固定化青霉素酰化酶合成头孢拉定的工艺研究
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收稿日期：2007-04-12 作者简介：叶树祥(1967)，男，硕士，从事化工、药学的生产和研究。 Tel：0575-3117205，013587318918 E-mail：yeshux@hotmail.com
氢苯甘氨酸的产生。pH 7.0、20℃反应效果好，收 率可达90％。本研究酶用量较大，但可回收套用。
YE Shu-xiang, XU Cheng-miao, WANG Jia-bing
(Zhejiang Anglikang Pharmaceutical Co., Ltd., Shengzhou 312400)
ABSTRACT: Cephadine was synthesized from 7-ADCA and DHME in the phosphate buffer (20℃, pH 7.0) with the immobilized penicillin acylase as a catalyst in a yield of 90％.
在本次论坛上，卡乐康专业的产品技术和服务为与会者带来了全新的一章。让更多的国内医药企业走近卡乐康，了解卡乐康。
万方数据
如今，随着全球医药市场的发展，中国医药市场所占比重逐步提升，卡乐康的全球发展战略随之调整：在中国市场引进国外 高端技术，产品从单一的薄膜包衣制品发展为全方位的辅料产品。近年来，推出了一系列缓控释产品和药用辅料系列产品。
2007年8月28日、30日，卡乐康中国公司缓控释事业部分别在上海和北京成功举办了第二届中国缓控释论坛。缓控释作为一 种国际新技术，能很好地顺应成品药的变更趋势，在速释、缓释及肠溶等固体制剂中都有运用，而且具有很强的技术开发现实 性。这些都为提高下游医药企业的产品品质提供保障，提升成品药的增值潜力。卡乐康除了拥有优秀的产品应用于各种先进的缓 控释技术，还针对缓控释领域骨架片技术，推出初始配方库，并在本次论坛中做了详细的介绍，为与会者呈现了全新的“渗透泵 技术于缓控释技术中的应用”，也带来了此项技术的全新、优质产品——Polyox(聚氧乙烯)。
素杂志, 2003, 28(7): 493. [4] 石家骥, 崔福绵. 青霉素G酰化酶在γ-氧化铝上的吸附交联
固定化[J]. 中国抗生素杂志, 2001, 26(5): 334-336. [5] 崔福绵, 石家骥, 白小东, 等. 酶法合成头孢环己二烯[J].
微生物学报, 1998, 38(4): ห้องสมุดไป่ตู้00-303. [6] Shaw S, Shyu J, Hsieh Y, et al. Enzymatic synthesis of
万方数据
· 620 ·
中国医药工业杂志 Chinese Journal of Pharmaceuticals 2007, 38(9)
图1 酶法合成1的工艺路线
滤饼依次用冷水和丙酮-水(1∶4，v / v)洗涤，4 5℃减压 (≤–85kPa)干燥2h，得1(17.8g，90％)，mp 190～192℃ (分解)[文献[8]：(192±3.4)℃]。纯度98.0％(HPLC外标 法)。IR、1HNMR、元素分析证实结构。
中国医药工业杂志 Chinese Journal of Pharmaceuticals 2007, 38(9)
· 619 ·
固定化青霉素酰化酶合成头孢拉定的工艺研究
叶树祥，徐成苗，王佳兵
(浙江昂利康制药有限公司，浙江嵊州 312400)
摘要：用7-氨基-3-脱乙酰氧基头孢霉烷酸和2,5-二氢苯甘氨酸甲酯盐酸盐在磷酸盐缓冲液体系中(20℃，pH 7.0)，利用固
1的合成可分为化学法和酶法。目前国内多用 化学法的混酐法生产工艺[3]。酶法合成1具有污染 小、操作简单和反应条件温和等优点[4-7]。本研究用 7-氨基-3-脱乙酰氧基头孢霉烷酸(7-ADCA)和2,5二氢苯甘氨酸甲酯盐酸盐(DHME)为原料，在磷酸 盐缓冲液中，经固定化青霉素酰化酶(PGA)催化合 成1(图1)，并考察了7-ADCA和DHME的浓度、固 定化酶的用量、pH及温度等影响因素，优化了工 艺：7-ADCA的浓度约为反应体系的10％；缓慢滴 加DHME，可有效降低其降解速度，控制副产物双
cephalothin by penicillin G acylase[J]. Enzyme Microb Technol, 2000, 26(2-4): 142-151. [7] Heemskerk D, Hogenboom AGM, Lenhardt CE, et al. Process for the preparation of cephradine: US, 2006189802 [P]. 2006-08-24. [8] 朱宝泉, 李安良, 杨光中, 等. 新编药物合成手册[M]. 北京: 化学工业出版社, 2003: 362.
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从包衣开始—做卓越的药用辅料供应商
卡乐康缓控释论坛—一个传递先进缓控释技术产品和应用研究的盛会
始于1961年的卡乐康，总部设在美国费城，是一家全球化、技术领先的药用辅料供应商。服务制药行业四十多年来，卡乐康 始终以高品质药用辅料供应市场，成为制药产品原料和产品品牌提升服务的领先者。
实验部分
PGA(浙江东阳顺风海德尔公司)；7-A DCA(浙江新东海 医药化工有限公司)；DHME(自制)。其他试剂均为分析纯。
头孢拉定一水合物(1) 固定化青霉素酰化酶30g(湿品，干品约 10g)加至底部有砂芯过滤装置(孔径约100µm)、 机械搅拌和夹层保温装置的酶反应器中，加入 0.lmol/L磷酸盐缓冲液(pH 7.0，60ml)，20℃加入 7-ADCA(15g，70mmol)和亚硫酸氢钠(0.2g)，搅 拌下用8％氨水调至pH 7.0。 另一反应瓶中加入D H M E(15.7g，7 7m m o l)和水 (28m l)，搅拌至溶。20℃下9 0 m i n内，滴至如上酶反 应器中，其间用8％氨水维持pH 7.0。加毕同温、同pH 条件下搅拌5 h，H PL C跟踪反应(7-A D CA残留低于 2mg/ml)。冷却至0～5℃，用8％氨水调至pH 8.5，从反 应器底部滤出反应液，用水(15ml×2)冲洗酶反应器，合 并滤液和洗液，过滤，升温至50℃，用10℃的稀盐酸-水 (1∶2，v/v)调节至pH 5.0，冷却至5℃，静置析晶，过滤，
参考文献：
[1] 郭永泰. 浅析头孢拉定的药理作用[J]. 海峡药学, 2004, 16(4): 120-121.
[2] 杨菁菁, 钟 秋, 戴 敏, 等. 国产头孢拉定临床药代动力 学及其胶囊剂的生物等效性[J]. 中国抗感染化疗杂志, 2002, 2(3): 133-135.
[3] 冯胜昔, 刘晓红, 杨 辉, 等. 头孢拉定的合成[J]. 中国抗生
定化青霉素酰化酶催化合成抗生素头孢拉定，收率90％。
关键词：头孢拉定；青霉素酰化酶；抗生素；酶法合成
中图分类号：R978.1+1
文献标识码：A
文章编号：1001-8255(2007)09-0619-02
Synthesis of Cephradine with the Immobilized Penicillin Acylase
Key Words: cephradine ; penicillin acylase; antibiotic; enzymatic synthesis
头孢拉定(cephadine，1)，化学名为(6R,7R)7-[(2R)-氨基-2-(1,4-环己二烯-1-基)乙酰胺基]-3甲基-8-氧代-5-硫杂-1-氮杂二环[4.2.0]辛-2-烯-2-羧 酸，是美国Squibb公司开发的头孢菌素类抗生素， 1977年首次在日本上市，临床用于治疗敏感菌引起 的支气管炎、支气管扩张感染、肺炎、肾盂肾炎、 膀胱炎和尿道炎等[1,2]。
氢苯甘氨酸的产生。pH 7.0、20℃反应效果好，收 率可达90％。本研究酶用量较大，但可回收套用。
YE Shu-xiang, XU Cheng-miao, WANG Jia-bing
(Zhejiang Anglikang Pharmaceutical Co., Ltd., Shengzhou 312400)
ABSTRACT: Cephadine was synthesized from 7-ADCA and DHME in the phosphate buffer (20℃, pH 7.0) with the immobilized penicillin acylase as a catalyst in a yield of 90％.
在本次论坛上，卡乐康专业的产品技术和服务为与会者带来了全新的一章。让更多的国内医药企业走近卡乐康，了解卡乐康。
万方数据
如今，随着全球医药市场的发展，中国医药市场所占比重逐步提升，卡乐康的全球发展战略随之调整：在中国市场引进国外 高端技术，产品从单一的薄膜包衣制品发展为全方位的辅料产品。近年来，推出了一系列缓控释产品和药用辅料系列产品。
2007年8月28日、30日，卡乐康中国公司缓控释事业部分别在上海和北京成功举办了第二届中国缓控释论坛。缓控释作为一 种国际新技术，能很好地顺应成品药的变更趋势，在速释、缓释及肠溶等固体制剂中都有运用，而且具有很强的技术开发现实 性。这些都为提高下游医药企业的产品品质提供保障，提升成品药的增值潜力。卡乐康除了拥有优秀的产品应用于各种先进的缓 控释技术，还针对缓控释领域骨架片技术，推出初始配方库，并在本次论坛中做了详细的介绍，为与会者呈现了全新的“渗透泵 技术于缓控释技术中的应用”，也带来了此项技术的全新、优质产品——Polyox(聚氧乙烯)。
素杂志, 2003, 28(7): 493. [4] 石家骥, 崔福绵. 青霉素G酰化酶在γ-氧化铝上的吸附交联
固定化[J]. 中国抗生素杂志, 2001, 26(5): 334-336. [5] 崔福绵, 石家骥, 白小东, 等. 酶法合成头孢环己二烯[J].
微生物学报, 1998, 38(4): ห้องสมุดไป่ตู้00-303. [6] Shaw S, Shyu J, Hsieh Y, et al. Enzymatic synthesis of
万方数据
· 620 ·
中国医药工业杂志 Chinese Journal of Pharmaceuticals 2007, 38(9)
图1 酶法合成1的工艺路线
滤饼依次用冷水和丙酮-水(1∶4，v / v)洗涤，4 5℃减压 (≤–85kPa)干燥2h，得1(17.8g，90％)，mp 190～192℃ (分解)[文献[8]：(192±3.4)℃]。纯度98.0％(HPLC外标 法)。IR、1HNMR、元素分析证实结构。
中国医药工业杂志 Chinese Journal of Pharmaceuticals 2007, 38(9)
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固定化青霉素酰化酶合成头孢拉定的工艺研究
叶树祥，徐成苗，王佳兵
(浙江昂利康制药有限公司，浙江嵊州 312400)
摘要：用7-氨基-3-脱乙酰氧基头孢霉烷酸和2,5-二氢苯甘氨酸甲酯盐酸盐在磷酸盐缓冲液体系中(20℃，pH 7.0)，利用固
1的合成可分为化学法和酶法。目前国内多用 化学法的混酐法生产工艺[3]。酶法合成1具有污染 小、操作简单和反应条件温和等优点[4-7]。本研究用 7-氨基-3-脱乙酰氧基头孢霉烷酸(7-ADCA)和2,5二氢苯甘氨酸甲酯盐酸盐(DHME)为原料，在磷酸 盐缓冲液中，经固定化青霉素酰化酶(PGA)催化合 成1(图1)，并考察了7-ADCA和DHME的浓度、固 定化酶的用量、pH及温度等影响因素，优化了工 艺：7-ADCA的浓度约为反应体系的10％；缓慢滴 加DHME，可有效降低其降解速度，控制副产物双
cephalothin by penicillin G acylase[J]. Enzyme Microb Technol, 2000, 26(2-4): 142-151. [7] Heemskerk D, Hogenboom AGM, Lenhardt CE, et al. Process for the preparation of cephradine: US, 2006189802 [P]. 2006-08-24. [8] 朱宝泉, 李安良, 杨光中, 等. 新编药物合成手册[M]. 北京: 化学工业出版社, 2003: 362.
ffffffffffffffffffffffffffffffffffffffff
从包衣开始—做卓越的药用辅料供应商
卡乐康缓控释论坛—一个传递先进缓控释技术产品和应用研究的盛会
始于1961年的卡乐康，总部设在美国费城，是一家全球化、技术领先的药用辅料供应商。服务制药行业四十多年来，卡乐康 始终以高品质药用辅料供应市场，成为制药产品原料和产品品牌提升服务的领先者。
实验部分
PGA(浙江东阳顺风海德尔公司)；7-A DCA(浙江新东海 医药化工有限公司)；DHME(自制)。其他试剂均为分析纯。
头孢拉定一水合物(1) 固定化青霉素酰化酶30g(湿品，干品约 10g)加至底部有砂芯过滤装置(孔径约100µm)、 机械搅拌和夹层保温装置的酶反应器中，加入 0.lmol/L磷酸盐缓冲液(pH 7.0，60ml)，20℃加入 7-ADCA(15g，70mmol)和亚硫酸氢钠(0.2g)，搅 拌下用8％氨水调至pH 7.0。 另一反应瓶中加入D H M E(15.7g，7 7m m o l)和水 (28m l)，搅拌至溶。20℃下9 0 m i n内，滴至如上酶反 应器中，其间用8％氨水维持pH 7.0。加毕同温、同pH 条件下搅拌5 h，H PL C跟踪反应(7-A D CA残留低于 2mg/ml)。冷却至0～5℃，用8％氨水调至pH 8.5，从反 应器底部滤出反应液，用水(15ml×2)冲洗酶反应器，合 并滤液和洗液，过滤，升温至50℃，用10℃的稀盐酸-水 (1∶2，v/v)调节至pH 5.0，冷却至5℃，静置析晶，过滤，
参考文献：
[1] 郭永泰. 浅析头孢拉定的药理作用[J]. 海峡药学, 2004, 16(4): 120-121.
[2] 杨菁菁, 钟 秋, 戴 敏, 等. 国产头孢拉定临床药代动力 学及其胶囊剂的生物等效性[J]. 中国抗感染化疗杂志, 2002, 2(3): 133-135.
[3] 冯胜昔, 刘晓红, 杨 辉, 等. 头孢拉定的合成[J]. 中国抗生
定化青霉素酰化酶催化合成抗生素头孢拉定，收率90％。
关键词：头孢拉定；青霉素酰化酶；抗生素；酶法合成
中图分类号：R978.1+1
文献标识码：A
文章编号：1001-8255(2007)09-0619-02
Synthesis of Cephradine with the Immobilized Penicillin Acylase
Key Words: cephradine ; penicillin acylase; antibiotic; enzymatic synthesis
头孢拉定(cephadine，1)，化学名为(6R,7R)7-[(2R)-氨基-2-(1,4-环己二烯-1-基)乙酰胺基]-3甲基-8-氧代-5-硫杂-1-氮杂二环[4.2.0]辛-2-烯-2-羧 酸，是美国Squibb公司开发的头孢菌素类抗生素， 1977年首次在日本上市，临床用于治疗敏感菌引起 的支气管炎、支气管扩张感染、肺炎、肾盂肾炎、 膀胱炎和尿道炎等[1,2]。