最新血清葡萄糖的测定
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血糖受损。
2.实验目的
1.掌握酶法测定血清葡萄糖浓度的原理 2.掌握血糖变化的临床意义
3.实验原理
血糖测定的方法有哪些？
（一）无机化学法：Folin-Wu法，基于葡萄糖醛基的还原性
OH-
Cu2+
Cu+
磷钼酸
显色
特异性差
Glu
（二）有机化学法：邻甲笨胺法，联笨胺法等
邻甲笨胺 + Glu
缩合
脱水
葡萄糖基胺
希夫氏碱 分子重排 蓝绿色化合物
（三）酶法
1.己糖激酶法（HK）
2.葡萄糖氧化酶法（GOD-POD法）
3.实验原理
葡萄糖氧化酶法（GOD-POD法） 葡萄糖氧化酶（GOD）将葡萄糖氧化为葡萄糖酸酶，同时释放过氧化氢。
葡萄糖+O2+H2O
GOD
葡萄糖酸+2H2O2
过氧化氢酶（POD）催化过氧化氢氧化色素原（如4-氨基安替比林和 苯酚），并使色素原氧化成红色醌类化合物，即Trinder反应。 2H2O2+4-氨基安替比林+苯酚 POD 红色醌类化合物
1.相关临床知识
OGTT操作步骤
1）.
试验前3天内，每日碳水化合物摄入量不少于150g。
2）. 空腹取血后，5分钟内口服溶于250~300ml水内的75g 无水葡萄糖粉的糖水，妊娠妇女用量为100g，儿童按1.75g/kg体重给
予，不超过75g.
3）. 服糖后半小时、1小时、2小时、3小时分别在前臂采血测血糖, 采血同时，每隔1小时取尿液作尿糖试验。试验过程中，受试者不喝茶
起各自对抗胰岛素的激素分泌过多，或升高血糖的激素增多引起的高血糖 现已归入特异性糖尿病中。 ① 颅内压增高：可刺激血糖中枢，如脑膜炎，颅外伤，颅内出血等，引起血糖增高。 ② 脱水引起的高血糖：如呕吐，腹泻和高热等也可使血糖轻度增高。
3.生理性低血糖 见于饥饿和剧烈运动时。
4.病理性低血糖 特发性功能性低血糖最多见，其次是药源性，肝源性和胰岛素 瘤等。
注意事项
1.葡萄糖氧化酶法可直接测定脑脊液葡萄糖含量，但不能直接测定尿液 葡萄糖含量。这是因为尿液中的尿酸等干扰性物质浓度过高，可干扰过 氧化氢酶反应，而造成假性偏低。
2.对于血液样品需及时分离血细胞。因红细胞的酵解将导致测定结果偏低。 建议测定样品以草酸钾-氟化钠为抗凝剂以抑制糖酵解。
3.严重黄疸，溶血及乳糜样血清应先制备无蛋白血滤液，然后再进行测定。
5.实验操作
取试管3支，按表操作
试剂/ml 血清
葡萄糖标准液 蒸馏水
酶酚混合液
空白管（B） -
0.020 3.00
标准管（S） -
0.020 -
3.00
测定管（T） 0.020 3.00
混匀，置37℃水浴中，保暖25min,在波长510nm处比色，以空白管调零，读取标准管及测 定管的吸光度。
计算公式
THANKS
此课件下载可自行编辑修改，仅供参考！ 感谢您的支持，我们努力做得更好！谢谢
血清葡萄糖浓度=
A测定 A标准
×5mmol/L
参考值 空腹血清葡萄糖浓度：3.89~6.11mmol/L
临床意义
1.生理性高血糖 可见摄入高糖食物后，或情绪紧张肾上腺分泌增加时。
2.病理性高血糖 ① 糖尿病：病理性高血糖常见于胰岛素绝对或相对不足的糖尿病患者。 ② 内分泌腺功能障碍：甲状腺功能亢进，肾上腺皮质功能及髓质功能亢进，引
原因：胰腺产生胰岛素 的细胞已经彻底损坏。
易发病人群：年龄轻， 大多<30岁
治疗：依赖胰岛素治疗
胰岛B 细胞
胰岛素
靶细 胞
II 型糖尿病（T2DM） 别名：非胰岛素依赖型糖尿
病
原因：自身能产生胰岛素， 但细胞无法对其做出反应。
易发病人群：中老年人，肥 胖者
治疗：需要胰岛素单独或与 口服药联合应用的治疗
3.当静脉空腹血糖＜7.0mmol／L，并且OGTT 2小时血糖介于7.8～11.1mmol／L之间， 说明人体对葡萄糖的调节能力轻度下降，可以诊断糖耐量减低。
4.当静脉空腹血糖介于6.1～7.0mmol／L之间，且OGTT 2小时血糖≤7.8mmol／L，说明 人体对进食葡萄糖后的血糖调节能力尚好，但对空腹血糖调节能力轻度减退，可以诊断空腹
有些患者血糖含量并不稳定，有什么办法进一步更准确诊断？
1.相关临床知识
口服葡萄糖耐量试验（OGTT）
概念：是一种葡萄糖负荷试验，用 以了解胰岛β细胞功能和机体对血 糖的调节能力，是诊断糖尿病的确 诊试验
原理：正常人进食糖类后血糖会 暂时升高，0.5~1小时后升到最高 峰，但不超过8.9mmol/L，2小时 后回到空腹水平。
血清葡萄糖的测定
1.相关临床知识
血液中的葡萄糖称为血糖。
1.相关临床知识
餐后两小时 11.1mmol/L≦
糖尿病
7.0mmol/L≦
空腹
空腹血糖
3.9-6.1 mmol/L
正常餐后两小时 3.9-7.8mmol/L
1.相关临床知识
I 型糖尿病（T1DM） 别名：青年发病型糖尿
病
或胰岛素依赖性糖尿病。
及咖啡，不吸烟，不做剧烈运动
4）. OGTT 2小时后血糖≥11.1mmol／L可以确诊糖尿病
1.相关临床知识
OGTT诊断
1.当静脉空腹血糖＜6.1mmol／L，OGTT 2小时血糖＜7.8mmol／L，说明人体对进食葡萄糖 后的血糖调节能力正常。
2.当静脉空腹血糖≥7.0mmol／L或OGTT 2小时血糖≥11.1mmol／L，说明人体处理进食后 葡萄糖的能力明显降低，可以确诊糖尿病。
红色醌类化合物的生成量与葡萄糖含量成正比。
4.实验器材和试剂
(一）器材
5ml移液管，微量可调式移液管， 721E分光计，37℃恒温水浴
（二）试剂
防止氧化，葡萄糖为单糖,含醛基,易氧化成羧基
Βιβλιοθήκη Baidu
1. 苯甲酸钠溶液（12mmol/L）
2. 酶酚混合试剂 酶试剂+酚溶液 1:1
3. 葡萄糖标准工作液（5mmol/L）
2.实验目的
1.掌握酶法测定血清葡萄糖浓度的原理 2.掌握血糖变化的临床意义
3.实验原理
血糖测定的方法有哪些？
（一）无机化学法：Folin-Wu法，基于葡萄糖醛基的还原性
OH-
Cu2+
Cu+
磷钼酸
显色
特异性差
Glu
（二）有机化学法：邻甲笨胺法，联笨胺法等
邻甲笨胺 + Glu
缩合
脱水
葡萄糖基胺
希夫氏碱 分子重排 蓝绿色化合物
（三）酶法
1.己糖激酶法（HK）
2.葡萄糖氧化酶法（GOD-POD法）
3.实验原理
葡萄糖氧化酶法（GOD-POD法） 葡萄糖氧化酶（GOD）将葡萄糖氧化为葡萄糖酸酶，同时释放过氧化氢。
葡萄糖+O2+H2O
GOD
葡萄糖酸+2H2O2
过氧化氢酶（POD）催化过氧化氢氧化色素原（如4-氨基安替比林和 苯酚），并使色素原氧化成红色醌类化合物，即Trinder反应。 2H2O2+4-氨基安替比林+苯酚 POD 红色醌类化合物
1.相关临床知识
OGTT操作步骤
1）.
试验前3天内，每日碳水化合物摄入量不少于150g。
2）. 空腹取血后，5分钟内口服溶于250~300ml水内的75g 无水葡萄糖粉的糖水，妊娠妇女用量为100g，儿童按1.75g/kg体重给
予，不超过75g.
3）. 服糖后半小时、1小时、2小时、3小时分别在前臂采血测血糖, 采血同时，每隔1小时取尿液作尿糖试验。试验过程中，受试者不喝茶
起各自对抗胰岛素的激素分泌过多，或升高血糖的激素增多引起的高血糖 现已归入特异性糖尿病中。 ① 颅内压增高：可刺激血糖中枢，如脑膜炎，颅外伤，颅内出血等，引起血糖增高。 ② 脱水引起的高血糖：如呕吐，腹泻和高热等也可使血糖轻度增高。
3.生理性低血糖 见于饥饿和剧烈运动时。
4.病理性低血糖 特发性功能性低血糖最多见，其次是药源性，肝源性和胰岛素 瘤等。
注意事项
1.葡萄糖氧化酶法可直接测定脑脊液葡萄糖含量，但不能直接测定尿液 葡萄糖含量。这是因为尿液中的尿酸等干扰性物质浓度过高，可干扰过 氧化氢酶反应，而造成假性偏低。
2.对于血液样品需及时分离血细胞。因红细胞的酵解将导致测定结果偏低。 建议测定样品以草酸钾-氟化钠为抗凝剂以抑制糖酵解。
3.严重黄疸，溶血及乳糜样血清应先制备无蛋白血滤液，然后再进行测定。
5.实验操作
取试管3支，按表操作
试剂/ml 血清
葡萄糖标准液 蒸馏水
酶酚混合液
空白管（B） -
0.020 3.00
标准管（S） -
0.020 -
3.00
测定管（T） 0.020 3.00
混匀，置37℃水浴中，保暖25min,在波长510nm处比色，以空白管调零，读取标准管及测 定管的吸光度。
计算公式
THANKS
此课件下载可自行编辑修改，仅供参考！ 感谢您的支持，我们努力做得更好！谢谢
血清葡萄糖浓度=
A测定 A标准
×5mmol/L
参考值 空腹血清葡萄糖浓度：3.89~6.11mmol/L
临床意义
1.生理性高血糖 可见摄入高糖食物后，或情绪紧张肾上腺分泌增加时。
2.病理性高血糖 ① 糖尿病：病理性高血糖常见于胰岛素绝对或相对不足的糖尿病患者。 ② 内分泌腺功能障碍：甲状腺功能亢进，肾上腺皮质功能及髓质功能亢进，引
原因：胰腺产生胰岛素 的细胞已经彻底损坏。
易发病人群：年龄轻， 大多<30岁
治疗：依赖胰岛素治疗
胰岛B 细胞
胰岛素
靶细 胞
II 型糖尿病（T2DM） 别名：非胰岛素依赖型糖尿
病
原因：自身能产生胰岛素， 但细胞无法对其做出反应。
易发病人群：中老年人，肥 胖者
治疗：需要胰岛素单独或与 口服药联合应用的治疗
3.当静脉空腹血糖＜7.0mmol／L，并且OGTT 2小时血糖介于7.8～11.1mmol／L之间， 说明人体对葡萄糖的调节能力轻度下降，可以诊断糖耐量减低。
4.当静脉空腹血糖介于6.1～7.0mmol／L之间，且OGTT 2小时血糖≤7.8mmol／L，说明 人体对进食葡萄糖后的血糖调节能力尚好，但对空腹血糖调节能力轻度减退，可以诊断空腹
有些患者血糖含量并不稳定，有什么办法进一步更准确诊断？
1.相关临床知识
口服葡萄糖耐量试验（OGTT）
概念：是一种葡萄糖负荷试验，用 以了解胰岛β细胞功能和机体对血 糖的调节能力，是诊断糖尿病的确 诊试验
原理：正常人进食糖类后血糖会 暂时升高，0.5~1小时后升到最高 峰，但不超过8.9mmol/L，2小时 后回到空腹水平。
血清葡萄糖的测定
1.相关临床知识
血液中的葡萄糖称为血糖。
1.相关临床知识
餐后两小时 11.1mmol/L≦
糖尿病
7.0mmol/L≦
空腹
空腹血糖
3.9-6.1 mmol/L
正常餐后两小时 3.9-7.8mmol/L
1.相关临床知识
I 型糖尿病（T1DM） 别名：青年发病型糖尿
病
或胰岛素依赖性糖尿病。
及咖啡，不吸烟，不做剧烈运动
4）. OGTT 2小时后血糖≥11.1mmol／L可以确诊糖尿病
1.相关临床知识
OGTT诊断
1.当静脉空腹血糖＜6.1mmol／L，OGTT 2小时血糖＜7.8mmol／L，说明人体对进食葡萄糖 后的血糖调节能力正常。
2.当静脉空腹血糖≥7.0mmol／L或OGTT 2小时血糖≥11.1mmol／L，说明人体处理进食后 葡萄糖的能力明显降低，可以确诊糖尿病。
红色醌类化合物的生成量与葡萄糖含量成正比。
4.实验器材和试剂
(一）器材
5ml移液管，微量可调式移液管， 721E分光计，37℃恒温水浴
（二）试剂
防止氧化，葡萄糖为单糖,含醛基,易氧化成羧基
Βιβλιοθήκη Baidu
1. 苯甲酸钠溶液（12mmol/L）
2. 酶酚混合试剂 酶试剂+酚溶液 1:1
3. 葡萄糖标准工作液（5mmol/L）