HOXA-10、PR、ER在难确诊输卵管异位妊娠诊断中的意义

HOXA-10、PR、ER在难确诊输卵管异位妊娠诊断中的意义

发表时间：2013-06-20T14:29:46.450Z 来源：《中外健康文摘》2013年第16期供稿作者：赵爱华1 张红华2 [导读] ER、PR都是可溶性糖蛋白,分别能特异性识别雌、孕激素及其衍生物。

赵爱华1 张红华2（1广东省佛山市同济医院妇产科 528000；2广东省佛山市妇幼保健院妇产科 528000）【中图分类号】R714.22 【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2013）16-0113-02 【摘要】目的探讨HOXA-10、雌、孕激素受体在难确诊输卵管异位妊娠诊断中的意义。方法应用免疫组化SP 法测定30例正常输卵管组织, 30例输卵管异位妊娠输卵管组织HOXA-10、PR、ER的表达。结果 HOXA-10在异位妊娠输卵管黏膜上皮中表达最高,在正常增生期和分泌期输卵管黏膜上皮中表达明显下降(P<0.05);输卵管异位妊娠组织雌激素受体表达显著高于孕激素受体表达(P<0.001),与正常输卵管组织相比, 输卵管异位妊娠组织雌激素受体表达极显著性增高(P<0.001) , 但孕激素受体表达无差异(P>0.05) 。结论 HOXA-10在输卵管黏膜上皮中表达增强，输卵管异位妊娠的发生与局部组织细胞雌激素受体的过度表达有关, 雌激素受体的检测有助于难确诊的输卵管异位妊娠的诊断。

【关键词】基因 ER PR 输卵管异位妊娠异位妊娠是目前妇产科最常见的急腹症，其中输卵管异位妊娠占95%以上，发病率逐年上升,且越来越年轻化。在早期诊断和治疗过程中，缺乏一种快速、有效、简便、经济的检查方法，尤其在基层医院往往造成误诊和病情延误，形成腹腔大出血，危及患者生命。异位妊娠与女性体内雌激素和孕激素水平有关，同时又与它们的局部应答元件(Response element) -雌激素受体( Estrogen receptor , ER) 和孕激素受体(Progestero nereceptor ,PR) 水平有着密切的关系。本研究采用免疫组化方法研究正常输卵管和异位妊娠输卵管黏膜上皮中HOXA-10和ER、PR的表达, 探讨HOXA-10在输卵管妊娠中的作用,以及ER、PR水平在难确诊输卵管异位妊娠诊断中的意义,为难确诊的输卵管异位妊娠的诊断及治疗提供新思路。

1 资料与方法

1.1 研究对象选取2011年2月至12月两院住院行手术治疗的输卵管妊娠患者30例为实验组。要求无盆腔炎、盆腔手术史及未使用宫内节育器，患者停经<49天，术前未使用甲氨喋呤治疗，且术后病理回报均为输卵管壶腹部妊娠。正常输卵管30例为对照组，取自病理科的输卵管组织蜡块。收集平素月经规律，有正常生育功能，因子宫肌瘤、卵巢囊肿(非功能性卵巢瘤)行手术切除的标本(取壶腹部)，组织学检查输卵管未见异常，通过子宫内膜病理结合月经史，确定月经周期，所取输卵管均处于分泌期。患者术前均未服用过激素类药物及放、化疗治疗。各组患者的停经天数及年龄均无统计学差异。

1.2 方法

取材部位为输卵管峡部或壶腹部, 标本用10%中性福尔马林固定,采用S-P免疫组化染色方法, 操作步骤按试剂说明书进行: 石蜡切片常规脱蜡至水, 0.3% H2O2室温10min, 以消除内源性过氧化物酶活性, PBS (pH7.8)高温高压抗原修复HOXA-10, 柠檬酸盐缓冲液(pH6.0)高温高压抗原修复ER和PR, 羊血清封闭液室温10min, 加一抗( 兔抗人HOXA11多克隆抗体, 武汉博士德生物工程有限公司, 1B50稀释;小鼠抗人ER、PR单克隆抗体工作液, 北京中杉金桥生物技术有限公司), 4e冰箱过夜, 加二抗后, 滴加辣根酶标记链霉卵白素工作液,DAB显色、苏木素复染、脱水、透明、封片。用PBS代替一抗作空白对照。

1.3 结果判断

HOXA-10以细胞浆出现棕黄色颗粒为阳性; ER、PR以细胞核出现棕黄色颗粒为阳性。根据阳性细胞占同类细胞的百分比分和染色强度的乘积评分: 阳性细胞百分比<10%为0分, 占10% ～25%为1分,占26%～50%为2分, >50%为3分;染色强度为淡黄色为1分,棕黄色为3分,介于两者之间为2分。将二者评分之乘积作为该切片的最终评分,将0分定为阴性(-),1～3分定为弱阳性(+),4～6分定为阳性(++), 7～9定为强阳性(+++)。

1. 4 统计学方法

采用SPSS 13. 0统计软件进行数据分析和统计学处理,免疫组织化学结果采用Kruskal-Wallis Test进行分析,P<0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 HOXA-10蛋白的表达主要表达于输卵管黏膜上皮，黏膜间质细胞和输卵管平滑肌也可见少量表达。在异位妊娠输卵管中, HOXA-10的强阳性(+++)表达率最高,在增生期输卵管中明显表达率下降, 而在分泌期输卵管中HOXA-10的表达率下降为0(表1); 将(++～+++) 组合并, 经统计学处理可见差异具有显著性意义( 表2)。表1 HOXA-10免疫组化染色结果