SOP-TBA(循环酶法)

目录

目录 (1)

第1章目的和范围 (2)

1.1 目的 (2)

1.2 适用范围 (2)

第2章操作规程 (2)

2.1 测定原理 (2)

2.2 试剂贮存与稳定性 (2)

2.3 试剂与样本准备 (2)

2.4 测定参数 (2)

2.5 操作步骤 (3)

2.6 校准和质控 (3)

第3章结果计算 (3)

3.1 吸光度变化率的计算 (3)

3.2 活性的计算 (3)

第4章方法学特性 (3)

4.1 正常参考范围 (3)

4.2 线性范围 (3)

第5章临床意义 (4)

第6章安全防护 (4)

第1章目的和范围

1.1目的

为用户使用迈瑞公司TBA试剂时，提供正确的操作流程和操作规范。

1.2适用范围

适用于各级医疗机构的用户。

第2章操作规程

2.1测定原理

γ-GT催化胆汁酸会被3α-羟甾醇脱氢（3α-HSD）以及β-硫代烟酰胺脲嘌呤二核苷酸氧化型（Thio-NAD）特异性地氧化，生成3-酮类固醇以及β-硫代烟酰胺脲嘌呤二核苷酸还原型（Thio-NADH）。此外生成的3-酮类固醇在3α-羟甾醇脱氢（3α-HSD）及β-硫代烟酰胺脲嘌呤二核苷酸还原型（Thio-NADH）存在下，生成胆汁酸及β-硫代烟酰胺脲嘌呤二核苷酸氧化型（Thio-NAD）。如上所述，依据循环酶而放大微量的胆汁酸量，测定单位时间内生成的β-硫代烟酰胺脲嘌呤二核苷酸还原型（Thio-NADH）在405nm处的吸光度变化，以求得胆汁酸的浓度。

2.2试剂贮存与稳定性

试剂贮存在2～8℃环境时，在试剂盒上规定的有效期前可以保持稳定。

2.3试剂与样本准备

本试剂为液体双试剂，取出后可以直接使用。

样本可以为血清、肝素或EDTA抗凝的血浆。尽量使用新鲜标本。

2.4测定参数

测定波长：405nm；

分析类型：连续监测法，扣除试剂空白；

孵育时间：3分钟；

延迟时间：1分钟；

读数时间：3分钟；

第一试剂/样本/第二试剂比例：270/4/90。

2.5 操作步骤

A/min

· R1： 270 μl

2.6 校准和质控

请使用迈瑞公司推荐的校准品和质控品。

第3章 结果计算

3.1 吸光度变化率的计算

ΔA/min=A/min 校准品管或样本管–A/min 空白管

3.2 活性的计算

C 样本=（ΔA 样本／ΔA 校准）×C 校准

C 样本：为测定的样本活性

C 标准：为校准品的活性

第4章 方法学特性

4.1 正常参考范围

4.2 线性范围

本法线性范围上限为150μmol/L ，当样品测定值超过上限时，应将样品用生理盐水作1+ 1稀释后重测，结果乘以2。

第5章临床意义

当患有肝脏疾病和胆酸吸收障碍时，进入血中的胆酸增加。在急性肝炎、慢性肝炎、肝硬化、肝癌等疾病时，总胆汁酸都有不同程度的升高。另外，总胆汁酸的升高还见于胆汁淤积，胆管阻塞、胆囊炎等慢性疾病。

第6章安全防护

所有样本，包括病人样本、校准品和质控品等，可能含有致病性微生物，有被感染的危险性,操作时应采取防范措施；

使用试剂时应采取必要的预防措施，避免与皮肤及粘膜接触；本试剂含有NaN3，应避免与铅铜等金属接触。