4.2 蛋白质的提取和分离 学案(含答案)
中图版高中生物选修1 6.1蛋白质的提取和分离_教案设计1
蛋白质的提取和分离【教学目标】1．知道蛋白质分离和提取技术的基本原理。
2．能进行血清蛋白的提取和分离。
3．尝试提取和检测牛奶中的酪蛋白。
4．尝试卵清蛋白的分离。
【教学重难点】1．知道蛋白质分离和提取技术的基本原理。
2．能进行血清蛋白的提取和分离。
【教学过程】一、蛋白质分离提纯技术1．将生物体内的蛋白质提取出来并加以分离，就可以得到高纯度的、甚至是单一种类的蛋白质。
2．蛋白质分离提纯技术包括离心技术、层析技术和电泳技术等。
其中，电泳技术最为快捷灵敏、简便易行。
二、电泳技术及分离蛋白质的原理1．电泳现象：带电粒子在电场中可以向与其自身所带电荷相反的电极方向移动。
电泳常用的支持物是聚丙烯酰胺凝胶，由此而来的技术称为聚丙烯酰胺凝胶电泳。
2．电泳技术分离蛋白质的原理：（1）蛋白质含有游离的氨基和羧基，是两性电解质，在一定pH条件下带有电荷。
（2）蛋白质所带的电荷数越多，移动得越快；电荷数相同时，分子量越小，则移动越快。
（3）不同蛋白质的混合溶液，在经过同一个电场电泳后，会在凝胶上形成不同的带纹。
每一种带纹可能就是一种蛋白质。
将这些带纹一个一个地剪下来，分别予以洗脱，然后对洗脱液中的蛋白质做进一步的分离。
如果待测洗脱液不能再分离，则这个带纹中很可能含有一种单纯蛋白质。
如果待测洗脱液还能再分离，则这个带纹中含有多种蛋白质，需要作进一步分离，直至提纯。
三、血清蛋白的提取和分离1．新鲜血液在体外凝固后，会析出清亮的淡黄色液体——血清。
血清中含有丙种球蛋白、凝集素等多种蛋白质。
2．过程：（1）点样：取新制血清与蔗糖溶液及溴酚蓝指示剂等体积混匀后，小心加到电泳样品槽的胶面上。
（2）电泳。
（3）染色：取出凝胶，放入质量分数为0.05%的考马斯亮蓝R250染色液中。
染色与固定同时进行，使染色液没过胶板，染色30min。
（4）脱色：用体积分数为7%的醋酸溶液浸泡漂洗数次，每隔1~2h更换脱色液，直至底色脱净，背景清晰。
（5）制干胶板：将已脱色的凝胶板放在保存液中浸泡3~4h，然后放在两层透气玻璃纸中间，自然干燥即可获得血清蛋白的电泳谱带。
2017-2018学年高二生物一教学案：课题3血红蛋白的提取和分离含答案
一、蛋白质提取、分离错误!1．蛋白质分离的理论依据2．凝胶色谱法(分配色谱法)（1）概念:根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法.（2）分离原理相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道,路程较长，移动速度较慢；相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快。
3．缓冲溶液(1)作用：在一定范围内,缓冲溶液能抵制外界酸和碱对溶液pH的影响,维持pH基本不变。
（2)配制：通常由1~2种缓冲剂溶解于水中配制而成,调节缓冲剂的使用比例就可以制得在不同pH范围内的缓冲液。
4．电泳（1）概念：带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程。
（2）原理①许多重要的生物大分子，如多肽、核酸等都具有可解离的基团，在一定的pH下，这些基团会带上正电或负电。
②在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。
③电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。
二、血红蛋白的提取和分离错误!1．样品处理(1）红细胞的洗涤①目的：去除杂蛋白，以利于后续步骤的分离纯化。
②过程：分离（低速短时间离心）→用胶头吸管吸出上层透明的黄色血浆→下层暗红色的红细胞用生理盐水洗涤（如此重复三次).(2）血红蛋白的释放①目的:使红细胞破裂释放血红蛋白。
②过程（3）分离血红蛋白溶液：离心（以2 000 r/min 速度，离心10 min）→观察到离心管中的溶液分为4层，从上往下依次为：第1层：无色透明的甲苯层。
第2层：脂溶性物质的沉淀层——白色薄层固体.第3层:血红蛋白的水溶液—-红色透明液体.第4层：其他杂质的暗红色沉淀物。
将液体用滤纸过滤,除去脂溶性沉淀层，于分液漏斗中静置片刻后，分出下层的红色透明液体。
2．透析——粗分离过程：取1 mL的血红蛋白溶液装入透析袋中，将透析袋放入盛有300 mL的物质的量浓度为20 mmol·L－1的磷酸缓冲液中(pH＝7。
(人教版)生物高二选修一：5.3《血红蛋白的提取和分离》学案(有答案)
课题3 血红蛋白的提取和分离蛋白质的各种特性的差异如分子的______和______、所带________________、溶解度、________和对其他分子的亲和力，等等，可以用来分离不同种类的蛋白质。
一、凝胶色谱法1．概念：凝胶色谱法也称做__________，是根据____________的大小分离蛋白质的有效方法。
2．原理：大多数凝胶是由________化合物构成的小球体，内部有许多贯穿的通道，当不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子质量____的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程______，移动速度______；而相对分子质量______的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在________移动，路程______，移动速度______。
相对分子质量不同的蛋白质因此得以分离。
3．凝胶材料：______性，______类化合物，如葡聚糖或________。
4．具体过程：（1）________混合物上柱。
（2）洗脱开始，____________的蛋白质进入凝胶颗粒内；相对分子质量______的蛋白质则被排阻于凝胶颗粒之外。
（3）___________的蛋白质被滞留；_____________的蛋白质向下移动。
（4）相对分子质量不同的分子完全分开。
（5）___________的蛋白质行程较短，已从________中洗脱出来，________________的蛋白质还在行进中。
提示：洗脱：从色谱柱上端不断注入缓冲液，促使蛋白质分子的差速流动。
二、缓冲溶液1．作用：在________内，能够抵制外界的________对溶液____的影响，维持____基本不变。
2．配制：通常由________溶解于水中配制而成。
调节缓冲剂的______就可以制得在不同________使用的缓冲液。
三、电泳1．概念：带电粒子在______的作用下发生______的过程。
2．原理：许多重要的生物大分子，如______、______等都具有________的基团，在一定pH下，这些基团会带上______或______。
亚硝酸盐含量测定、蛋白质的提取和分离导学案及参考答案
亚硝酸盐含量的测定【知识梳理】一、亚硝酸盐1.物理性质：粉末，易溶于水。
2.应用：在食品生产中常用作食品添加剂。
3.分布：自然界中分布广泛，存在于、咸菜和豆粉等食品中。
4.危害：人体摄入总量达到时，会引起中毒；摄入总量达到时会引起死亡。
5.我国卫生标准：肉制品中不得超过，酱腌菜中不得超过20mg/kg，婴儿奶粉中不得超过。
6.代谢：绝大多数随尿排出，但在特定条件下，即适宜的和一定的微生物作用下，会转变为致癌物——。
二、亚硝酸盐含量的测定1.测定方法：。
2.测定原理：在条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成色染料。
将显色反应后的样品与已知浓度的标准显色液进行目测比较，可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。
3.测定操作：配制溶液【典型例题】1.下列关于亚硝酸盐的叙述，错误的是（）A.亚硝酸盐为白色粉末，易溶于水B.亚硝酸盐分布广泛，蔬菜中亚硝酸盐的平均含量约为4mg/kgC.咸菜中亚硝酸盐的平均含量在7mg/kg以上，所以应尽量少吃咸菜D.我国卫生标准规定，婴儿奶粉中亚硝酸盐的残留量不得超过5mg/kg2.有关膳食中的亚硝酸盐对人体健康的影响，下列说法正确的是（）A.膳食中的亚硝酸盐在人体内会随尿液全部排出B.亚硝酸盐在人体内积累有致癌作用C.亚硝酸盐只有在特定条件下才会转变成致癌物质D.亚硝酸盐对人体健康不会有任何影响3.下列关于测定亚硝酸盐含量原理的叙述，不正确的是（）A.亚硝酸盐经一定方式显色反应后呈玫瑰红色B.显色反应后亚硝酸盐的理化性质没有发生改变C.不同浓度的亚硝酸盐显色深浅不同D.样品液显色后，通过与已知浓度的标准液比色，可大致估算出样品液中亚硝酸盐的含量4.测定亚硝酸盐含量的有关叙述,不正确的是（）A.亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应,需在盐酸酸化条件下进行B.重氮化反应后,与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料C.对显色反应样品进行目测,可精确算出泡菜中亚硝酸盐含量D.配制溶液所用的提取剂为氯化镉与氯化钡5.下列是测定亚硝酸盐含量的试剂，其中在配制时需加入盐酸的是（）①对氨基苯磺酸溶液②N-1-萘基乙二胺盐酸盐溶液③提取剂A.①②③B.①②C.①③D.②③6.测定亚硝酸盐含量的操作步骤正确的是（）A.制备标准显色液——制备溶液——制备样品处理液——比色B.制备标准显色液——制备样品处理液——制备溶液——比色C.制备溶液——制备样品处理液——制备标准显色液——比色D.制备溶液——制备标准显色液——制备样品处理液——比色7.下列有关泡菜的制作和亚硝酸盐含量的测定的实验叙述中，正确的是（）A.将新鲜蔬菜与煮沸冷却的盐水(盐和清水的质量比为4∶1)混匀装瓶B.发酵过程始终要保持密封状态，泡菜坛盖边缘的水槽中要始终装满水C.在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应形成玫瑰红色染料D.随发酵进行，亚硝酸盐含量逐渐增加，用比色法可进行亚硝酸盐含量的测定8.餐桌上香甜酸脆的泡菜，能令人胃口大开，然而从营养学的角度看，应该多吃新鲜蔬菜，少吃腌制食品，以尽量减少腌制食品中的亚硝酸盐对人体健康的潜在威胁。
生物53《血红蛋白的提取和分离》学案(2)(新人教版选修1)
课题3 血红蛋白的提取和别离一、学习目标：本课题尝试对血液中血红蛋白的提取和别离，使学生能够体验从复杂体系中提取生物大分子的根本过程和方法，并了解色谱法，电泳法等别离生物大分子的根本原理，为今后学习运用这些技术打下根底。
二、重点：凝胶色谱法的原理和方法三、难点：样品的预处理；色谱柱填料的处理和色谱柱的装填。
【根底梳理】一、凝胶色谱法1、概念：也称做；是根据别离蛋白质的有效方法。
2、原理〔1〕由构成的凝胶，内部有许多贯穿的的。
〔2〕当不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子质量的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程，移动速度，而相对分子质量的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在移动，路程，移动速度，从而使不同的蛋白质分子得以别离。
二、缓冲溶液1、作用：在一定范围内，抵抗的对溶液pH的影响，维持pH 。
2、配制：由种缓冲剂溶解于中配制而成，通过调节缓冲剂的就可以得到不同pH范围内使用的缓冲液。
三、电泳1、概念：指在电厂的作用下发生的过程。
2、原理：在一定的下，、等生物大分子的可解离基团会带上或，在的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷的电极移动。
3、作用：电泳利用了待别离样品中各种分子的差异及分子本身的、的不同，使带电分子产生不同的，从而实现样品中的别离。
4、方法：常用的电泳方法有和。
测定蛋白质分子量时通常使用。
四、实验操作1、样品处理:通过、、等操作收集血红蛋白溶液。
(1)红细胞的洗涤：目的是。
别离时采取，直至上清液中没有，说明红细胞已洗涤干净。
(2)血红蛋白的释放：在和的作用下，红细胞破裂，释放出血红蛋白。
(3)别离血红蛋白溶液：把离心后，将试管中的液体用过滤、除去，于中静置片刻后，别离出下层的。
2、粗别离：即透析(1)方法：将血红蛋白溶液装入，将放入一定量适宜浓度的中，透析。
(2)目的：将的杂质除去。
(3)原理：透析袋能使小分子自由进出，而将大分子物质保存在袋内。
3、纯化:通过凝胶色谱柱将相对分子质量较大的杂质蛋白除去。
中图版选修一蛋白质的提取和分离学案
第一节蛋白质的提取和分离 翦因fl 自主学习•基础知识|接^息讣扣 一、 蛋白质分离提纯技术常用的蛋白质分离提纯技术包括离心技术、 层析技术和电泳技术等。
其中电 泳技术最为快捷灵敏、简便易行。
二、 电泳技术分离蛋白质的原理1. 蛋白质中含有游离的氨基和羧基，是两性电解质，在一定 pH 条件下带 有电荷。
2. 蛋白质在电场中可以向与其自身所带电荷相反的电极方向移动。
3 •蛋白质所带的电荷数越多，移动得越快；电荷数相同时，分子量越小_ 移动越快。
三、 结果分析不同蛋白质的混合溶液经过同一电场电泳后，会在凝胶上形成不同的带纹， 每种带纹可能就是一种蛋白质。
四、 “血清蛋白的提取和分离”活动程序1. 点样：取新制血清5微升、质量浓度为0.4克/毫升的蔗糖溶液和质量分 数为0.1%的溴酚蓝指示剂等体积混匀后，用微量加样器吸取 5卩样品加到电泳 样品槽的胶面上。
2. 电泳。
3. 染色：用质量分数为0.05%的考马斯亮蓝R 250染色液对凝胶进行染色。
4•脱色：用体积分数为7%的醋酸溶液对凝胶板进行浸泡漂洗,至底色脱净。
5 .制干胶板：将已脱色的凝胶板放在保存液中浸泡 3 h 〜4 h 后，放在两层»第六章 蛋白质和DNA 技术透气的玻璃纸中间自然干燥。
疑难问题卡片预习完成后，请把你认为难以解决的问题记录在下面的表格中刃合作探究•重难疑点问题1问题2问题3问题4ZHONGNANTUPO 突破^-----------一、蛋白质分离提纯的方法1.蛋白质分离的基本过程破碎细胞抽提(粗制品) 纯化蛋白质2.破碎细胞的方法在分离与纯化蛋白质之前，必须采用适当的方法使蛋白质呈溶解状态释放出来：通常先将生物组织进行机械破碎，再根据细胞的特点，选择不同的破碎细胞方法(常用的有研磨法、超声波法、酶解法)。
3.抽提细胞破碎后，各种蛋白质被释放出来，再根据蛋白质的不同性质，选择不同的溶剂进行抽提。
4.纯化(1)原理：纯化主要是指根据蛋白质之间以及蛋白质与其他物质之间在分子大小、溶解度大小、所带电荷的多少、吸附性质等方面存在的差异进行的。
《蛋白质的提取和分离》 学习任务单
《蛋白质的提取和分离》学习任务单一、学习目标1、了解蛋白质提取和分离的基本原理和方法。
2、掌握常见的蛋白质提取技术，如溶剂提取法、盐析法等。
3、熟悉蛋白质分离的常用方法，如凝胶过滤层析、离子交换层析、亲和层析等。
4、学会运用实验手段进行蛋白质的提取和分离操作。
5、培养实验设计、数据分析和问题解决的能力。
二、学习内容（一）蛋白质提取的原理和方法1、蛋白质的溶解性和稳定性蛋白质在不同溶剂中的溶解性差异。
影响蛋白质稳定性的因素，如温度、pH 值等。
2、常见的提取方法溶剂提取法：选择合适的溶剂（如水、稀盐溶液、有机溶剂等）来溶解蛋白质。
盐析法：通过添加中性盐（如硫酸铵）改变蛋白质的溶解度，使其沉淀析出。
（二）蛋白质分离的原理和方法1、凝胶过滤层析原理：根据蛋白质分子大小的差异进行分离。
凝胶介质的选择和操作要点。
2、离子交换层析原理：利用蛋白质的带电性质差异。
离子交换剂的类型和选择。
3、亲和层析原理：基于蛋白质与特定配体的特异性结合。
亲和配体的设计和固定化。
（三）实验操作与技术1、样品的预处理细胞破碎的方法（如机械破碎、酶解法等）。
去除杂质和干扰物质。
2、提取和分离过程中的条件控制温度、pH 值、离子强度等的优化。
3、蛋白质的检测和鉴定常用的检测方法（如紫外吸收法、Bradford 法等）。
鉴定蛋白质的纯度和分子量的方法（如SDSPAGE、质谱分析等）。
（四）数据分析和结果解读1、实验数据的记录和整理。
2、分析蛋白质提取和分离效果的影响因素。
3、根据结果优化实验方案。
三、学习资源1、教材：《生物化学》、《蛋白质化学与生物技术》等相关教材。
2、在线课程：各大在线教育平台上的蛋白质提取和分离相关课程。
3、学术论文：查阅相关领域的研究论文，了解最新的研究进展。
4、实验手册：实验室常用的实验操作手册和指南。
四、学习活动1、理论学习阅读教材和相关资料，理解蛋白质提取和分离的原理和方法。
观看在线课程，加深对知识点的理解。
课题3_血红蛋白的提取和分离导学案及答案
课题3 血红蛋白的提取和分离【学习目标】1、尝试从血液中提取和分离血红蛋白2、了解色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理【学习重点】凝胶色谱法的原理和方法【学习难点】样品的预处理；色谱柱填料的处理和色谱柱的装填1．基础知识蛋白质的物化理性质：形状、大小、电荷性质和多少、溶解度、吸附性质、亲和力等千差万别，由此提取和分离各种蛋白质。
1．1凝胶色谱法（分配色谱法）：（1）原理：（图5－13a）分子量大的分子通过多孔凝胶颗粒的间隙，路程短，流动快；分子量小的分子穿过多孔凝胶颗粒内部，路程长，流动慢。
（2）凝胶材料：多孔性，多糖类化合物，如葡聚糖、琼脂糖。
（3）分离过程：（图5－13b）混合物上柱→洗脱→大分子流动快、小分子流动慢→收集大分子→收集小分子【补充】洗脱：从色谱柱上端不断注入缓冲液，促使蛋白质分子的差速流动。
1．2缓冲溶液（1）原理：由弱酸和相应的强碱弱酸盐组成（如H2CO3－NaHCO3，HC－NaC，NaH2PO4/Na2HPO4等），调节酸和盐的用量，可配制不同pH的缓冲液。
（2）缓冲液作用：抵制外界酸、碱对溶液pH的干扰而保持pH稳定。
1．3凝胶电泳法：（1）原理：不同蛋白质的带电性质、电量、形状和大小不同，在电场中受到的作用力大小、方向、阻力不同，导致不同蛋白质在电场中的运动方向和运动速度不同。
［思考］阅读教材后，填写下表：（2）分离方法：琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺经胶电泳等。
（3）分离过程：在一定pH下，使蛋白质基团带上正电或负电；加入带负电荷多的SDS，形成“蛋白质－SDS复合物”，使蛋白质迁移速率仅取决于分子大小。
2．实验设计2.1蛋白质的提取和分离一般分为哪些基本步骤？样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定。
【思考】：是否所有种类的蛋白质的提取和分离都是这样的？为什么？不是。
因为蛋白质的来源和性质不同，分离方法差别很大。
2.2选择实验材料（1）你认为鸟类血液和哺乳动物血液中，最好哪种血液来提取血红蛋白？为什么？哺乳动物血液。
高二生物选修一 《4.1蛋白质的分离与纯化方法》教案
高二年级第二学期生物学科总第课时教案课题一蛋白质的分离与纯化方法使用时间：____________ 主备人：_设计定电荷的蛋白质在其中泳动时，到达各自等电点的pH位置就停止，此法可用于分析和制备各种蛋白质。
2.实验原理:醋酸纤维薄膜电泳(CAME)是以醋酸纤维薄膜(CAM)作支持物的一种区带电泳技术，将血清样品点样于醋纤膜上，在pH 为8. 6的缓冲液中电泳时，血清蛋白质均带负电荷移向正极。
由于血清中各蛋白组分等电点不同而致表面净电荷量不等，加之分子大小和形状各异，因而电泳迁移率不同，彼此得以分离。
电泳后，CAM 经染色和漂洗，可清晰呈现清蛋白、一球蛋白、一球蛋白、8球蛋白、丫一球蛋白5条区带，比色即可计算出血清各蛋白组分的相对百分数。
布置学生课堂检测，并重点提示。
学生完成课堂检测课后: 学生完成课外作业及下一节布置课外作业及下一节预习提纲。
(见导学案)生物成分的分离与测定技术蛋白质的分离常用的细胞破碎的方法:预习。
抽提方法: 纯化主要是根据: 常用的方法:三、其他补充教学资料（各位教师根据各班教学特点选择补充资料，可另附纸）高二生物生物成分的分离与测定技术导学案使用时间： _______ 编制人：_一、学习目标：知道蛋白质的分离常用的细胞破碎的方法，蛋白质抽提方法，掌握蛋白质的分离与纯化方法。
二、知识构成：1.________________________________________________________________________ 蛋白质的分离常用的细胞破碎的方法有：__________________________________________________________ 根据蛋白质的不同特性，分别可选择哪些抽提方法？________________________________________________ 、蛋白质的纯化主要是根据____________________________ 之间以及__________________________ 之间在 ______________ 、_____________ 、_________ 、___________ 等方面存在的差异进行的。
学案设计-选修一第四章 第2节 蛋白质的提取和分离(配北师大版)
第2节蛋白质的提取和分离一、学习目标1.简述蛋白质提取的基本过程和方法。
2.理解电泳法等分离蛋白质的基本原理。
二、重难点分析重点：凝胶色谱法的原理和方法。
难点：样品的预处理；色谱柱填料的处理和色谱柱的装填。
三、学习过程（一）预习导学知识点一：同工酶以及乳酸脱氢酶1.同工酶指催化相同的化学反应，而酶蛋白的__________、__________乃至免疫学性质不同的一组酶。
2.乳酸脱氢酶(1)种类：一般含有5种同工酶。
(2)特点：__________相同，但__________不同，电泳结果应该形成__________个条带。
答案：1.分子结构理化性质2.相对分子质量所带电荷 5知识点二：乳酸脱氢酶同工酶的提取和分离1.提取原理乳酸脱氢酶同工酶可以与特定的底物进行反应，形成特殊的__________色产物。
同工酶检测必须依靠其具有催化活性的特点，从而使其和其他的__________蛋白质区分开来。
因此在提取此类蛋白质时必须提供必要的__________和__________环境以保持其生物活性。
2.分离原理蛋白质在立体网状的__________中电泳时，其迁移率主要取决于它所带__________以及分子的__________和形状等因素。
因此，乳酸脱氢酶同工酶可以通过__________法分开。
3.实验步骤(1)提取过程：制备匀浆→获取酶。
(2)分离过程：制琼脂糖凝胶电泳板→加样、电泳→染色、观察。
答案：1.蓝紫可溶性缓冲系统低温2.琼脂糖凝胶净电荷大小电泳（二）合作探究什么是缓冲溶液？它的作用是什么？答案：在一定范围内，能对抗少量外来强酸、强碱或稍加稀释不引起溶液pH发生明显变化的作用叫做缓冲作用，具有缓冲作用的溶液叫做缓冲溶液。
缓冲溶液通常是由一或两种化合物（缓冲剂）溶解于水中制得，调节缓冲剂的配比就可制得不同pH范围的缓冲液。
缓冲溶液的作用是维持反应体系的pH不变。
在生物体内进行的各种生物化学过程都是在精确的pH 下进行的，受到氢离子浓度的严格调控。
《蛋白质的提取和分离》 学习任务单
《蛋白质的提取和分离》学习任务单一、学习目标1、理解蛋白质提取和分离的基本原理。
2、掌握常见的蛋白质提取和分离方法。
3、学会运用实验技术进行蛋白质的提取和分离操作。
4、培养科学思维和实验操作能力，提高解决实际问题的能力。
二、学习重点1、蛋白质提取的材料选择和预处理方法。
2、不同蛋白质分离方法的原理和应用，如盐析法、凝胶过滤法、离子交换层析法等。
三、学习难点1、理解蛋白质分离方法的原理，如凝胶过滤法中分子大小与洗脱顺序的关系。
2、实验操作中各种条件的控制和优化，以获得高纯度和高产量的蛋白质。
四、学习方法1、理论学习：通过教材、网络资源等，学习蛋白质提取和分离的相关知识。
2、实验探究：参与实验室实践，亲身体验蛋白质提取和分离的过程。
3、案例分析：研究实际的蛋白质提取和分离案例，加深对方法和原理的理解。
五、学习过程（一）知识讲解1、蛋白质的性质（1）蛋白质的分子结构特点，包括一级结构、二级结构、三级结构和四级结构。
（2）蛋白质的溶解性、电荷性质、分子大小等物理化学性质。
2、蛋白质提取的原则和策略（1）选择合适的材料，如动物组织、植物细胞或微生物。
（2）考虑材料的新鲜度、蛋白质含量和杂质情况。
3、常见的蛋白质提取方法（1）机械破碎法，如研磨、匀浆等。
（2）化学法，如使用蛋白酶、表面活性剂等。
4、蛋白质分离的方法（1）盐析法原理：不同蛋白质在不同盐浓度下的溶解度差异。
操作步骤：逐渐增加盐浓度，使目标蛋白质沉淀。
（2）凝胶过滤法原理：根据蛋白质分子大小进行分离。
凝胶的选择和柱子的装填。
（3）离子交换层析法原理：利用蛋白质的电荷差异。
离子交换剂的选择和平衡。
（4）亲和层析法原理：基于蛋白质与特定配体的特异性结合。
配体的选择和固定。
（二）实验操作1、实验准备（1）准备所需的实验器材，如离心机、层析柱、移液器等。
（2）配置实验所需的试剂，如缓冲液、盐溶液等。
2、蛋白质提取实验（1）以动物肝脏或植物叶片为材料，进行破碎处理。
2019届二轮复习 蛋白质的提取与分离 学案(适用全国)
1．蛋白质提取与分离的依据分子的形状、大小；电荷性质和多少；溶解度；吸附性质；对其他分子亲和力。
2．凝胶色谱法（1）材料：凝胶多孔性，多糖类化合物，如葡聚糖、琼脂糖。
（2）步骤：混合物上柱→洗脱→大分子流动快、小分子流动慢→收集大分子→收集小分子原理：当相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程较长，移动速度较慢；相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快。
相对分子质量不同的蛋白质因此得以分离。
3．缓冲溶液（1）概念：在一定范围内，能对抗外来少量强酸、强碱或稍加稀释不引起溶液pH发生明显变化的溶液。
（2）作用：能够抵制外界的酸或碱的对溶液的pH的影响，维持pH基本不变。
（3）配制：通常由1－2种缓冲剂溶解于水中配制而成。
调节缓冲剂的使用比例就可以制得在不同pH 范围内使用的缓冲液。
由弱酸和相应的强碱弱酸盐溶解于水中。
如H2CO3/NaHCO3，NaH2PO4/Na2HPO4等。
（4）本实验使用的是磷酸缓冲液(NaH2PO4/Na2HPO4)，目的是利用缓冲液模拟细胞内的pH环境，保证血红蛋白的正常结构和功能，便于观察（红色）和科学研究（活性）。
4．电泳法（1）概念：指带电粒子在电场作用下发生迁移的过程。
（2）原理：分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小，形状的不同使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。
（3）类型：琼脂糖凝胶电泳法：由于琼脂糖本身不带电荷，各种分子在电场中迁移速度决定于所带电荷性质的差异及分子的大小、形状的不同。
聚丙烯酰胺凝胶电泳法：在凝胶中加入SDS，使蛋白质解聚成单链，与各种蛋白质形成蛋白质－SDS复合物，使其迁移速度完全取决于分子的大小。
5．实验操作实验操作的基本步骤：样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定。
（一）样品处理（1）红细胞的洗涤：①目的：去除杂蛋白。
生物中图版学案：第六章第一节蛋白质的提取和分离
第一节蛋白质的提取和分离1．了解提取生物大分子的基本思路和方法.2．尝试蛋白质的提取。
一、蛋白质分离提纯技术将生物体内的蛋白质提取出来并加以分离,就可以得到高纯度的甚至是单一种类的蛋白质。
1．蛋白质分离提纯技术包括离心技术、层析技术和电泳技术等.其中,电泳技术最为快捷灵敏、简便易行.2．电泳原理蛋白质含有游离的氨基和羧基,是两性电解质，在一定pH条件下带有电荷。
作为带电粒子，蛋白质在电场中可以向与其自身所带电荷相反的电极方向移动，这就是电泳现象.蛋白质所带的电荷数越多，移动得越快;电荷数相同时，相对分子质量越小,则移动越快。
3．不同蛋白质的混合溶液，在经过同一个电场电泳后，会在凝胶上形成不同的带纹。
每一种带纹可能就是一种蛋白质。
将这些带纹一个一个地剪下来，分别予以洗脱，然后对洗脱液中的蛋白质做进一步的分离。
如果待测洗脱液不能再分离，则这个带纹中很可能含有一种单纯蛋白质。
如果待测洗脱液还能再分离,则这个带纹中含有多种蛋白质，需要作进一步分离，直至提纯。
二、血清蛋白的提取和分离1．新鲜血液在体外凝固后，会析出清亮的淡黄色液体-—血清。
血清中含有丙种球蛋白、凝集素等多种蛋白质.2．过程（1）点样：取新制血清与蔗糖溶液及溴酚蓝指示剂等体积混匀后，小心加到电泳样品槽的胶面上.(2）电泳。
（3）染色：取出凝胶,放入考马斯亮蓝R250染色液中.染色与固定同时进行,使染色液没过胶板，染色30 min。
（4）脱色：用醋酸溶液浸泡漂洗数次，每隔1~2 h更换脱色液,直至底色脱净，背景清晰。
（5）制干胶板：将已脱色的凝胶板放在保存液中浸泡3~4 h,然后放在两层透气玻璃纸中间,自然干燥即可获得血清蛋白的电泳谱带。
三、其他蛋白质的提取与分离1．牛奶中酪蛋白的提取与检测当pH＝4.8时，酪蛋白的溶解度降低，并析出沉淀。
用酒精除去酪蛋白沉淀中的脂肪后，即得到纯的酪蛋白。
酪蛋白中含有酪氨酸，能与米伦试剂起颜色反应，首先生成白色沉淀，加热后变成红色.2．卵清蛋白质的分离选取鸡、鸭、鹅、鹌鹑等动物的新鲜卵清作实验材料。
14.蛋白质的提取和分离-沪科教版选修1生物技术实践教案
14.蛋白质的提取和分离-沪科教版选修1 生物技术实践教案一、实验目的了解蛋白质的提取和分离方法，掌握蛋白质质量的测定技术。
二、实验原理1.蛋白质的提取蛋白质的提取一般包括以下步骤：（1）细胞破碎：通过机械破碎、超声波破碎和化学破碎等方法将细胞破碎，使细胞内的蛋白质从细胞内溶液释放出来。
（2）蛋白质分离：利用离心、滤过和电泳等方法对细胞提取液进行分离，得到纯净蛋白质。
2.蛋白质的分离蛋白质的分离可以采用以下方法：（1）电泳法：将蛋白质溶液放在电泳胶上，通过电泳运动将蛋白质分离出来。
（2）硫酸铵分级沉淀法：根据蛋白质在不同硫酸铵饱和度下的溶解度差异进行分离。
（3）柱层析法：利用不同蛋白质成分的分子量、电荷、亲和力等差异，分离出不同的蛋白质。
三、实验步骤1.蛋白质提取（1）取一定数量的细胞或组织，洗涤干净；（2）将细胞或组织加入含有破碎酶或超声波液中，进行破碎；（3）离心收集液体，去除碎细胞、细胞膜和碎骨等。
2.蛋白质分离（1）电泳法：将蛋白溶液通过电泳胶进行电泳，按照不同速度分离出含有目标蛋白的凝胶。
（2）硫酸铵分级沉淀法：将蛋白质溶液分别在不同硫酸铵饱和度下进行沉淀，分离出不同的蛋白质。
（3）柱层析法：将蛋白溶液通过不同材质的层析柱进行分离，分离出不同的蛋白质。
3.测定蛋白质含量测定蛋白质含量可以采用比色法、BCA法和Lowry法等方法。
四、实验注意事项（1）进行实验时要佩戴实验手套；（2）破碎细胞时保持冷却状态，防止酶的活性降低；（3）分离过程中要严格控制温度，在低温下进行实验，防止蛋白质变性。
五、实验结果分析通过实验，我们可以了解蛋白质的提取和分离方法，掌握蛋白质质量的测定技术。
在实验的过程中，我们还可以观察到蛋白质质量的变化和分离程度，并进行相应的分析。
六、实验拓展在实验的基础上，可以进行以下拓展：（1）利用已有的蛋白质分离技术，分离出某种目标蛋白；（2）应用分离出的蛋白质进行进一步的生物学研究、泛素化等研究。
2019学年第二学期高二生物专题5《血红蛋白的提取和分离》学案含答案
血红蛋白的提取和分离学习目标1.掌握蛋白质分离的方法——凝胶色谱法的原理、缓冲液的制备及作用和蛋白质纯度鉴定的方法——电泳法的原理。
2.掌握蛋白质提取和分离的过程。
3.掌握蛋白质分离过程中需注意的问题。
一、蛋白质的分离技术1．蛋白质的分离依据 根据蛋白质各种特性的差异，如分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度、吸附性质和对其他分子的亲和力等，可以用来分离不同种类的蛋白质。
2．凝胶色谱法(1)概念：也称做分配色谱法，是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。
(2)凝胶的特点⎩⎪⎨⎪⎧ 形态：微小的多孔球体组成：大多数由多糖类化合物构成结构：内部有许多贯穿的通道(3)常用凝胶：葡聚糖或琼脂糖。
(4)分离原理①相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程较长，移动速度较慢，通过凝胶的时间较长。
②相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快，通过凝胶的时间较短。
特别提醒洗脱是指从色谱柱上端不断注入缓冲液，促使蛋白质分子的差速流动。
3．缓冲溶液(1)作用：在一定范围内，缓冲溶液能够抵制外界的酸和碱对溶液pH的影响，维持pH基本不变。
(2)配制：通常由1～2种缓冲剂溶解于水中配制而成。
调节缓冲剂的使用比例就可以制得在不同pH范围内使用的缓冲液。
(3)意义：为了能够在实验室条件下准确模拟生物体内的过程，就必须保持体外溶液的pH与体内环境中的pH基本一致。
4．电泳(1)概念：带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程。
(2)原理①带电粒子：许多重要的生物大分子，如多肽、核酸等都具有可解离的基团，在一定的pH下，这些基团会带上正电或负电。
②迁移动力与方向：在电场的作用下，带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。
③分离依据：电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。
高二生物学案52蛋白质的提取与分离(I)人教版选修一
A．将橡皮塞上部用刀切出锅底状的凹穴B．将橡皮塞下部切出凹穴
C．插入的玻璃管的上部要超出橡皮塞的凹穴底面D．将尼龙网剪成与橡皮塞下部一样大小的圆片
13．样品的加入和洗脱的操作不正确的是（）
A．加样前，打开色谱柱下端的流出口，使柱内凝胶面上的缓冲液缓慢下降到凝胶面的下面
学习重点：凝胶色谱法的原理和方法。
学习难点：色谱柱制作、填料的处理、色谱柱的装填和样品的加入与处理。
预习内容
凝胶色谱操作
(1)凝胶色谱柱的制作
①柱底部的制作
a．选择合适的橡皮塞，中间打孔。
b．在橡皮塞顶部切出锅底状_____________，在0.5 mL的___________头部切下___________长的一段，插入橡皮塞孔内，上部不得超出橡皮塞的凹穴底面。
11．在盛有红褐色的Fe(OH)3，胶体的U形管的两个管口，各插一个电极，通直流电后，发现
阴极附近的颜色逐渐加深，这说明()
A．Fe(OH)3胶体粒子带正电荷，向阴极移动B．Fe(OH)3胶体粒子带负电荷，向阳极移动
C．Fe(OH)3胶体粒子带正电荷，向阳极移动D．Fe(OH)3胶体粒子带负电荷，向阴极移动
c．剪尼龙网小圆片覆盖在___________。用___________的尼龙纱将橡皮塞___________包好，插到玻璃管一端。
d．色谱柱下端用移液管头部作___________，连接一细的___________，并用___________控制尼龙管的___________与___________，另一端放入收集___________的收集器内。
A．样品处理、凝胶色谱操作、SDS一聚丙烯酰胺凝胶电泳
B．样品处理、凝胶色谱操作、纯化C．样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定
2019-2020学年苏教版生物选修一新素养同步学案：第四章 第一节 第1课时 蛋白质的分离与提取 Word版含答案
第一节 生物成分的分离与测定技术 第1课时 蛋白质的分离与提取学习导航明目标、知重点难点掌握电泳法分离大分子的原理。
(重点) 运用常用的方法提取和分离蛋白质。
(重、难点)[学生用书P48]一、阅读教材P 71～72分析蛋白质的分离与纯化 1．生物细胞中的蛋白质提取(1)在提取蛋白质时，可以采用研磨与超声波结合的方法将生物组织或细胞完全破碎，使蛋白质从细胞中释放出来，并使其溶解在适当的抽提液中。
(2)抽提液的选择需要根据蛋白质的特性而定，一般酸性蛋白质用偏碱性溶液抽提，碱性蛋白质用偏酸性溶液抽提，脂蛋白等则可用有机溶剂抽提。
2．蛋白质的分离方法(1)离心沉降法：通过控制离心速度，使分子大小、密度不同的蛋白质发生沉降分层。
(2)薄膜透析法：利用蛋白质分子不能透过半透膜的特性，使蛋白质与其他小分子化合物分离的方法。
(3)凝胶色谱法①概念：根据蛋白质分子量的大小差异对其进行有效分离的方法。
②原理a ．凝胶⎩⎪⎨⎪⎧形态：微小的多孔球体组成：大多由多糖类化合物构成结构：内部具有很细微的多孔网状结构b ．分离的过程进入凝胶颗粒内路程移动速度部的难易程度小分子容易较长较慢蛋白质大分子无法进入较短较快蛋白质二、阅读教材P73～77完成血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳及凝胶色谱法分离血红蛋白的操作1．血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳配制试剂→准备器材→架滤纸桥→浸泡薄膜→细心点样→平悬薄膜→实施电泳→染色→漂洗→脱色。
2．凝胶色谱法分离血红蛋白样品处理→血红蛋白的释放、分离和透析→凝胶的制备→色谱柱的装填→样品的加入→洗脱与收集。
判一判(1)酸性蛋白质用酸性溶液抽提，水溶性蛋白质用透析液抽提，脂溶性蛋白质用稀碱性溶液抽提。
(×)(2)电泳是指带电粒子在电场的作用下向着与其电性相反的电极移动的过程。
(√)(3)电泳时泳动速度取决于带电颗粒的大小、形状、所带静电荷多少。
(√)(4)离心沉降法和薄膜透析法分离蛋白质的原理是一样的。
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4.2 蛋白质的提取和分离学案（含答案）
第第14课时课时蛋白质的提取和分离蛋白质的提取和分离学习导航
1.阅读教材P7475内容，理解电泳.同工酶和蛋白质组学。
2.结合教材P7375内容，进行乳酸脱氢酶同工酶的提取和电泳分离。
3.结合教材P7375内容，总结在琼脂糖凝胶电泳中影响蛋白质迁移率的因素。
重难点击
1.进行乳酸脱氢酶同工酶的提取和电泳分离。
2.总结在琼脂糖凝胶电泳中影响蛋白质迁移率的因素。
一
一..电泳电泳..同工酶和蛋白质组学同工酶和蛋白质组学带电荷的物质在电场中的趋向运动称为电泳。
电泳的种类多，应用非常广泛，它已成为分子生物学技术中分离生物大分子的重要手段。
1电泳1概念带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程。
2原理带电粒子许多重要的生物大分子，如多肽.核酸等都具有可解离的基团，在一定的pH下，这些基团会带上正电或负电。
迁移动力与方向在电场的作用下，带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。
分离依据电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异
以及分子本身的大小.形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。
3常用的电泳方法琼脂糖凝胶电泳在电泳缓冲液和凝胶中加入琼脂糖，蛋白质分子的迁移速率主要取决于其所带净电荷以及分
子的大小和形状等因素。
变性胶电泳在电泳缓冲液和凝胶中加入二烷基硫酸钠SDS变
性剂，蛋白质都变为椭圆形，SDS带有大量的负电荷，掩盖了不同蛋白质的电荷差异，因此变性胶电泳中影响蛋白质的迁移速率的
主要因素是蛋白质分子的大小。
2同工酶同工酶是指催化相同的化学反应而酶蛋白的分子结构.理化性质乃至免疫学性质不同的一组酶。
乳酸脱氢酶一般含有5
种同工酶，其相对分子质量相同，但所带电荷不同。
3蛋白质组学蛋白质组学指的是在大规模水平上研究蛋白质的特征，包括蛋白质的氨基酸组成分析.立体结构研究和蛋白质的人工合成等。
由此获得蛋白质水平上的关于疾病发生.细胞代谢等过程的整体而全面的认识。
蛋白质组学的研究不仅能分析生物体内
蛋白质的组成，还可以揭示各种蛋白质在生物体内的相互作用与
联系。
1从电荷方面思考，适合电泳法分离的各种分子需具备什么条件答案各种分子应带有不同种类和不同量的电荷。
2变性胶电泳分离蛋白质是否依据蛋白质所带电荷的差异为什么答案否。
因为SDS能与蛋白质结合，形成蛋白质SDS复合物，SDS所带负电荷的量远大于蛋白质分子原有的电荷量，因而掩盖了不同蛋白质间的电荷差异，使电泳迁移率完全由蛋白质分子的大小决定。
归纳总结
琼脂糖凝胶电泳和变性胶电泳的两点区别1分离原理不同琼脂糖凝胶电泳依据分子所带电荷的差异和分子大小.形状等。
变性胶电泳则完全取决于分子大小，而非电荷性质和分子形状。
2用途不同琼脂糖凝胶电泳广泛应用于核酸的研究中，用于分离大分子核酸。
变性胶电泳则广泛应用于分离蛋白质和相对分子质量较小的核酸。
1带电荷的蛋白质在电场中移动的速度主要取决于A所带的电荷多少B蛋白质的分子大小C蛋白质的相对分子质量D蛋白质的分子大小和所带的电荷多少答案D2下列说法中，不正确的是A同工酶催化的化学反应相同，但结构不完全相同B同工酶的相对分子质量一定不同C蛋白质的多样性决定了其功能的多样性D蛋白质组学是21世纪生命科学研究领域新的前沿答案B解析同工酶催化的化学反应相同，但结构不完全相同，乳酸脱氢酶的5种同工酶的相对分子质量是相同的。
特别提醒同工酶存在于生物的同一种属或同一个体的不同组织.甚至同一组织或细胞中。
产生同工酶的主要原因是在进化过程中基因发生变异，而其变异程度尚不足以成为一个新酶。
二
二..乳酸脱氢酶同工酶的提取和分离乳酸脱氢酶同工酶的提取和分离下面我们以乳酸脱氢酶同工酶的提取和分离为例，体验蛋白质的提取和分离技术。
1乳酸脱氢酶同工酶的提取1取5g新鲜的动物心脏，漂洗干净后剪碎到预冷的玻璃匀浆器中，加入25mL磷酸提取缓冲液，然后冰浴研磨成匀浆如图1。
2将匀浆收集到冰浴的离心管中，在4条件下12000rpm离心10min。
吸取上清液，然后在4条件下保存备用如图2。
2琼脂糖凝胶电泳分离1制备琼脂糖凝胶用TBE电泳缓冲液配制质量分数为1的琼脂糖凝胶，加热溶解后混匀，缓慢倒入胶床中，插入适当的梳子，室温冷却至凝胶凝固。
拔出梳子，将凝胶放入电泳槽中，然后向电泳槽中加入适量TBE电泳缓冲液如图3。
2加样取适量同工酶提取液与等量载样缓冲液质量分数40的蔗糖溶液.0.25溴酚蓝混匀，然后取20L加入样品孔内。
3电泳100V条件下进行电泳约30min。
4染色当溴酚蓝指示剂电泳到凝胶底部时切断电源，取出胶板浸入染色液中，37染色1530min，水洗后观察电泳结果。
3结果分析由图中电泳结果可以看出1每个器官形成了5个条带说明乳酸脱氢酶有5种同工酶。
2LDH2在心脏中含量最高，在骨骼肌中含量最低，说明不同的器官同一种同工酶的含量不同。
3骨骼肌中含量最高的是LDH5，含量最低的是LDH1，说明同一器官不同的同工酶含量不同。
1提取和分离乳酸脱氢酶同工酶过程中为什么要保持酶的活性答案酶作为一类特殊的蛋白质具有生物催化活性，在其提取和分离过程中必须保持其生物活性，这样分离出的酶才有可能用来研究其生化性质及相关功能。
2制备乳酸脱氢酶同工酶提取液的过程中，哪些是为了保持酶活性而采取的措施答案提供必要的缓冲系统，以维持pH的相对稳定，防止破坏其活性；保持低温环境，如将玻璃匀浆器和离心管预冷，低温离心；避免引入其他杂质或变性剂，导致酶变性，如对材料进行漂洗。
3溴酚蓝为什么能作为乳酸脱氢酶同工酶的指示剂答案溴酚蓝能和乳酸脱氢酶同工酶发生特定的反应，形成特殊的蓝紫色产物。
归纳总结1实验步骤概括取材剪碎漂洗匀浆离心制凝胶加样电泳染色冲洗观察。
2实验操作要点所有提取乳酸脱氢酶同工酶用到的器具最好都提前在冰箱中预冷处理，这样能更好地保持酶的活性。
蛋白质样品在上样之前，要与等量载体缓冲液混匀。
载样缓冲液中的蔗糖可增加蛋白质样品的比重，防止加样时发生“漂
样”现象；溴酚蓝作为一种电泳前沿指示剂，可据其在凝胶中的迁移距离判断电泳的进行程度。
将蛋白质样品加在电泳槽的负极段的加样孔，因为在碱性缓冲液中带负电荷的蛋白质在外加电场作用下会向正极移动。
3在乳酸脱氢酶同工酶分离过程中，使用缓冲液的作用是A维持溶液浓度不变B维持溶液酸碱度相对稳定C催化蛋白质分离过程顺利完成D无实际意义答案B解析分离蛋白质时加入缓冲液，其原因是缓冲液在一定范围内能抵制外界酸和碱对反应溶液pH的影响，保持pH基本不变。
4下列说法不正确的是A在酶的提取和分离过程中必须保持其生物活性B将心脏研磨成匀浆时要在冰浴下进行，是为了保证酶的活性C载样缓冲液中的溴酚蓝是一种酸碱缓冲物质，维持pH稳定D电泳结果出现了5个条带，说明乳酸脱氢酶有5种同工酶答案C解析酶提取之后要进行一系列活性条件下的研究，因此在酶的提取和分离过程中必须保持其生物活性，将心脏研磨成匀浆时要在冰浴下进行，就是为了保证酶的活性。
载样缓冲液中的溴酚蓝是一种指示剂，指示酶的迁移位置；电泳结果出现了5个条带说明乳酸脱氢酶有5种同工酶。
特别提醒琼脂糖凝胶电泳的优点1琼脂糖含液体量大，近似自由电泳。
2琼脂糖作为支持体有均匀.区带整齐.分辨率高.重复性好等优点。
3电泳速度快。
4区带易染色，样品易回收，有利于制备。
5操作简单.快速.灵敏。
1下列有关同工酶的概念，描述正确的是A催化相同的化学反应，酶蛋白的分子结构.理化性质不同，电泳行为不同B催化不同的化学反应C催化不同的化学反应，酶蛋白的分子结构.理化性质相同，电泳行为相同D催化相似的化学反应答案A解析同工酶是指催化相同的化学反应而酶蛋白的分子结构.理化性质以及免疫学性质不同的一组酶。
2乳酸脱氢酶有几种同工酶A2B3C4D5答案D解析乳酸脱氢酶的同工酶共有5种。
3下列各项中，除哪项外均为电泳使样品中各分子分离的原因A分子带电性质的差异B分子的大小C分子的形状D分子的变性温度答案D解析电泳是指带电粒子在电场作用下发生迁移的过程。
样品分子的带电性质不同.分子的大小和形状不同都会影响带电粒子在电场中的迁移速度，与分子的变性温度无关，故选D项。
4科学家发现蝇体内存在一种抗菌活性蛋白。
这种蛋白质具有极强的抗菌能力，受到研究者的重视。
分离该抗菌蛋白可用电泳法，其原理是根据蛋白质分子的__________.大小及形状不同，在电场中的________不同而实现的分离。
答案电荷带电情况迁移速度解析电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小.形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。