沙门氏菌的练习题
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学号:312013211018 姓名:刘从斌
1、什么是食物中毒?其常见的引起食物中毒的原因有哪些种类?(1)概念:指摄入了含有生物性、化学性有害物质的食品或把有毒有害物质当作食品摄入后出现的非传染性的急性、亚急性疾病。(2)①食用病畜禽的肉制品食品;
②病畜禽、带菌人和动物使食品受污染;
③用不洁净水处理食品。
2、沙门氏菌的主要形态特征有哪些?
①革兰氏阴性短杆菌,无芽孢,一般无荚膜,除鸡沙门氏菌和雏
沙门氏菌以外,都有周身鞭毛,运动力强。
②在普通营养琼脂上生长良好,菌落中等大小,无色半透明、圆
形、光滑、湿润。
3、人类沙门氏菌感染的临床类型主要有哪三类?
①伤寒型:由伤寒、副伤寒沙门氏菌引起;
②败血症型:最常由猪霍乱、鼠伤寒和肠炎沙门氏菌引起;
③胃肠炎型:主要由沙门氏菌I的各种血清型引起,最常见的是沙
门氏菌食物中毒和感染性腹泻,是由沙门氏菌在食品中大量繁殖,侵入肠道后继续繁殖并释放大量肠毒素,引起剧烈胃肠炎。
4、沙门氏菌检验流程的主要操作要点?
(1)前增菌:
称取25 g (mL )样品放入盛有225 mL BPW 的无菌均质杯中,以8 000 r/min~10 000 r/min 均质。1 min~2 min,或置
于盛有225 mL BPW 的无菌均质袋中,用拍击式均质器拍打1 min~2 min。若样品为液态,不需要均质,振荡混匀。如需测定pH 值,用1 mol/mL 无菌NaOH 或HCl 调pH至6.8±0.2。无菌操作将样品转至500 mL 锥形瓶中,如使用均质袋,可直接进行培养,于3℃±1 ℃培养8 h~18h。如为冷冻产品,应在
45 ℃以下不超过15 min,或2 ℃~5 ℃不超过18 h 解冻。(2)增菌:
轻轻摇动培养过的样品混合物,移取1 mL,转种于10 mL TTB 内,于42 ℃±1 ℃培养18 h~24h 。同时,另取1 mL,转种于10 mL SC 内,于36 ℃±1 ℃培养18 h~24 h。
(3)分离:
分别用接种环取增菌液1 环,划线接种于一个BS 琼脂平板和一个XLD 琼脂平板(或HE 琼脂平板或沙门氏菌属显色培养基平板)。于36 ℃±1 ℃分别培养18 h~24 h(XLD 琼脂平板、HE 琼脂平板、沙门氏菌属显色培养基平板)或40h~48h (BS 琼脂平板),观察各个平板上生长的菌落。
5、沙门氏菌检验主要包括那5个主要步骤及其主要作用?
①前增菌——第一步使食物样品在含有营养的非选择性培养基中
增菌,使受损伤的沙门氏菌细胞恢复到稳定的生理状态。
②选择性增菌——在含选择性抑制剂的促生长培养基中间,样品
进一步增菌的一个步骤。此培养基允许沙门氏菌持续增殖,同时阻止大多数其他细菌的增殖。
选择性平板分离——这一步采用固体选择性培养基,抑制非沙门氏菌的生长,提供肉眼可见的疑似沙门氏菌纯菌落的识别。
④生物化学筛选——排除大多数非沙门氏菌。也提供了沙门氏菌
培养物菌属的初步鉴定。
⑤血清学技术——提供了培养物菌种的鉴定。
6、沙门氏菌检验的主要流程?
7、请解释三糖铁生化现象的主要原理?
原理:如果细菌可利用蔗糖或乳糖发酵产酸或产酸产气,培养基全部变黄,如果只可以利用葡萄糖,葡糖糖被分解产酸,可使斜面先变黄,但因量少,生成的少量酸因接触空气而被氧化,加之细菌利用培养基含氮物质,生成碱性产物,故使斜面最后为红色,底部由于在厌氧状态下,酸类不被氧化,仍保持黄色。如果细菌又能分解含硫化合物,产生H2S,培养基底部变黑。
8、沙门氏菌检验中的生化试验主要有那几个?它们的基本原理是什
么?如何判断是阴性还是阳性?
(1)靛基质试验(吲哚试验)
①原理:某些细菌含有色氨酸酶,能分解蛋白胨中的色氨酸,
生成靛基质(吲哚)。吲哚与对二甲氨基苯甲醛结合,可形成
红色化合物,即玫瑰吲哚,以此鉴别细菌。
②试验方法:将待检菌接种于培养基中,于36±1℃培养24---48h
后,•加入柯凡克试剂数滴,轻摇试管,呈红色者为阳性,‚或
沿试管壁缓慢加入欧波试剂约0.5ml覆盖液面,两液面接触处
呈现玫瑰红色者为阳性反应,无红色者为阴性反应。
③结果观察与记录:
呈现玫瑰红色,为阳性反应,记+
无红色者,为阴性反应,记-
(2)尿素酶试验
①原理:某些细菌能产生尿素酶,将尿素分解产生氨,氨使培
养基变为碱性,使培养基中的酚红指示剂呈粉红色,培养基由
黄色变为红色,为阳性,以此鉴别细菌。
②试验方法:挑取大量培养18---24h的待检菌,浓密涂布接种
于尿素琼脂斜面上,不要到达底部,留底部作变色对照。
培养2、4和24h分别观察一次结果,培养基变为粉红色为阳性,颜色不变为阴性。
如阴性继续培养至4天,作最终判定。
③结果观察与记录:
培养基变呈粉红色,为阳性,记+
培养基颜色不变,为阴性,记-
(3)氨基酸脱羧酶试验:
①原理:某些细菌能产生氨基酸脱羧酶,可使赖氨酸、鸟氨酸
进行脱羧作用,生成胺类物质和CO2。胺类物质使培养基呈碱
性变紫色,为阳性,如呈黄色为阴性,以此鉴别细菌。
②试验方法:取待检菌,分别接种于含有氨基酸的培养基内和
不含氨基酸的对照培养基内,在36±1℃培养1---4天,每天观
察结果。
③结果观察与记录:
试验管呈紫色,对照管呈黄色,为阳性,记+
试验管、对照管都呈黄色,为阴性,记-
(4)三糖铁试验
原理:如果细菌可利用蔗糖或乳糖发酵产酸或产酸产气,培养
基全部变黄,如果只可以利用葡萄糖,葡糖糖被分解产酸,可
使斜面先变黄,但因量少,生成的少量酸因接触空气而被氧化,
加之细菌利用培养基含氮物质,生成碱性产物,故使斜面最后
为红色,底部由于在厌氧状态下,酸类不被氧化,仍保持黄色。
如果细菌又能分解含硫化合物,产生H2S,培养基底部变黑。
(5)氰化钾试验
①原理:氰化钾是细菌呼吸酶系统的抑制剂,可与呼吸酶作用
使酶失去活性,抑制细菌的生长,但有的细菌在一定浓度的氰
化钾存在时仍能生长,以此鉴别细菌。