第6章药物的含量测定

例：利血平片含量
• 对照品溶液的制备：精密称取利血平对照品10 mg， 置100 mL 棕色量瓶中，加氯仿10 mL溶解后，再用 乙醇稀释至刻度，摇匀；精密量取2 mL ，置100 mL 棕色量瓶中，用乙醇稀释至刻度，摇匀，即得。 供试品溶液的制备：取本品（规格：0.25 mg）20片， 如为糖衣片应除去糖衣，精密称定，研细，精密称 取适量（约相当于利血平 0.5 mg），置100 mL 棕 色量瓶中，加热水10 mL，摇匀后，加氯仿10 mL， 振摇，用乙醇定量稀释至刻度，摇匀，滤过，精密 量取续滤液，用乙醇定量稀释成每1 mL 约含利血平 2μg的溶液，即得。
• 方法原理： 供试品加水溶解后，加稀盐酸， 用乙醚振摇提取，置105℃恒重的蒸发皿中， 低温蒸去乙醚，并在105℃干燥至恒重，精 密称定，所得残渣重量与1.087相乘，即苯 妥英钠（C15H11N2NaO2）的重量。
注射用苯妥英的含量测定
• 取供试品装量差异项下的内容物，混合均匀，精 密称取适量（约相当于苯妥英钠0.3 g），加水50 mL溶解后，加稀盐酸10 mL，摇匀，用乙醚振摇 提取5次，第一次100 mL，以后每次各25 mL，合 并乙醚液，用水洗涤2次，每次5 mL，合并洗液， 用乙醚10 mL振摇提取，合并前后两次得到的乙醚 液，置105℃恒重的蒸发皿中，低温蒸去乙醚，并 在105℃干燥至恒重，精密称定，所得残渣重量与 1.087相乘，即得供试量中含苯妥英钠 （C15H11N2NaO2）的重量。 • Wa: 试样的重量；Wb: 称量形式的重量。 Wb F 含量(%) Wa
第6章 药物含量测定方法
• 化学分析法 • 仪器分析法
药物含量测定方法 • 1 容量分析法 优点：精密度好、操作简 便快速、结果准确 缺点：专属性差 原料药含量测定首选方法
• 化 学 分 析 法
药物含量测定方法
2 重量分析法 优点：精密度好、快速、结果 准确 缺点：专属性差、样品量大、 操作较繁、需时较长 仅在不能应用容量分析法进行 原料药含量测定时再考虑。
•
1．直接分光光度法：
对照品法 例：呋喃唑酮（痢特灵）含量测定 供试品溶液与对照品溶液同时测定 Ax Cx D 100 % Cx C R 含量(%) W AR
Ax、AR —供试品、对照品溶液的吸光度 Cx 、CR—供试品、对照品溶液的浓度 D —供试品溶液的体积 W —供试品的取样量
(V 0 V s ) B FB TA 含量(%) 100 % W
含量(%) (V 0 V s ) Na 2 S 2O 3 W C Na 2 S 2O 3 TA 0.1 100 %
§2.4 药物含量测定方法
• 仪 器 分 析 法 1 光谱分析法 2 色谱分析法 3 电化学分析法 4 热分析法
cx R xຫໍສະໝຸດ Baidu R xb CR Rr Rrb
Cx、CR--- 供试品、对照品溶液的浓度 Rx、Rr---供试品、对照品溶液的荧光强度 Rxb、Rrb---供试品、对照品空白溶液的荧光强度
荧光强度线性范围较窄，在0.5~2之间，若超过，应调 节试液浓度再测，当浓度与荧光强度明显偏离线性时， 应改用标准曲线法。
4．钯离子比色法 原理：吩噻嗪类药物的二价硫在pH = 2±0.1 缓冲液中可与钯离子(Pd2+)形成红色络合物， 借以进行比色测定。10 min呈色完全，可稳 定2 h，lmax = 500 nm，最适宜范围50μg~ 250μg。 USP对奋乃静糖浆、注射液及片剂含量测定。
2 荧光光谱法
选定被测物质的激发光波长和发射光波长，并 制备对照品和供试液，在线性范围内测定：
cx
Ax x
1% E1 cm 100
例：盐酸普纳洛尔注射液的含量
• 精密量取本品（规格：5 mL:5 mg）2 mL，用 甲醇稀释至每1 mL 中约含盐酸普纳洛尔20 mg， 摇匀，照分光光度法，在290 nm 的波长处测 定吸收度，按C16H21NO2.HCl 的吸收系数 （Ｅ 1%）为207 计算，即得。 1cm
V T 含量(%) 100 % W
例：注射用异烟肼含量测定
N
O C N H 异烟肼 Isoniazid NH2
• 取装量差异项下的内容物，混合均匀，精密 称取本品约0.2 g，置100 mL量瓶中，加水使 溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取25 mL， 加水50 mL、盐酸20 mL与甲基橙指示液1滴， 用溴酸钾滴定液（0.01667 mol/L）缓缓滴定 （温度保持在18℃～25℃）至粉红色消失。 每1 mL的溴酸钾滴定液（0.01667 mol/L）相 当于3.429 mg的异烟肼（C6H7N3O）。
•
3 滴定度的定义和计算：
若滴定液浓度为CA (mol· L-1)，则 T = nb×MB = b/a×CA×MB MB—被测物质的摩尔质量。 T—滴定度，单位常用mg/mL。
含量的计算
直接滴定法：
V T F 含量(%) 100 % W F—滴定液浓度校正因子
实际摩尔浓度 F 规定摩尔浓度
§2.4 药物含量测定方法
• 光 谱 分 析 法
1 紫外-可见分光光度法 2 原子吸收分光光度法 3 荧光光谱法
§2.4 药物含量测定方法
• 紫外-可见分光光度法是各国药典常用的定 量分析方法。 中国药典对其所收载的药物采用吸收系数 光 法、对照品法以及计算分光光度法求算含 谱 量。 分 优点：灵敏度高、操作简便、样品用量少 析 缺点：准确度不如重量法、容量法、专属 法 性差 主要用于含量低制剂的含量测定
呋喃唑酮含量测定
• 避光操作。取本品约20 mg，精密称定，置 250 mL量瓶中，加二甲基甲酰胺40 mL， 振摇使溶解，用水稀释至刻度，摇匀，精 密量取10 mL，置100 mL量瓶中，用水稀 释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。照紫 外-可见分光光度法（附录Ⅳ A），在367 nm的波长处测定吸光度；另取呋喃唑酮对 照品适量，精密称定，同法测定，计算， 即得。
Ax D V x 标示量（%） 100 % 3 207 100 V B 10
V---注射液的标示体积：5 mL D---稀释液的体积 V---供试液的取样量体积：2 mL B---注射液的标示量：5 mg
__
例：盐酸氯丙嗪注射液的测定法
注射液处方中有维生素C作抗氧剂, 在l = 254 nm处有干扰, 所以测定 l 在306 nm (次最大吸收波长)，该波长VC无干扰。
标示量百分数
• 药物制剂的含量通常以标示量百分数表示，记为 “标示量（%）”，即单位制剂中药物的实际含 量与生产时处方量的比值，计算公式：
标示量（%） cx D W 100 % W B
___
W、W和B分别为样品重、单位制剂的平均重量 和制剂的标示量。
• 取本品10片，精密称定，研细，精密称出适量（约 相当于呋喃唑酮20 mg），置250 mL量瓶中，加二 甲替甲酰胺40 mL，溶解后，加水稀释至刻度，摇匀， 滤过。弃去初滤液，精密量取续滤液10 mL，置100 mL量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。照分光光度法， 在367±1nm的波长处测定吸收度。另取呋喃唑酮对 照品约20 mg，精密称定，置250 mL量瓶中，加二 甲替甲酰胺40 mL，溶解后，加水稀释至刻度，摇匀， 作为对照液，同法测定，计算，即得。
2．萃取后分光光度法 碱化，有机溶剂萃取游离型碱，使其与制剂辅 料分离，再用分光光度法测定 可避免注射剂中抗氧剂等附加剂的干扰 例:盐酸异丙嗪注射剂的USP含量测定法: 碱化 有机溶剂(乙醚)提取 除水溶性杂 质和酸性有机杂质 酸化 盐酸液反提取 除中性有机杂质
3．萃取－双波长分光光度法 碱化，有机溶剂萃取，在254 nm、277 nm波长 处测定吸收，用吸收度之差计算含量，以消除抗 氧剂干扰。氯丙嗪的最大吸收波长为254 nm， 其氧化产物在此波长也有吸收，同时在277 nm 处氧化产物也有吸收，且其吸收度与在254 nm 处吸收度相等，而氯丙嗪在277 nm处无吸收。 • A = A254-A277
V T F 含量(%) 100 % W C KBrO 3 VKBrO 3 3.429 0 . 01667 含量(%) 100 % W
含量的计算
返滴定法（剩余滴定法或回滴法）：
(V 0 V s ) B FB TA 含量(%) 100 % W
FB—滴定液B浓度校正因子 TA—滴定液A的滴定度 W —供试品的取样量
• 化 学 分 析 法
• 重量分析法：以质量为测量值的分析方法。将被测组 分与其他分离，称重计算含量。精确到0.1-0.2 %。 对低含量组分测定误差较大，尽量避免用。水分测定， 药品中水中不溶物、炽灼残渣、灰分仍用。 1、挥发法：利用被测组分具有挥发性或将其转化为 挥发性物质，称取挥发前后挥发性物质算含量。 a、 直接挥发法：测吸收剂增加的量 b、 间接挥发法：测样品所减少的量 2、萃取法：(提取重量法)用互不相容的溶剂萃取后称 重，适用于有机药物的测定。 3、沉淀法：将被测组分以沉淀形式分离出来，转化 为称量形式，计算被测组分的含量的方法。
___ Ax CR D W A 标示量（%） R 100 % W B
例：呋喃唑酮片含量测定如下，计 算其 标示量（%）
例：盐酸氯丙嗪片的测定方法
吸收系数法 优点：不需标准品； 缺点：仪器精密度要求高 盐酸异丙嗪比吸收系数为915，测定l = 254 nm 操作：取10片，除去糖衣后，精称，研细→称取粉末 适量→加水、盐酸溶解→过滤，取滤液于254 nm处测 定。即可计算。
化 学 分 析 法
§2.4 药物含量测定方法
• 3 滴定度的定义和计算： 滴定度是指每毫升滴定液所相当的被测成 分的量（mg），以T表示，单位常用 mg/mL。对于滴定反应： aA + bB ＝ cC + dD 在滴定中，A与B物质之间存在化学计量关 系（摩尔比）为nA: nB= a: b，即 nB = b/a×nA，
O
例：注射用异烟肼含量测定
N
C N H 异烟肼 Isoniazid
NH2
反应式：3C6H7N3O + 2KBrO3 → 3C6H5NO2 + 3N2 + 3H2O
3 T C KBrO 3 M C6H7N3O 2
3 T 0.01667 137 .14 3.429 (mg / mL) 2
例：盐酸去氧肾上腺素含量测定
• 取本品约0.1 g，精密称定，置碘瓶中，加水 20 mL使溶解，精密加溴滴定液(0.05 mol/L) 50 mL，再加盐酸5 mL,立即密塞，放置15分 钟并时时振摇，注意微开瓶塞，加碘化钾试液 10 mL ，立即密塞，振摇后，用硫代硫酸钠滴 定液(0.1 mol/L)滴定，至近终点时，加淀粉指 示液，继续滴定至蓝色消失，并将滴定的结果 用空白试验校正。每1 mL溴滴定液(0.05 mol/L)相当于3.395 mg 的C9H13NO2.HCl。
换算因素F
• 换算因素是指被测组分的摩尔质量与称量 形式的摩尔质量之比
aMa F b Mb
a、 b —使待测组分与称量形式中含有的待测 元素原子数或分子数相当的最小公倍数； Ma—供测品中带测组分的摩尔质量， g/mol; Mb—待测组分称量形式的摩尔质量， g/mol。
注射用苯妥英的含量测定
例：盐酸去氧肾上腺素含量测定
HCl
反应式：
HO OH
C9H13NO2 + 3Br2 → C9H10Br3NO2 + 3HBr Br2 + 2KI → 2KBr + I2 I2 + 2Na2S2O3 → 2NaI +Na2S4O6
N H
TBr 2
1 0.05 203 .67 3.395 (mg / mL) 3
例：利血平片含量
• 测定法：精密量取供试品溶液与对照品溶液各5 mL， 分别置具塞试管中，加五氧化二钒试液2.0 mL，激烈 振摇后，在30℃放置1 小时后，取出，于室温时，照 荧光分析法（附录Ⅳ E），在激发光波长400 nm ， 发射光波长500 nm 处测定荧光读数，计算，即得。