KJ02-_维生素B1的测定(精)
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VB1结构具有嘧啶环和氨基，显生物碱特性。可与多种生物碱沉
淀或显色 剂反应。
碘化汞钾 产生淡黄色沉淀
碘
产生红色沉淀
VB1
硅钨酸
白色沉淀
Байду номын сангаас
苦酮酸
扇形白色结晶
（三）氯化物反应
1）滴加硝酸银，即产生白色凝乳状沉淀；分离，沉淀加氨试液即溶解，再加 硝酸银，沉淀复生成。 2）加二氧化锰，混匀后，加硫酸湿润，缓慢加热，产生氯气，用湿润的淀 粉碘化钾试纸检验显蓝色。
OVER
Thanks
第二节 维生素B1的分析
学习要求
• 掌握维生素B1化学结构、理化性质以及
与分析方法间的关系，专属鉴别反应、 主要含量测定方法与原理 • 熟悉维生素B1有关物质、检查方法与原 理
一、VB1作用和存在形式
1. VB1作用
1）维生素B1又称硫胺素 ，主要作用是以 辅酶的方式参加糖代谢。
2）抑制胆碱酯酶的活性，减少乙酰 胆碱的水解。 功能主治：维生素B1主要用于防治维生素B1缺乏症(脚气病)，多发 性神经炎，小儿麻痹后遗症以及小儿遗尿症和心肌炎等的辅助治疗， 清除运动后疲劳；对解除某些药物如链霉素、庆大霉素等引起的听 觉障碍有帮助；也用于食欲不振，消化不良；在糖代谢率增高(如 发热、甲亢、大量葡萄糖输入)时亦需要适当补充 。
在246nm的波长测定吸光度，结果在70.29μg/mL～101.53μg/mL范围 内线性关系良好。
4.与生物碱沉淀试剂反应
与某些生物碱（如碘化汞钾、硅钨酸等）反应生成组成恒定的沉淀。
5.氯化物的特性
维生素B1为盐酸盐，水解有氯离子，可以进行氯化物的鉴别反应。
三、鉴别反应
（一）硫色素荧光反应
N H3C N CH 2 NH 2 HCl N S CH 3 C 2 H 4 OH
硫色素荧光法是维生素B1的专属性反应，用于维生素B1及其 制剂的含量测定。
硫色素荧光法
1）原理
铁氰化钾
维生素B1 碱性溶液 硫色素 紫外光
λex365nm
蓝色荧光 Λem435nm
2) 方法步骤
1.铁氰化钾的制备 2.对照品溶液的制备 3.样品溶液的制备 4.测定方法
vml供试品溶液中维生素B 的ug数=[（A-b)/(S-d)]*C对照品*v对照品
NaOH
N H 3C N
CH 2 NH 2 O
N
N NaS
N N N NaS
CH 3 C2H 4OH
CH3 C2H4OH
-H 2 O
H3C
H3C
环合
N N N H
N S
CH 3 C 2 H 4 OH
(O) H3C 2H
N N N
N S
CH3 C2H4OH
硫色素
（二）沉淀反应
噻唑环 氨基嘧啶
（二）性质
VB1呈白色结晶或结晶性粉末。 1.溶解性
在乙醇中微溶，乙醚中不溶。干燥品在空气中可迅速吸收4%的水分，其 水溶液呈酸性。
2.硫色素反应
噻唑环在碱性介质中可开环，再与嘧啶环上的氨基环合，经铁氰化钾 等氧化剂氧化具有荧光的硫色素，其硫色素溶于正丁醇呈蓝色荧光。
3.紫外吸收特性
1
A和S分别为供试品溶液和对照品测得的平均荧光对数；b和d则分别为 其相应的空白读数。
3）注意事项
• 硫色素荧光反应为维生素B1的专属性反应，虽非定 • •
量完成，但在一定条件下形成的硫色素与维生素B1 浓度成正比。 不受氧化破坏产物的干扰，测定结果比较准确。但 操作繁琐，且荧光测定受干扰因素较多。 氧化剂除铁氰化钾外，可用氯化汞或溴化氰代替。
2. VB1存在形式
在生物体内通常以硫胺焦磷酸盐（TPP）的形式存在。 多存在于酵母、谷物、肝脏、大豆、肉类 。
酵母
谷类
动物肝脏
大 豆
肉 类
二、结构与性质
（一）结构
维生素B1是由氨基嘧啶环和噻唑环通过亚甲基连接而成的 季铵盐类化合物，噻唑环上季铵及嘧啶环上氨基，为两个碱 性基团，可与酸成盐。 氯化4-甲基-3[(2-甲基- 4-氨基- 5-嘧啶基)-甲基]-5-(2-羟基乙基) 噻唑鎓盐酸盐
（四）硫元素反应
VB1
NaOH Na2S 共热
Pb（NO3）2 PbS
（五）红外分光光度法
样品加水溶解，水浴蒸干，在105℃干燥2个小时测定。
四、含量测定
维生素B1及其制剂常用的含量测定方 法有非水滴定法、紫外分光光度法和 硫色素荧光反应法。 ChP2010用非水溶液滴定法测定其原料 药，片剂和注射液均采用紫外分光光度法
淀或显色 剂反应。
碘化汞钾 产生淡黄色沉淀
碘
产生红色沉淀
VB1
硅钨酸
白色沉淀
Байду номын сангаас
苦酮酸
扇形白色结晶
（三）氯化物反应
1）滴加硝酸银，即产生白色凝乳状沉淀；分离，沉淀加氨试液即溶解，再加 硝酸银，沉淀复生成。 2）加二氧化锰，混匀后，加硫酸湿润，缓慢加热，产生氯气，用湿润的淀 粉碘化钾试纸检验显蓝色。
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第二节 维生素B1的分析
学习要求
• 掌握维生素B1化学结构、理化性质以及
与分析方法间的关系，专属鉴别反应、 主要含量测定方法与原理 • 熟悉维生素B1有关物质、检查方法与原 理
一、VB1作用和存在形式
1. VB1作用
1）维生素B1又称硫胺素 ，主要作用是以 辅酶的方式参加糖代谢。
2）抑制胆碱酯酶的活性，减少乙酰 胆碱的水解。 功能主治：维生素B1主要用于防治维生素B1缺乏症(脚气病)，多发 性神经炎，小儿麻痹后遗症以及小儿遗尿症和心肌炎等的辅助治疗， 清除运动后疲劳；对解除某些药物如链霉素、庆大霉素等引起的听 觉障碍有帮助；也用于食欲不振，消化不良；在糖代谢率增高(如 发热、甲亢、大量葡萄糖输入)时亦需要适当补充 。
在246nm的波长测定吸光度，结果在70.29μg/mL～101.53μg/mL范围 内线性关系良好。
4.与生物碱沉淀试剂反应
与某些生物碱（如碘化汞钾、硅钨酸等）反应生成组成恒定的沉淀。
5.氯化物的特性
维生素B1为盐酸盐，水解有氯离子，可以进行氯化物的鉴别反应。
三、鉴别反应
（一）硫色素荧光反应
N H3C N CH 2 NH 2 HCl N S CH 3 C 2 H 4 OH
硫色素荧光法是维生素B1的专属性反应，用于维生素B1及其 制剂的含量测定。
硫色素荧光法
1）原理
铁氰化钾
维生素B1 碱性溶液 硫色素 紫外光
λex365nm
蓝色荧光 Λem435nm
2) 方法步骤
1.铁氰化钾的制备 2.对照品溶液的制备 3.样品溶液的制备 4.测定方法
vml供试品溶液中维生素B 的ug数=[（A-b)/(S-d)]*C对照品*v对照品
NaOH
N H 3C N
CH 2 NH 2 O
N
N NaS
N N N NaS
CH 3 C2H 4OH
CH3 C2H4OH
-H 2 O
H3C
H3C
环合
N N N H
N S
CH 3 C 2 H 4 OH
(O) H3C 2H
N N N
N S
CH3 C2H4OH
硫色素
（二）沉淀反应
噻唑环 氨基嘧啶
（二）性质
VB1呈白色结晶或结晶性粉末。 1.溶解性
在乙醇中微溶，乙醚中不溶。干燥品在空气中可迅速吸收4%的水分，其 水溶液呈酸性。
2.硫色素反应
噻唑环在碱性介质中可开环，再与嘧啶环上的氨基环合，经铁氰化钾 等氧化剂氧化具有荧光的硫色素，其硫色素溶于正丁醇呈蓝色荧光。
3.紫外吸收特性
1
A和S分别为供试品溶液和对照品测得的平均荧光对数；b和d则分别为 其相应的空白读数。
3）注意事项
• 硫色素荧光反应为维生素B1的专属性反应，虽非定 • •
量完成，但在一定条件下形成的硫色素与维生素B1 浓度成正比。 不受氧化破坏产物的干扰，测定结果比较准确。但 操作繁琐，且荧光测定受干扰因素较多。 氧化剂除铁氰化钾外，可用氯化汞或溴化氰代替。
2. VB1存在形式
在生物体内通常以硫胺焦磷酸盐（TPP）的形式存在。 多存在于酵母、谷物、肝脏、大豆、肉类 。
酵母
谷类
动物肝脏
大 豆
肉 类
二、结构与性质
（一）结构
维生素B1是由氨基嘧啶环和噻唑环通过亚甲基连接而成的 季铵盐类化合物，噻唑环上季铵及嘧啶环上氨基，为两个碱 性基团，可与酸成盐。 氯化4-甲基-3[(2-甲基- 4-氨基- 5-嘧啶基)-甲基]-5-(2-羟基乙基) 噻唑鎓盐酸盐
（四）硫元素反应
VB1
NaOH Na2S 共热
Pb（NO3）2 PbS
（五）红外分光光度法
样品加水溶解，水浴蒸干，在105℃干燥2个小时测定。
四、含量测定
维生素B1及其制剂常用的含量测定方 法有非水滴定法、紫外分光光度法和 硫色素荧光反应法。 ChP2010用非水溶液滴定法测定其原料 药，片剂和注射液均采用紫外分光光度法