流式细胞术彩色图谱(学习版)4b
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图4-9-39 外周血成熟T细胞(CD3+)的不同表达方式
1例右肺癌手术后患者外周血CD3+细胞为70.68%(左:散点图,右:直方图)
图4-9-40 外周血Ts(CD8+)细胞的不同表达方式
(FL2——CD8-PE)
1例NHL Ⅲa 期患者外周血CD8+细胞为18.45%(左:散点图,右:直方图)
图4-9-41 外周血Ts细胞(CD28+)的不同表达方式
(FL2——CD28-PE)
1例右肺癌手术后外周血CD28+细胞为34.73%(左:散点图,右:直方图)
1例恶性淋巴瘤患者外周血
CD29+细胞为21.69% 图4-9-42 肿瘤患者外周血CD29+细胞的标测(FL2——CD29-PE)
1例胃癌手术后、化疗后转移
患者外周血CD28+细胞为
56.67%
图4-9-43 肿瘤患者外周血CD28+细胞的检测(FL2——CD28-PE)
1例食管癌患者外周血CD15+
细胞为68.52%
图4-9-44 肿瘤患者外周血粒细胞(CD15+)的检测(FL1——CD15-FITC)
1例右肺癌患者外周血CD45-RA+细
胞为38.65%
图4-9-45 患者外周血CD45-DR+细胞的检测(FL2——CD45-RA-PE)
1例卵癌患者外周血CD14+细胞为
4.76%
图4-9-46 患者外周血单核细胞(CD14+)的检测(FL1——CD14-FITC)
1例肺癌患者肿瘤组织CD14+细胞
为2.48%
图4-9-47 患者肿瘤组织巨噬细胞(CD14+)的检测(FL1——CD14-FITC)
1例宫颈癌患者外周血
CD35细胞为6.56%
图4-9-48 患者外周血CD35+细胞的检测(FL1——CD28-FITC)
1例乳腺癌患者外周血
CD45+细胞为80.82%
图4-9-49 患者外周血CD45+细胞(全部白细胞)的检测(FL1——CD45-FITC)
图4-9-50 患者外周血CD45+细胞(全部白细胞)和活化T细胞(CD69)细胞因子的检测
待
(十)造血干细胞的表达
图4-10-1 CD34抗原在血细胞发生过程式中的表达
1 荧光标记单参数检测造血干细胞——CD34-FITC
外周血造血干细胞检测的散射光图
(设门取淋巴细胞和单核细胞进行分析)
图4-10-2 1例NHL患者PBSCT动员后外周血造血干细胞(CD34+)的单参数检测
(FL1:CD34-FITC)
CD34+细胞为4.64%(左:散点图;右:直方图,见两个阴性细胞峰可能为淋巴细
胞和单核细胞峰)
1例肺癌化疗后患者外周血1例乳腺癌患者骨髓组织CD34+细胞CD34+细胞为0.68% 为2.11%
图4-10-3 患者不同组织CD34+细胞的表达(FL1: CD34-FITC)
1例小细胞肺癌患者PBSCT动员后外周血CD34+细胞为5.48%
(左:散点图;右:直方图)
1例小细胞肺癌患者PBSCT动员后外周血
CD34+细胞为 2.69%
(左:散点图;右:直方图)
1例NHL患者PBSCT动员后外周血CD34+细胞为6.63%)
(左:散点图;右:直方图)
图4-10-4 不同肿瘤患者外周血CD34+细胞的表达(FL1: CD34-FITC)
(2)荧光标记双参数检测造血干细胞
① CD34-FITC/CD33-PE双参数检测造血干细胞
单荧光抗体标记的造血干、
祖细胞(右限,CD34+细胞为
2.11%)
单色荧光单抗标记的造血祖
细胞(右限,CD33+细胞为
5.66%)
双荧光单抗标记的造血干
细胞(右下限,
CD33-/CD34+细胞为
1.98%)
图4-10-5 1例非霍奇金淋巴瘤患者骨髓组织造血干细胞的双色荧光标记检测
(FL1——CD34-FITC;FL2——CD33-PE)
骨髓组织中的CD33+细胞
右限,造血祖细胞为22.57%
骨髓组织中的CD34+细胞
右限,造血干祖细胞为4.21%
骨髓组织中的CD33-/CD34+细胞
右下限,造血干细胞为1.49% 图4-10-6 1例小细胞肺癌患者骨髓组织造血干细胞的双荧光标记检测
外周血CD33+细胞表达
右限,造血祖细胞为5.44%
外周血CD34+细胞表达
右限,造血干、祖细胞为1.42%
外周血CD33-/CD34+细胞表达
右下限,造血干细胞为1.31% 图4-10-7 1例非霍奇金淋巴瘤患者外周血干细胞的双荧光标记检测
外周血CD33+细胞
右限,造血祖细胞为2.67%
外周血CD34+细胞
右限,造血干祖细胞为0.62%
外周血CD33-/CD34+细胞
右下限,造血干细胞为0.41% 图4-10-8 1例肺癌(实体瘤)患者外周血干细胞的双荧光标记检测
② CD45-FITC/CD34-PE 双参数检测
外周血细胞散射光图 CD45+细胞图
横座标:FSC-H ; 横座标:CD45-FITC 纵座标:SSC-H 纵座标:SSC-H
CD 34+细胞图 CD 34+/CD 45+细胞图
横座标:SSC-H 横座标:CD34-PE
纵座标:CD34-PE 纵座标:CD45-FITC
图4-10-9 外周血的干细胞(CD45+/CD34+)的表达
(Flow cytometry analysis of Diaclone CD34 Control Cells CD45-FITC/CD34-PE dual staini ng)
淋巴细胞
单核细胞 粒细胞
R1:在外周血中CD45+细胞R2:在CD45+细胞中的CD34+细胞
R3:血细胞中的CD34+细胞R4:造血干细胞图4-10-10 外周血中造血干细胞的CD45+/CD34+细胞检测法
R1:在外周血中CD45+细胞R2:血细胞中的CD34+细胞
R3:CD45+细胞中的CD34+细胞R4:造血干细胞图4-10-11 外周血中造血干细胞的CD45+/CD34+细胞检测法
(3)荧光标记三参数检测造血干细胞——ProCOUNT Tm 法
图4-10-12 外周血CD34+细胞的ProCOUNT TM 检测——对照样品
CD34+细胞绝对数:31.7/μl
外周血细胞用ProCOUNT 系统试剂和软件检测CD34细胞含量 图中:红色群体是经过多参数设门后精确设定的CD34阳性细胞群体;
绿色群体是进行定量计数的标准微球
图4-10-13 外周血CD34+细胞的ProCOUNT TM检测——实验样品CD34+细胞绝对数:6484.6/μl
外周血细胞用ProCOUNT系统试剂和软件检测CD34细胞含量
图中:红色群体是经过多参数设门后精确设定的CD34阳性细胞群体;
绿色群体是进行定量计数的标准微球
“门”R2:成熟T淋巴细胞(CD3+)
“门”R3:B 淋巴细胞(CD19+)
“门”R4:单核细胞(CD14+)
“门”R2和“门”R3:造血干细胞(CD 34+)
“门”R2和“门”R3:同型对照
图4-10-14 磁珠分离CD34+细胞前、后骨髓组织各种细胞成分的变化
(左图:分离前样品;右图:分离后样品)
(十一)白血病细胞的免疫分型
1、白血病患者骨髓组织细胞的变化过程
图4-11-1 正常人骨髓组织的细胞表面抗原的表达特征
图4-11-2 白血病初诊患者的骨髓组织细胞表面抗原的表达特征
图4-11-3 白血病缓解期患者骨髓组织的细胞表面抗原的表达特征
R1 有核细胞
R2 CD34+细胞
R3 CD34-/CD19+细胞
R4 CD10+/CD38+细胞
R5 CD38+/CD10+细胞
R6 CD38+/CD10+细胞
R7 CD38-/CD10+细胞
R8 CD38+/CD10-细胞
R9 CD38+/CD10-细胞
2、B 细胞型急性淋巴细胞白血病的免疫表型特征
图4-11-4 1例B 细胞性急性淋巴细胞患者白血病细胞免疫表型的分析
(R1中细胞占87.73%,表达CD19、CD10、CD13、CD20;不表达CD7、CD15、HLA-DR )
R1R2
图4-11-5 1例急性B细胞性淋巴细胞白血病患者白血病细胞免疫表型分
析
(R2中细胞占92.10%,表达CD10、CD19、CD20、CD22、CD34、HLA-DR)
图4-11-6 1例急性B细胞性淋巴细胞白血病患者白血病细胞免疫表型分析(R2中细胞占CD19、CD10、CD22、CD20、HLA-DR、CD34)
图4-11-7 1例急性B细胞性淋巴细胞白血病患者白血病细胞免疫表型分析(R2中细胞占42.90%,表达CD10、CD22、CD19、CD34、HLA-DR、CD13、CD33)
急性B淋巴细胞性白血病(“门”内为白血病细胞)
图4-11-8 1例急性B淋巴细胞性白血病患者白血病细胞抗原κ、λ链的检测(κ、λ链单独表达阳性示细胞是克隆性增生的结果)
3、T 细胞型急性淋巴细胞白血病的免疫表型特征
图4-11-9
1例急性T 淋巴细胞型白血病患者病细胞免疫表型分析
(R1中细胞占72.87%,表达CD5、CD34、CD10、CD7、CD13)
R1R2
R4
图4-11-10 1例T细胞型急性淋巴白血病患者白血病细胞免疫表型分析(R2中细胞占85.4%,表达CD5、CD7、CD19、CD71及胞浆CD3)
图4-11-11 1例T细胞型急性淋巴白血病患者白血病细胞免疫表型分析(R2中细胞占87.25%,表达CD3、CD5、CD7、CD71、HLA-DR及CD13)。