叶绿体色素的提取与分离实验
生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》实验报告
生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》实验报告实验目的：1. 学习叶绿体中色素的提取和分离的方法；2. 观察叶绿体中不同色素的吸收光谱。
实验原理：叶绿体是植物细胞中的特殊细胞器，其中含有多种色素，包括叶绿素 a、叶绿素 b、类胡萝卜素等。
这些色素能够吸收不同波长的光线，并转化为化学能以参与光合作用。
本实验利用溶剂提取和色谱柱分离的方法，将叶绿体中的色素提取出来，并通过紫外-可见光分光光度计测定不同色素的吸收光谱。
实验步骤：1. 取一片鲜叶（最好选择深绿色的叶片）切碎，加入适量的乙醇或醋酸乙酯中浸泡，使叶绿体释放出色素。
注意保持容器密封以避免光照。
2. 将浸泡片刻半小时，使叶绿体彻底释放色素。
3. 将叶绿体悬液过滤，收集含有色素的过滤液。
4. 取一支色谱柱，填充色谱吸附剂（如硅胶），再用无色溶剂（如正己烷）预洗一次。
5. 将收集到的含色素液体加入色谱柱中，用无色溶剂洗脱，收集不同色素的洗脱液。
6. 用紫外-可见光分光光度计测定不同色素的吸收光谱。
实验结果：根据实验数据得到不同色素的吸收光谱曲线，可观察到叶绿素 a 在400-500 nm波长范围内有最大吸收峰，叶绿素 b 在450-550 nm波长范围内有最大吸收峰，类胡萝卜素在500-600 nm波长范围内有最大吸收峰。
根据吸收光谱的不同，可以推测各色素在光合作用中的吸收波长和参与的反应。
实验结论：通过该实验，我们成功地提取和分离了叶绿体中的色素，并观察到不同色素的吸收光谱。
这些实验结果可以帮助我们深入了解植物光合作用的机制，以及不同色素在光合作用中的作用。
同时，该实验也展示了提取和分离生物样品中化学物质的基本实验技巧和原理。
叶绿素的提纯实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 了解叶绿素的结构和性质。
2. 掌握叶绿素的提取和提纯方法。
3. 学习利用有机溶剂提取叶绿素，并通过色谱法进行分离和纯化。
二、实验原理叶绿素是绿色植物中进行光合作用的重要色素，主要由叶绿素a和叶绿素b组成。
叶绿素不溶于水，但可溶于有机溶剂，如乙醇、丙酮等。
通过提取和提纯，可以得到高纯度的叶绿素，为进一步研究其性质和作用提供条件。
实验过程中，首先将植物叶片用有机溶剂提取叶绿素，然后通过层析法分离叶绿素和其他色素，最后收集纯化的叶绿素。
三、实验器材1. 新鲜植物叶片（如菠菜、青菜等）2. 研钵、研杵3. 乙醇、丙酮（分析纯）4. 层析柱、层析板5. 滤纸、脱脂棉6. 移液管、滴管7. 恒温水浴锅8. 显微镜9. 紫外-可见分光光度计四、实验步骤1. 提取叶绿素（1）取新鲜植物叶片，用剪刀剪碎，放入研钵中。
（2）加入适量乙醇和丙酮（体积比1:1），研磨至匀浆。
（3）将匀浆倒入分液漏斗，静置分层。
（4）收集有机层，用无水硫酸钠干燥。
（5）过滤，得到叶绿素提取液。
2. 分离叶绿素（1）将层析板放入层析柱中，在底部铺一层脱脂棉。
（2）取适量叶绿素提取液，用移液管滴加于层析板上，确保液面低于层析板边缘。
（3）选择合适的溶剂系统，如正己烷-乙酸乙酯（体积比4:1）。
（4）将溶剂滴加于层析板上，观察层析过程，直至溶剂前沿到达预定位置。
（5）取出层析板，用铅笔标记层析结果。
3. 收集纯化叶绿素（1）用移液管收集叶绿素层，倒入小烧杯中。
（2）加入少量乙醇，搅拌均匀。
（3）用滤纸过滤，收集滤液。
（4）将滤液倒入蒸发皿中，用恒温水浴锅蒸干。
（5）用少量乙醇溶解残留物，得到纯化叶绿素。
五、实验结果与分析1. 叶绿素提取：通过有机溶剂提取，可以得到绿色叶片提取物，表明叶绿素已从植物叶片中提取出来。
2. 叶绿素分离：通过层析法，可以将叶绿素与其他色素分离，证明叶绿素具有独特的性质。
3. 叶绿素纯化：通过蒸发和溶解，可以得到纯化的叶绿素，说明实验过程中叶绿素得到了有效的纯化。
生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》(细选二篇)
生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》(细选二篇)生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》1一、实验目的1.学会提取和分离叶绿体中色素的方法。
2.比较、观察叶绿体中四种色素：理解它们的特点及与光合作用的关系二、实验原理光合色素主要存在于高等植物叶绿体的基粒片层上，而叶绿体中的色素能溶于有机溶剂中。
故要提取色素，要破坏细胞结构，破坏叶绿体膜，使基粒片层结构直接与有机溶剂接触，使色素溶解在有机溶剂中。
叶绿体中的色素有四种，不同色素在层析液(脂溶性强的有机溶剂)中的溶解度不同，因而随层析液的扩散速度也不同。
三、材料用具取新鲜的绿色叶片、定性滤纸、烧杯、研钵、漏斗、纱布、剪刀、小试管、培养皿、毛细吸管、量筒、有机溶剂、层析液(20份石油醚、2份丙酮、1份苯混合)、二氧化硅、碳酸钙。
四、实验过程（见书Ｐ54）1.提取色素：2.制备滤纸条：3.色素分离，纸层析法。
（不要让滤液细线触及层析液）4.观察：层析后，取出滤纸，在通风处吹干。
观察滤纸条上出现色素带的数目、颜色、位置和宽窄。
结果是：4条色素带从上而下依次是：胡萝卜素(橙黄色)、叶黄素(黄色)、叶绿素a(蓝绿色)、叶绿素b(黄绿色)。
五、讨论1.滤纸条上的滤液细线为什么不能接触到层析液？2．提取和分离叶绿体中色素的关键是什么？生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》2一、实验目的1. 学会提取和分离叶绿体中色素的方法。
2. 比较、观察叶绿体中四种色素：理解它们的'特点及与光合作用的关系二、实验原理光合色素主要存在于高等植物叶绿体的基粒片层上，而叶绿体中的色素能溶于有机溶剂中。
故要提取色素，要破坏细胞结构，破坏叶绿体膜，使基粒片层结构直接与有机溶剂接触，使色素溶解在有机溶剂中。
叶绿体中的色素有四种，不同色素在层析液(脂溶性强的有机溶剂)中的溶解度不同，因而随层析液的扩散速度也不同。
三、材料用具取新鲜的绿色叶片、定性滤纸、烧杯、研钵、漏斗、纱布、剪刀、小试管、培养皿、毛细吸管、量筒、有机溶剂、层析液(20份石油醚、2份丙酮、1份苯混合)、二氧化硅、碳酸钙。
以下关于色素的提取与分离实验的叙述中，正确的是（ ）
以下关于色素的提取与分离实验的叙述中，正确的是（）
A. 提取色素时未加碳酸钙将会使蓝绿色的色素带变窄，橙黄色的色素带基本没变化
B. 由于绿叶中的色素能溶解在无水乙醇中，所以可用无水乙醇分离色素得到四条色素带
C. 溶解度最大的色素带距离滤液细线最近
D. 滤纸条上最宽的色素带是叶绿素b
答案：
A
分析：
【分析】叶绿体色素的提取和分离实验：
1、提取色素原理：色素能溶解在酒精或丙酮等有机溶剂中，所以可用无水酒精等提取色素．
2、分离色素原理：各色素随层析液在滤纸上扩散速度不同，从而分离色素．溶解度大，扩散速度快；溶解度小，扩散速度慢．
3、各物质作用：无水乙醇或丙酮：提取色素；层析液：分离色素；二氧化硅：使研磨得充分；碳酸钙：防止研磨中色素被破坏．
4、结果：滤纸条从上到下依次是：胡萝卜素（最窄）、叶黄素、叶绿素a （最宽）、叶绿素b（第2宽），色素带的宽窄与色素含量相关．评价：
【解答】解：A、加入碳酸钙是为了防止叶绿素被破坏，对胡萝卜影响不大，会使蓝绿色的色素带变窄，橙黄色的色素带基本没变化，A正确；
B、无水乙醇是用于提取色素，B错误；
C、溶解度最大的色素扩散快，距离滤液细线最远，C错误；
D、滤纸条上最宽的色素带式含量最多的色素，是叶绿素a，D错误．故选：A．。
实验三 叶绿体中色素的提取和分离
叶绿体中色素的提取和分离方案一【实验原理】（1）叶绿体中的色素能够溶解在有机溶剂丙酮中，所以，可以通过研磨法用丙酮提取叶绿体中的色素(若无丙酮亦可用酒精代替)。
（2）纸层析法：层析液（在60℃～90℃下分馏出来20份石油醚+ 2份丙酮+ 1份苯混合而成）是一种脂溶性很强的有机溶剂。
叶绿体中的色素在层析液中的溶解度不同(溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快；溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢。
)这样，几分钟之后，叶绿体中的色素就在扩散过程中分解开来。
所以，可以用纸层析法分离出叶绿体中的色素。
【实验器材】新鲜的绿色菠菜叶片，干燥的定性滤纸，烧杯，研钵，小玻璃漏斗，脱脂棉，载玻片，剪刀，小试管，培养皿盖，药勺，量筒，天平。
丙酮，层析液，二氧化硅，碳酸钙。
【实验过程】（一）提取绿色叶片中的色素：1、用天平称取5g绿色的叶片，用剪刀剪碎，放入研钵中；2、向研钵中放入少许二氧化硅和碳酸钙，再加入5ml丙酮。
由于丙酮具有一定的毒性并且很容易挥发。
为了尽量少的吸入丙酮，可以将一片滤纸盖在研钵上，纸的中心穿一个洞，将杵棒套入洞口进行研磨。
※为什么要加入少许少许二氧化硅和碳酸钙？加入二氧化硅是为了研磨的更充分；加入少许碳酸钙是为了保护叶绿体中的色素，为是由于碳酸钙可以中和液泡破裂后释放出的有机酸，调节液体的PH，防止或避免色素被破坏。
※为什么要加入丙酮？丙酮是有机溶剂可以使色素溶解其中，作为色素的溶剂。
3、将研磨液迅速倒入小玻璃漏斗中进行过滤（漏斗基部放一小团脱脂棉）。
将滤液收集到一个小试管中，及时用塞将试管口塞紧。
（以防止滤液中的丙酮挥发）※是否可以用滤纸来代替脱脂棉？不可以，滤纸对光合色素具有较强的吸附能力，使滤液的色素分子减少。
（二）制备滤纸条：取一块预先干燥处理过的定性滤纸，将滤纸剪成长6cm、宽1cm的滤纸条，将滤纸条的一端剪去两角，并在距这一端1cm处用铅笔画一条细的横线。
※在剪裁定性滤纸时，尽量注意双手不要接触纸面，以免手上的油脂或其他脏物污染滤纸，影响色素在纸条上的扩散。
绿叶素的提取实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 学习从植物叶片中提取叶绿素的方法。
2. 了解叶绿素的性质和功能。
3. 掌握层析技术的基本原理和操作方法。
4. 通过实验，加深对绿色植物光合作用的理解。
二、实验原理叶绿素是绿色植物进行光合作用的重要色素，主要存在于植物的叶绿体中。
叶绿素分子由卟啉环和长链脂质组成，具有亲水和亲脂性。
在提取过程中，利用有机溶剂（如丙酮、乙醇等）可以将叶绿素从植物组织中溶解出来。
层析技术是分离混合物中各组分的一种常用方法，通过不同物质在固定相和流动相之间的分配系数差异，实现分离。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：新鲜绿色植物叶片、无水乙醇、丙酮、层析纸、层析缸、滤纸、镊子、剪刀、研钵、研杵、移液管、滴管、天平等。
2. 实验仪器：分析天平、紫外-可见分光光度计、显微镜等。
四、实验步骤1. 准备植物样品：取新鲜绿色植物叶片，洗净、晾干，用剪刀剪成小碎片。
2. 提取叶绿素：将剪碎的叶片放入研钵中，加入适量无水乙醇，用研杵充分研磨，使叶片充分溶解。
3. 过滤：将研磨后的溶液用滤纸过滤，收集滤液。
4. 蒸发溶剂：将滤液倒入蒸发皿中，在通风橱内蒸发溶剂，直至出现固体。
5. 层析分离：将得到的固体溶解于少量丙酮中，用移液管吸取少量溶液滴在层析纸上，待溶剂挥发后，将层析纸放入层析缸中，加入适量丙酮作为流动相，观察层析过程。
6. 观察与记录：观察层析纸上色素带的分布情况，记录色素带的颜色、位置和宽度。
五、实验结果与分析1. 叶绿素提取：通过研磨和过滤，成功从植物叶片中提取出叶绿素。
2. 层析分离：在层析纸上观察到三条明显的色素带，从上到下依次为胡萝卜素、叶黄素和叶绿素。
3. 叶绿素性质：叶绿素具有绿色，在紫外-可见光范围内有特定的吸收光谱，可被分光光度计检测。
4. 光合作用：叶绿素是光合作用的主要色素，参与光能的吸收和转换。
六、实验讨论1. 叶绿素的提取：在提取过程中，有机溶剂的选择和用量对叶绿素的提取效果有较大影响。
植物生理学实验报告叶绿体色素的提取分离理化性质和叶绿素含量的测定
植物生理学实验报告叶绿体色素的提取分离理化性质和叶绿素含量的测定引言：叶绿体是植物细胞中的一个重要细胞器，其中主要存在着叶绿素等色素，它们在光合作用中起着重要的作用。
研究叶绿体色素的提取、分离、理化性质和叶绿素含量的测定，对于了解光合作用的机理以及研究植物生理生化过程具有重要意义。
本实验旨在通过实验手段提取叶绿体色素，进行色素的分离、理化性质的研究和叶绿素含量的测定。
材料与方法：材料：菠菜叶片、研钵、磨杵、丙酮、乙醇、石油醚、叶绿素提取液、测色皿、高锰酸钾溶液、浓硫酸。
方法：1.取适量菠菜叶片放入研钵中，加入适量丙酮，用磨杵捣碎成糊状。
2.将捣碎的菠菜糊状物转移到玻璃漏斗中，用石油醚冲洗3次，使叶绿体附着物进一步析出。
3.将漏斗中的上清液收集，并加入适量乙醇，振摇混合，使叶绿素慢慢析出。
4.将释放出的叶绿体颗粒通过离心机离心沉淀10分钟，收集沉淀。
5.取收集到的叶绿体沉淀，加入适量叶绿素提取液，用乳钙酸钠解离剂进行叶绿素含量的测定。
6.将其中一部分叶绿体溶液加入高锰酸钾溶液，观察颜色变化。
7.将其余叶绿体溶液与浓硫酸混合，观察颜色变化。
结果与讨论：通过上述方法，我们成功地提取并分离出菠菜叶片中的叶绿体色素。
加入石油醚可以去除一部分杂质，使叶绿体进一步纯化。
加入乙醇可以使叶绿素从叶绿体中溶出。
通过离心沉淀，我们收集到了叶绿体的沉淀物。
叶绿体的提取液与高锰酸钾溶液反应后呈现蓝色或紫色，这是由于高锰酸钾通过氧化反应将一些具有现菌酮结构的物质氧化为合成叶绿素的前体物质所引起的。
这种反应也证实了叶绿体的存在。
叶绿体溶液与浓硫酸混合后呈现蓝绿色，这是由于浓硫酸通过剥离叶绿体周围的蛋白质和其他有机物质，将叶绿素分子释放出来，产生颜色变化。
叶绿素的含量测定是通过与乳钙酸钠解离剂反应来进行的。
乳钙酸钠解离剂能够与叶绿体中的叶绿素结合，并形成稳定的叶绿素-乳钙酸钠络合物。
这种络合物通过光密度的测定，可以根据比色法来测量叶绿素的含量。
叶绿素的提取、分离和测定
Ca=12.7OD663-2.69OD645 Cb=22.9OD645-4.68OD663 Ct=Ca+Cb=20.2D645+8.02D663
解方程式得
(二）步骤
称取0.5g叶片，剪碎后置于玻璃匀浆器中加纯丙酮5mL，研成匀浆，用80%丙酮10mL洗匀浆器，用80%丙酮定容到25mL，避光静置5min。用移液管吸取上面的绿色清液1mL置于一大试管中，加入丙酮4ml稀释，摇动试管，作测定用。
测量光密度值 取上述提取液以80%丙酮作为空白对照，于663及645nm下读取光密度值
计算结果代入公式求出各来自绿素的含量（单位mg/L）最后计算时需考虑稀释因子
叶绿素a含量（mg/g鲜重）=CA*5 *25*2/1000 =0.25CA
叶绿素b的含量（mg/g鲜重）=0.25CB
研钵、吸管、小烧杯、试管、培养皿等
01
95%酒精、石油醚
02
碳酸钙
03
（二）仪器和药品
（三）步骤
用天平称取15g鲜叶，剪碎放入研钵中，加少量的CaCO3粉末及95%酒精5-10mL研成糊状，再加95%酒精20mL，充分混匀以提取叶片匀浆中的色素，5-10分钟后，过滤入三角烧瓶中加塞待用。
取一张色层分析纸或定性滤纸代用，剪成圆形，直径应略大于培养皿的直径；将圆形滤纸平放在培养皿上，用滴管吸取叶绿素提取液，滴在滤纸的中心位置，稍干后，再重复操作几次；然后取另一滴管吸取石油醚，慢慢地推动叶绿素提取液，不久即可看到分离的各种色素的同心圆环,由内到外依次为：叶绿素a为蓝绿色、叶绿素b为黄绿色、叶黄素呈鲜黄色、胡萝卜素为橙黄色。
叶绿素a、b在长波方面的最大吸收峰分别为为663nm和645nm。
叶绿体色素的提取与分离实验
3、用纸层析法将色素进行分离，在滤纸条上出现最宽旳一 条色素带旳颜色是（ ） A、橙黄色 B、黄色 C、蓝绿色 D、黄绿色
类胡萝卜素 50
叶绿素b 叶绿素a
0
波长
二、捕获光能旳色素和构造
（一）捕获光能旳色素
色素
叶绿素a （蓝绿色）
叶绿素 叶绿素b
（黄绿色） 含量约占3/4
类胡萝卜素
叶黄素 （黄色） 胡萝卜素 （橙黄色）
含量约占1/4
吸收可见 旳太阳光
类胡萝卜素主 要吸收蓝紫光
叶绿素主要吸收 红光和蓝紫光
课堂检测
1、在叶绿体色素旳提取和分离试验中在滤纸条上扩散速度 最快旳色素是（ ） A、叶绿素a B、叶绿素b C、胡萝卜素 D、叶黄素
分别在A、B、C三个研钵中加入2克菠菜，经研磨、提取得到三种颜色旳溶液： 深绿色、黄绿色（或褐色）、几乎无色。注：“+”表达加，“—”表达不加。
处理
二氧化硅（少许） 碳酸钙（少许）
95%乙醇（10ml） 蒸馏水（10ml）
ABC +++ —+ + + —+ —+ —
（1）A处理得到旳溶液颜色是 黄绿色 ，原因是__叶__绿__素_被__破__坏__________
（6）色素分离旳成果：相邻色素带间距最宽旳是 他们旳颜色是 橙黄色 和 黄色 ，主要吸收 蓝紫
胡萝卜素 和 叶黄素 ， 光。
（ D）
A、安装红色透光薄膜 B、安装蓝紫色透光薄膜
绿叶色素的分离实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 学习绿叶中色素的提取和分离方法。
2. 掌握层析法分离不同色素的原理和操作。
3. 了解不同色素在叶绿体中的分布和特点。
二、实验原理绿叶中的色素主要包括叶绿素、类胡萝卜素和叶黄素等。
这些色素在有机溶剂中具有良好的溶解度，因此可以通过有机溶剂提取绿叶中的色素。
在层析过程中，不同色素在层析液中的溶解度不同，从而在滤纸上形成不同的色素带。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：新鲜的绿色叶片、无水乙醇、层析液（20份石油醚、2份丙酮、1份苯混合）、二氧化硅、碳酸钙、定性滤纸、研钵、烧杯、漏斗、纱布、剪刀、小试管、培养皿、毛细吸管、量筒等。
2. 实验仪器：分析天平、酒精灯、烘箱、显微镜、电子天平等。
四、实验步骤1. 提取绿叶中的色素：（1）取新鲜的绿色叶片，用剪刀剪成小块，放入研钵中。
（2）加入适量的二氧化硅和碳酸钙，充分研磨。
（3）向研钵中加入10ml无水乙醇，继续研磨，使色素充分溶解。
（4）将研磨好的混合物过滤，收集滤液。
2. 制备滤纸条：（1）取一张定性滤纸，剪去两角，使滤纸条呈三角形。
（2）将滤纸条放入烧杯中，加入少量层析液，使滤纸条充分湿润。
（3）将滤纸条取出，在通风处吹干。
3. 画滤液细线：（1）用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔线均匀画一条细而直的滤液线。
（2）待滤液线干燥后，重复画2-3次，以增加色素量。
4. 色素分离：（1）将干燥后的滤纸条画线一端朝下放入有少许层析液的层析瓶中。
（2）盖上培养皿，使层析瓶密封。
（3）待层析液上升到滤纸条上端后，取下培养皿，观察色素分离情况。
5. 观察与记录实验结果：（1）观察滤纸条上出现的色素带数目、颜色、位置和宽窄。
（2）记录实验结果，分析不同色素的分布和特点。
五、实验结果与分析1. 滤纸条上出现的色素带从上至下依次为：胡萝卜素（橙黄色）、叶黄素（黄色）、叶绿素a（蓝绿色）、叶绿素b（黄绿色）。
2. 胡萝卜素和叶黄素主要吸收蓝紫光，叶绿素a和叶绿素b主要吸收蓝紫光和红光。
叶绿体中色素的提取与分离实验
2.在研磨时要加少许二氧化硅，目的是为了研 磨充分，有利于色素的提取；加少许碳酸钙 的目的是为了防止研磨过程中，叶绿体中的 色素受到破坏。
3.分离色素时，一定不要让滤纸条上的滤液细 线接触到层析液，这是因为色素易溶解在层 析液中，导致色素带不清晰，影响实验效果。
B．滤纸条上滤液细线会变粗而使色素太分散
C．色素会溶解在层析液中而使结果不明显
D．滤纸条上几种色素会混合起来
5．某人做叶绿体中色素分离实验时，使用的 是圆形滤纸，装置如下图。实验结束时在圆形 滤纸上形成四个同心色素圆环，则最内圈所呈 颜色为 （D）
6．叶绿体中色素经层析后，出现在滤 纸上扩散最宽的色素带是（A）,最窄的 色素带是 （C） , 最整齐的色素带是
（C）
A．叶绿素a C．胡萝卜素
B．叶绿素b D．叶黄素
7．叶绿体的色素能在滤纸条上彼此分 离开的原因是 （C）
A．色素提取液中的不同色素已分层 B．阳光的照射使不同的色素彼此分 开
C．滤纸对各种色素的吸附力不同 D．丙酮酸使色素溶解并彼此分离的 扩散速度不同
小结：在叶绿体色素的提取和分离实验中：
【实 验】
叶绿体中色素的提取和 分离
一、实验原理
1.叶绿体中的色素能溶解在丙酮（有机溶剂: 酒精、汽油、苯、石油醚等）中，所以用 丙酮可提取叶绿体中色素。
2.色素在层析液中溶解度不同，溶解度高的 色素分子随层析液在滤纸条上的扩散得快， 溶解度低的色素分子随层析液在滤纸条上 的扩散得慢，因而可用层析液将不同的色 素分离。
五、实验讨论： 1．滤纸条上有几条不同颜色的色带？其排 序怎样？宽窄如何？这一说明了什么？
叶绿体中色素的提取与分离实验
（3）对滤纸剪去两角的目的是使层析液同时到达滤液细线。
（4）所画滤液细线越细越齐越好，这样可避免 色素带部分重叠 以取得较好的分离效果。
（5）层析装置加盖的目的是避免层析液挥发影响效果并引起中 毒。
（6）滤纸条上色素带最宽的颜色是蓝绿色，相邻色素带间距离 最近的是叶绿素a与叶绿素b。
A．水
B．丙酮
C．酒精
D．CCl4
3．做色素提取和分离实验的正确装置是 图中（D）
4．在进行叶绿素提取和分离实验时，不能让 层析液没及滤液细线的原因是（C）
A．滤纸条上几种色素会扩散不均匀而影响实 验结果
B．滤纸条上滤液细线会变粗而使色素太分散
C．色素会溶解在层析液中而使结果不明显
D．滤纸条上几种色素会混合起来
【实 验】
叶绿体中色素的提取 和分离
化隆四中
马海龙
一、实验原理
1.叶绿体中的色素能溶解在丙酮（有机溶剂: 酒精、汽油、苯、石油醚等）中，所以用 丙酮可提取叶绿体中色素。
2.色素在层析液中溶解度不同，溶解度高的 色素分子随层析液在滤纸条上的扩散得快， 溶解度低的色素分子随层析液在滤纸条上 的扩散得慢，因而可用层析液将不同的色 素分离。
3.层析时不要让滤液细线触及层析液。
四、注意事项
1.因丙酮和层析液都是易挥发且有一定毒性的 有机溶剂，所以研磨要快，收集的滤液要用 棉塞塞住，层析时要加盖，尽量减少有机溶 剂的挥发。
2.在研磨时要加少许二氧化硅，目的是为了研 磨充分，有利于色素的提取；加少许碳酸钙 的目的是为了防止研磨过程中，叶绿体中的 色素受到破坏。
实验步骤
1. 提取叶绿素
研磨法 材料剪碎
叶绿素的提取和分离实验报告
叶绿素的提取和分离实验报告一、实验目的1、掌握叶绿素提取和分离的原理和方法。
2、了解叶绿体中色素的种类和含量。
二、实验原理1、提取原理叶绿素是一种脂溶性色素，能够溶解在有机溶剂中，如无水乙醇、丙酮等。
在研磨叶片时，细胞被破碎，叶绿素能够从叶绿体中释放出来，溶解在有机溶剂中，从而实现提取。
2、分离原理叶绿体中的色素在层析液中的溶解度不同，溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快；溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢。
这样，不同的色素就会在滤纸条上分离出来。
三、实验材料和用具1、材料新鲜的菠菜叶。
2、用具研钵、漏斗、脱脂棉、毛细吸管、剪刀、定性滤纸、载玻片、盖玻片、培养皿、天平、药匙、量筒、玻璃棒、无水乙醇、层析液（石油醚：丙酮：苯＝ 20:2:1）、二氧化硅、碳酸钙。
四、实验步骤1、提取叶绿素（1）称取 5g 新鲜的菠菜叶，剪碎后放入研钵中。
（2）向研钵中加入少量的二氧化硅和碳酸钙，以及5mL 无水乙醇。
（3）迅速、充分地研磨菠菜叶，直至变成匀浆状。
（4）用漏斗和脱脂棉过滤研磨液，收集滤液到小试管中。
2、制备滤纸条（1）将定性滤纸剪成 10cm×1cm 的长条。
（2）在一端剪去两角，以防止层析液在滤纸条边缘扩散过快。
3、画滤液细线（1）用毛细吸管吸取少量滤液，沿滤纸条的铅笔细线均匀地画出一条细而直的滤液细线。
（2）待滤液干后，再重复画 2 3 次，以增加色素的含量。
4、分离叶绿素（1）将适量的层析液倒入培养皿中，液面高度不要超过 1cm。
（2）将滤纸条有滤液细线的一端朝下，轻轻插入层析液中，注意不要让滤液细线触及层析液。
（3）用培养皿盖盖住培养皿，以防止层析液挥发。
5、观察和记录（1）一段时间后，取出滤纸条，待干燥后观察色素带的分布。
（2）记录不同色素带的颜色、位置和宽度。
五、实验结果1、观察到滤纸条上出现了四条不同颜色的色素带，从上到下依次为：胡萝卜素（橙黄色）、叶黄素（黄色）、叶绿素 a（蓝绿色）、叶绿素 b（黄绿色）。
叶绿体色素的提取和分离
叶绿体色素的提取和分离
叶绿体色素是位于植物叶绿体中的一类有机化合物，包括叶绿素 a、叶绿素 b、类胡萝卜素等。
提取和分离叶绿体色素的方法如下：
1. 手工研磨法：将植物叶片取出后，加入适量的减水醇（如乙醇或甲醇），用研钵或机械研磨器搅拌研磨，使细胞破碎释放叶绿体色素。
然后通过离心将悬液离心分离出叶绿体色素。
2. 酒精沉淀法：将植物叶片切碎后加入适量的酒精溶液，用撇去悬浮物，然后再用滤纸滤除酒精中的杂质。
过滤后的溶液可以进行酒精沉淀，即加入适量的酒精悬浮叶绿体色素，并通过离心分离出沉淀。
3. 层析法：将植物叶片经过研磨和过滤后得到的色素溶液，可以通过色谱柱层析进行分离。
常用的色谱柱包括硅胶柱、纸层析柱和高效液相色谱柱等。
通过向色谱柱中加入适当的溶剂系统，可以将叶绿体色素按照其亲水性和亲油性进行分离。
4. 液-液萃取法：将植物叶片研磨并与适量的有机溶剂（如二氯甲烷、苯或正己烷）混合，通过摇晃、振荡或搅拌等方法，使叶绿体色素在有机相和水相之间分配。
随后，分离有机相并蒸干，即可得到叶绿体色素。
这些方法可以根据实验需求和设备条件选择使用，提取和分离叶绿体色素可以用于进一步的分析和研究。
叶绿体中色素的提取与分离实验教案
叶绿体中色素的提取与分离实验教案【实验名称】叶绿体中色素的提取与分离实验【实验目的】1.了解叶绿体中的主要色素成分；2.掌握叶绿体色素的提取与分离方法。
【实验原理】叶绿体是植物细胞中的一种细胞器，其中含有许多重要的光合色素，包括叶绿素、类胡萝卜素等。
叶绿素是叶绿体中最主要的光合色素，起到吸收光能并参与光合作用的关键作用。
1.取一片新鲜的绿色叶片，仔细清洗干净；2.将叶片切碎，放入研钵中；3.加入适量的酒精，用研钵研磨叶片，使叶绿素溶解在酒精中；4.将研磨好的悬浮液倒入试管中，用玻璃棒搅拌均匀；5.用过滤纸过滤悬浮液，得到褐绿色的叶绿素酒精溶液。
对于叶绿体中色素的分离，可以通过色谱技术实现。
常用的色谱技术有薄层色谱法和色谱柱法。
其中，薄层色谱法适用于对色素进行初步分离和检测，而色谱柱法适用于对色素进行精细分离和定量分析。
【实验步骤】1.将酒精提取得到的叶绿素酒精溶液滴在薄层色谱板上；2.将薄层色谱板放入色谱槽中，注入色谱移动相，使之静置一段时间，待色素被吸附；3.取出薄层色谱板，将其放在试验纸上，用铅笔轻轻描绘出色素分布的斑点；4.将带有色素斑点的色谱板放入色谱槽中，注入色谱移动相，使之静置一段时间，让色素分离；5.取出色谱板，将其放在试验纸上，再次描绘出色素分布的斑点，比较与第一次描绘的斑点；6.根据色素斑点出现的位置，判断叶绿体中主要含有的色素成分。
【实验记录】实验记录表【实验结果分析】根据色素分离的结果和斑点分布位置的变化，可以初步确定叶绿体中含有的主要色素成分。
叶绿体中主要包含的色素有叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素等。
叶绿素a和叶绿素b是叶绿体中最常见的两种色素，它们在薄层色谱板上的斑点通常位于相对位置较低的地方，而类胡萝卜素则位于相对位置较高的地方。
【实验结论】通过叶绿体中色素的提取与分离实验，初步确定叶绿体中主要包含叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素等色素成分。
【思考题】1.为什么要进行色素的提取与分离实验？2.除了实验中所使用的方法，你还知道其他提取与分离色素的方法吗？3.叶绿体中的色素对光合作用有什么影响？。
叶绿素的提取和分离实验
绿
离 实 验
素 的 提 取
与
分
捕获光能的色素
绿叶中会有哪些种类的色素呢？ 它们分别是什么颜色的？ 各种色素在绿叶的含量相同吗？
实验：绿叶中色素的提取与分离
实验材料和用具 (1)材料：新鲜的绿色叶片(如菠菜叶片) ; (2)用具：无水乙醇，层析液，二氧化硅，碳 酸钙；干燥的定性滤纸，烧杯(100ml)，研钵， 小玻璃漏斗，尼龙布，毛细吸管，剪刀，小试管， 培养皿盖，药勺，量筒(10ml)，天平。
胡萝卜素 叶黄素 叶绿素a
从上到下 胡黄 a b
叶绿素b 层析液
滤液细线
捕获光能的色素
绿叶中会有哪些种类的色素呢？ 它们分别是什么颜色的？ 各种色素在绿叶的含量相同吗？滤纸上色带的排列顺序如何？
实验讨论：
宽窄如何？说明什么？
捕 获 光
类胡萝 胡萝卜素 卜素 (占1/4) 叶黄素
能
的
叶绿素a
色 素
叶绿素
(占3/4)
叶绿素b
实验中的注意事项
(1)选材：应选取鲜嫩、颜色深绿的叶片，以保证含有较多 的色素。
(2)提取色素：研磨要迅速、充分，且加入几种物质（注意 SiO2和CaCO3）的量要成比例，以保证提取较多的色素和色素浓度 适宜。
(3)制备滤纸条：剪去两角，以保证色素在滤纸条上扩散均 匀、整齐，便于观察实验结果，否则，会形成弧形色素带。
实验：绿叶中色素的提取和分离
重点一：实验原理 (1)提取：叶绿体中的色素易溶于无水乙醇等 有机溶剂中。 (2)分离：叶绿体中的各种色素在层析液中溶 解度不同。
重点二：方法与步骤
1．提取色素
SiO2：使绿叶 充分研磨。 CaCO3：防止研 磨时色素受到破坏。 过滤：单层尼 龙布
叶绿体色素的提取分离及理化性质检测实验报告
叶绿体色素的提取分离及理化性质检测实验报告一、实验目的：1. 学习应用薄层色谱法分离叶绿体色素的实验方法。
2. 了解叶绿素的组成、性质和测定叶绿素有助于理解光合作用的本质。
二、实验原理：叶绿体是进行光合作用的细胞器。
叶绿体中的叶绿素a，叶绿素b，胡萝卜素和叶黄素与类囊体膜结合成为色素蛋白复合体。
这些色素都不溶于水，而溶于有机溶剂，故可用乙醇等有机溶剂提取。
提取液可用薄层色谱法加以分离和鉴别。
薄层层析色谱法是将吸附剂均匀地涂在玻璃板上成一薄层，将此吸附剂薄层作为固定相，把待分离的样品溶液点在薄层板的下端，然后用一定量的溶剂作流动相，将薄层板的下端浸入到展开剂当中。
由于吸附剂对不同物质的吸附能力大小不同，吸附力强的物质相对移动慢一些，而吸附力弱的物质则相对移动快一些，从而使各组分有不同的移动速度而彼此分开。
植物活性成分的分离常用薄层层析法和柱层析法，其中柱层析适用于大量制备。
本实验采用薄层层析色谱法，其中固定相用硅胶预制板。
三、实验材料与试剂：1. 新鲜的菠菜叶片。
2 体积分数为95%的乙醇，碳酸钙粉末，展开剂〈石油醚：丙酮：苯=75：1，体积比>。
3.研钵，漏斗，三角瓶，剪刀，点样毛细管，层析缸，硅胶预制板，滤纸。
四、实验步骤：(一) 色素提取液的制备1. 取新鲜叶片4“5片，洗净，擦干叶表面，去除中脉剪碎，放入研钵中。
2. 向研钵中加入少量CaCO₃**,再加2*3ml体积分数为 95%的乙醇,充分研磨至糊状，再加10°15ml体积分数为95%的乙醇，上清液用漏斗过滤出。
残渣再用10ml体积分数为95%的乙醇冲洗一次，一同过滤于三角瓶中，即制成叶绿体色素提取液。
提取液应避光保存，因提取量较大，可用于其他相关实验(如后面的叶绿素理化性质的验证)。
(二) 叶绿体色素的分离1.取硅胶预制板一个，用点样毛细管吸取上述提取液，平行于硅胶板的短边，距下边缘1cm处用毛细管划线，保证划线细直。
实验三叶绿体色素的提取分离和性质分析
提取效率
通过比较不同提取时间、不同溶 剂浓度和不同提取温度对提取效 率的影响，发现最佳提取条件为 提取时间30分钟，溶剂浓度为
95%，提取温度为4°C。
提取物纯度
通过观察提取液的颜色和吸光度 ，可以初步判断提取物的纯度。 在最佳条件下，提取液颜色深且 吸光度较高，说明提取的叶绿体
色素纯度较高。
叶绿体色素的分离结果分析
将叶绿素标准品制作成标准曲线，根据标准曲线计算提 取液中各色素的浓度。
用分光光度计在400~700nm波长范围内扫描色素提取 液，记录各波长下的吸光度值。
根据各色素的浓度和吸光度值，计算各色素的吸收系数 和相对含量。
04
CATALOGUE
结果分析
叶绿体色素的提取结果分析
提取方法
采用研磨法从植物叶片中提取叶 绿体色素，该方法能够充分破碎 细胞壁，释放出叶绿体中的色素
实际应用
生态意义
了解叶绿体色素的组成和性质有助于 深入探究植物对光能的吸收和利用机 制，对于维护生态平衡和保护环境具 有重要意义。
实验结果可用于指导农业生产、园艺 和林业等领域，通过合理调节植物的 光合作用，提高作物的产量和品质。
对实验的反思和改进建议
反思
在实验过程中，需要注意操作的规范性和准确性，以避免误差和干扰因素对实验结果的影响。同时，需要充分考 虑实验的安全性和环保性。
工业应用
叶绿体色素在食品、化妆 品、染料等领域有广泛应 用，具有潜在的经济价值 。
02
CATALOGUE
实验原理
叶绿体色素的组成和结构
叶绿体色素是由多种色素分子构成的 复合物，主要包含叶绿素a、叶绿素 b、叶黄素和胡萝卜素等。
叶绿素a和叶绿素b具有卟啉环结构， 是光合作用的主要色素分子，而叶黄 素和胡萝卜素则具有类胡萝卜素的结 构。
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5、下图是叶绿体色素的提取与分离实验中所用的材料与用具。请回答： 下图是叶绿体色素的提取与分离实验中所用的材料与用具。请回答： 分别在A 三个研钵中加入2克菠菜，经研磨、提取得到三种颜色的溶液： 分别在A、B、C三个研钵中加入2克菠菜，经研磨、提取得到三种颜色的溶液： 深绿色、黄绿色（或褐色）、几乎无色。 ）、几乎无色 表示加， 表示不加。 深绿色、黄绿色（或褐色）、几乎无色。注：“+”表示加，“—”表示不加。 表示加 表示不加
⑵、分离色素 制备滤纸条：剪去两角－使扩散均匀， 制备滤纸条：剪去两角－使扩散均匀，防止边
缘毛细现象
画滤液细线： 风干后重复数次） 画滤液细线：直、细、浓(风干后重复数次）
层析液不能没及滤液细线： 层析液不能没及滤液细线：防止色素 溶于层析液 层析分离 加盖：防止挥发 加盖： 洗手： 洗手：丙酮有毒
练习
在圆形滤纸的中央点上粘叶绿体的色素滤液， 3．在圆形滤纸的中央点上粘叶绿体的色素滤液， 进行色素分析，会得到近似同心环状的四个色素圈， 进行色素分析，会得到近似同心环状的四个色素圈， 排在外圈的色素呈 [ A ] A．橙黄色 B．黄色 C．蓝绿色 D．黄绿色 (1)在 叶绿体色素的提取和分离实验” 4、(1)在“叶绿体色素的提取和分离实验”中，将叶绿体 纸层析法 色素进行分离的方法名称是_________ (2)某学生在实验 _________。 色素进行分离的方法名称是_________。(2)某学生在实验 过程中将划有滤液细线的滤纸条(已重复几次划线) 过程中将划有滤液细线的滤纸条(已重复几次划线)插入层 析液，几分种后取出观察， 析液，几分种后取出观察，发现在滤纸条上无色素分带现 象，而其他用同一滤液作实验的同学的滤纸条上却色素分 滤液线浸入层析液 带明显。其实验失败的原因最可能是________________ ________________。 带明显。其实验失败的原因最可能是________________。
叶绿体中色素的提取和分离实验
一、叶绿体中色素的提取和分离实验 1、实验原理 提取：色素能溶解在有机溶剂中， 提取：色素能溶解在有机溶剂中，不溶于水 丙酮溶液 如：丙酮溶液 无水乙醇 分离：色素在层析液中溶解度不同， 溶解度不同 分离：色素在层析液中溶解度不同，使四种色素 随层析液在滤纸上扩散的速度不同而分离 随层析液在滤纸上扩散的速度不同而分离 扩散的速度
类 胡 萝 卜 素 叶 绿 素
吸收光能百分比 100
叶绿素a、 主要吸收 主要吸收： 光和红 叶绿素 、b主要吸收 蓝紫光和红光 胡萝卜素和叶黄素主要吸收： 蓝紫光
类胡萝卜素 50 叶绿素b 叶绿素 叶绿素a 叶绿素
0
波长
二、捕获光能的色素和结构
（一）捕获光能的色素
叶绿素 色素 叶绿素a 叶绿素 叶绿素b 叶绿素 叶黄素 （蓝绿色） 蓝绿色） （黄绿色） 黄绿色） （黄色） 黄色） 含量约占3/4 含量约占 含量约占1/4 含量约占
2、实验用具 、
新鲜的绿叶（菠菜叶） 新鲜的绿叶（菠菜叶）
3.方法与步骤： 3.方法与步骤： 方法与步骤 （1）提取：称 ）提取：
取5g左右的鲜叶，剪碎， 放入研钵中。加少许的 石英砂（充分研磨）和 石英砂（充分研磨） 碳酸钙 (保护叶绿素) 保护叶绿素) 与丙酮溶液。在研钵中 与丙酮溶液 快速研磨。将研磨液进 行过滤。
练习
在植物实验室的暗室内， 1、在植物实验室的暗室内，为了尽可能地降 低植物光合作用的强度，最好安装（ 低植物光合作用的强度，最好安装（ B ） A、红光灯 B、绿光灯 C、白炽灯 D、蓝光灯 为提高大棚蔬菜的产量， 2、为提高大棚蔬菜的产量，哪项措施更有效 （ D ） B、安装蓝紫色透光薄膜 A、安装红色透光薄膜 C、安装绿色透光薄膜 D、安装无色透光薄膜
橙黄色） 类胡萝卜素 胡萝卜素 （橙黄色） 吸收可见 的太阳光 叶绿素主要吸收 叶绿素主要吸收 红光和 红光和蓝紫光 类胡萝卜素主 类胡萝卜素主 要吸收蓝紫光 要吸收蓝紫光
课堂检测
1、在叶绿体色素的提取和分离实验中在滤纸条上扩散速度 、 最快的色素是（ ） 最快的色素是（ A、叶绿素 、叶绿素a B、叶绿素 、叶绿素b C、胡萝卜素 D、叶黄素 、 、 2、叶绿体中色素的提取和分离的实验目的是（ ） 、叶绿体中色素的提取和分离的实验目的是（ A、观察多种色素的吸收光谱 、 B、验证叶绿体中色素的种类和多种色素的颜色。 、验证叶绿体中色素的种类和多种色素的颜色。 C、提取高等植物叶绿体中的色素 、 D、用纸层析法将色素进行分离 、 3、用纸层析法将色素进行分离，在滤纸条上出现最宽的一 、用纸层析法将色素进行分离， 条色素带的颜色是（ 条色素带的颜色是（ ） A、橙黄色 B、黄色 C、蓝绿色 D、黄绿色 、 、 、 、 4、在圆形滤纸的中央点上，对叶绿体的色素进行色素分析， 、在圆形滤纸的中央点上，对叶绿体的色素进行色素分析， 会得到近似，同心的四个色素环， 会得到近似，同心的四个色素环，排到在最里圈的色素是 （ ） A、橙黄色 B、蓝绿色 C、黄色 D、黄绿色 、 、 、 、
处理 二氧化硅（少量） 二氧化硅（少量） 碳酸钙（少量） 碳酸钙（少量） 95%乙醇（10ml） 95%乙醇（10ml） 乙醇 蒸馏水（10ml） 蒸馏水（10ml）
A + — + —
B + + — +
C + + + —
叶绿素被破坏 （1）A处理得到的溶液颜色是 黄绿色 ，原因是_____________________ 色素未被提取出来 （2）B处理得到的溶液颜色是 几乎无色 原因是_____________________ ， （3）C处理得到的溶液颜色是 深绿色 ， 细、直、浓 划滤液细线要求___________________ （4）划滤液细线要求___________________ 防止挥发 层析液不要没及滤液细线 ，加盖的目的_________ 加盖的目的_________ （5）分离色素时关键注意 胡萝卜素 和 叶黄素 ， 色素分离的结果： （6）色素分离的结果：相邻色素带间距最宽的是 他们的颜色是 橙黄色 和 黄色 ，主要吸收 蓝紫 光。