凝血酶原时间测定sop(CA系列)

血浆凝血酶原（PT）测定
1. 实验原理:
确定量的血浆样本经过一定时间的加温后,加入一定浓度的凝血酶试剂,采用波长为660nm的光照射样本,凝血过程中血浆的混浊度可以通过测量散射光光强度的改变来测定,从散射光光强度的测定,
可以作出凝血曲线,。

凝血酶可使血浆标本中的纤维蛋白原转化为纤维蛋白，形成凝块。

形成凝块的时间即检测时间。

2. 标本采集
2.1早晨空腹采血(空腹12小时左右),静脉采血.
2.2
3.8％(w/v)枸椽钠0.2ml+静脉血1.8ml,混匀.
3. 标本存放
1小时内(3000r/min×15min)分离血浆,室温放置不超过2小时,2～8℃保存不超过4小时，长时间保存需在冰冻条件下，（-70℃不超过6个月）,只能冻融1次，在37℃迅速解冻，以减低凝血因子的消耗，解冻后立即测试.
4. 标本运输：低温条件下运输.
5. 标本拒收的标准:抗凝剂不符合,采血量不准确,凝固,溶血,脂血标本不能作测定.
6. 实验材料:
6.1 德国Dade Behring Marburg 公司Test Thrombin试剂（干粉）,每瓶加5ml配套缓冲液溶解(50毫升),未开封试剂2～8℃贮存到说明书上有效期.复溶试剂2～8℃保存不超过5天.
6.2 缓冲液，用于凝血酶试剂的溶解,2～8℃贮存到说明书上有效期.
6.3 Dade Citrol质控血浆.用蒸镏水1ml溶解后放置30分钟,才能使用或分装.复溶后,室温保存2小时,2～8℃4小时.
7. 仪器设备:
7.1 仪器名称: Sysmex CA-1500全自动血液凝固分析仪
7.2 仪器厂家:日本Sysmex公司
7.3 仪器型号:Sysmex CA-1500
7.4 仪器技术参数:
7.4.1 速度:最快检测速度180测试/小时,组合检测约140测试/小时
7.4.2 试剂位:36个,具冷藏功能.
7.4.3 样本位:50个,可自动连续添加.
7.5 仪器校准程序:
7.5.1 校准频率:当方法改变,试剂厂家或试剂型号改变,仪器维修影响测定结果等情况时,必须进行校
准.
7.5.2 校准操作:设置标准曲线分析(由仪器提供商指定工程师执行)
8. 操作步骤:
8.1 检查前准备:
8.1.1 清空废液瓶,清空反应杯抛弃槽.
8.1.2 添加足够反应杯(不能超出警告线)
8.1.3 添加清洁液试剂,清洗用蒸镏水等.
8.2 开机
先开打印机再开主机,开机后仪器自检,约15分钟,屏幕上方“Not Ready”变为“Ready”,表示仪器预热完成,进入系统准备工作状态,可进行测定.
8.3 输入工作清单:
从主菜单选,选
并同时输入此标本的其他测试项目,若选“凝血四项（APTT、APAPTT、Fbg、APTT）”，
可按，选完项目后按
某项目时只需按该项目（按键如
（快速输入可用.
8.4 放置样本
按8.3所设好的工作清单顺序将离心分离好的样本放置于样本架上,并按顺序把样本架排列于Sampler 进样器右边位置(最多同时放5架共50个样本)
8.5 .
盖好遮光盖,确认仪器为准备状态(显示屏正上方显示“Ready”)按,进样开始,→测定进行,仪器显示为“Analying”(被选择项目背景变为“◎”，此时可重复8.3,8.4,继续输入其他架样本工作
清单,继续确认测试任务,添加样本架继续测试,→测定完成,测定项目背景变为“●”，打印机打印出测定结果，所有测定清单完成，系统恢复“Ready”状态.
8.6 每日维护:完成每日的测定后,关机前维护.
8.6.1 冲冼针Rinse Probe
8.6.2 清空废液瓶,和已使用过的反应杯.
8.6.3 将试剂架连用试剂放入冰箱.
8.7 关机:先关主机,再关打印机.
9．检验结果的判断与分析:
9.1 仪器测定APTT线性范围在5-200s,测定完成仪器将显示每个参数的结果，若不能对参数进行正确
计算,将出现下列信息:
﹡﹡﹡,﹡出现错误,不能得到分析数据
ˉˉˉ,ˉ不能计算参数
＋＋＋，＋数值超出线性范围.
9.2 仪器设定APTT参考范围在24-36s,如果得到一个不正常数值,在数据的左侧将出现下列标记:
﹡出现错误信息
< 数据低于可报告的低限
> 数据高于可报告的高限
10. 质量控制:每批样本同时测定两个浓度水平(高值和正常值)的质控品,以2S为警告限,3S为失控限,绘制质控图,判断是否在控.质控规则详见室内质控作业指导书.
11. 临床意义:APTT是用于判定血栓前状态或血栓性疾病的筛查项目.
11.1 参考范围: 24-36s，（患者结果超过正常对照3秒以上有临床意义）
11.2纤维蛋白原溶解治疗的监测
11.3纤维蛋白形成障碍或怀疑重度纤维蛋白原缺乏的筛查
11.4 肝素诱导活化部分凝血活酶延长和纤维蛋白形成障碍的鉴别诊断
12．变异的潜在来源
12.1抗凝剂：草酸盐、EDTA、肝素不能用于APTT测定项目，抗凝比例不当也将影响结果的准确性。

12.2样本采集处理不当，如血与抗凝剂未充分混匀，出现小凝块；混匀时过分用力，使红细胞破坏出
现溶血，均会造成结果变异。

12.3纤溶药物的影响：如双香豆素、链激酶、尿酶等
12.4妊娠与急性炎症的影响
13. 操作注意事项:干粉试剂及质控血浆溶解
13.1 确认溶剂类型，一般溶解液包括：蒸馏水、生理盐水、缓冲液、厂家特定溶解液，必须按说明书
要求使用。

13.2 溶解时，轻轻转动容器，保证干粉完全溶解，避免剧烈振荡。

13.3复溶后，室温放置5-10分钟方可使用。

14. 仪器维护与保养
14.1 日常维护（见8.6）
14.2 每周维护
14.2.1液路冲洗：仪器在“Ready”状态下，从主菜单按
→按键运行此程序→完成后按返回。

14.2.2清洁仪器：定期用擦布擦干净仪器内外，包括试剂槽。

14.3 需要时维护：
14.3.1调整压力：仪器在“Ready”状态下，以主菜单按→按
键，显示压力是否在其调整范围内？若不在，则打开仪器右侧相应压力调整旋钮，旋动调整好压力，再锁紧旋钮。

14.3.2更换灯泡：关机→从仪器右侧取下灯泡外盖及内盖→换上好的灯泡→装上内外盖→从主菜单按
14.3.3更换保险管：关机→从仪器左侧旋下保险盖→更换上好的保险管→装上保险管盖。

15. 参考文献
15.1 叶应妩.王毓三等《全国临床检验操作规程》第三版，东南大学出版社.
15.2 Sysmex公司《Sysmex CA-1500操作手册》1998.6修订本.。