临床常用免疫学检查ppt
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T淋巴细胞表面标志物检测
意义 可用于T淋巴细胞计数, T淋巴细胞亚
群的分类以及判断T淋巴细胞的活化程度。 CD3 分子表达于所有成熟T淋巴细胞的表面,
是总T淋巴细胞的重要标志,CD3+ 常见于甲 状腺功能亢进、淋巴细胞性甲状腺炎、重症肌 无力以及器官移植后排斥反应。 CD3+ 主要见 于免疫缺陷病,如AIDS、先天性胸腺发育不 全综合征以及联合免疫缺陷病等。亦可见于恶 性肿瘤、SLE、免疫抑制剂治疗等。
血清免疫球蛋白
IgM:分子量最大,由5个IgM单体通过J 链连接。是最早出现的Ig,是抗原刺激 后最早出现的抗体,其杀菌、溶菌、溶 血、促吞噬以及凝集作用比IgG高 500~1000倍。
测定方法:单向免疫扩散法(RID)或 免疫比浊法。
血清免疫球蛋白 测定参考值
参考值: IgG:7.6~16.6g/L (RID法) IgA:710~3350mg/L
总补体溶血活性(CH50)测定 参考值 试管法:50000~100000U/L
意义:增高 见于急性炎症、急性组织损伤、恶 性肿瘤及妊娠。降低 见于急性肾小球肾炎、 自身免疫性疾病、亚急性感染性心内膜炎、慢 性肝病、肝硬化、AIDS、严重烧伤等。
血清补体测定
血清C3:主要由巨噬细胞和肝脏合成,在经典 激活途径与旁路激活途径中发挥重要作用。 参考值:免疫比浊法0.85~1.70g/L 增高 作为急性时相蛋白,在急性炎症、传染病 早期、急性组织损伤、恶性肿瘤、抑制物排斥 反应时增高。降低 补体合成能力降低;合成原 料不足;消耗或丢失太多;先天性补体缺乏。
LDH释放法 参考值 细胞毒指数:27.5%~52.5% 51Cr释放法 参考值 NK细胞活性(自然杀伤率):
47.6%~76.8%
NK细胞活性测定
临床意义 活性升高 常见于病毒感染的早期,Down综合征,接
受器官移植、骨髓移植的患者等及免疫增强剂治疗患 者。
活性降低 常见于恶性肿瘤、重症联合免疫缺陷病,
T细胞分化抗原测定
白细胞分化抗原(cluster differentiation,CD)
CD3代表总T淋巴细胞,CD4是辅助、诱导T细胞的标 志,CD8是抑制、杀伤性T细胞的标志。应用单抗和荧 光标记二抗反应在荧光显微镜下或流式细胞仪中计数 CD的百分率。
参考值 :免疫荧光法(IFA): CD3为63.1%±10.8%; CD4 为42.8%±9.5%;CD8 19.6%±5.9%;CD4 /CD8 为(2.2±0.7)/1。流式细胞术:CD3 61%~85%;CD4 28%~58%;CD8 19%~48%;CD4 /CD80.9~2.0/1。
B淋巴细胞表面标志物检测
参考值:免疫荧光法(羊抗人)(以携带该标 志的细胞百分数表示)
SmIg+细胞总数:均值21%(16%~28%) SmIgG+ 细胞:均值7.1%(4%~13%) SmIgM+细胞:均值8.9%(7%~13%) SmIgA+细胞: 均值2.2%(1%~4%) SmIgD+细胞: 均值6.2%(5%~8%) SmIgE+细胞: 均值0.9%(0%~1.5%)
血清免疫球蛋白分类
Ig通常是指具有抗体活性和(或)抗体样结构 的球蛋白。
应用免疫电泳与超速离心分析可将Ig分5类: IgG、IgA、IgM、 IgD、 IgE。
IgG:含量最多或最主要的Ig(75%),唯一 能够通过胎盘的Ig。主要由脾脏和淋巴结中的 浆细胞合成与分泌。
IgA:约占10%,SIgA在局部免疫中起重要作 用。主要由肠系淋巴组织中的浆细胞产生。
乙型肝炎病毒血清标记物检测
HBsAg(+)表示肝中有HBV 见于:乙型肝炎潜伏期和急性期。
慢性迁延性肝炎,慢性活动性肝炎,肝硬化, 肝癌。
慢性HBsAg携带者。 Anti-HBs或抗HBs:中和抗体
乙型肝炎病毒血清标记物检测
HBeAg:有乙型肝炎,是病毒复制活跃, 传染性强的指标;持续阳性易转变为慢 性肝炎; HBeAg+和 HBsAg+可垂直传 播。
B淋巴细胞表面标志物检测
临床意义 SmIg+细胞增高 :常与B细胞恶性增殖有
关,主要见于慢淋、毛细胞白血病以及 巨球蛋白血症等。 SmIg+细胞减低:主要与体液免疫缺陷有 关,常见于性联丙种球蛋白缺乏症、严 重联合免疫缺陷病等。
B淋巴细胞表面标志物检测
B细胞分化抗原CD19、CD20、CD21、 CD22测定
烁仪测量,记录每分钟脉冲数(cpm)。
SI(刺激指数)=PHA刺激管cpm均值/对照管cpm均值
SI>2为有意义,<2为淋巴细胞转化率降低。
T细胞转化试验
临床意义 判断机体细胞免疫功能水平,降低常见
于细胞免疫缺陷或细胞免疫功能低下者, 如恶性肿瘤、淋巴瘤、重症结核、肝硬 化等。增高常见于Down综合征。 估计疾病的疗效与预后
血清补体测定
血清C4测定:由肝脏、吞噬细胞合成, 参与补体的经典激活途径。
参考值:单向免疫扩散法:0.197+/0.109/L。
临床意义基本与C3相似,降低还见于多 发性骨髓瘤、IgA肾病、遗传性C4缺乏 症等。
血清补体测定
补体C1q测定 参考值:0.179±0.04g/L 临床意义:与C3相似,降低还见于活动
丙型肝炎病毒标志物检测
抗-HCV(ELISA) 抗-HCV IgM阳性 常见于急性HCV感染,是诊断
丙肝的早期敏感指标;是HCV活动的指标,是判断 HCV传染性的指标。
抗-HCV IgG HCV-RNA测定 测定方法 逆转录巢式PCR法,荧光定量PCR法
(第三代试剂抗原包括C、NS3、NS4、NS5;丙肝病毒易发生变 异,抗-HCV阳转时间差异较大)
T细胞分化抗原测定
临床意义
CD3 CD4+T细胞下降 常见于某些病毒感染性疾病,如
AIDS、MCV、严重创伤、全身麻醉、大手术、应用 免疫抑制剂等; 升高见于类风湿性关节炎活动期。
C征D、8+重T细症胞肌下无降力、常D见M于(类II风型湿)性以关及节膜炎型、肾S小jo球gr肾en炎综等合; 升高见于传染性单核细胞增多症急性期、MCV以及慢 性乙肝。
血清抗链球菌溶血素“O”测定
参考值: 乳胶凝集法(LAT):<500U 意义:增高 常见于A组溶血链球菌感染相关疾
病,如扁桃腺炎、感染性心内膜炎、风湿热、 链球菌感染后肾小球肾炎等。 Leabharlann BaiduASO 在A组溶血链球菌感染后1周开始升高, 4~6周达高峰,可持续几个月或几年。 假阳性与假阴性
伤寒、副伤寒沙门菌免疫测定
参考值:FACS:CD19+细胞 11.74%±3.73%
临床意义 CD19为全部B细胞共有的表面 标志,增高见于B细胞系统的恶性种瘤, 减低见于体液免疫缺陷病。
NK细胞活性测定
NK细胞能直接杀伤效应细胞,具有抗肿瘤、
抗感染和和免疫调节等功能,亦参与移植物排 斥反应、自身免疫病和超敏反应的发生。
1. I型变态反应 2. IgE型骨髓瘤、寄生虫感染等 3. 慢性肝炎、SLE、类风湿性关节炎等。
血清M蛋白测定 (M protein,monoclonal
immunoglobulins)
是一种单克隆B淋巴细胞异常增殖时产生的IgG分 子或片段,一般不具有抗体活性。
参考值:蛋白电泳法,免疫电泳法:阴性
Anti-HBe或抗Hbe:出现于急性感染的 恢复期,持续时间较长。意味着HBV部 分被清除或抑制,复制减少,传染性降 低。
乙型肝炎病毒血清标记物
Anti-HBc或抗HBc:反映肝细胞受到HBV侵害 的一种指标,主要包括IgM、IgG、IgA。
抗HBc IgM阳性是最早出现的特异性抗体,是 诊断急性乙型肝炎和判断病毒复制活跃的指标, 并提示病人的血液有强传染性。也见于慢性活 动性肝炎。
血清IgD测定 免疫扩散法:0~62mg/L 已发现有些抗核抗体、抗基底膜抗体、抗甲状 腺抗体和抗“O”抗体等均属IgD,但活性甚低。
血清IgE:主要由鼻咽部、支气管、胃肠 道等粘膜固有层的浆细胞分泌,为亲细 胞抗体,能与肥大细胞、嗜碱性粒细胞 膜上的FceR结合,产生I型变态反应。 ELASA:0.1~0.9mg/L 临床意义:
抗HBc IgG 其阳性滴度高,表明患有乙型肝炎, 指正在感染;低滴度为既往感染指标,体内时 间长。
乙型肝炎病毒血清标记物
HBV-DNA定性和定量测定:目前定量测 定范围为102 ~108 拷贝/ml。
与血清免疫学结果的综合评价 HBsAg和Anti-HBs HBeAg,Anti-HBe ,Anti-HBc 5项标志物的变化和联合检测的临床意义
肥达(Widal)反应 参考值 O凝集价<1:80 伤寒H凝集价<1:160 副伤寒A、B、C凝集价<1:80 伤寒、副伤寒沙门菌抗体IgM测定 参考值 ELASA法:阴性或滴度<1:20。
伤寒、副伤寒沙门菌免疫测定
临床意义 O升高,H正常 H正常,O升高 O升高,H升高 O升高,A、B、C任何一项升高
血清C-反应蛋白(CRP)测定
C-反应蛋白是一种由肝脏合成的,能与肺炎双球菌C 多糖体起反应的急性时相反应蛋白,具有激活补体, 促进吞噬和免疫调理作用。
参考值:<8.2mg/L(免疫比浊法) 意义 组织损伤,如大手术,严重创伤,烧伤,心肌梗
死等,发病后数小时迅速增高,病情好转后又迅速下 降。又复升高提示继发感染或深部静脉血栓形成。
CD4 +/CD8+比值下降,常见于AIDS、瘤型麻风病、恶 性肿瘤进行期和复发时。也见于部分感染性疾病如传 染性单核细胞增多症、MCV、血吸虫病等;增高见于 类风湿性关节炎活动期、SLE、Sjogren综合征、重症 肌无力、膜型肾小球肾炎以及器官移植后排斥反应等。
淋巴细胞功能检测
T细胞转化试验 形态学法: T细胞转化率60.1%±7.6% 3H-TdR掺入法:培养淋巴细胞用液体闪乐
性混合性结缔组织病、重度营养不良、 肾病综合征、重度联合免疫缺陷病等。 B因子测定-C3激活剂前体
细胞免疫检查
淋巴细胞表面标志物检测 ㈠ T淋巴细胞表面标志物检测:E玫瑰花
形成试验、免疫荧光法(IFA)、荧光激 活细胞分类法(FACS)、免疫金银法以 及免疫酶染色法等。 E玫瑰花形成试验 SRBC+CD2 参考值 Et 64.4%±6.7% 免疫荧光法
IgM :0.48~2.12 g/L
临床意义
.
免疫球蛋白增高
多克隆增高:常见于各种慢性感染、慢性肝
病、肝硬化、淋巴瘤和某些自身免疫性 疾病,如SLE、类风湿关节炎等。
单克隆增高:主要见于免疫增殖性疾病,如 多发性骨隋瘤、原发性巨球蛋白血症等。
免疫球蛋白降低:常见于各类先天性免疫缺陷 病、获得性免疫缺陷病、联合免疫缺陷病及长 期使用免疫抑制剂的病人。
意义:1.多发性骨髓瘤(MM),占35%~65%,其 中IgG型占60%左右; IgA型占20%左右; 轻链型 占15%左右; IgD、 IgE型罕见。2.巨球蛋白血症。 3.重链病(HCDs)。4.半分子病。5.恶性淋巴瘤。 6.良性M蛋白血症。
血清补体测定
补体是具有酶活性的一种不耐热球蛋白,分3 组:9种补体成分(C1~C9);B、D、P、H、 I 因子;补体调节蛋白,如C1抑制物、C4结合 蛋白、促衰变因子等。
AIDS和免疫抑制剂治疗者等。
肿瘤疗效观察及预后评价 免疫调节功能 NK细胞可释放INF-γ、INF-β和GM-
CSF等细胞因子。
乙型肝炎病毒血清标记物检测
•HBsAg,Anti-HBs或抗HBs HBeAg,Anti-HBe或抗Hbe HBeAg,Anti-HBc或抗Hbc
测定方法:ELASA,RIA
风湿热活动期,可达200mg/L以上。 细菌性感染常明显升高,病毒性感染升高不明显或轻
B淋巴细胞表面标志物检测
表面抗原:CD19、CD20、CD21、CD22和 CD40等
表面受体:B细胞抗原受体(BCR)、细胞因 子受体(CKR)、补体受体(CR)与Fc受体 等。
B细胞表面免疫球蛋白(BCR,SmIg)是B细 胞的特征性表面标志。将荧光标记的抗不同类 型Ig的单克隆抗体进行检测,可将B细胞分为 SmIgG、SmIgM、 SmIgA、 SmIgD、 SmIgE。