硝酸盐含量测定方法

硝酸盐测定

1 原理

样品经沉淀蛋白质、除去脂肪后，溶液通过镉柱，或加入镉粉，使其中的硝酸根离子还原成亚硝酸根离子，在弱酸性条件下，亚硝酸根与对氨基苯磺酸重氮化后，再与N－1萘基乙二胺偶合形成红色染料，测得亚硝酸盐总量，由总量减去亚硝酸盐含量即得硝酸盐含量。

2 试剂

氯化铵缓冲溶液～：同。

硫酸镉溶液L)：称取37g硫酸镉

(CdSO4·8H2O)，用水溶解，定容至1L。

盐酸溶液L)：吸取盐酸，用水稀释至1L。

硝酸钠标准溶液：准确称取于110～120℃干燥恒重的硝酸钠，加水溶解，移于500mL容量瓶中，加50mL氯化铵缓冲液，用水稀释至刻度，混匀，在4℃冰箱中避光保存。此溶液每毫升相当于1mg硝酸钠。

硝酸钠标准使用液：临用时吸取硝酸钠标准溶液，置于100mL容量瓶中，加水稀释至刻度，混匀，临用时现配。此溶液每毫升相当于10μg硝酸钠。

亚硝酸钠标准使用液同。

镉柱：

镉粉还原效率的测定：镉粉使用前，

经盐酸浸泡活化处理，再以水洗两次，用水浸没待用。用牛角勺将镉粉加入25mL带塞刻度试管中，至5mL刻度；用少量水封住。吸取硝酸钠标准使用液，加入5mL氯化铵缓冲液。盖上试管塞，振摇2min，静止5min，用漏斗颈部塞有少量脱脂棉的小漏斗过滤，滤液定量收集于50mL容量瓶中，用15mL水少量多次地洗涤镉粉，洗液与滤液合并。加5mL乙酸(60%)后，立即加10mL显色剂，加水稀释至刻度，混匀，暗处置25min。用1cm比色杯，以标准零管调节零点，于550nm 波长处测吸光度，根据亚硝酸盐标准曲线计算还原效率。

计算

式中：X2——还原效率，%；

20——硝酸盐的质量，μg；

m3——20μg硝酸盐还原后测得亚硝酸盐的

质量，μg；

——亚硝酸盐换算成硝酸盐的系数。

3 分析步骤

样品处理

称取约10.00g(粮食取5g)经绞碎混匀样品，置于打碎机中，加70mL水和12mL氢氧化钠溶液(20g/L)，混匀，用氢氧化钠溶液(20g/L)调样品pH＝8，定量转移至200mL容量瓶中加10mL硫酸锌溶液，混匀，如不产生白色沉淀，再补加2～5mL氢氧化钠，混匀。置60℃水浴中加热10min，取出后冷至室温，加水至刻度，混匀。放置，用滤纸过滤，弃去初滤液20mL，收集滤液备用。

测定(用镉粉法还原硝酸盐为亚硝酸盐)

镉粉法：准确吸取的样品滤液，置于盛有高度5mL镉粉的25mL带塞刻度试管中。自“加入5mL氯化铵缓冲液…”按依法操作。

注：蔬菜、腌菜类食品中硝酸盐含量较高，可根据样品中硝酸盐的实际含量，将样品溶液稀释至适当浓度。

4 计算

式中：X3——样品中硝酸盐的含量，mg/kg；

m4——样品的质量，g；

m5——经镉粉还原后测得亚硝酸钠的质量，μg；

m6——直接测得亚硝酸盐的质量，μg；

——亚硝酸钠换算成硝酸钠的系数。

V3——样品处理液总体积，mL；

V4——测定用样液体积，mL。

结果的表述：报告算术平均值的两位有效数。

5 允许差

相对相差≤10%。