临床输血学检验新生儿溶血病PPT课件

母缺少任一Rh抗原 有该Rh抗原
胎儿却具
第一胎可发病（约半数）一般发生在第二胎；第一胎也可发 病
不一定
大多数更严重
较轻
较重，严重者甚至死胎
生后第2～3天出现
24小时内出现并迅速加重
轻
可有严重贫血或伴心力衰竭
很少发生
多有不同程度的肝脾增大
很少发生
可发生，持续至生后3～6周
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症状与体症：
❖ 贫血 ❖ 黄疸 ❖ 水肿 ❖ 肝脾肿大 ❖ 全身表现
临床输血学检验
新生儿溶血病
南京医科大学第一附属医院 江苏省人民医院输血科
江苏省临床用血质控中心 周小玉
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概念：
新生儿溶血病（Haemolytic Disease of Newborn， HDN)系指母胎血型不合引起的母亲对新生儿（或胎儿）红 细胞发生同种免疫反应引起的溶血性疾病。
我国以ABO血型不合造成ABO-HDN比较多见，Rh血型不合 造成Rh-HDN比较少见，其他系统血型不合造成HDN更少见 。
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溶血三项—直抗试验：
结果判定：
阴性：红细胞完全沉于底部。 阳性：红细胞不同程度地分散于凝胶柱中。
临床意义：
观察患儿RBC有无被免疫抗体致敏,一旦发现新生儿红细胞 直抗阳性，即成为诊断新生儿溶血病有力证据。
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注意事项：
由于新生儿A(B)抗原密度比成人低,结合在红细胞上抗 体往往较少,ABO HDN患儿直抗试验常常得到阴性或弱阳 性（≤1+）结果。Rh HDN为常为强阳性(≥2+)。是区别 ABO和Rh HDN主要标志。 基于上述原因，应注意： 对于微弱的凝集，也应报告结果（可报弱阳性） ABO HDN既使直抗和游离试验均为阴性，第三项放
散实验必须要进行。
。
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溶血三项－游离抗体
实验原理： 用间接coombs试验检测新生儿血清中的血型抗体,如果 检出的抗体能够和新生儿红细胞反应,则新生儿可能患溶 血症。
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溶血三项－游离抗体
操作步骤：
将50ul浓度为0.8～1.0%标准的A（B）、O细胞分 别加入已标注的微柱凝胶孔中。
向各孔中分别加入患儿的血清25ul。 置孵育器孵育15分钟。
结果。
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主要检查项目：
产后检查：
❖ 新生儿血型鉴定（ ABO、Rh ） ❖ 血常规检测：
溶血RBC、Hb下降，网织红和有核红升高。
❖ 生化检查：胆红素升高，以未结合胆红素为主。 ❖ 溶血三项检测：
直接抗人球蛋白试验、游离抗体筛查和抗体释放试验。
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溶血三项—直抗试验： 实验原理：
检测新生儿红细胞上是否存在免疫性抗体； 患者体内若有与红细胞抗原相应的不完全抗体存在，可与红细 胞结合。但因不完全抗体分子小，不能有效地连接红细胞，仅 能使红细胞处于致敏状态，加入抗球蛋白血清，与红细胞上吸 附的不完全抗体结合，在致敏红细胞之间搭桥。
37℃温育10分钟，取出后待用。 向第2～10支试管中各加入NS100ul； 向第1,2支试管中各加入2-Me处理过的血清(抗D测定除外)
100ul,从第2支试管吸取稀释液100ul加入第3管,依 次作倍比稀释,保留第10管稀释液备用; 向1～9管中各入5% (A、B或O) RBC悬液50ul； 用适当的技术来检查（聚凝胺、抗人球、酶法等），肉眼观察
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发病病因：
胎儿从父亲遗传来的红细胞抗原恰为母亲所缺少,胎儿 红细胞通过胎盘进入母体血循环刺激母体产生相应的血 型抗体（IgG）。
此抗体又可通过胎盘进入胎儿血循环与胎儿、（新生 儿）红细胞相结合，发生特异性抗原抗体反应，使红细 胞破坏而发生溶血现象。
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• 抗体性质： IgG • 多发生于ABO和Rh两个血型系统 抗A，抗B，抗D，抗E
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溶血三项—直抗试验
抗人球试管法 微柱抗人球卡法
方法试剂选择
直抗试验
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直抗试验
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溶血三项—直抗试验：
操作步骤： 将患者红细胞制备成0.8～1.0% RBC悬液 （ 0.5mlLiss+5ul压积RBC)，待用。 准确吸取上述制备好的RBC悬液50ul加入微柱凝胶孔中。 置孵育器孵育15分钟。 离心10分钟后观察结果。
离心10分钟后观察结果。
′ 37℃孵育15
观察结果
1030r/min,10′
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溶血三项－游离抗体 结果判定：
阴性：红细胞完全沉于底部。 阳性：红细胞不同程度地分散于凝胶柱中。
临床意义：
游离试验是检测新生儿血清中的血型抗体，具体分析见 下表：
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溶血三项－游离抗体
新生儿血清中游离抗体检查
与指示细胞反应
❖ 夫妇血型检查(ABO、Rh) ❖ 抗体筛检 ❖ 血型IgG抗体效价测定
连续检查发现效价持续升高，则表明胎儿受害的可能性增大
❖ 羊水检查：测定羊水胆红素水平，估计胎儿溶血程度 ❖ B型超声检查：了解胎儿有无水肿。
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IgG抗体效价测定
原理：
父母血型预测胎儿的血型，判断HDN发生的可能性 IgG是唯一能通过胎盘的免疫球蛋白，目的检测IgG类
Ac
Bc
Oc
+
－
－
－
+
－
+
+
－
+/－
+/－
+
－
－
－
结果判定
有游离的抗-A抗体 有游离的抗-Ｂ抗体 有游离的抗-A,抗-B或抗-A,B抗体 有游离的ABO系统以外的抗体 无游离的抗体
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ABO HDN
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ABO新生儿溶血病 0型母亲——A型或B型婴儿 多为第一胎 Rh新生儿溶血病 Rh阴性母亲——Rh阳性婴儿 很少为第一胎
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临床特点
发生频率 发生的母子血型
发生胎次
下一胎情况 临床表现 黄疸 贫血 肝脾大 晚期贫血
ABO溶血病
Rh溶血病
常见
不常见
主要发生在母O型 胎儿为A型或B型
性质的抗体（如IgG抗A、抗B、抗D等） 排除IgM抗体的干扰（二巯基乙醇或二硫苏糖醇）
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IgG抗体效价测定—方法和试剂
✓ 凝聚胺法 ✓ 抗人球试管法
微柱卡法
酶法
方法试剂选择 IgG抗体效 价测定
1、二巯基乙醇（商 品化）2、试剂细胞 14
IgG抗体效价测定
操作步骤：
取10支小试管，编号为1，2…10； 另取小试管1只，加入待检血清和2-Me（0.1M）各200ul，置
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◆ ABO溶血
胎儿红细胞溶血轻
◆ Rh溶血
胎儿红细胞溶血重
胎儿血中胆红素↑ 胎儿重度贫血
髓外造血↑
胎盘 母亲肝脏
低蛋白血症 心力衰竭
娩出时黄疸不明显
胎儿全身水肿
肝脾肿大
新生儿处理胆红素↓ 新生儿黄疸
血清UCB过高 血脑屏障
胆红素脑病
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实验室检查
产前检查 产后检查
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主要检查项目:
产前检查: