研磨组织 提取蛋白

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Purpose: 提取蛋白，用于Western blot检测

Material: 组织

裂解液

Procedure:

1.取米粒大小组织，放入研钵中，加入液氮研磨（反复加液氮研磨）

2.研磨充分后加入RIPA裂解液ul（RIPA中裂解液与蛋白酶抑制剂PMSF比例

为100:1）

3.继续研磨至裂解液化为液体后，吸出裂解液放入1.5ml离心管中，裂解15—30min

4.4℃离心，15000rcf，10min

5. 留上清，测蛋白浓度

6. 其余蛋白中加6×buffer，100ul液体中加20ul 6×buffer，终浓度为1×

7. –20℃保存

Result:

蛋白样品浓度：