百分率
33% 10%
不能诊断的浆细胞骨髓瘤 57%
副蛋白的类型和水平提供了有用的线索
副蛋白水平升高更可能见到骨髓有意义的改变 副蛋白的类型与疾病类型相关

Woven bone vs lamellar bone

骨骼处于动态的再生过程中，尤 其是小梁骨。
骨髓：髓质

红骨髓：造血细胞 黄骨髓：脂肪细胞 骨髓的增生程度是与年龄相关的

成年人: 1-年龄% (±10-20%) 儿童:

<1 1-5 >5
80-100% 60-80% 60±15%
II 骨髓的结构
骨质 髓质 间充质

骨髓：骨质

胚胎外的造血局限于骨髓：

成年人的造血局限于中央位置的骨骼: 颅骨，椎骨，肋骨，锁骨，胸骨，髂 骨等

骨的组成包括皮质骨和小梁骨

外围的皮质骨 (cortical bone) 内部的小梁骨 (trabecular bone). 组织学描述:
无遗传学异常不能排除MDS 流式细胞学可以检测MDS中髓系抗原的异常
表达
MDS分类
疾病 难治性血细胞减少伴单系发育 异常（RCUD） 难治性贫血伴环形铁粒幼细胞 （RARS） 难治性血细胞减少伴多系发育 异常（RCMD） 难治性血细胞减少伴多系发育 异常和环形铁粒幼细胞 难治性贫血伴原始细胞过多-1 （RAEB-1） 难治性贫血伴原始细胞过多-2 （RAEB-2） MDS伴孤立性5q骨髓增生异常综合征，不能分 类（MDS-U） 外周血所见 仅血细胞减少 仅贫血 两系或全血细胞减 少 两系或全血细胞减 少 一系或多系血细胞 减少 一系或多系血细胞 减少 贫血，血小板计数 常增高 一系或多系血细胞 减少 影响系列 仅一个系列 仅红系 两系或三系 两系或三系 原始细胞 （%） <5% <5% <5% <5% 环形铁粒幼 细胞（%） <15% >15% <15% >15% 生存期（月） 66 72 33 33

造血细胞的细胞学
三系造血成分的成熟 计数及分类 如果没有活检，可替代性用于增生程度的评估 转移性肿瘤的评估

骨髓涂片：计数及分类
各系分别计数，M:E 比率. 百分比要与增生度相结合. 要在不同区域甚至不同涂片来评估，才能具有代表性.

成年人骨髓细胞的正常值
细胞类型 原始粒细胞 早幼粒细胞 中幼粒细胞 晚幼粒细胞 杆状核/中性粒 嗜酸性粒细胞及前体 嗜碱性粒细胞及前体 单核细胞 有核红细胞 淋巴细胞 浆细胞 正常范围 (%) 0-3 2-8 10-13 10-15 25-40 1-3 0-1 0-1 15-25 10-15 0-1

IgM副蛋白

淋巴浆细胞淋巴瘤或其他B细胞淋巴瘤, MM中少见
MM or B细胞淋巴瘤, 淋巴浆细胞淋巴瘤中少见
IgG, IgA, IgD 副蛋白

70例MM患者，肿瘤细胞在骨髓 病理，涂片及流式细胞检测中的 比较
骨髓病理 骨髓涂片 流式细胞 骨髓瘤细 59.50%± 26.29%± 7.20%± 29.70% 22.01% 10.92% 胞比例