A6 D-DIMER金标法检测操作规程

A6 D-DIMER金标法检测操作规程
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D-DIMER金标法检测操作规程(NycoCard Reader Ⅱ金标监测仪)





A6.2检测原理
基于免疫过滤试验原理，将血浆加入检测板孔内，样品被吸入，D-Dimer分子由包被D-Dimer单克隆抗体的膜捕获，然后加入D-Dimer单克隆抗体与胶体金的缀合物溶液，膜中D-Dimer将与金标抗体发生结合反应，形成双抗夹心的三明治嵌合体，过剩金标抗体用洗涤液洗去，用NycoCard ReaderII检测膜上红色强度，红色强度与血浆中D-Dimer含量成正比。
A6.3检测项目
D-Dimer含量测定。
A6.4 标本采集与处理
A6.4.1 NycoCard 分析仪使用静脉抗凝血血浆进行分析。
A6.4.2 静脉采血：除非是卧床病人，一般在采血时取坐位，体位影响水分在血管内外的分布。一般从肘静脉取血，婴幼儿可从颈静脉、股静脉取血。使用止血带时时间不超过1min，穿刺成功后立即松开止血带，当需要重新使用止血带时应选用另一上臂。
（1）采血器具：静脉采血器具采用3.2％柠檬酸钠抗凝剂真空采血管和与之配套的7号无菌针头。血液与抗凝剂比例9:1。
（2）采血操作步骤：按静脉采血标准规程严格操作。采血完毕后，要马上翻转真空采血管以抗凝。翻转8至10次可防止大多数血样产生血块或血小板栓子。
A6.5试剂
本实验室使用挪威NycoCard Reader Ⅱ多功能全定量金标监测仪配套试剂，由挪威授权天津市嘉士林科贸有限公司销售。
A6.5.1试剂盒应在2～8℃保存，室温下，稳定一周，避免光线直射和潮湿。
A6.5.2未使用完的检测板放置在盒中塑料袋，在2～8℃保存稳定四周。
A6.6 仪器操作
A6.6.1机器打开自检后屏幕将出现“main menu calibrate”提示，按下“ENTER”键后，根据屏幕英文提示翻开机器右侧黑色盖子，用比色笔的尖部用力插入白色圆盖的中心部位，稍后屏幕出现“active wait”，待屏幕相继出现“calibrated”、“main menu enter test”后，便可以开始测量样本。
A6.6.2从试剂盒中取出比色板，揭开盖纸，按顺序加入50μl洗涤液→50μl血浆→50μl偶联液→50μl洗涤液，5 min内完成下列比色操作步骤。
首先，按下“ENTER”键进入操作状态，屏幕出现“test：D-Dimer new”，再按下“ENTER”键后屏幕出现“measure D-Dimer place pen”，将比色笔用力插紧比色板中心红色区域，等屏幕出现“active wait”后，屏幕将显示D-Dimer试验结果，请及时记录（数据结果无保存！）
A6.6.3关机方法：测量完毕后按“Quit”键直至屏幕出现“off” 按下“ENTER”键关机。
A6.7 注意事项
A6.7.1测量结果单位为毫克/升（mg/L），须乘以1000换算成“纳克/毫升（ng/ml）”后再填写报告。并注意登记！！！
A6.7.2偶联液

在使用前轻轻颠倒混匀2～3次。
A6.7.3结果过高，可用洗涤液稀释，结果乘以稀释倍数。
A6.7.4不同批号的试剂盒试剂不能混用。
A6.7.5温度对结果有影响，因此试剂、标本在操作前应达到室温（20～25℃）。
A6.7.6标本在50秒内未渗入板内将导致结果升高，重新将标本离心。
A6.7.7加样时避免产生气泡，不要用吸管头接触滤膜，以免触破。
A6.9 参考值：0～500 ng/ml
A6.10操作性能：CV＜5％
A6.11临床意义
血浆中D-Dimer浓度的升高表明血管网络中有过量的纤维蛋白形成。通过激活纤溶系统，纤维蛋白可被纤溶酶降解形成各种可溶性的降解产物片段，其中就有D-Dimer。
纤维蛋白降解产物D-Dimer的水平提高，表明体内存在持续的纤维蛋白降解过程。因此，纤维蛋白降解产物D-Dimer是诊断下肢深静脉栓塞（DVT），肺栓塞（PE），弥漫性血管内凝血（DIC）的关键实验指标，具有较好的排除诊断价值。
A6.12. 参考文献
1.中华人民共和国卫生部医政司.全国临床检验操作规程（第三版）．南京：东南大学出版社，2006，234.
2.NycoCard Reader Ⅱ金标监测仪操作手册.



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