实验二-叶绿体中色素的提取和分离教学提纲

实验材料用具：
1、材料：新鲜的绿色叶片(如菠菜叶片)。 2、仪器：干燥的定性滤纸，烧杯(100mL)，
研钵 玻璃漏斗，尼龙布（或棉花），毛 细吸管，剪刀，小试管，培养皿盖，药勺， 量筒(10mL)，天平，镊子，铅笔，尺子。 3、药品：丙酮，层析液，二氧化硅，碳 酸钙。
实验过程：
1、提取叶绿素的步骤 ： （1）称：用天平称量5g除去叶柄的叶片 （2）剪：越细越好，尽量去除叶脉等部分 （3）加药品：加少量二氧化硅，碳酸钙和
。
问题讨论：
• 4. 为什么不能让滤液细线触及层析液？ 层析液会溶解色素使色素无法分离；
5.观察实验结果有什么现象？滤纸条上出现了几 条色素带？每条色素带的颜色和排序如何？ 滤纸条上将分离出四条色素带，颜色从上 往下分别是橙黄色、黄色、蓝绿色和黄绿色， 四种色素分别是胡萝卜素（最快）、叶黄素、 叶绿素a（最多）和叶绿素b（最慢）。
①将5克新鲜完整的菠菜叶，放在研钵中，加入丙酮、 石英砂、CaCO3以后，迅速研磨。 (原因是没有去除粗叶脉和将叶剪碎，这样降低了叶 绿素的提取率 ）
②用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔线处小心均匀 地划出一条滤液细线，并连续迅速地重复划2～3次。
(原因是上一次滤液细线未干燥，即划下一次线， 使滤液线过粗或线上色素量较低
丙酮（约5mL）快速充分研磨。 （4）磨：研磨要领是要用力压快速研磨。 （5）过滤：用纱布（或棉花）、漏斗和试
管，最后提取液置于试管中待用，及时用 棉塞（或塞子）将试管塞严 .
1、约5克的菠菜緑叶，剪碎，放 入研钵中。
2、研钵中加入少许二氧化硅和碳酸钙，再加 入10mL无水乙醇。
3、迅速研磨。
③把划好细线的滤纸条插入层析液中，并不断摇晃， 以求加快色素在滤纸条上的扩散。
（原因是由于摇晃，层析液接触液线，溶解了色素）
.
胡萝卜素（橙黄色）
绿 叶
类胡萝卜素
中
（含量约1/4）
叶黄素（黄色）
的
色 素
叶绿素
叶绿素a（蓝绿色）
（含量约3/4）
叶绿素b（黄绿色）
实验关键:
1.选材时应注意选择鲜嫩、色浓绿、无浆汁 的叶片.(如菠菜叶)
2.画滤液细线时应以细、齐、直为标准，重复 画线时必须等上次画线干燥后再进行，重复 2-3次。
2.下列关于“叶绿体色素提取和分离”的实验
描述中，不属于实验要求的是 （ ）
A.提取高等植物叶绿体中的色素 B.用纸层析法分离色素 C.了解各种色素的吸收光谱 D.验证叶绿体中所含色素的种类
3.用纸层析法将色素进行分离,在滤纸条上出现 的最窄的一条色素带的颜色是 （ ）
A.黄色 B.橙黄色 C.黄绿色 D.蓝绿色
叶绿体中色素的提取和分离
叶绿体中色素的提取和分离
➢实验目的
掌握提取和分离叶绿体色素的方法，探究叶绿体中 色素的种类。
➢实验材料
➢新鲜的绿色叶片(如菠菜叶片)。
叶绿体中色素的提取和分离
➢实验原理
➢ 叶绿体中含有两大类色素（叶绿素和类胡 萝卜素），它们溶于有机溶剂，因此可选用乙 醇或丙酮进行提取。
➢ 层析液是一种脂溶性很强的有机溶剂，叶 绿体内的色素在层析液中的溶解度各不相同， 溶解度越高，在滤纸上的扩散速度越快，反之 则慢，可以将叶绿体中的色素分离开来。因此 采用纸层析法进行分离。
A.橙黄色 B.黄绿色 C.蓝绿色 D.黄色
(2)在做“叶绿体中色素的提取和分离”
实验时，向研钵中加入SiO2的目的
是：
，
加入CaC03的目的是
在盛有层析液Βιβλιοθήκη Baidu烧杯上盖上培养皿盖的是 在滤纸条上扩散速度最慢的色素带是 其颜色是
(3)某同学在做“叶绿体中色素的提取分离”实验 时，操作情况如下所述，结果实验失败，请指出 其错误所在:
2、 将滤液放在试管中，为什么要及时用棉塞 将试管塞严？
滤液含有丙酮，丙酮有毒，防止挥发
3、 画滤液细线时重复画几次的目的是什么？ 增加色素的含量，使分离后的色素带更加清
晰
问题讨论：
• 4. 为什么不能让滤液细线触及层析液？
5.观察实验结果有什么现象？滤纸条上出现了几 条色素带？每条色素带的颜色和排序如何？
叶绿体中色素的提取和分离
➢实验结果
问题讨论：
1、加入SiO2、CaCO3的作用是什么？
2、 将滤液放在试管中，为什么要及时 用棉塞将试管塞严？
3、 画滤液细线时重复画几次的目的是 什么？
问题讨论：
1、加入SiO2、CaCO3的作用是什么？ 二氧化硅的作用是使研磨更加充分、迅速；
碳酸钙的作用是保护叶绿素不分解
4.提取叶绿体中的色素时要加丙 酮，其原因是 （ ）
A.让色素溶解 B.防止叶绿素被破坏 C.便于将叶片研磨成匀浆 D.促使叶绿体中色素分离
5.在叶绿体色素的提取和分离实验中，在 滤纸条上扩散速度最快的色素是（ ）
A.叶绿素a B.叶绿素b C.胡萝卜素 D.叶黄素
能力提高练习：
(1)在圆形滤纸的中央，点上叶绿体色素的 提取液进行层析，随着层析液从滤纸的中 央向四周扩散，形成四个色素环带，排在 最里圈的色素是（ ）
3.层析时不要让滤液细线触及层析液。
随堂演练 ：
1.通过纸层析分离叶绿体色素，结果在滤纸 条上出现四条色素带，从上到下依次为 （） A.胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a、叶绿素b B.胡萝卜素、叶绿素a、叶绿素b、叶黄素 C.叶绿素b、叶绿素a、叶黄素、胡萝卜素 D.叶黄素、叶绿素a、叶绿素b、胡萝卜素
4、将研磨液迅速倒入玻璃漏斗中进行过滤， 将过滤液收集到烧杯或试管中。
2、分离色素的步骤
①制备滤纸条：将预备在 试验桌上的滤纸条一端 剪去两个角作标记，在 距离这一端1cm处用铅笔 画一条细的横线。
②画滤液细线：沿铅笔线 轻轻均匀地画一道线， 每次划完尽量吹干，用 提取液反复划好几次， 不要弄破纸条。
③层析分离叶绿体中 的色素：将3mL层 析液倒入烧杯中， 注意将纸条画有滤 液细线的一端置于 烧杯中的层析液中， 注意千万不要将滤 液细线浸没在层析 液中。
• ④（干燥后） 观察实验结果：
• 四条色素带， 颜色从上往下 分别是橙黄色、 黄色、蓝绿色 和黄绿色，四 种色素分别是 胡萝卜素、叶 黄素、叶绿素 a和叶绿素b