004岛津UV-2550型紫外分光光度计校验SOP
岛津紫外-可见分光光度计uv-2550
岛津UV-2550 仪器说明书一、仪器简介岛津UV-2550是一款博得了用户高度评价的紫外可见分光光度计，性能卓越且操作简单方便，与功能强大的操作软件UVProbe结合，可以具备强大的功能。
小光斑的光学系统使得微量的测定更为方便。
1）高水平的超低杂散光UV-2550采用优异的DDM（双闪耀衍射光栅、双单色器）技术实现了超低杂散光（％以下）和高光通量。
低的杂散光可以对高浓度的样品不进行稀释而直接测定。
2）通用型的软件UVProbeUV-2550通过新一代的中英文双语操作软件UVProbe控制，包含光谱测定、光度测定、动力学测定和报告处理四大模块，从基本的测定到研究解析都可以通过它实现。
UVProbe实现了真正的QA/QC功能，完全支持GLP、GMP。
另外还可以加载膜厚测定、色彩分析等软件。
3）丰富的附件选择和广泛的应用领域生命科学领域：可对从生命体内得到的微量样品进行测试。
积分球测试：可以对浑浊样品和粉末状的样品进行测试。
反射附件：可以对光学材料进行相对反射和绝对反射的测定。
二、主要技术指标三、操作流程1、开机预热1.1先打开电脑显示器和主机，再打开仪器的电源（仪器左侧），双击桌面上的图标UVProbe ,出现“运行身份”对话框，选中“当前用户”，把“保护我的计算机”前的“√”去掉，否则进不去程序，点“确定”，进入软件；1.2点击屏幕下方的“连接”，出现“UV-2550PC 系列– (FD 00)”对话框，仪器开始初始化，所有项目前显示绿灯，则初始化通过，点击“确定”，仪器连接成功；1.3初始化结束后，仪器需预热15min。
预热结束，即可往下操作。
2、基线校正2.1点击菜单栏中的“窗口”，在下拉菜单中，点击“光度测定”，打开光度模块；2.2点击屏幕下方光度计按键栏的“基线”，弹出“基线参数”对话框，输入波长范围（实验所需的波长范围），点击“确定”，启动基线校准操作，在基线扫描过程中，注意波长的变化范围，读数变化≤3nm可接受。
分光光度计操作规程汇总
分光光度计标准操作规程(SOP)关键词：分光光度计使用目的：熟悉分光光度计使用标准操作规程，以保证检测的准确度和精密度及仪器的良好保养维护。
主体内容：1．使用仪器前，使用者应该首先了解本仪器的结构和工作原理。
以及各个操作旋钮之功能。
在未接通电源前，应该对仪器的安全性进行检查，电源线接线应牢固。
通地要良好，各个调节旋钮的起始位置应该正确，然后再接通电源开关。
仪器在使用前先检查一下，放大器暗盒的硅胶干燥筒（在仪器的左侧），如受潮变色，应更换干燥的蓝色硅胶或者倒出原硅胶，烘干后再用。
2．将灵敏度旋钮调置“1”档（放大倍率最小）。
3．开启电源，指示灯亮，选择开关置于“T”，波长调至测试用波长。
仪器预热20分钟。
4．打开试样室盖（光门自动关闭），调节“0”旋钮，使数字显示为“00.0”，盖上试样室盖，将比色皿架置与蒸馏水校正位置，使光电管受光，调节透过率“100%”旋钮，使数字显示为“100.0”。
5．如果显示不到“100.0”，则可适当增加微电流放大器的倍率档数，但尽可能置低倍率档使用，这样仪器将有更高的稳定性。
但改变倍率后必须按(4)重新校正“0”和“100%”。
6．预热后，按(4)连续几次调整“0”和“100%”，仪器即可进行测定工作。
7．吸光度A的测量按(4)调整仪器的“00.0”和“100%”，将选择开关置于“A”，调节吸光度调零旋钮，使得数字显示为“.000”，然后将被测样品移入光路，显示值即为被测样品的吸光度值。
8．浓度C的测量：选择开关由“A”旋置“C”，将已标定浓度的样品放入光路，调节浓度旋钮，使得数字显示为标定值，将被测样品放入光路，即可读出被测样品的浓度值。
9．如果大幅度改变测试波长时，在调整“0”和“100%”后稍等片刻，（因光能量变化急剧，光电管受光后响应缓慢，需一段光响应平衡时间），当稳定后，重新调整“0”和“100%”即可工作。
10．每台仪器所配套的比色皿，不能与其它仪器上的比色皿单个调换。
UV-2550紫外分光光度计操作规程
UV-2550紫外可见分光光度计操作和维护作业指导书1•仪器的工作环境仪器应在温度为5C〜35 C,相对湿度不大于85%的环境中工作，放置仪器的桌子不应受到影响使用的振动，室内无强烈电磁场干扰，避免直接暴露在阳光下，避开有硫化氢、二氧化硫、氟气、氨气等腐蚀气体的地方。
仪器供电电压变化不超过220V± 22V，频率变化不超过50Hz±1Hz，仪器地线端应良好接地。
2 •仪器的主要技术指标及规格2.1光学系统：单光束、衍射光栅2.2波长范围：190 nm〜900nm2.3波长设定：190 nm〜850nm,按0.1 nm间隔任意设定2.4波长显示：四位LED,精确至0.1 nm2.5波长准确度：± 1nm2.6波长重复性：< 0.5nm2.7光源：12V30W卤钨灯、氘灯2.8光源切换：自动2.9检测器：光电倍增管R9282.10带宽：2nm2.11杂光：0.5%T（在200nm,碘化钾溶液）2.12测光量程：透射比0%二〜100%T2.13透射比准确度：± 0.5% T2.14透射比重复性：< 0.3% T3. 操作步骤3.1装置的连接：首先从下拉式菜单的仪器项上追加需要的仪器。
操作完毕如下图①所示，加装了UV-1650、UV- 2550、UV- 2450以及UV- 3150;使用时点击实际连接的仪器，例如下图的UV- 2550，然后点击上图的连接键②，这样装置与PC机连接（当然，中间的通讯电缆的连接、通讯口的指定等都是必须的，此处不再赘述）并开始下示的初始化面。
初始化大约需要5分钟左右，进行一系列的检查和初置，如一切顺利通过就可以开始测定。
广W I最大包置搜索ROM檢测广光原点1慢菠RAM检测厂WI灯能量检测遮光器电动机初始化厂M最大位苴挨焉获绻电动机初始化厂E亲1能呈检测I'J电动机初贻化r光原点Z股素扫描电动机初姑化r持命L测试r過过♦或失败3.2测定…首先选择测定的方式，在主菜单上能发现右图亘土丄所示的各键，自左至右分别为：3.2.1报告生成器：用于制作各种格式的报告。
岛津UV-1800紫外可见分光光度计操作规程(仪器版)
岛津UV-1800紫外可见分光光度计操作规程(仪器版)操作规程：岛津UV-1800紫外可见分光光度计一、操作步骤1.开启主机电源，进行自检和初始化。
2.初始化结束后，进入“模式菜单”。
3.在“模式菜单”下，选择测定样品吸光度的单波长模式或制作标准曲线和样品测定的定量模式。
二、单波长下，样品吸光度的测定1.在单波长模式下，按下“___”键，输入测定波长。
2.若需要空白校正，先放置空白样品，按下“AUTO ZERO”键。
3.放入样品，按下“START/STOP”键，完成样品吸光度的测定。
三、标准曲线的制作1.在定量模式下，进入“测量参数配置屏幕”，设置测量参数选项。
2.选择“1λ”测量方法，输入测量波长。
3.选择定量法，手动输入K、B值制作曲线或根据实际输入标准样品数目，校准曲线方程的次数和零截距条件。
4.设置重复测量次数和样品浓度单位。
5.按下“START/STOP”键，输入标样浓度和吸光度值，进行一次空白调零，消除皿差。
6.查看校准曲线和标准曲线方程和相关系数是否符合要求，保存测量参数和校准曲线。
四、样品的测定按照单波长或定量模式操作，放入样品，进行测定。
1.在测量前，将比色皿放在吸收池样品侧和参考侧，盛有蒸馏水，进行空白校正。
然后按下【AUTOZERO】键，将测量值设为“0ABS(100%)”。
2.在“模式菜单”下，选择【3.定量】键，进入“测量参数配置屏幕”，引用上一次的标准曲线。
如果标准曲线有改变，在“模式菜单”下，按下【F1】键调入需要的标准曲线。
接着按下【F3】键，进入样品测量屏幕，或在参数配置屏幕下按下“START/STOP”键进行样品测量。
3.样品测量后，按下【F4】键保存测量数据，或按下【CE】清除当前数据。
4.最后按下【RETURN】键返回“模式菜单”，关闭主机电源。
5.在测定或100%T（0Abs）校准时，保持样品室盖闭合。
6.定量测定完毕后，多次按下RETURN键返回至“测定参数设置”界面，系统显示“是否删除数据”，选择“是”。
UV-2550分光光度计检定相关知识
UV2550分光光度计检定相关知识检定规程规定:检定周期为半年,两次检定合格的仪器检定周期可延长至一 年.1 波长准确度的检验仪器显示的波长数值与单色光的实际波长值之间的误差.1.1可见区:一般采用窄吸收的溶液,滤光片或蒸汽或放电灯泡发射的射线来校 准.一般绘制镨铷滤光片的吸收光谱曲线,镨铷滤光片的吸收峰在528.7nm和807.7nm.若相差±3nm以上,调节校正螺丝;若相差±10nm以上,重新调整钨灯灯泡位置或 检修单色器的光学系统.个人认为,以上指标对老仪器比较适用,比如721,7230等,如果现在比较好的一 些仪器出现那么大的差别,早该被淘汰了.至于现在一些比较好的仪器波长准确 度相差多少,还没有一个定论,一般要小于0±0.5nm.俺也在研究.不过有一点俺 是要指出的,就是不能用老的指标来衡量新的仪器,这是非常不科学的.(建议:别的一些指标,有用滤光片的,也有用溶液的,不过据我所知,现在用滤光 片已经成为主流,就我个人而言,,滤光片的波长非常准确,而且非常稳定,一般检 定起来比较容易.但有其自身的缺点,那就是价格比较昂贵.相对而言,溶液则比 较便宜,在市场经济高度发达的今天,首先要考虑的就是成本.如果是自己实验室 检定,用溶液就可以了.)1.2紫外区用苯蒸汽的吸收光谱曲线.(不过现在均改用滤光片,苯有毒,对人对环境都有危 害,而且苯蒸汽挥发扩散不均匀)具体做法是:在吸收池里滴一滴液体苯,盖上吸收池盖,待苯挥发充满整个吸收池 后,就可以绘制苯蒸汽的吸收光谱.若实际测定结果与苯的标准光谱曲线不一致, 表示仪器波长误差,必须加以调节.1.3利用氘灯的C线和F线(俺以2550为例进行说明)波长准确度利用氘灯的特征峰的波长进行检查，2 个峰分别位于 486.0 nm 和 656.1 nm,1.3.1 F线测定方式： 能量记录范围： 0 (低)~100 (高)波长范围： 660 (开始)~650 (结束)扫描速度： 中等采样间隔： 自动选择仪器参数表 设置测定参数如下：灯：D2 (氘灯)检测器： PMPM 增益：2狭缝宽： 0.2采样间隔 :自动UV2550 峰的波长应该在 655.8 nm ~ 656.4 nm.1.3.2 C线再次用相同的步骤对测定氘灯的另一个特征峰：记录范围： 0 (低) ~ 10 (高)波长范围： 490 (开始) ~ 480 (结束)本例中，UV2550峰的波长应该在485.7 nm ~ 486.3 nm，操作及谱图2 波长重复性检验重复使用同一波长,单色光实际波长的变动值小于等于0.5nm.波长重复性是波长准确度的重复测量.在相同的测试条件下(温度、扫描速度、狭 缝宽度等),每隔一定时间,对某一吸收光谱的缝位重复测量一次,然后求出测量 值的相对标准偏差,该相对标准偏差的的平均值表示波长的重复性.3透射比正确度的检查通常用硫酸铜、硫酸钴铵溶液,不过最长用的还是重铬酸钾溶液.具体操作:质量分数=0.006000%(即1000g溶液中含有重铬酸钾0.06000g) 重铬 酸钾的0.001mol/L高氯酸标准溶液.以0.001mol/L高氯酸为参比,以1cm的石英 比色皿分别235nm,257nm,313nm,350nm波长处测定透射比,与表一标准溶液的标准值进行比较,其差值在0.8%~2.5%之内.(指标对老仪器而言)表1 W(K2CrO7)=0.006000% K2CrO7 溶液的透射比(25℃)波长/nm 235 257 313 350透射比 18.2 13.7 51.3 22.94稳定度的检查在光电管不受光的条件下,用零点调节器将仪器调至零点,观察3min,读取透射比的变化,即为零点稳定度在仪器测量波长范围的两端向中间靠10nm处,例如仪器工作波长范围为200~800nm,则在210nm和790nm处,调零点后,盖上样品室盖,使光电管受光,调节 透射比为95%(数显仪器调至100%)观察3min,读取透射比的变化即为光电流稳定 度.5分辨率5.1单色器分辨率的测试单色器分辨率表示刚能分辨相邻两条吸收谱带的能力,它是狭缝宽度和单色器色 散率的函数.5.2测试光栅和出射狭缝的特性，以及光栅和出射狭缝的安排决定了仪器的分辨率。
紫外可见分光光度法测定总黄酮含量的方法学考察要点
紫外可见分光光度法测定总黄酮含量的方法学考察要点一、本文概述紫外可见分光光度法是一种基于物质对紫外和可见光的吸收特性进行定量分析的方法。
在生物化学和药物分析中，这种方法被广泛应用于测定各类化合物的含量，其中包括黄酮类化合物。
黄酮类化合物，也称为黄酮或黄碱素，是一类具有广泛生物活性的天然产物，它们广泛存在于植物中，并具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种生物活性。
因此，对黄酮类化合物进行准确、快速的定量分析具有重要意义。
本文旨在探讨紫外可见分光光度法在测定总黄酮含量中的应用，并对其方法学进行考察。
我们将详细介绍紫外可见分光光度法的基本原理、实验操作步骤，以及影响测定结果的各种因素。
我们还将讨论该方法的优点和局限性，以及在实际应用中可能遇到的问题和解决方案。
通过对这些内容的全面探讨，我们希望能够为相关领域的研究人员和技术人员提供有益的参考和指导，推动紫外可见分光光度法在黄酮类化合物分析中的应用和发展。
二、紫外可见分光光度法的基本原理紫外可见分光光度法（UV-Vis spectrophotometry）是一种基于物质对紫外和可见光区域内特定波长光的吸收特性进行定量分析的方法。
该方法基于朗伯-比尔定律（Lambert-Beer Law），即溶液对光的吸收与溶液的浓度成正比，与光通过溶液的路径长度也成正比。
在紫外可见分光光度法中，当一束单色光通过被测溶液时，部分光能会被溶液中的吸光物质吸收，导致光强减弱。
吸光度（A）与吸光物质的浓度（c）和光程长度（l）之间的关系可以表示为 A = εlc，其中ε为摩尔吸光系数，它表示单位浓度、单位光程长度下的吸光度。
对于总黄酮含量的测定，黄酮类化合物在紫外可见光区域内有特定的吸收峰，通过测量这些吸收峰处的吸光度，并结合标准品的工作曲线，可以实现对总黄酮含量的定量分析。
紫外可见分光光度法还具有操作简便、灵敏度高、重现性好等优点，因此在黄酮类化合物含量测定中得到了广泛应用。
需要注意的是，紫外可见分光光度法只能测定那些具有吸光特性的物质，且受到溶液的颜色、浊度以及其它共存物质的影响。
紫外可见分光光度计测定食品中苯甲酸钠的含量
紫外可见分光光度计测定⾷品中苯甲酸钠的含量紫外可见分光光度计法测定⾷品中苯甲酸钠的含量⼀、实验⽬的1.进⼀步了解和熟悉紫外-分光光度计的原理和结构，学习UV2550的操作。
2.掌握紫外分光光度法测定苯甲酸钠的吸收光谱图。
3.掌握标准曲线法测定样品中苯甲酸钠的含量。
⼆、实验原理为了防⽌⾷品在储存、运输过程中发⽣腐蚀、变质，常在⾷品中添加少量防腐剂。
防腐剂使⽤的品种和⽤量在⾷品卫⽣标准中都有严格的规定，苯甲酸及其钠盐、钾盐是⾷品卫⽣标准允许使⽤的主要防腐剂之⼀，其使⽤量⼀般在0.1%左右。
苯甲酸具有芳⾹结构，在波长225nm和272nm处有K吸收带和B吸收带。
根据苯甲酸（钠）在225nm处有最⼤吸收，测得其吸光度即可⽤标准曲线法求出样品中苯甲酸的含量。
三、仪器和试剂1.紫外可见分光光度计UV2550（⽇本岛津），1.0cm⽯英⽐⾊⽫，50ml容量瓶。
2.NaOH溶液（0.1mol/L）3.苯甲酸钠标准溶液的配制(1)苯甲酸钠标准贮备液（1.000g/L）：准确称量经过⼲燥的苯甲酸钠1.000g（105℃⼲燥处理2h）于1000mL容量瓶中，⽤适量的蒸馏⽔溶解后定容。
该贮备液可置于冰箱保存⼀段时间。
(2)苯甲酸钠标准溶液（100.0mg/L）：准确移取苯甲酸钠储备液10.00mL于100mL容量瓶中，加⼊蒸馏⽔稀释定容。
(3)系列标准溶液的配制：分别准确移取苯甲酸钠标准溶液1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL和5.00mL于6个50mL容量瓶中，各加⼊0.1mol/LNaOH溶液1.00mL后，⽤蒸馏⽔稀释定容。
得到浓度分别为2.0 mg/L、4.0mg/L、6.0mg/L、8.0mg/L和10.0mg/L的苯甲酸钠系列标准溶液。
4.市售饮料的配制准确移取市售饮料0.5ml于50mL容量瓶中，⽤超声脱⽓5min驱赶⼆氧化碳后，加⼊0.1mol/LNaOH溶液1.00mL，⽤蒸馏⽔稀释定容。
SHIMADZU UV-2550技术手册1.2
编号：部门：质量控制室版本：1.2起草：审核：替代：1.0Q A审核：批准：执行日期：1 目的建立SHIMADZU UV-2550技术手册，规范SHIMADZU UV-2550的使用、维护行为。
2 范围海正药业成品药质量控制室和研发稳定性对SHIMADZU UV-2550的使用、维护。
3 职责质量控制室、研发稳定性、计量中心4 规程4.1操作规程4.1.1 打开光学台和计算机电源，使氘灯稳定1小时。
4.1.2 进入UV Probe菜单，点击“窗口＞光谱”，打开光度测试模块，再点击光度计键条中的连接按钮，来连接仪器，待仪器自检完成后（标记显绿色），点击确定。
4.1.3 测定样品4.1.3.1 光谱测定模块4.1.3.1.1 建立数据采集方法：点击“编辑＞方法”或点击方法图表M，在弹出的窗口中：“开始框”和“结束框”输入所需的波长范围（波长从大扫描到小），再在“扫描速度”、“采样间隔”及“扫描方式”标签中选定所需的参数，然后点击仪器参数标签，在“测定方式”和“狭缝宽”目录中选择所需的参数。
最后点击确定。
4.1.3.1.2 存储数据采集方法数据采集方法可以储存起来，以后可调出使用。
选择“文件＞另存为”，在文件名输入框中，输入SpecMeth，在另存为类型列表框中，点击方法文件（*.smd），然后点击存储。
4.1.3.1.3 数据采集Ⅰ基线校正在两个样品池中分别加试样的空白溶剂，放入样品室，点击光度计键条中的基线按钮，启动基线校正操作，当基线参数对话框弹出时在“开始波长”和“结束波长”中分别输入测试所需的波长范围。
Ⅱ样品测定将外面的那个样品池拿出，倒掉溶剂，吹干（每次测定样品前，都要先将样品池洗干净，并吹干），加入待测试样，放入样品室，点击光度计键条中的开始按钮，当扫描完毕后，在弹出的新数据集对话框中输入文件名及数据存储元名，点击确定。
4.1.3.1.4 保存数据选择“文件＞另存为”，在对话框顶部的保存位置选择适当的路径，在文编号：部门：质量控制室版本：1.2起草：审核：替代：1.0Q A审核：批准：执行日期：件名输入框中输入文件名，在保存类型中选择“.spc”，在点击保存。
岛津 紫外可见分光光度计UV2550
岛津UV-2550 仪器说明书一、仪器简介岛津UV-2550是一款博得了用户高度评价的紫外可见分光光度计，性能卓越且操作简单方便，与功能强大的操作软件UVProbe结合，可以具备强大的功能。
小光斑的光学系统使得微量的测定更为方便。
1）高水平的超低杂散光UV-2550采用优异的DDM（双闪耀衍射光栅、双单色器）技术实现了超低杂散光（0.0003％以下）和高光通量。
低的杂散光可以对高浓度的样品不进行稀释而直接测定。
2）通用型的软件UVProbeUV-2550通过新一代的中英文双语操作软件UVProbe控制，包含光谱测定、光度测定、动力学测定和报告处理四大模块，从基本的测定到研究解析都可以通过它实现。
UVProbe实现了真正的QA/QC功能，完全支持GLP、GMP。
另外还可以加载膜厚测定、色彩分析等软件。
3）丰富的附件选择和广泛的应用领域生命科学领域：可对从生命体内得到的微量样品进行测试。
积分球测试：可以对浑浊样品和粉末状的样品进行测试。
反射附件：可以对光学材料进行相对反射和绝对反射的测定。
二、主要技术指标三、操作流程1、开机预热1.1先打开电脑显示器和主机，再打开仪器的电源（仪器左侧），双击桌面上的图标UVProbe2.33, 出现“运行身份”对话框，选中“当前用户”，把“保护我的计算机”前的“√”去掉，否则进不去程序，点“确定”，进入软件；1.2点击屏幕下方的“连接”，出现“UV-2550PC 系列–Rev.A(FD 00)”对话框，仪器开始初始化，所有项目前显示绿灯，则初始化通过，点击“确定”，仪器连接成功；1.3初始化结束后，仪器需预热15min。
预热结束，即可往下操作。
2、基线校正2.1点击菜单栏中的“窗口”，在下拉菜单中，点击“光度测定”，打开光度模块；2.2点击屏幕下方光度计按键栏的“基线”，弹出“基线参数”对话框，输入波长范围（实验所需的波长范围），点击“确定”，启动基线校准操作，在基线扫描过程中，注意波长的变化范围，读数变化≤3nm可接受。
UV-2550紫外分光光度计标准操作及维护保养规程
UV-2550紫外分光光度计标准操作及维护保养规程1.目的建立UV-2550型紫外可见分光光度计标准操作及维护保养规程，确保分光光度计正常使用。
2.范围适用于UV-2550型紫外可见分光光度计的操作使用。
3.术语或定义N/A4.职责：仪器管理员及仪器操作人员对本规程的实施负责。
5.程序5.1 工作环境仪器应在温度为5℃～35℃，相对湿度不大于85%的环境中工作，放置仪器的桌子不应受到影响使用的振动，室内无强烈电磁场干扰，避免直接暴露在阳光下，避开有硫化氢、二氧化硫、氟气、氮气、氨气等腐蚀气体的地方。
5.2 供电要求仪器供电电压变化不超过220V±22V，频率变化不超过50±2HZ，仪器地线端应良好接地。
5.3 联机5.3.1开启计算机，进入Windows9X操作系统。
5.3.2用鼠标点击“开始”→“程序”→“紫外可见分光光度计”→紫外可见分光光度计”。
5.3.3计算机屏幕显示“是否联机？”提示，选择“是”。
如未初始化，系统直接进入初始化窗口。
如已初始化过，系统提示“是否初始化？”，可选择“是”或“否”。
选择“是”，则系统进入初始化窗口如选择“否”，则系统进行系统设置后进入工作窗口。
5.4.定量分析5.4.1在工作窗口下选择定量分析进入，设定波长（输入指定波长，并使仪器波长马达驱动至该指定波长。
如果波长输入值大于850nm或小于190nm，将会有提示表明该输入出错，并且等待下一次输入。
如取消设定，则所输入波长值无效。
否则产针会等待输入，直至输入的波长值正确为止）。
5.4.2取比色皿一只倒入空白溶液，放入样品室第一格；另取配对比色皿一只倒入待测液，放入样品室第二格，盖好样品室。
5.4.3调满度。
使显示的数值在透过率时为99.0%～101.0%；在吸光度时为-0.001～0.001第二格，读数窗上显示的数值即为该样品的吸光度（A）。
5.5 定性分析5.5.1在工作窗品下选择波长扫描。
岛津UV2550操作说明
岛津UV2550紫外-可见分光光度计的使用2011-09-27 10:29:40| 分类：药物化学| 标签：|字号大中小订阅岛津UV2550中文操作手册/view/ecf2d74569eae009591bec04.html岛津UV2550紫外-可见分光光度计的使用前段时间采用铬酸钡分光光度法（HJ/T 342-2007）测定硫酸根的含量，实验过程中需要用到分光光度计，可是面对一台超大的紫外-可见分光光度计，我却是摸不着头脑，请教同学也没有完全会用的。
于是痛下决心，一定要弄明白这个仪器的基本应用。
功夫不负有心人呀，经过一段时间的研究和实践操作，我终于大概弄明白了最基本的操作。
现对岛津UV 2550紫外-可见分光光度计的基本使用进行简要说明（参考《岛津UV 2550紫外可见分光光度计教程》，教程为中文，我使用的仪器操作界面为英文）。
1.开电脑主机，开显示器，打开仪器开关。
2.双击桌面图标UVprobe，打开之后点击“Connect”进行连接。
3.出现以下窗口，仪器开始进行检查，检查完毕后点击“OK”。
4.基线校正：点击光度计键条中的“Auto Zero”，进行基线的初始化操作。
5.建立数据采集方法1）选择“File”>>“New”。
2）选择“Edit”>>“Methods”，启动光度测定方法向导，出现以下窗口。
3）波长设定：波长类型：Point；波长：填测定所需波长；点击“Add”。
点击“Next”。
注：当取几个波长的平均值时，分别填写波长后加入到条目中。
4）校准：类型：Multi Piont；公式：Fixed Vovelength；WL：WL所需波长；曲线次数（Order of）：1st/2nd/3rd。
点击“Next”。
注：1st：直线；2nd：二次曲线，接近数据点；3rd：最接近数据点。
5）测定参数标准标签页：标准曲线数据直接输入时选“User Entry”，采用仪器测定时选“Instrument”。
uv2550使用说明
u v2550使用说明(总3页)--本页仅作为文档封面，使用时请直接删除即可----内页可以根据需求调整合适字体及大小--岛津UV 2550紫外-可见分光光度计操作规程一、开机1.开电脑主机，开显示器，打开仪器开关。
2.双击桌面图标UVprobe，打开之后点击左下角“连接”进行连接。
3.出现以下窗口，仪器开始进行检查，检查完毕后点击“OK”。
注：仪器自检过程不能打开样品仓，否则会影响自检正常进行。
二、模式1.基线校正：将样品池及参比池同时放入参比溶液，点进行基线校正。
2.建立数据采集方法选择“编辑”→“方法”，进入光谱方法对话框。
在“测定”选项下，输入波长范围，其余选其缺省值即可。
在“仪器参数”选项下，测定方式通常选吸收值，其余缺省。
在“附件”选项下，选六联池。
在上述确定后，点确定，进入测试界面3.样品测定：参比池参比液不动，将外侧样品池的换成待测样品，点进行样品图谱扫描。
4.测试完成后，图谱将自动将峰值及峰谷的位置标出。
5.报告生成：点，调出报告模板，点击“打印预览”形成UVProbe报告，在该页面点“打印”，在打印对话框中选，点击确定后，出现保存对话框，输入文件名后，保存。
6.打印数据点，调出数据打印对话框，在该对话框右击选“属性”，输入间隔，全部选定数据复制，点开Excel,粘贴即可。
注:全部测试完成后，一定要点“文件”→“全部保存”，否则测试数据将丢失三、模式1.选择“编辑”→“方法”，启动光度测定方法向导。
波长类型：点；波长：填测定所需波长；点击“加入”。
点击“下一步”。
标准曲线选项选“多点”“固定波长”，WL1处输入所选波长，一直点“下一步”到“完成”。
保存设定的方法。
2.基线校正：将样品池及参比池同时放入参比溶液，点击，扣除参比溶液对样品的影响。
3.标准曲线：在激活的“标准表”输入浓度，保持参比池参比液不动，将外侧样品池的换成已配置好的标准样品，为防止交叉污染，建议浓度由低到高点逐个进行样品吸光度测试，所有的标准样品测试后，自动生成标准曲线。
UV-2550分光光度计的使用
UV-2550分光光度计的使用紫外光谱法的原理: 紫外可见吸收光谱的基本原理是利用在光的照射下待测样品内部的电子跃迁，电子跃迁类型有：（1）σ→σ* 跃迁指处于成键轨道上的σ电子吸收光子后被激发跃迁到σ*反键轨道（2）n→σ* 跃迁指分子中处于非键轨道上的n电子吸收能量后向σ*反键轨道的跃迁（3）π→π* 跃迁指不饱和键中的π电子吸收光波能量后跃迁到π*反键轨道。
（4）n→π* 跃迁指分子中处于非键轨道上的n电子吸收能量后向π*反键轨道的跃迁。
电子跃迁类型不同，实际跃迁需要的能量不同：σ→σ* ～150nmn→σ* ～200nmπ→π* ～200nmn→π* ～300nm吸收能量的次序为：σ→σ*＞n→σ*≥π→π*＞n→π*特殊的结构就会有特殊的电子跃迁，对应着不同的能量（波长），反反映在紫外可见吸收光谱图上就有一定位置一定强度的吸收峰，根据吸收峰的位置和强度就可以推知待测样品的结构信息。
3、紫外可见吸收光谱常用于共轭体系的定量分析，灵敏度高，检出限低。
物质的紫外吸收光谱基本上是其分子中生色团及助色团的特征，而不是整个分子的特征。
如果物质组成的变化不影响生色团和助色团，就不会显著地影响其吸收光谱，如甲苯和乙苯具有相同的紫外吸收光谱。
另外，外界因素如溶剂的改变也会影响吸收光谱，在极性溶剂中某些化合物吸收光谱的精细结构会消失，成为一个宽带。
所以，只根据紫外光谱是不能完全确定物质的分子结构，还必须与红外吸收光谱、核磁共振波谱、质谱以及其他化学、物理方法共同配合才能得出可靠的结论。
化合物的鉴定利用紫外光谱可以推导有机化合物的分子骨架中是否含有共轭结构体系，如C＝C －C＝C、C＝C－C＝O、苯环等。
利用紫外光谱鉴定有机化合物远不如利用红外光谱有效，因为很多化合物在紫外没有吸收或者只有微弱的吸收，并且紫外光谱一般比较简单，特征性不强。
利用紫外光谱可以用来检验一些具有大的共轭体系或发色官能团的化合物，可以作为其他鉴定方法的补充。
紫外UV2550sop
5.2．3本规程适用于供试品的常规测定，其他非常规测试，如时间扫描和自动定量计算等则需参考仪器的使用说明书，按照具体的情况设定操作参数，进行测定。
5.1．3．5完成测定后，单击断开键，将计算机与岛津UV-2550型紫外分光光度计主机断开，将吸收池清洗干净后，将计算机和岛津UV一2550型紫外分光光度计主
机分别关闭。
5.2注意事项
5.2．1设定的参数不恰当会导致测定的结果和图谱不佳，如狭缝太宽使吸收值降低，分辨率下降；狭缝太窄则出现过大的噪声，使读数不准确等。
5.1．2．6检测完成后，单击打印键打印光谱图和数据。
5.1．3光度测定
5.1．3．1单击工具栏中的光度测定快捷键，进入光度测定工作界面；单击方法快捷键M进入方法编辑栏，在此设定光度测定的有关参数：如光度测定波长类型、波长、样品采样次数、校准的公式、方程式的定制和狭缝的宽度等；参数设定完成后，单击关闭键关闭退出方法编辑栏，返回光度测定工作界面。
1.目的:
建立岛津UV一2550型紫外分光光度计操作规程。
2.依据：
国家认监委《实验室资质认定评审准则》、国家药监局《药品检验所实验室质量管理规范（试行）》、《XX市食品药品检验所质量管理手册》（第X版）、现行《中国药典》二部附录。
3.适用范围：
本标准适用于检验人员对岛津UV一2550型紫外分光光度计的操作。
4.责任：
检验员对本标准Biblioteka 实施负责。5.操作规程5.1操作方法
5.1．1准备工作
5.1．1．1电压正常后，打开计算机和岛津UV一2550型紫外分光光度计主机，双击桌面上的 快捷键，进入岛津UV一2550型紫外分光光度计工作站。
岛津UV-2550介绍
岛津UV-2550紫外可见分光光度计1 岛津UV-2550介绍岛津UV-2550（270X660X275mm）紫外可见分光光度计由光源、单色器、吸收池、检测器、讯号处理与显示器五个部分组成。
它是每个化学分析实验室必备的常用仪器设备之一，岛津的紫外可见分光光度计产品线非常丰富，从最普通的单光束分光光度计到测量范围可以扩展到深紫外、近红外区域的UV－VIS－NIR分光光度计。
该仪器在有机化学研究中得到广泛的应用，通常用作物质鉴定、纯度检查，有机分子结构的研究。
在定量方面，可测定结构比较复杂的化合物和混合物中各组分的含量，也可以测定物质的离解常数，络合物的稳定常数，物质分子量鉴别和微量滴定中指示终点以及在高效液相色谱中作检测器等。
低杂散光的双单色器型（UV-2550）和高性能价格比的单单色器型（UV-2450）紫外可见分光光度计，配备32BitPC汉化软件[UVProbe]。
岛津UV－2450/2550是一款博得了用户高度评价的紫外可见分光光度计，性能卓越且操作简单方便，与功能强大的操作软件UVProbe结合，可以具备强大的功能。
小光斑的光学系统使得微量的测定更为方便。
2 岛津UV-2550技术参数1.测定波长范围：190～900nm2.谱带宽度：0.1～5nm3.分辨率：0.1nm4.波长重现性：±0.1nm5.杂散光：0.0003%以下6.测光方式：双光束方式（付反馈直接比例方式）7.测光范围：吸光度-4～5Abs,透射率，反射率：0.0-999.9%8.记录范围：吸光度-9.999-9.999Abs,透射率，反射率：-999.9-9.9999.基线平坦度：±0.001Abs以内（除去干扰，狭缝2nm,波长扫描10.检测器：光电倍增管3 岛津UV-2550操作规程岛津UV2550紫外可见分光光度计现场培训教程/view/9303db40b307e87101f6962d.html1.打开仪器，计算机电源。
岛津UV-2550紫外可见分光光度计操作规程
岛津UV-2550紫外可见分光光度计操作规程一、仪器主要指标及结构波长范围（nm）：190～900，双光束二、操作规程1、开机及仪器自检打开紫外光度计的电源，开启电脑，点击“UV Probe”图标，点击页面下端的“连接”，等待仪器自检（全部指标变绿）。
2、扫描光谱（1）. 点击“光谱模块”图标而选定光谱模块。
（2）. 点击“基线校正”进行基线校正。
（3）. 点击“编辑”的“方法”选项，或点击“方法图标”显示光谱方法的对话框。
（4）. 设置波长范围。
开始：ΧΧΧnm 结束：ΧΧΧ240nm扫描速度：中采样间隔：1.0nm（5）. 点击“仪器常数”标准，在测试目录中选“吸收”，然后点击“确定”。
（6）. 点击“开始”，仪器开始扫描光谱，然后点击“确定”。
（7）. 点击“峰值检测”图标，显示峰值数据。
（8）. 点击“数据打印”图标，显示各波长吸光度。
（记下每隔10nm的数据）。
3、吸光度测定（1）. 选定光度测定模块：点击“光度测定”图标。
（2）. 选定常数：点击“编辑”的“方法”选项，波长设“ΧΧΧnm”，单击“加入”。
点击“校准”选项，设定类型为“多点”，WL1选择“ΧΧΧ”，然后点击“关闭”。
（3）. 输入样品信息：点击“标准表”，输入标准样品“ID、浓度”后按“回车键”，点击“读取Std”，就显示出测定结果的吸光度。
重复以上步骤至标准曲线绘制完成。
点击“样品表”，输入样品“ID”后按“回车键”，点击“读取UNK”，就显示出测定结果的吸光度。
（4）. 点击“保存”，输入“××专业××组”文件名保存。
中国石油大学化工学院2010.04.15。
UV2550标准操作规程sop
1. 目的1.1 制定标准的紫外可见分光光度计操作规程。
1.2 减少操作误差。
2. 范围本程序适用于UV-2550紫外可见分光光度计操作。
3. 职责本仪器负责人、使用人4.程序4.1 准备4.1.1 打开总电源，稳定后，开主机电源，指示灯亮，同时打开计算机。
4.1.2 双击桌面上的UVProbe图标进入操作系统，在UVProbe界面上点击[Connect]连接键，联机并初始化。
4.1.3 基线校正，点击光度计键条中的“基线”来进行基线的初始化操作，在校正前要确定样品池中没有任何样品，然后当基线参数对话框弹出时，在开始波长和结束波长中分别输入波长值。
点击“确定”进行基线校正。
4.2 光度测定模块：光度测定模块主要用于测定样品中某物质的浓度。
4.2.1 建立标准曲线，首先准备几种性质相同浓度不同的标准样品，选择窗口>光度测定，打开光度测定模块。
工具栏上的方法图标建立数据采集方法。
启动光度测定方法向导。
4.2.2 填测定所需波长，如需要多点扫描时在类型中选“多点”，在WL1和WL2中填写波长，然后填写单位（U），公式（F）,点击“确定”。
4.2.3 测定标准品的浓度⑴ 填充标准表：点击标准表的任何位置激活标准表，在表中填入样品ID和浓度。
（2）在菜单栏中点击“去空白”，这时系统将默认标准表中的第1个为空白样品，把空白放置到样品室中，点击“读取”键，然后依次放置标准样品，点击“读取”键。
4.2.4 查看和保存标准曲线：选择示图>标准曲线，会出现根据标准表测定绘制的标准曲线，选择文件>另存为，检查保存对话框内的保存路径。
在文件名输入标准曲线名称。
点击“保存”。
4.3 未知样品的测量4.3.1 激活样品表（在表的任何部位点击），此时会在标题上显示“激活”，在样品表中输入样品的ID。
4.3.2 将未知样品放入分光光度计的样品室中，点击“读取”键。
4.3.3 按照样品号重复上述的操作。
注意：计算浓度时，样品吸收值要减去样品空白。
004岛津UV-2550型紫外分光光度计校验SOP
1. 目的（Objectives）本规程规范了岛津UV-2550型紫外分光光度计校验的方法，确保在法定计量部门校验后的有效期内岛津UV-2450型紫外分光光度计使用的有效性，保证检验结果的准确可靠。
2. 范围（Scope）本规程适用于检验部及各车间中间体化验室的岛津UV-2550型紫外分光光度计的定期校验。
3. 定义（Definition）无4. 职责（Responsibilities）4.1. 质量控制部负责本规程的起草、修订、审核、培训和执行。
4.2. 质量保证部、工程部负责本规程的审核。
4.3. 质量负责人负责对本规程的批准。
5. 引用标准（Reference Standards）5.1. 《中国药典》（2010年版）5.2. 中国药品检验标准操作规范2010年版5.3. JJG 178-2007紫外、可见、近红外分光光度计检定规程6. 材料（Resource）6.1. 质量分数为0.060/1000重铬酸钾的0.001mol/L的高氯酸标准溶液。
6.2. 10%高氯酸溶液。
6.3. 4%高氯酸钬溶液。
6.4. 碘化钠标准溶液：浓度为10.0g/L。
6.5. 亚硝酸钠标准溶液：浓度为50.0g/L。
7. 流程图（Flow Chart）无8. 内容（Contents）8.1. 校验项目及可接受标准8.2. 校验前准备8.2.1. 操作室应清洁无尘，无易燃、易爆和腐蚀性物质，无强烈的机械振动和电磁干扰，无强光直射，排风良好。
8.2.2. 温度在15℃~35℃；相对湿度为45%~80%（假如室温大于30℃，相对湿度不得大于70%）。
8.2.3. 仪器应有名称、型号、编号、制造厂名、出厂日期、工作电源电压、频率及检定签标识等8.2.4. 检查吸收池，不得有裂纹，透光面应清洁，无划痕和斑点。
8.3. 校验方法8.3.1. 基线平直度8.3.1.1.8.3.1.2. 操作：按8.3.1.1设定方法，基线扫描3次，记录图谱和数据。
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1. 目的（Objectives）
本规程规范了岛津UV-2550型紫外分光光度计校验的方法，确保在法定计量部门
校验后的有效期内岛津UV-2450型紫外分光光度计使用的有效性，保证检验结果
的准确可靠。
2. 范围（Scope）
本规程适用于检验部及各车间中间体化验室的岛津UV-2550型紫外分光光度计
的定期校验。
3. 定义（Definition）
无
4. 职责（Responsibilities）
4.1. 质量控制部负责本规程的起草、修订、审核、培训和执行。
4.2. 质量保证部、工程部负责本规程的审核。
4.3. 质量负责人负责对本规程的批准。
5. 引用标准（Reference Standards）
5.1. 《中国药典》（2010年版）
5.2. 中国药品检验标准操作规范2010年版
5.3. JJG 178-2007紫外、可见、近红外分光光度计检定规程
6. 材料（Resource）
6.1. 质量分数为0.060/1000重铬酸钾的0.001mol/L的高氯酸标准溶液。
6.2. 10%高氯酸溶液。
6.3. 4%高氯酸钬溶液。
6.4. 碘化钠标准溶液：浓度为10.0g/L。
6.5. 亚硝酸钠标准溶液：浓度为50.0g/L。
7. 流程图（Flow Chart）
无
8. 内容（Contents）
8.1. 校验项目及可接受标准
8.2. 校验前准备
8.2.1. 操作室应清洁无尘，无易燃、易爆和腐蚀性物质，无强烈的机械振动和电磁干扰，
无强光直射，排风良好。
8.2.2. 温度在15℃~35℃；相对湿度为45%~80%（假如室温大于30℃，相对湿度不
得大于70%）。
8.2.3. 仪器应有名称、型号、编号、制造厂名、出厂日期、工作电源电压、频率及检定
签标识等
8.2.4. 检查吸收池，不得有裂纹，透光面应清洁，无划痕和斑点。
8.3. 校验方法
8.3.1. 基线平直度
8.3.1.1.
8.3.1.2. 操作：按8.3.1.1设定方法，基线扫描3次，记录图谱和数据。
以测量图谱中起
始点内吸光度与最大偏离起始点的吸光度之差作为检出的基线平直度。
8.3.1.3. 可接受标准为≤0.002Abs，并将结果填入记录。
8.3.2. 吸收池的配套性
8.3.2.1. 扫描参数的设置
8.3.2.2. 操作：按8.3.2.1设定方法，装纯化水于220nm处，将一个吸收池的透射比调
至100%，测量另一吸收池透射比值，其差值即为吸收池的配套性，测定透射比
2次，记录图谱和数据。
8.3.2.3. 可接受标准为≤±0.5%，并将结果填入记录。
8.3.3. 噪声与漂移
8.3.3.1.
8.3.3.2. 操作：
1) 噪声：在250nm波长下设置参比光束和样品光束，以空气为空白，调整仪
器的透射比为100%，扫描2min，记录范围99%~101%，测量图谱上最大
值与最小值之差，即为仪器透射比100%的噪声。
在样品光路中插入挡光板，
调整仪器透射比为0%，扫描2min，计算图谱上最大值与最小值之差，即为
仪器透射比0%的噪声。
500nm波长下同法操作。
2) 漂移：按上述要求测得透射比0%噪声和100%噪声后，波长置于500nm处，
扫描30min，测得图谱上最大值和最小值之差即为仪器的透射比100%漂移。
8.3.3.3. 计算：
1) 噪声：
A. 透射比0%的噪声
%0min %0max %0⋅⋅-=∆T T T %0T ∆——透射比0%的噪声； %0max ⋅T ——透射比0%时的最大值； %0min ⋅T ——透射比0%时的最小值； B. 透射比100%的噪声 %100min %100max %100⋅⋅-=∆T T T %100T ∆——透射比100%的噪声； %100max ⋅T ——透射比100%时的最大值； %100min ⋅T ——透射比100%时的最小值； 2) 漂移： min max T T D -=∆ D ∆——漂移； m ax T ——透光率的最大值； m in T ——透光率的最大值； 8.3.3.4.
可接受标准
1) 透射比0%的噪声：≤0.1% 2) 透射比100%的噪声：≤0.2% 3) 透射比100%线漂移：≤0.2%/30min 8.3.3.5.
将结果填入记录。
8.3.4.
透射比最大允许误差和重复性 8.3.4.1.
8.3.4.2.
操作：按8.3.4.1设定方法，用质量分数为0.060/1000重铬酸钾的0.001mol/L
的高氯酸标准溶液分别在235，257，313，350nm 处测量透射比3次，记录图谱和数据。
8.3.4.3. 可接受标准：透射比最大值与最小值相差不大于0.2%，每一波长与标准值比较
偏差不大于0.5%，并将结果填入记录。
8.3.5. 波长示值误差和重复性
8.3.5.1. 试液配制
1) 10%高氯酸溶液：量取8.5ml 高氯酸（70%~73%）至100ml 量瓶中，加纯化水稀释至刻度，摇匀。
2) 4%高氯酸钬溶液：取氧化钬4.0g ，置100ml 量瓶中，加10%高氯酸溶液稀释至刻度，摇匀即可。
8.3.5.2.
操作：用空气作空白，进行仪器的基线校准，扫描速度“慢”、狭缝宽度（2nm ），采样间隔（0.5nm ），在波长220nm ~660nm 范围内，进行单方向重复扫描3次，由仪器识别记录各峰值与标准值比较。
8.3.5.3.
计算： 波长示值误差：标λλλ-=∆；波长重复性： min max λλδλ-= 式中：λ——3次测量的平均值； 标λ——波长标准值； m ax λ、min λ——分别为3次测量波长的最大值和最小值。
8.3.5.4.
高氯酸钬溶液较强的吸收峰波长为241.13、278.10、287.18、333.44、345.47、361.31、416.28、451.30、485.29、536.64、640.52nm 。
8.3.5.5.
可接受标准：波长准确度：-0.5nm~+0.5nm ；波长重复性:：＜0.5nm 。
8.3.6.
氘灯波长准确度 8.3.6.1.
8.3.6.2. 操作：按8.3.5.1设定方法，在660nm~650nm处与490nm~480nm处各扫描3
次，测得各峰值的波长，记录图谱和数据。
8.3.6.3. 将标准波长656.1nm、486.0nm处实测波长结果填入记录。
8.3.7. 杂散光
8.3.6.1.
8.3.6.2. 操作：按8.3.6.1设定方法，用10.0g/L的碘化钠标准溶液于220nm处，50.0g/L
的亚硝酸钠标准溶液于360nm处，10nm标准石英吸收池，蒸馏水作参比，光
谱带宽2nm，分别测定透射比3次，记录图谱和数据。
8.3.6.3. 结果填入记录。
8.4. 校验周期
8.4.1. 每年对仪器进行内部校验一次。
8.4.2. 当仪器关键部件（如氘灯或光路系统）维修或更换时，应再次进行内部校验，以
证明仪器满足使用要求。
8.4.3. 如一次校验不合格，应内部调整后再校验，如结果仍超标，则应停止使用，进行
维修。
9. 注意事项（Notice）
无
10. EHS要求（EHS Requirements）
无
11. 派生记录（Derived Records）
紫外分光光度计校验记录
12. 相关文件（Related Documents）
12.1. 实验室仪器设备的管理SOP
12.2. 校验合格证
12.3. UV-2550紫外可见分光光度计使用、清洁维护SOP
13. 变更记载（Change History）。