薄层层析

薄层层析硅胶板（来自互联网）

薄层层析硅胶板是用高纯度薄层层析硅胶（粉状）调入一定量的粘结剂喷制成，板面纯白、平整均匀、细密。

主要成分为SiO2·nH2O，化学性质稳定，除强碱和氢氟酸外，不与其他酸碱反应。薄层层析硅胶板可直接用于多种类型有机物质的定性或定量分析，

2 用途

在医药、农药、中草药、有机化工产品及粮食、食品的微量杂质及主要成份的鉴定中已得到普遍应用。

3 分类

硅胶板的规格分为：G ，H，GF254，HF254。

那这些型号到底代表什么意思？他们的依据是什么呢？

"硅胶H"--不含粘合剂；

"硅胶G"--含煅石膏粘合剂；

"硅胶HF254"--含荧光物质，可用于波长为254nm紫外光下观察荧光；

"硅胶GF254"--既含煅石膏又含荧光剂。

还有一个非常简单的判别分类的办法就是，不同型号的硅胶在于其中石膏含量的不同，这一点体现在硅胶的粘稠度不同，石膏含量越高越粘稠。这个在卖硅胶的瓶子上都有标识，比如硅胶H就很稀松，硅胶G一般粘稠度还是比较适中的。

【黄曲霉毒素生物酶解毒研究——黄曲霉毒素B1 酶解毒机制研究】

3.1.3 对黄曲霉毒素B1有活力菌株的筛选

取玻璃试管，分别加入AFB1标准储备液（终浓度0.5ug/ml）60ul，65℃水浴下吹氮气挥干。分别加上述菌体粗酶或发酵液粗酶3ml,置28℃超级恒温水浴箱内温浴30分钟，加3ml氯仿终止作用，取氯仿层。Ex365nm,Em445nm下测荧光强度（F)（HITACHI 650-60 型荧光分光光度计，日本Hitachi 公司）。

沸水浴5分钟后的同样量的菌体粗酶或发酵液粗酶代替上述未经沸水浴的粗酶，同样条件操作及测试，其结果作为对照。样品荧光强度的大小代表样品作用后AFB1残留量。

每个样品及对照品均重复3次，均设双样，求其均值体。

3标准曲线的测定(薄层色谱法）

取黄曲霉毒素B1标准溶液（10ug/ml)，用定量毛细管（0.5，1，2,5ul）分别取5到50ng 黄曲霉毒素B1点在硅胶60A薄层板（10×10cm,预制板，E.Merck Co.,德国)上，两端间隔1.25cm,点与点之间间隔1cm.自然干后，于15×15cm层析缸内用精制过无水乙醚预展后，再以丙酮-氯仿（88:12 v/v）溶剂系统展开。板上的AFB1用荧光光密度用荧光薄层扫描仪在365nm下检测并作标准曲线。

4 样品中黄曲霉毒素B1含量的测定（工作终浓度0.5ug/ml）

黄曲霉毒素B1反应后液或反应对照液（见3.1.3，煮沸及未煮沸）