培养基模拟灌装试验方法探讨_陈华美
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生产过程中尽量模拟真实生产过程，进行装量取样模拟 动作、非常规 干 预、常 规 干 预、动 态 悬 浮 粒 子 和 沉 降 菌 检 测 等。
6． 2 无菌培养基制备方法
注射液产品用一定浓度（ 3% ） 的液体培养基为模拟灌装 的液体，粉针 剂 可 以 用 培 养 基 干 粉 为 模 拟 分 装 用 的 无 菌 粉 末，也可以用无菌的乳糖、甘露醇等材料用于模拟分装的粉 末。
5． 2 设备设施表面的微生物数量
用棉球擦拭法在试验开始前、中、后，在指定的取样点取 样作无菌检查。取出事先准备好的浸泡在 50mL 灭菌生理盐 水中的无菌棉签，用无菌棉签密排平行擦拭，同时缓慢转动 棉签，应对相同区重复进行采样，用同一棉签垂直于开始的 涂抹进行涂擦。采样后，用无菌手术剪刀把棉签的头部（ 棉 花部位） 剪断投入装有 50mL 无菌 0． 9% 氯化钠溶液的锥形 瓶中，塞上塞子，包扎好，振摇。取供试品 50mL 薄膜过滤，取 出滤膜，菌面朝上，贴于培 养 基 上。于 30 ～ 35℃ 培 养 72h。 接受标准： A 级区域表面微生物最大允许数≤1 个 /25cm2 ，其 他表面≤5 个 25cm2 。
4 人员控制及操作规程
模拟灌装试验中使用的容器（ 安瓿、西林瓶） 的和灌装 / 分装设备等的操作和转运都应与该产品实际生产操作相同。 灌封使用的器具等均采用 121℃ 、30min 湿热灭菌。灌封机
右前臂、胸口、前额、口罩及眼罩等部位的表面微生物进行监 测。用棉球 擦 拭 法 取 样 作 无 菌 性 试 验，棉 球 取 样 面 积 为 25cm2 / 个，于 30 ～ 35℃ 培养 72h。判断标准为： 无 菌 服 ≤5 个； 手套≤1 个。
6． 3 模拟灌装试验
准备好灌装数量安瓿，按正常生产工艺清洗、灭菌，设定 灌装机机速； 将配制间配好的液体培养基按正产工艺除菌过 滤，并存放于无菌储罐里； 灌装试验操作按无菌灌装标准操 作规程进行，做好标记。灌封前及灌封过程中执行以下额外 常规干预模拟挑战试验动作以及非常规干预模拟挑战试验 动作。
（ 1） 常规干预动作 常规操作为正常生产时可能发生的操作，如调节机器和 装量、无菌连接、无菌设备传递、中间品检查、理瓶顺瓶等。 （ 2） 非常规干预动作 非常规操作 包 括 设 备 在 异 常 情 况 下 的 处 理，如 设 备 停 机、设备故障维修、人员频繁进入、卡瓶破瓶、设备调整、漏液 等。某安瓿模拟灌装非常规干预过程如下： 在灌封 1500 支后设备空转 30min，停机 2h； 继续灌封至 3000 支后设备空转 30min，停机 2h； 继续灌封至 4500 支后设 备空转 30min，停机 2h； 继续灌封至 6000 支后设备空转 30 分 钟，停机 2h； 继续灌封至 7500 支后设备空转 30min，停机 2h； 再继续灌装至 9000 支后设备空转 30min，停机 2h； 最后灌装 完 10000 支，停机，从灌装开始至结束应不低于 XX 小时。每 灌封 3000 支，在设备空转停机期间由设备维修人员进行模 拟维修，维修时间 30min，维修时设备停机。 停机时更换灌注针头二次； 停机时更换灌注系统软管道二次； 停机时更换灌注系统活塞二次； 灌封过程中操作人员围绕设备周围巡视五次； 灌封过程中操作人员出进灌封室三次； 每灌封到 3000 支左右时，假设网带有倒瓶的情况下，由 操作人员经手套箱用已灭菌处理的镊子进行人为干预的模 拟动作； 在灌封过程中假设卡瓶的情况下，由操作人员经手套箱 用已灭菌处理的镊子进行人为干预的模拟动作三次； 干预的类型、次 数，调 试 期 间 取 走 的 样 品 数 应 在 方 案 中
及产品污染
备故障）
灌封设备故障并维修，致环境及产品
人员 培 训，使 用 前 通 过 试
模拟维 修 操 作 进 行 挑 战 验
高
是
污染
机，并定期设备维护保养
证
检漏压力不够，导致破损样品无法检
保证足够检漏压力，确保破
检漏
出，无法 真 实 反 应 灌 封 无 菌 保 证 水
高
是
确认检漏压力。
损样品被检出。
污染控制数 /瓶 ≤1
10000 以上
≤1； 若有 2 支污染，需调查后，进行再验证。
2 风险评估
拟灌装装量、灌装 / 分装时间、允许的最差情况（ 系统人为干
试验前需要对验证范围和程序进行适当的风险评估，根 预及设备故障） 、检漏等项目都需要进行风险评估，对于风险
据风险评估的结果确定验证所需项目。对于培养基模拟灌 程度高的项目应采取控制措施降低风险，符合要求。
是
的 70% 、正常机速、110% 机
品污染
速进行分装
最差情
因内包材或者设备出现异常，发生人
况（ 系统
模拟走塞不畅、卡塞、取 样
为非常规干预和因取样检测的常规
严格异常操作的要求，对于
人为干
中
是
等常规 关 于 和 非 常 规 干 预
干预时间过长，造成灌封系统内环境
可能污染的药品报废处理
预及设
情况进行挑战验证
Chen Huamei ，Hua Yu ，Wang Daping
（ Southwest Pharmaceuticals Co． ，LTD． ，Chongqing 400038，China）
Abstract： This method of filling test process and the use of non temininally sterilised products medium simulation are expounded and discussed． this paper，Medium filling simulation test mainly includes establish acceptance standard， medium sterile ，environment control ，performance testing，monitoring，simulation of filling process，microbial cultures and results evaluation and so on，through the test to prove the reliability of the aseptic process． Key words： non temininally sterilised products； medium filling simulation； test
FDA、欧盟及 WHO 的 GMP 中都要求非最终灭菌产品的 无菌保证水平（ SLA） 不低于 10 － 3 （ 百万分之一） ，即在样品数 量大于 5000 瓶，可信限为 95% 时污染率为 0． 1% 或小于 0．
各种方法和各种规程以防止微生物污染的水平达到可接受 的合格标准的能力。培养基模拟灌装试验主要包括建立可 接受标准、风险分析与评估、培养基性能测试（ 无菌性试验和
实验前 对 培 养 基 进 行 灵 敏
对所用 培 养 基 在 实 验 培 养
性 能 试 真实的反映灌封工艺的无菌保证水
高
度试验，确保培养基的灵敏
是
完成后进行促生长试验。
验
平。
度
培 养 基 灌封量过多或过少致试验结果无法
控制每瓶的灌封装量范围，
模 拟 灌 真实的反应灌封工艺的无菌保证水
中
保证灌 封 装 量 能 润 湿 整 个
是
检查人 员 培 训 记 录 所 有 相 关人员，模拟生产实际活动 后取样。 对最多 允 许 人 数 进 行 挑 战 试验
收稿日期： 2015 － 01 － 20
第8 期
陈华美，等： 培养基模拟灌装试验方法探讨
·89·
表 2（ 续）
评估项目
潜在风险
风险评估
控制措施
风险是否降低
确认要求
培 养 基 培养基灵敏度不够，致试验结果无法
2015 年第 44 卷
常规生产可能遇到的最差状态下操作。这些最差条件可能 包括： 灌装速度、最长生产时间、停机维修、破瓶移出、人员进 出、无菌条件下的转移运输、称重、容许的最大人数等。
6． 1 灌装过程
将除菌过滤后的胰酪胨大豆肉汤培养基 （ TSB） 无菌灌 封在安瓿 / 西林瓶内，灌封完毕后，熔封口 / 上塞轧盖； 冻干产 品应在冻干机内模拟冻干程序，对冻干操作要模拟，但应避 免真空度低 导 致 培 养 基 中 的 水 分 减 少 或 微 生 物 生 长 抑 制。 一般可接受的灌装量为 5000 － 10000 瓶，连续试验 3 批。
1% 的指标作为合格标准时可接受的。欧盟和中国 GMP 规 定培养基模拟灌装的目标是零污染，并遵循以下规则［2］。
生长性能试验） 、无菌环境控制与监测、模拟灌装过程、微生
表 1 模拟灌装数量和要求
模拟分装数量 /瓶 3000 ～ 5000
污染控制数 /瓶 0
模拟分装数量 /瓶 5000 ～ 10000
·88·
山东化工 SHANDONG CHEMICAL INDUSTＲY
培养基模拟灌装试验方法探讨
陈华美，黄 渝 ，王大平
（ 西南药业股份有限公司，重庆 400038）
2015 年第 44 卷
摘要： 对非最终灭菌产品培养基模拟灌装试验过程和使用的方法进行了全面阐述和探讨。培养基模拟灌装试验主要包括建立可
《药品生产质量管理规范》（ 2010 版 GMP） 要求非最终灭 菌药物的无菌工艺验证应进行培养基模拟灌装试验［1］。培
物培养、验证周期与频次、结果评价等几方面，本文就这几方 面内容和进行阐述和探讨。
养基模拟灌装试验采用与实际生产工艺相同的条件与操作 1 可接受标准
方法（ 包括生产环境） ，向安瓿 / 西林瓶内灌装经除菌过滤器 过滤的培养基（ 粉针剂用固体培养基粉末） ，然后将此模拟制 品在适当条件下培养，证明无菌药品在灌装过程中所采取的
装试验的无菌验证来讲，人员无菌操作行为、培养基性能、模
表 2 风险分析评估表
评估项目
潜在风险
风险评估
控制措施
风险是否降低
确认要求
人员培训并更衣考核上岗，
生产操作人员更衣不当致手套或洁
高
每批对 进 入 无 菌 区 人 员 取
是
净服表面污染，致产品污染
人员
样监测。
操作间人员过多，致产品污染
高
限定最大人数。
平。
3 培养基性能测试［3］
5． 1 人员监测
模拟灌装试验采用胰酪胨大豆肉汤培养基（ TSB） ，通过
当操作人员结 束 其 关 键 操 作 完 成 后，对 其 左 右 手 套、左
下述试验对培养基微生物生长性能进行确认，培养基应灭菌 后备用。
2． 1 培养基无菌性试验
将用于模拟灌装的胰酪大豆培养基 （ TSB） 另外用试管 配制 4 管（ 20mL / 管） ，在 121℃ 灭菌 15min，盖塞、封口后将其 中 2 管在 20 ～ 25℃ 培养 7d，在 30 ～ 35℃ 培养 7d。若各试管 中应无任何微生物生长，则判断合格。
接受标准、培养基性能测试、无菌环境控制与监测、模拟灌装过程、微生物培养和结果评价等几方面，通过试验以证明无菌工艺的
可靠性。
关键词： 非最终灭菌； 培养基模拟灌装； 试验
中图分类号： TQ460
文献标识码： A
文章编号： 1008 － 021X（ 2015） 08 － 0088 － 03
Discussion on the Simulation Test of Media Fill
是
确认灌封装量
封量Leabharlann Baidu
平。
安瓿的量即可。
按照产 品 工 艺 规 定 灌 封 最
灌封时间小于产品工艺规定的最大
按工艺 规 定 的 最 大 时 限 进
中
是
大时间（ 10 小时） 挑战进行
时限，导致试验不具备代表性
行灌封
验证
时间
挑战工 艺 规 程 中 正 常 机 速
产品暴露时间过长带来的风险致产
高
严格控制允许的灌封速度
5． 3 HVAC 状况监测
在培养基灌装过程中环境应进行监测，监测方案可以与 日常生产不同，但不应低于日常生产。监测项目可以包括温 湿度、压差、尘埃粒子、沉降菌和浮游菌等。
5． 4 安瓿 /西林瓶无菌检查
灌注系统在 A 级洁净区单向流下进行无菌装配，并与滤液罐 连接。所有参 加 模 拟 试 验 的 操 作 人 员 均 应 经 过 培 训 合 格。 参加模拟试验人员组成和数量应严格控制，现场模拟操作人 员要保留最多的人员，进出人员应严格执行相关操作程序， 应减少不必要人员进出［4］。
2． 2 培养基微生物生长性能试验
将配制 好 的 灭 菌 培 养 基 分 装 于 10 支 50mL 试 管 中 （ 20mL / 管） ，在其中 4 支管内接种 ＜ 100CFU 的枯草杆菌，和 1 支不接种枯草杆菌的 TSB 试管 （ 空白对照） 同时在 30 ～ 35℃ 下培养 7 天，在另 4 支试管内接种 ＜ 100CFU 的白色念 珠菌，和 1 支不接种白色念珠菌的 TSB 试管（ 空白对照） 同时 在 20 ～ 25℃ 培养 7d，七天内若 50% 以上接种的各试管的培 养基应出现明显的所接种的微生物的生长，空白试验无菌生 长，则判断合格。
5 洁净环境监测与控制
试验前、试验中和试验结束后在出瓶转盘上取一定数量 安瓿 /西林瓶作无菌检查。
6 模拟灌装过程
培养基模拟灌装应与实际生产相同的条件下尽量模拟 实际生产完成操作。在充分考虑生产时可能造成污染的各 种因素，应对常规生产中的各种干扰活动进行模拟，应模拟
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山东化工 SHANDONG CHEMICAL INDUSTＲY
6． 2 无菌培养基制备方法
注射液产品用一定浓度（ 3% ） 的液体培养基为模拟灌装 的液体，粉针 剂 可 以 用 培 养 基 干 粉 为 模 拟 分 装 用 的 无 菌 粉 末，也可以用无菌的乳糖、甘露醇等材料用于模拟分装的粉 末。
5． 2 设备设施表面的微生物数量
用棉球擦拭法在试验开始前、中、后，在指定的取样点取 样作无菌检查。取出事先准备好的浸泡在 50mL 灭菌生理盐 水中的无菌棉签，用无菌棉签密排平行擦拭，同时缓慢转动 棉签，应对相同区重复进行采样，用同一棉签垂直于开始的 涂抹进行涂擦。采样后，用无菌手术剪刀把棉签的头部（ 棉 花部位） 剪断投入装有 50mL 无菌 0． 9% 氯化钠溶液的锥形 瓶中，塞上塞子，包扎好，振摇。取供试品 50mL 薄膜过滤，取 出滤膜，菌面朝上，贴于培 养 基 上。于 30 ～ 35℃ 培 养 72h。 接受标准： A 级区域表面微生物最大允许数≤1 个 /25cm2 ，其 他表面≤5 个 25cm2 。
4 人员控制及操作规程
模拟灌装试验中使用的容器（ 安瓿、西林瓶） 的和灌装 / 分装设备等的操作和转运都应与该产品实际生产操作相同。 灌封使用的器具等均采用 121℃ 、30min 湿热灭菌。灌封机
右前臂、胸口、前额、口罩及眼罩等部位的表面微生物进行监 测。用棉球 擦 拭 法 取 样 作 无 菌 性 试 验，棉 球 取 样 面 积 为 25cm2 / 个，于 30 ～ 35℃ 培养 72h。判断标准为： 无 菌 服 ≤5 个； 手套≤1 个。
6． 3 模拟灌装试验
准备好灌装数量安瓿，按正常生产工艺清洗、灭菌，设定 灌装机机速； 将配制间配好的液体培养基按正产工艺除菌过 滤，并存放于无菌储罐里； 灌装试验操作按无菌灌装标准操 作规程进行，做好标记。灌封前及灌封过程中执行以下额外 常规干预模拟挑战试验动作以及非常规干预模拟挑战试验 动作。
（ 1） 常规干预动作 常规操作为正常生产时可能发生的操作，如调节机器和 装量、无菌连接、无菌设备传递、中间品检查、理瓶顺瓶等。 （ 2） 非常规干预动作 非常规操作 包 括 设 备 在 异 常 情 况 下 的 处 理，如 设 备 停 机、设备故障维修、人员频繁进入、卡瓶破瓶、设备调整、漏液 等。某安瓿模拟灌装非常规干预过程如下： 在灌封 1500 支后设备空转 30min，停机 2h； 继续灌封至 3000 支后设备空转 30min，停机 2h； 继续灌封至 4500 支后设 备空转 30min，停机 2h； 继续灌封至 6000 支后设备空转 30 分 钟，停机 2h； 继续灌封至 7500 支后设备空转 30min，停机 2h； 再继续灌装至 9000 支后设备空转 30min，停机 2h； 最后灌装 完 10000 支，停机，从灌装开始至结束应不低于 XX 小时。每 灌封 3000 支，在设备空转停机期间由设备维修人员进行模 拟维修，维修时间 30min，维修时设备停机。 停机时更换灌注针头二次； 停机时更换灌注系统软管道二次； 停机时更换灌注系统活塞二次； 灌封过程中操作人员围绕设备周围巡视五次； 灌封过程中操作人员出进灌封室三次； 每灌封到 3000 支左右时，假设网带有倒瓶的情况下，由 操作人员经手套箱用已灭菌处理的镊子进行人为干预的模 拟动作； 在灌封过程中假设卡瓶的情况下，由操作人员经手套箱 用已灭菌处理的镊子进行人为干预的模拟动作三次； 干预的类型、次 数，调 试 期 间 取 走 的 样 品 数 应 在 方 案 中
及产品污染
备故障）
灌封设备故障并维修，致环境及产品
人员 培 训，使 用 前 通 过 试
模拟维 修 操 作 进 行 挑 战 验
高
是
污染
机，并定期设备维护保养
证
检漏压力不够，导致破损样品无法检
保证足够检漏压力，确保破
检漏
出，无法 真 实 反 应 灌 封 无 菌 保 证 水
高
是
确认检漏压力。
损样品被检出。
污染控制数 /瓶 ≤1
10000 以上
≤1； 若有 2 支污染，需调查后，进行再验证。
2 风险评估
拟灌装装量、灌装 / 分装时间、允许的最差情况（ 系统人为干
试验前需要对验证范围和程序进行适当的风险评估，根 预及设备故障） 、检漏等项目都需要进行风险评估，对于风险
据风险评估的结果确定验证所需项目。对于培养基模拟灌 程度高的项目应采取控制措施降低风险，符合要求。
是
的 70% 、正常机速、110% 机
品污染
速进行分装
最差情
因内包材或者设备出现异常，发生人
况（ 系统
模拟走塞不畅、卡塞、取 样
为非常规干预和因取样检测的常规
严格异常操作的要求，对于
人为干
中
是
等常规 关 于 和 非 常 规 干 预
干预时间过长，造成灌封系统内环境
可能污染的药品报废处理
预及设
情况进行挑战验证
Chen Huamei ，Hua Yu ，Wang Daping
（ Southwest Pharmaceuticals Co． ，LTD． ，Chongqing 400038，China）
Abstract： This method of filling test process and the use of non temininally sterilised products medium simulation are expounded and discussed． this paper，Medium filling simulation test mainly includes establish acceptance standard， medium sterile ，environment control ，performance testing，monitoring，simulation of filling process，microbial cultures and results evaluation and so on，through the test to prove the reliability of the aseptic process． Key words： non temininally sterilised products； medium filling simulation； test
FDA、欧盟及 WHO 的 GMP 中都要求非最终灭菌产品的 无菌保证水平（ SLA） 不低于 10 － 3 （ 百万分之一） ，即在样品数 量大于 5000 瓶，可信限为 95% 时污染率为 0． 1% 或小于 0．
各种方法和各种规程以防止微生物污染的水平达到可接受 的合格标准的能力。培养基模拟灌装试验主要包括建立可 接受标准、风险分析与评估、培养基性能测试（ 无菌性试验和
实验前 对 培 养 基 进 行 灵 敏
对所用 培 养 基 在 实 验 培 养
性 能 试 真实的反映灌封工艺的无菌保证水
高
度试验，确保培养基的灵敏
是
完成后进行促生长试验。
验
平。
度
培 养 基 灌封量过多或过少致试验结果无法
控制每瓶的灌封装量范围，
模 拟 灌 真实的反应灌封工艺的无菌保证水
中
保证灌 封 装 量 能 润 湿 整 个
是
检查人 员 培 训 记 录 所 有 相 关人员，模拟生产实际活动 后取样。 对最多 允 许 人 数 进 行 挑 战 试验
收稿日期： 2015 － 01 － 20
第8 期
陈华美，等： 培养基模拟灌装试验方法探讨
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表 2（ 续）
评估项目
潜在风险
风险评估
控制措施
风险是否降低
确认要求
培 养 基 培养基灵敏度不够，致试验结果无法
2015 年第 44 卷
常规生产可能遇到的最差状态下操作。这些最差条件可能 包括： 灌装速度、最长生产时间、停机维修、破瓶移出、人员进 出、无菌条件下的转移运输、称重、容许的最大人数等。
6． 1 灌装过程
将除菌过滤后的胰酪胨大豆肉汤培养基 （ TSB） 无菌灌 封在安瓿 / 西林瓶内，灌封完毕后，熔封口 / 上塞轧盖； 冻干产 品应在冻干机内模拟冻干程序，对冻干操作要模拟，但应避 免真空度低 导 致 培 养 基 中 的 水 分 减 少 或 微 生 物 生 长 抑 制。 一般可接受的灌装量为 5000 － 10000 瓶，连续试验 3 批。
1% 的指标作为合格标准时可接受的。欧盟和中国 GMP 规 定培养基模拟灌装的目标是零污染，并遵循以下规则［2］。
生长性能试验） 、无菌环境控制与监测、模拟灌装过程、微生
表 1 模拟灌装数量和要求
模拟分装数量 /瓶 3000 ～ 5000
污染控制数 /瓶 0
模拟分装数量 /瓶 5000 ～ 10000
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培养基模拟灌装试验方法探讨
陈华美，黄 渝 ，王大平
（ 西南药业股份有限公司，重庆 400038）
2015 年第 44 卷
摘要： 对非最终灭菌产品培养基模拟灌装试验过程和使用的方法进行了全面阐述和探讨。培养基模拟灌装试验主要包括建立可
《药品生产质量管理规范》（ 2010 版 GMP） 要求非最终灭 菌药物的无菌工艺验证应进行培养基模拟灌装试验［1］。培
物培养、验证周期与频次、结果评价等几方面，本文就这几方 面内容和进行阐述和探讨。
养基模拟灌装试验采用与实际生产工艺相同的条件与操作 1 可接受标准
方法（ 包括生产环境） ，向安瓿 / 西林瓶内灌装经除菌过滤器 过滤的培养基（ 粉针剂用固体培养基粉末） ，然后将此模拟制 品在适当条件下培养，证明无菌药品在灌装过程中所采取的
装试验的无菌验证来讲，人员无菌操作行为、培养基性能、模
表 2 风险分析评估表
评估项目
潜在风险
风险评估
控制措施
风险是否降低
确认要求
人员培训并更衣考核上岗，
生产操作人员更衣不当致手套或洁
高
每批对 进 入 无 菌 区 人 员 取
是
净服表面污染，致产品污染
人员
样监测。
操作间人员过多，致产品污染
高
限定最大人数。
平。
3 培养基性能测试［3］
5． 1 人员监测
模拟灌装试验采用胰酪胨大豆肉汤培养基（ TSB） ，通过
当操作人员结 束 其 关 键 操 作 完 成 后，对 其 左 右 手 套、左
下述试验对培养基微生物生长性能进行确认，培养基应灭菌 后备用。
2． 1 培养基无菌性试验
将用于模拟灌装的胰酪大豆培养基 （ TSB） 另外用试管 配制 4 管（ 20mL / 管） ，在 121℃ 灭菌 15min，盖塞、封口后将其 中 2 管在 20 ～ 25℃ 培养 7d，在 30 ～ 35℃ 培养 7d。若各试管 中应无任何微生物生长，则判断合格。
接受标准、培养基性能测试、无菌环境控制与监测、模拟灌装过程、微生物培养和结果评价等几方面，通过试验以证明无菌工艺的
可靠性。
关键词： 非最终灭菌； 培养基模拟灌装； 试验
中图分类号： TQ460
文献标识码： A
文章编号： 1008 － 021X（ 2015） 08 － 0088 － 03
Discussion on the Simulation Test of Media Fill
是
确认灌封装量
封量Leabharlann Baidu
平。
安瓿的量即可。
按照产 品 工 艺 规 定 灌 封 最
灌封时间小于产品工艺规定的最大
按工艺 规 定 的 最 大 时 限 进
中
是
大时间（ 10 小时） 挑战进行
时限，导致试验不具备代表性
行灌封
验证
时间
挑战工 艺 规 程 中 正 常 机 速
产品暴露时间过长带来的风险致产
高
严格控制允许的灌封速度
5． 3 HVAC 状况监测
在培养基灌装过程中环境应进行监测，监测方案可以与 日常生产不同，但不应低于日常生产。监测项目可以包括温 湿度、压差、尘埃粒子、沉降菌和浮游菌等。
5． 4 安瓿 /西林瓶无菌检查
灌注系统在 A 级洁净区单向流下进行无菌装配，并与滤液罐 连接。所有参 加 模 拟 试 验 的 操 作 人 员 均 应 经 过 培 训 合 格。 参加模拟试验人员组成和数量应严格控制，现场模拟操作人 员要保留最多的人员，进出人员应严格执行相关操作程序， 应减少不必要人员进出［4］。
2． 2 培养基微生物生长性能试验
将配制 好 的 灭 菌 培 养 基 分 装 于 10 支 50mL 试 管 中 （ 20mL / 管） ，在其中 4 支管内接种 ＜ 100CFU 的枯草杆菌，和 1 支不接种枯草杆菌的 TSB 试管 （ 空白对照） 同时在 30 ～ 35℃ 下培养 7 天，在另 4 支试管内接种 ＜ 100CFU 的白色念 珠菌，和 1 支不接种白色念珠菌的 TSB 试管（ 空白对照） 同时 在 20 ～ 25℃ 培养 7d，七天内若 50% 以上接种的各试管的培 养基应出现明显的所接种的微生物的生长，空白试验无菌生 长，则判断合格。
5 洁净环境监测与控制
试验前、试验中和试验结束后在出瓶转盘上取一定数量 安瓿 /西林瓶作无菌检查。
6 模拟灌装过程
培养基模拟灌装应与实际生产相同的条件下尽量模拟 实际生产完成操作。在充分考虑生产时可能造成污染的各 种因素，应对常规生产中的各种干扰活动进行模拟，应模拟
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