银染电泳实验方法

合集下载
  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

一、实验名称:银染法-电泳检测目标条带
二、实验目的:测定样品中蛋白组成
三、实验材料
1.主要试剂耗材
名称厂家/品牌
30%丙烯酰胺SIGMA
三羟甲基氨基甲烷Amresco
十二烷基硫酸钠(SDS)北京新经科生物技术有限公司
氯化钠北京化工厂
四、实验内容:
A.加样量计算
B.样品定量,浓度计算,吸取等量的待测样品至各EP管中,向管中加入适当体积的5×SDS凝胶加样
缓冲液,100℃加热5min,使蛋白变性。

C.小心拔出上样梳,按预定的顺序加样,上样量根据所选板子的厚度而定,在预留的一个上样孔中
加入分子量Maker
D.样品煮沸10分钟,13000rpm离心5分钟,取上清。

E.开始电泳,电压150V 跑70min。

F.结束电泳,将15%胶拆开固定15min—水洗6min—致敏5min—水洗1min—银染15min—水洗5s—
显色至条带清晰—终止1min后换水保存。

相关文档
最新文档