生化酶课件
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酶—酶的催化特性(生物化学课件)
酶的催化特点
酶的催化特点
酶是生物催化剂，与无机催化剂相比，二者有共性； 但酶的化学本质是蛋白质，又在生物体内作用，因此酶的作用 又有特性。
2
酶和一般催化剂的共性
1.用量少而催化效率高； 2.它能够改变化学反应的速度，但是不能改变化学
反应平衡。 3.只能催化热力学允许的反应，在反应前后不发生
改变。
3
酶催化作用特性
高效性 专一性
4
1．高效性
酶的催化作用可使反应速度提高106 -1012倍。
例如：过氧化氢分解
2H2O2
2H2O + O2
用Fe3+ 催化，效率为6×10-4 mol/mol.S，而用过氧化氢酶催化，
效率为6×106 mol/mol.S。
用-淀粉酶催化淀粉水解，1克结晶酶在65C条件下可催化2吨淀粉 水解。
• (3)酸碱催化：
+
-COOH, -NH 3,
-SH,
+
OH HN
NH
广义酸基团 （质子供体）
-COO -,
..
-NH 2,
-S ,-
O-
:N
NH
广义碱基团 （质子受体）
(4)共价催化：
催化剂通过与底物形成反应活性很高的 共价过渡产物，使反应活化能降低，从 而提高反应速度的过程，称为共价催化。
酶中参与共价催化的基团主要包括 His 的咪唑基，Cys 的硫基，Asp 的羧基， Ser 的羟基等。
某些辅酶，如焦磷酸硫胺素和磷酸吡活的生理意义
避免细胞产生的酶对细胞进行自身消化，并使酶在特定的部 位和环境中发挥作用，保证体内代谢正常进行。
有的酶原可以视为酶的储存形式。在需要时，酶原适时地转 变成有活性的酶，发挥其催化作用。
酶的催化特点
酶是生物催化剂，与无机催化剂相比，二者有共性； 但酶的化学本质是蛋白质，又在生物体内作用，因此酶的作用 又有特性。
2
酶和一般催化剂的共性
1.用量少而催化效率高； 2.它能够改变化学反应的速度，但是不能改变化学
反应平衡。 3.只能催化热力学允许的反应，在反应前后不发生
改变。
3
酶催化作用特性
高效性 专一性
4
1．高效性
酶的催化作用可使反应速度提高106 -1012倍。
例如：过氧化氢分解
2H2O2
2H2O + O2
用Fe3+ 催化，效率为6×10-4 mol/mol.S，而用过氧化氢酶催化，
效率为6×106 mol/mol.S。
用-淀粉酶催化淀粉水解，1克结晶酶在65C条件下可催化2吨淀粉 水解。
• (3)酸碱催化：
+
-COOH, -NH 3,
-SH,
+
OH HN
NH
广义酸基团 （质子供体）
-COO -,
..
-NH 2,
-S ,-
O-
:N
NH
广义碱基团 （质子受体）
(4)共价催化：
催化剂通过与底物形成反应活性很高的 共价过渡产物，使反应活化能降低，从 而提高反应速度的过程，称为共价催化。
酶中参与共价催化的基团主要包括 His 的咪唑基，Cys 的硫基，Asp 的羧基， Ser 的羟基等。
某些辅酶，如焦磷酸硫胺素和磷酸吡活的生理意义
避免细胞产生的酶对细胞进行自身消化，并使酶在特定的部 位和环境中发挥作用，保证体内代谢正常进行。
有的酶原可以视为酶的储存形式。在需要时，酶原适时地转 变成有活性的酶，发挥其催化作用。
生化酶
（二）相对专一性 有些酶只对底物分子中某种化学键有选择性
的催化作用，对该键两端的基团，则无严格
要求。(键专一性)
（一般了解）
例如：脂肪酶催化酯类分子中的酯键发生
水解反应，对酯键两端的 R 和 R' 基团，则无
严格要求。
又如：
蔗糖酶 果糖—葡萄糖 蔗糖 蔗糖酶 果糖—葡萄糖—半乳糖 棉子糖
一般了解
维生素B12 钴胺素 甲基钴胺素
甲基轉移
二、酶的命名与分类
（一） 酶的命名 1 、习惯命名法
（一般了解）
通常以酶催化的底物加反应的类型，
最后标以酶字即成。(1)根据酶作用的底物来命名： 如淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶等；(2)根据酶催化反应
的性质来命名：如脱氢酶、脱羧酶、水解酶等；(3)
根据酶的来源、作用条件等来命名： 胃蛋白酶、淀粉酶、碱性磷酸酯酶等。
质称为底物。
一、酶的化学组成
（要求牢固掌握）
（一）单纯酶 (simple enzyme)
是仅由氨基酸残基构成的酶如脲酶、蛋白酶、淀粉
酶、脂肪酶、等水解酶类。无非蛋白质部分。 蛋白质部分：酶蛋白 (apoenzyme) （二）结合酶 （又称全酶） 非蛋白质部分： 小分子有机化合物 (holoenzyme) （辅助因子） (cofactor) 金属离子
第四章
酶 enzyme
酶学发展简介:酶学研究历史
（一般了解）
公元前两千多年，我国已有酿酒记载。
一百余年前，Pasteur认为发酵是酵母细胞生命
活动的结果。 1877年，Kuhne首次提出Enzyme一词。 1897年，Buchner兄弟用不含细胞的酵母提取液， 实现了发酵。
2022-2023学年 人教版 必修一 酶的作用和本质 课件 (55张)
(4)3号试管Fe3＋数比4号试管H2O2酶高25万倍，但4号试管反应速率更快， 这说明什么？ 提示 过氧化氢酶比Fe3＋ 的催化效率高得多。 (5)2号、3号、4号试管相比，哪支试管最终产生的氧气最多，为什么？ 提示 一样多，几支试管的H2O2溶液的体积和浓度都相同。 (6)该实验可得出什么结论？ 提示 酶具有催化作用，同无机催化剂相比，酶的催化效率更高。
√A.RNA具有生物催化作用
B.酶是由RNA和蛋白质组成的 C.酶的化学本质是蛋白质 D.绝大多数的酶是蛋白质，少数是RNA
对点训练
判断正误
(1)酶的基本组成单位是氨基酸( × ) (2)具有分泌功能的细胞才能产生酶( × ) (3)酶是活细胞产生的，只能在细胞内起催化作用( × ) (4)酶在反应完成后立即被降解成氨基酸( × ) (5)酶具有催化、调节等多种功能( × )
核心探讨
关于酶的相关总结
化学本质 合成原料 组成元素 合成场所
3.实验过程和现象
试管编号
1
第一步
H2O2浓度 剂量
3% 2 mL
第二步
反应条件 剂量
常温 2滴清水
气泡产生
_不__明__显__
结果
卫生香复燃情况 _不__复__燃__
2
3
4
3%
3%
3%
2 mL
2 mL
2 mL
90 ℃ FeCl3溶液 肝脏研磨液
2滴清水
2滴
2滴
_少__量__
_较__多__
_大__量__
来源
绝大多数是_蛋__白__质__
少数是_R_N__A_
_氨__基__酸__
_核__糖__核__苷__酸__
C、H、O、N，有的含有S _C__、__H_、__O__、__N_、__P__
检验科讲课生化ppt课件
28
血脂的检测
胆固醇（TC） 甘油三脂（TG） 高密度脂蛋白胆固醇（HDL-c） 低密度脂蛋白胆固醇（LDL -c） 载脂蛋白ApoA I 载脂蛋白ApoB 100 脂蛋白(a) LP (a)
29
多谢大家
30
此课件下载可自行编辑修改，供参考！ 感谢您的支持，我们努力做得更好！
27
血糖及糖尿病诊断标准
糖尿病的诊断标准： 1.空腹血浆葡萄糖测定》7.0mmol/L。 2.任意时间血浆葡萄糖测定》11.1 mmol/L 3.口服葡萄糖耐量实验（OGTT）》11.1 mmol/L 正常人空腹血浆葡萄糖浓度的参考范围： 3.89~6.11 mmol/L 。若空腹大于8 .0mmol/L，且有 临床症状可诊断为糖尿病，若小于6.0 mmol/L， 则可排除糖尿病，若在6.0~7.0之间应再做检查
12
胆红素代谢的检验
胆红素来源绝大部分来自衰老死亡的红细胞，当肝细 胞损伤、胆管阻塞、红细胞破坏增加或寿命缩短时， 胆红素代谢发生异常，临床出现黄疸。 血清胆红素分为结合与非结合胆红素，二者合称总胆 红素。TBIL=DBIL+IBIL TBIL:<34为隐性黄疸， <170为轻度黄疸， <340为中度 黄疸，>340为高度黄疸，完全阻塞性黄疸为340~510； 不完全阻塞者为170~265，肝细胞性黄疸17~200；溶 血性黄疸<85
13
三种黄疸的胆红素变化比较
正常人 溶血性黄疸
DBIL 0~6.8 轻度增高
肝细胞性黄疸 中度增高
阻塞性黄疸 明显增高
IBIL 1.7~10.2 明显增高
中度增高
轻度增高
DBIL/TBIL >35% <20%
血脂的检测
胆固醇（TC） 甘油三脂（TG） 高密度脂蛋白胆固醇（HDL-c） 低密度脂蛋白胆固醇（LDL -c） 载脂蛋白ApoA I 载脂蛋白ApoB 100 脂蛋白(a) LP (a)
29
多谢大家
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27
血糖及糖尿病诊断标准
糖尿病的诊断标准： 1.空腹血浆葡萄糖测定》7.0mmol/L。 2.任意时间血浆葡萄糖测定》11.1 mmol/L 3.口服葡萄糖耐量实验（OGTT）》11.1 mmol/L 正常人空腹血浆葡萄糖浓度的参考范围： 3.89~6.11 mmol/L 。若空腹大于8 .0mmol/L，且有 临床症状可诊断为糖尿病，若小于6.0 mmol/L， 则可排除糖尿病，若在6.0~7.0之间应再做检查
12
胆红素代谢的检验
胆红素来源绝大部分来自衰老死亡的红细胞，当肝细 胞损伤、胆管阻塞、红细胞破坏增加或寿命缩短时， 胆红素代谢发生异常，临床出现黄疸。 血清胆红素分为结合与非结合胆红素，二者合称总胆 红素。TBIL=DBIL+IBIL TBIL:<34为隐性黄疸， <170为轻度黄疸， <340为中度 黄疸，>340为高度黄疸，完全阻塞性黄疸为340~510； 不完全阻塞者为170~265，肝细胞性黄疸17~200；溶 血性黄疸<85
13
三种黄疸的胆红素变化比较
正常人 溶血性黄疸
DBIL 0~6.8 轻度增高
肝细胞性黄疸 中度增高
阻塞性黄疸 明显增高
IBIL 1.7~10.2 明显增高
中度增高
轻度增高
DBIL/TBIL >35% <20%
大学生化课件维生素与辅酶
烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADP+） 5 维生素B6：磷酸吡哆醛、磷酸吡哆胺 6 维生素B7 ：生物素 7 叶酸： 四氢叶酸（FH4） 8 维生素B12 9 硫辛酸 10 维生素C
维生素B1
NH2
CH2 N N
H3C
N
H3C
S CH2-CH2-OH
THIAMINE
焦磷酸硫胺素（TPP）
维生素B1
第五章 维生素和辅酶
第五章 维生素和辅酶
一、 维生素及其与辅酶的关系 • 维生素（vitamin）——维持机体正常生命活动不可缺少
的一类小分子有机化合物，人和动物不能合成它们，必须从 食物中摄取。维生素可分为脂溶性（A，D，K，E）和水溶 性两大类。当人体缺乏某种维生素时，则相应代谢受阻，出 现维生素缺乏症。
N
thiazolium ring
S
NH 2
H
O
acidic hydrogen
Cl
CH 3 N
O
H3C
N
N
H3C C
H2
S
N
H2C
C
O
P
O
P
O-
OH
S
O
O- O
O-
H3C
N
H3C
H2
thiamine pyrophospHh2aCte C O P O P O-
O-
O-
resonance
CH 3
N
H+
thiamine pyrophosphate
维生素B1缺乏症
维生素B2
黄素单核苷酸（FMN）和黄素腺嘌呤二核苷酸（FAD）
FMN
Riboflavin
FMN +2H
维生素B1
NH2
CH2 N N
H3C
N
H3C
S CH2-CH2-OH
THIAMINE
焦磷酸硫胺素（TPP）
维生素B1
第五章 维生素和辅酶
第五章 维生素和辅酶
一、 维生素及其与辅酶的关系 • 维生素（vitamin）——维持机体正常生命活动不可缺少
的一类小分子有机化合物，人和动物不能合成它们，必须从 食物中摄取。维生素可分为脂溶性（A，D，K，E）和水溶 性两大类。当人体缺乏某种维生素时，则相应代谢受阻，出 现维生素缺乏症。
N
thiazolium ring
S
NH 2
H
O
acidic hydrogen
Cl
CH 3 N
O
H3C
N
N
H3C C
H2
S
N
H2C
C
O
P
O
P
O-
OH
S
O
O- O
O-
H3C
N
H3C
H2
thiamine pyrophospHh2aCte C O P O P O-
O-
O-
resonance
CH 3
N
H+
thiamine pyrophosphate
维生素B1缺乏症
维生素B2
黄素单核苷酸（FMN）和黄素腺嘌呤二核苷酸（FAD）
FMN
Riboflavin
FMN +2H
生化5第五章维生素与辅酶ppt课件
在酸性溶液中较稳定,中性或碱性溶液中易氧化.
4.缺乏引起的疾病
缺乏时表现出多发性神经炎、皮肤麻木、心力衰竭、四肢无 力、下肢水肿。临床上称为脚气病.
: (二).维生素B2和黄素辅基
1.结构
维生素B2又称核黄素，由核糖醇和6，7-二甲基 异咯嗪两部分组成。
OHOHOH O
CH2CHCHCHCH2OPHOHHH
4.缺乏引起的疾病
缺乏时组织呼吸减弱，代谢强度降低。主要症状为口腔炎， 舌炎、角膜炎、皮炎等。
(三).泛酸和辅酶A（CoA）
1.结构
维生素B3又称泛酸，是由,-二羟基---二甲基丁酸 和一分子-丙氨酸缩合而成。
CH3OH O
O
CH2 C CH C NH CH2 CH2 C COOHOH
OH CH3
参与多种生物合成过程。
N5- -CH3， -CHO ，N10- CHO， N5-N10联合 -CH2-，=CH-
H
H2N
N
N
H H
10
COOH
CH2
O
CH2
N
N
CH2 NH H
OH H 5
C NH CH COOH
3 .来源及性质
叶酸分布于植物叶、酵母及动物肝，肾中。 叶酸为浅黄色结晶，微溶于水，易被光破坏。
N
NN
OH
CO
N
NH NC
O
FMN
FAD
N N
NH2
1
CH=N- 2H
CHNH
-N=CH
10
FMN/FAD 氧化型
HN-CH
FMN2H/FAD2H 还原型
3.来源及性质
核黄素分布于酵母、绿色植物、谷物、鸡蛋乳品及肝脏等中。 植物和微生物可合成。
4.缺乏引起的疾病
缺乏时表现出多发性神经炎、皮肤麻木、心力衰竭、四肢无 力、下肢水肿。临床上称为脚气病.
: (二).维生素B2和黄素辅基
1.结构
维生素B2又称核黄素，由核糖醇和6，7-二甲基 异咯嗪两部分组成。
OHOHOH O
CH2CHCHCHCH2OPHOHHH
4.缺乏引起的疾病
缺乏时组织呼吸减弱，代谢强度降低。主要症状为口腔炎， 舌炎、角膜炎、皮炎等。
(三).泛酸和辅酶A（CoA）
1.结构
维生素B3又称泛酸，是由,-二羟基---二甲基丁酸 和一分子-丙氨酸缩合而成。
CH3OH O
O
CH2 C CH C NH CH2 CH2 C COOHOH
OH CH3
参与多种生物合成过程。
N5- -CH3， -CHO ，N10- CHO， N5-N10联合 -CH2-，=CH-
H
H2N
N
N
H H
10
COOH
CH2
O
CH2
N
N
CH2 NH H
OH H 5
C NH CH COOH
3 .来源及性质
叶酸分布于植物叶、酵母及动物肝，肾中。 叶酸为浅黄色结晶，微溶于水，易被光破坏。
N
NN
OH
CO
N
NH NC
O
FMN
FAD
N N
NH2
1
CH=N- 2H
CHNH
-N=CH
10
FMN/FAD 氧化型
HN-CH
FMN2H/FAD2H 还原型
3.来源及性质
核黄素分布于酵母、绿色植物、谷物、鸡蛋乳品及肝脏等中。 植物和微生物可合成。
生物化学---酶催化作用的特点PPT课件
NAD+ (烟酰胺-腺嘌呤二核苷酸，又称为辅酶I) 和NADP+(烟酰胺-腺嘌呤磷酸二核苷酸,又称为辅 酶II )是维生素烟酰胺的衍生物，它们是多种重要 脱氢酶的辅酶。
NH2
CONH2 O- O- N
N+ O
CH2OPOPOCH2
N O
OO
N N
OH OH
OH OH(OPO3H2)
⑤ 维生素B6和磷酸吡哆醛 维生素B6包括吡哆醇、吡哆醛和吡哆胺。
(2)传递氢（递氢体）：如 硫辛酸；
FMN/FAD、NAD/NADP、C0Q、
(3)传递酰基体：如 C0A、TPP、硫辛酸； (4)传递一碳基团：如 四氢叶酸；
(5)传递磷酸基：如 ATP，GTP；
(6)其它作用： 转氨基，如 VB6 ；传递CO2，如 生物素。
维生素和辅酶
维生素是机体维持正常生命活动所必不可少的一类小分子 有机物质。
NH2 N
ClCH2 N+
H3C N
S
CH3 CH2CH2 OH
焦磷酸硫胺素(TPP)是脱羧酶的辅酶，催化丙酮酸或α–酮
戊二酸的氧化脱羧反应，所以又称为羧化辅酶。
NH2 N
ClCH2 N+
H3C N
S
CH3
OO
CH2CH2 O P O P OH
OH OH
② 维生素B2和黄素辅酶 维生素B2又称核黄素，由核糖醇和6，7-二甲基异咯嗪
(1)活性中心：酶分子中直接和底物结合并起催化反应的空间 局限（部位）。
结合部位(Binding site)：酶分子中与底 物结合的部位或区域
一般称为结合部位。
催化部位(Catalytic site): 酶分子中促使底物发生化 学变化的部位称为催化部 位。
NH2
CONH2 O- O- N
N+ O
CH2OPOPOCH2
N O
OO
N N
OH OH
OH OH(OPO3H2)
⑤ 维生素B6和磷酸吡哆醛 维生素B6包括吡哆醇、吡哆醛和吡哆胺。
(2)传递氢（递氢体）：如 硫辛酸；
FMN/FAD、NAD/NADP、C0Q、
(3)传递酰基体：如 C0A、TPP、硫辛酸； (4)传递一碳基团：如 四氢叶酸；
(5)传递磷酸基：如 ATP，GTP；
(6)其它作用： 转氨基，如 VB6 ；传递CO2，如 生物素。
维生素和辅酶
维生素是机体维持正常生命活动所必不可少的一类小分子 有机物质。
NH2 N
ClCH2 N+
H3C N
S
CH3 CH2CH2 OH
焦磷酸硫胺素(TPP)是脱羧酶的辅酶，催化丙酮酸或α–酮
戊二酸的氧化脱羧反应，所以又称为羧化辅酶。
NH2 N
ClCH2 N+
H3C N
S
CH3
OO
CH2CH2 O P O P OH
OH OH
② 维生素B2和黄素辅酶 维生素B2又称核黄素，由核糖醇和6，7-二甲基异咯嗪
(1)活性中心：酶分子中直接和底物结合并起催化反应的空间 局限（部位）。
结合部位(Binding site)：酶分子中与底 物结合的部位或区域
一般称为结合部位。
催化部位(Catalytic site): 酶分子中促使底物发生化 学变化的部位称为催化部 位。
生化实验课件-尿液淀粉酶活力测定
澱粉酶活性單位的規定是：在37℃，30分鐘，將0.1%澱 粉溶液1mL水解後與碘液作用呈無色的酶量定為一個活 力單位。
三.操作步驟
1. 尿液等梯度稀釋
取8支試管，按次序記上號碼，各加0.9% NaCl 1 mL。 用1mL移液管加尿液1mL於第一管，使其與0.9%NaC1混合
1mL 尿液 1mL 1mL 1mL 1mL 1mL 1mL 1mL
4.顯色
各管中加稀碘液2滴
搖勻。觀察各管的顏色
四.實驗結果與分析
1.酶活力單位的計算：
選擇無色管中尿液稀釋倍數最大的一管來計算。假設第5管為無色 （從第6管起仍有紅色或藍色）。已知第5管內含尿液為1/32mL。 即1/32mL尿液能在37℃，30分鐘水解0.1%澱粉1 mL。所以，1 mL尿液在同樣條件下可水解0.1%澱粉32 mL。即每1 mL尿液中 所含澱粉酶的活性為32個活力單位。
棄之
1mLNaCl 稀釋度 1/2 1/4 1/8 1/32 1/64 1/128 1/256 對照
從第1管吸出1mL到第2管中，再從第2管吸出1mL到第3管……依次類推。 第7管吸出1mL棄之。可得分別含有尿液1/2、1/4，1/8…1/256 mL的 不同濃度的尿稀釋液，第8管不加尿液作為對照管。
2.對實驗結果進行分析
五.實驗注意事項
1.尿液取樣要準確 2.稀釋時取樣要準確 3.移液管反復沖洗 4.Fra bibliotek液不能加的太多
附：試劑與器材
1.0.9%NaC1； 2.0.1%澱粉； 3.碘化鉀一碘溶液（20gKI和10g碘溶於100mL水中，使用前稀釋10倍） 4.移液管； 5.試管； 6.恒溫水浴鍋。
2.加底物
各管加入0.1%澱粉液1mL
三.操作步驟
1. 尿液等梯度稀釋
取8支試管，按次序記上號碼，各加0.9% NaCl 1 mL。 用1mL移液管加尿液1mL於第一管，使其與0.9%NaC1混合
1mL 尿液 1mL 1mL 1mL 1mL 1mL 1mL 1mL
4.顯色
各管中加稀碘液2滴
搖勻。觀察各管的顏色
四.實驗結果與分析
1.酶活力單位的計算：
選擇無色管中尿液稀釋倍數最大的一管來計算。假設第5管為無色 （從第6管起仍有紅色或藍色）。已知第5管內含尿液為1/32mL。 即1/32mL尿液能在37℃，30分鐘水解0.1%澱粉1 mL。所以，1 mL尿液在同樣條件下可水解0.1%澱粉32 mL。即每1 mL尿液中 所含澱粉酶的活性為32個活力單位。
棄之
1mLNaCl 稀釋度 1/2 1/4 1/8 1/32 1/64 1/128 1/256 對照
從第1管吸出1mL到第2管中，再從第2管吸出1mL到第3管……依次類推。 第7管吸出1mL棄之。可得分別含有尿液1/2、1/4，1/8…1/256 mL的 不同濃度的尿稀釋液，第8管不加尿液作為對照管。
2.對實驗結果進行分析
五.實驗注意事項
1.尿液取樣要準確 2.稀釋時取樣要準確 3.移液管反復沖洗 4.Fra bibliotek液不能加的太多
附：試劑與器材
1.0.9%NaC1； 2.0.1%澱粉； 3.碘化鉀一碘溶液（20gKI和10g碘溶於100mL水中，使用前稀釋10倍） 4.移液管； 5.試管； 6.恒溫水浴鍋。
2.加底物
各管加入0.1%澱粉液1mL
生化》实验四影响酶活性的因素ppt演示课件
操作项目ph68磷酸缓冲液ml050505唾液淀粉酶溶液ml37沸水3ph对唾液淀粉酶活性的影响操作摇匀置37水浴中反应每隔1分钟从第2号管中取出1滴反应液于白瓷板上加碘液检查反应进行情况直至反应液不再变色即可停止反应取出所有试管
动物生物化学实验
实验四 影响酶活性的因素
1
一、实验目的
通过对唾液淀粉酶活性的观察，验证 温度、pH、激活剂、抑制剂等对酶活性 的影响。
9
4.激活剂和抑制剂对唾液淀粉酶活性的影响
取试管3支，按下表操作
操作
管号
1
23Βιβλιοθήκη 1% NaCl(ml)1
0
0
1% CuSO4(ml)
0
1
0
蒸馏水(ml)
0
0
1
唾液淀粉酶溶液(ml)
1
1
1
1%淀粉溶液(ml)
1
1
1
摇匀，37℃水浴反应1min左右即可用碘液检查1号试管淀粉水 解程度，待1号试管的反应液不再变色时取出所有试管。分别向各 管滴加1滴碘液，观察比较各管颜色深浅，并解释。
1% NaCl
5
2. 器材
恒温水浴锅 电炉 白瓷板
6
四、实验操作
1. 唾液淀粉酶的制备
取干净的水杯，盛上蒸馏水。 用蒸馏水漱口。 口含约20ml蒸馏水，1-2分钟后，吐入一干净烧 杯中，棉花过滤。
7
2. 温度对唾液淀粉酶活力的影响
取3支试管，按下表操作：
操作项目
1%淀粉溶液(ml) pH6.8磷酸缓冲液(ml) 唾液淀粉酶溶液(ml)
10
五、实验结果
1. 根据实验结果，说明各种因素对唾液淀 粉酶活性的影响情况。
2. 结合课堂讲授理论，解释之。
动物生物化学实验
实验四 影响酶活性的因素
1
一、实验目的
通过对唾液淀粉酶活性的观察，验证 温度、pH、激活剂、抑制剂等对酶活性 的影响。
9
4.激活剂和抑制剂对唾液淀粉酶活性的影响
取试管3支，按下表操作
操作
管号
1
23Βιβλιοθήκη 1% NaCl(ml)1
0
0
1% CuSO4(ml)
0
1
0
蒸馏水(ml)
0
0
1
唾液淀粉酶溶液(ml)
1
1
1
1%淀粉溶液(ml)
1
1
1
摇匀，37℃水浴反应1min左右即可用碘液检查1号试管淀粉水 解程度，待1号试管的反应液不再变色时取出所有试管。分别向各 管滴加1滴碘液，观察比较各管颜色深浅，并解释。
1% NaCl
5
2. 器材
恒温水浴锅 电炉 白瓷板
6
四、实验操作
1. 唾液淀粉酶的制备
取干净的水杯，盛上蒸馏水。 用蒸馏水漱口。 口含约20ml蒸馏水，1-2分钟后，吐入一干净烧 杯中，棉花过滤。
7
2. 温度对唾液淀粉酶活力的影响
取3支试管，按下表操作：
操作项目
1%淀粉溶液(ml) pH6.8磷酸缓冲液(ml) 唾液淀粉酶溶液(ml)
10
五、实验结果
1. 根据实验结果，说明各种因素对唾液淀 粉酶活性的影响情况。
2. 结合课堂讲授理论，解释之。
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2、酶作为生物催化剂的特性
1) 催化效率极高
2) 高度的专一性
3) 反应条件温和 4) 酶的催化活性是受调节控制的
第二节 酶的结构和功能
酶的组成
酶
单纯酶 结合酶
蛋白质部分 + 非蛋白质部分
酶蛋白 + 辅助因子 = 全酶（有活性）
辅酶 辅基
小分子有机化合物 （B族维生素）
无机金属离子
对于结合酶来说： (结合酶)全酶 = 酶蛋白 + 辅助因子 金属离子
酶原的激活∶使酶原转变为具有活性酶的作 用称为酶原的激活。
如∶ 胰蛋白酶原的激活
胰蛋白酶原激活示意图
胰凝乳蛋白酶原 胰蛋白酶
有活性 胰凝乳蛋白酶
有活性、稳定
人体肠道内蛋白酶的激活方式：
胰凝乳蛋白酶原 胰凝乳蛋白酶
胰蛋白酶原 肠激酶
胰蛋白酶
弹性蛋白酶原 弹性蛋白酶
羧肽酶原
羧肽酶
（五）同工酶
又称同功酶，是催化同一化学反应， 而酶分子的结构、组成有所不同的一系列 酶。它们存在于同一个体或组织中，但在 生理、免疫活性和理化性质上都存在差异。
二、酶浓度对反应速度的影响
在正常情况下，酶反应速度与酶浓度之间存在 线性关系，在生产上可通过酶量来控制生产时 间。 v = k [E]
前提条件：[S]足够大， 不存在影响酶活性的 试剂如激活剂和抑制剂。
而当[S]不足或有影响酶活性的试剂存在时， 该关系曲线会发生变形。
三、pH对酶促反应速度的影响
同工酶是由不同亚基组成的二聚体、 四聚体或多聚体，不同的亚基在酶分子中 所占比例不同，酶分子之间即存在差异。
例如：乳酸脱氢酶为四聚体，由M链和H链 以不同的比例组成，共有五种分子形式： M4、M3H、M2H2、MH3、H4。它们虽然都 催化丙酮酸与乳酸之间的氧化还原反应， 但对底物的亲和力不同，对调节因子的敏 感性节 第三节 第四节 第五节 第六节
第概一述节2 概述
酶第的二化节学本酶质和的结化构学2本9 质和结构 酶第催三化节作用酶机制催5化5 作用机制 酶第反四应节动力酶学8促0 反应动力学
酶活力的测定133 酶的分离、纯化141
第一节 概述
一、酶(Enzymes)的概念
酶是由活性细胞产生的具有催化作 用的蛋白质，被称为生物催化剂。
大部分酶的活性受环境pH的影响，在一定pH下酶促 反应有最大速度，高或低于此pH酶反应速度均下降。
钟形曲线
pH影响酶促反应速度的原因：
[1]. 过酸过碱会影响酶分子的构象，破坏 其稳定性，使酶失活。
[2]. 当pH改变不剧烈时，酶虽然不会变性， 但底物分子或酶活性中心基团的解离状态 会发生变化，而在它们诸多解离状态中往 往只有一种状态会适于发生反应。
辅助因子(cofactors) 小分子有机化合物
辅助因子本身无催化作用，但一般在酶促反应中 起运输转移电子、原子或某些功能基团的作用。
小分子有机 化合物
辅酶(coenzyme)——与酶蛋白结合松弛，用 透析法可以分开
辅基(prosthetic group)——与酶蛋白结 合紧密
对双成份酶（结合蛋白质）来 说，辅助因子与酶蛋白应是1∶1， 缺失就表现不出活性，缺少就会影 响活性，但超过比例也不会提高活 性。
必活 需性 基中 团心
结合基团：能识别底物并与之结合，使 底物与酶结合成复合物。
催化基团：能催化底物发生化学变化使 之转化为产物。
辅酶或辅基：帮助接触残基完成催化功 能。
活性中心外的必需基团：对酶催化活性无贡献， 但能维持酶蛋白的构象。
（四）酶和酶原激活
某些酶（特别是蛋白酶）在细胞内合成 时并无催化活性，经过一些酶和酸的作用后 激活，才能变成具有活性的酶。这些无催化 活性的酶分子前体称之为酶原。
酶的pH稳定范围
一定条件下，能够使酶分子空间结 构保持稳定，酶活性不损失或极少损失 的pH范围，称为酶的pH稳定范围。每 种酶往往都有自己的稳定pH范围，它也 是酶的一个基本性质。
四、温度对酶促反应的影响
温度对酶促反应速度的影响有两方面：
[1]. 同一般的化学反应一样，温度升高，底物分 子内能增加，进入活化态的分子数增多，速度 加快。
[3]. pH的改变会影响到酶分子中另一些基 团的解离，从而会影响酶的专一性或活性 中心的构象。
有关最适pH须注意的概念:
最pH并不是酶的特征性常数，它受到底物 的种类和浓度，缓冲液成分等因素的影响。
酶的最适pH和酶的等电点通常并不一致。
多数酶的最适pH在中性或略偏酸性的范围内， 但也有例外，胃蛋白酶的最适pH为1.5，精氨 酸酶的最适pH为9.8。
不同生物体所含的酶在种类和数量
上各有不同，这种差异决定了生物的代 谢类型。
酶（E） 、酶促反应 、 底物（S）、 产物（P）
E
S
P
二、酶催化作用的特点
1、酶与非生物催化剂的共性
1) 反应前后不发生质与量的变化。 2) 用量少、催化效率高。 3) 能加快反应的速度，但不改变反应的平衡点。 4) 都能降低反应的活化能。
生物体内酶的种类极多，但辅助 因子种类很有限。同一种辅助因子往 往能与多种不同的酶结合，形成不同 的全酶，如氧化还原酶类一般都以 NAD(P)、FMN、FAD为辅助因子。 而某种特定的酶一般只与一种辅酶结 合。故酶蛋白决定酶的专一性，而辅 助因子与酶的活性有关。
二、酶分子的结构与功能
酶催化的高效率、高度专一性和酶活 性可调节性都与酶蛋白本身的结构直接相 关。酶蛋白的一级结构决定其空间结构， 而酶的空间构象是酶催化功能的结构基础。
第四节 酶促反应动力学(单底物）
（酶反应速度和影响因素）
酶促反应动力学(Kinetics)是研究酶促反应速度， 反应过程的规律及各种环境因素（底物浓度、温度、 pH、[E]、[S]、抑制剂、激活剂）等对酶促反应 速度的影响的科学。
酶促反应动力学的研究对酶的基础理论和生产 实践都有重要意义。
多底物酶促反应动力学部分请自学（363～367）
（二）酶的活性部位 （ the active site or active center）
酶蛋白分子并不是所有基团都与酶的活性 有关，只有少数特定AA残基的侧链基团和 酶的催化活性有直接关系，这些功能基团 称为酶的必需基团。
必需基团不一定都在活性部位、有些在活 性部位以外起维持酶分子结构的作用。
酶的活性中心与必需基团
1) 催化效率极高
2) 高度的专一性
3) 反应条件温和 4) 酶的催化活性是受调节控制的
第二节 酶的结构和功能
酶的组成
酶
单纯酶 结合酶
蛋白质部分 + 非蛋白质部分
酶蛋白 + 辅助因子 = 全酶（有活性）
辅酶 辅基
小分子有机化合物 （B族维生素）
无机金属离子
对于结合酶来说： (结合酶)全酶 = 酶蛋白 + 辅助因子 金属离子
酶原的激活∶使酶原转变为具有活性酶的作 用称为酶原的激活。
如∶ 胰蛋白酶原的激活
胰蛋白酶原激活示意图
胰凝乳蛋白酶原 胰蛋白酶
有活性 胰凝乳蛋白酶
有活性、稳定
人体肠道内蛋白酶的激活方式：
胰凝乳蛋白酶原 胰凝乳蛋白酶
胰蛋白酶原 肠激酶
胰蛋白酶
弹性蛋白酶原 弹性蛋白酶
羧肽酶原
羧肽酶
（五）同工酶
又称同功酶，是催化同一化学反应， 而酶分子的结构、组成有所不同的一系列 酶。它们存在于同一个体或组织中，但在 生理、免疫活性和理化性质上都存在差异。
二、酶浓度对反应速度的影响
在正常情况下，酶反应速度与酶浓度之间存在 线性关系，在生产上可通过酶量来控制生产时 间。 v = k [E]
前提条件：[S]足够大， 不存在影响酶活性的 试剂如激活剂和抑制剂。
而当[S]不足或有影响酶活性的试剂存在时， 该关系曲线会发生变形。
三、pH对酶促反应速度的影响
同工酶是由不同亚基组成的二聚体、 四聚体或多聚体，不同的亚基在酶分子中 所占比例不同，酶分子之间即存在差异。
例如：乳酸脱氢酶为四聚体，由M链和H链 以不同的比例组成，共有五种分子形式： M4、M3H、M2H2、MH3、H4。它们虽然都 催化丙酮酸与乳酸之间的氧化还原反应， 但对底物的亲和力不同，对调节因子的敏 感性节 第三节 第四节 第五节 第六节
第概一述节2 概述
酶第的二化节学本酶质和的结化构学2本9 质和结构 酶第催三化节作用酶机制催5化5 作用机制 酶第反四应节动力酶学8促0 反应动力学
酶活力的测定133 酶的分离、纯化141
第一节 概述
一、酶(Enzymes)的概念
酶是由活性细胞产生的具有催化作 用的蛋白质，被称为生物催化剂。
大部分酶的活性受环境pH的影响，在一定pH下酶促 反应有最大速度，高或低于此pH酶反应速度均下降。
钟形曲线
pH影响酶促反应速度的原因：
[1]. 过酸过碱会影响酶分子的构象，破坏 其稳定性，使酶失活。
[2]. 当pH改变不剧烈时，酶虽然不会变性， 但底物分子或酶活性中心基团的解离状态 会发生变化，而在它们诸多解离状态中往 往只有一种状态会适于发生反应。
辅助因子(cofactors) 小分子有机化合物
辅助因子本身无催化作用，但一般在酶促反应中 起运输转移电子、原子或某些功能基团的作用。
小分子有机 化合物
辅酶(coenzyme)——与酶蛋白结合松弛，用 透析法可以分开
辅基(prosthetic group)——与酶蛋白结 合紧密
对双成份酶（结合蛋白质）来 说，辅助因子与酶蛋白应是1∶1， 缺失就表现不出活性，缺少就会影 响活性，但超过比例也不会提高活 性。
必活 需性 基中 团心
结合基团：能识别底物并与之结合，使 底物与酶结合成复合物。
催化基团：能催化底物发生化学变化使 之转化为产物。
辅酶或辅基：帮助接触残基完成催化功 能。
活性中心外的必需基团：对酶催化活性无贡献， 但能维持酶蛋白的构象。
（四）酶和酶原激活
某些酶（特别是蛋白酶）在细胞内合成 时并无催化活性，经过一些酶和酸的作用后 激活，才能变成具有活性的酶。这些无催化 活性的酶分子前体称之为酶原。
酶的pH稳定范围
一定条件下，能够使酶分子空间结 构保持稳定，酶活性不损失或极少损失 的pH范围，称为酶的pH稳定范围。每 种酶往往都有自己的稳定pH范围，它也 是酶的一个基本性质。
四、温度对酶促反应的影响
温度对酶促反应速度的影响有两方面：
[1]. 同一般的化学反应一样，温度升高，底物分 子内能增加，进入活化态的分子数增多，速度 加快。
[3]. pH的改变会影响到酶分子中另一些基 团的解离，从而会影响酶的专一性或活性 中心的构象。
有关最适pH须注意的概念:
最pH并不是酶的特征性常数，它受到底物 的种类和浓度，缓冲液成分等因素的影响。
酶的最适pH和酶的等电点通常并不一致。
多数酶的最适pH在中性或略偏酸性的范围内， 但也有例外，胃蛋白酶的最适pH为1.5，精氨 酸酶的最适pH为9.8。
不同生物体所含的酶在种类和数量
上各有不同，这种差异决定了生物的代 谢类型。
酶（E） 、酶促反应 、 底物（S）、 产物（P）
E
S
P
二、酶催化作用的特点
1、酶与非生物催化剂的共性
1) 反应前后不发生质与量的变化。 2) 用量少、催化效率高。 3) 能加快反应的速度，但不改变反应的平衡点。 4) 都能降低反应的活化能。
生物体内酶的种类极多，但辅助 因子种类很有限。同一种辅助因子往 往能与多种不同的酶结合，形成不同 的全酶，如氧化还原酶类一般都以 NAD(P)、FMN、FAD为辅助因子。 而某种特定的酶一般只与一种辅酶结 合。故酶蛋白决定酶的专一性，而辅 助因子与酶的活性有关。
二、酶分子的结构与功能
酶催化的高效率、高度专一性和酶活 性可调节性都与酶蛋白本身的结构直接相 关。酶蛋白的一级结构决定其空间结构， 而酶的空间构象是酶催化功能的结构基础。
第四节 酶促反应动力学(单底物）
（酶反应速度和影响因素）
酶促反应动力学(Kinetics)是研究酶促反应速度， 反应过程的规律及各种环境因素（底物浓度、温度、 pH、[E]、[S]、抑制剂、激活剂）等对酶促反应 速度的影响的科学。
酶促反应动力学的研究对酶的基础理论和生产 实践都有重要意义。
多底物酶促反应动力学部分请自学（363～367）
（二）酶的活性部位 （ the active site or active center）
酶蛋白分子并不是所有基团都与酶的活性 有关，只有少数特定AA残基的侧链基团和 酶的催化活性有直接关系，这些功能基团 称为酶的必需基团。
必需基团不一定都在活性部位、有些在活 性部位以外起维持酶分子结构的作用。
酶的活性中心与必需基团