《生物饵料培养学》实验课件-精选
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生物饵料培养-第二章1-2
（4）同化产物
由于各门藻类的色素成分不同，所以同化产物及 转化的贮藏物质也不相同
–蓝藻门为蓝藻淀粉 –金藻门为金藻糖(白糖素)及脂肪 –黄藻门和硅藻门以脂肪为主 –裸藻门为副淀粉 –甲藻门为淀粉或淀粉状化合物 –绿藻门为淀粉 –红藻的同化产物为红藻淀粉，褐藻的同化产物为褐藻 淀粉及甘露醇。
第二节、单细胞藻类的概念与特点
• 单 细 胞 藻 类 ， unicellular algae, 也 叫 微 藻 microalgae，通常指单个细胞或多个细胞聚集在
一起的微型藻类。
按生长环境分为
陆生微藻
海水微藻
微藻
水生微藻
淡水微藻
气生微藻
按生活方式分类
浮游微藻
微藻
底栖微藻
附生微藻
按营养方式分类
第一节 藻类概述
一、主要特征/分类 二、形态构造 三、生殖方式 四、生活史 五、浮游藻类的采集方法 六、鉴 定
一、主要特征
藻类（algae）是低等植物，分布甚广，绝大多 数生活于水中，大小不一。
具有叶绿素，进行光合作用。 没有真正的根、茎、叶的分化。 生殖单位是单细胞的孢子或合子。
光自养微藻
微藻
异养微藻 兼性营养微藻
微藻的主要类群
1．绿藻门Chlorophyta 2．硅藻门Bacillariophyta 3．金藻门Chrysophyta 4．蓝藻门Cyanophyta 5．甲藻门Pyrrophyta 6．隐藻门Cryptophyta 7．裸藻门Euglenophyta 8．黄藻门Xanthophyta
/Paleobotany/list-444-1.html 化石网
卤虫的培养(生物饵料培养课件)
卤虫对水域中离子 组成及浓度的耐受 力范围很广。
4.溶解氧
卤虫具高效的呼吸色素—血红素， 可以在低溶解氧状态下（1mg/L） 生存，也可生活于溶解氧为饱和 溶解度150％的超富氧水体中。
5.酸碱度
孵化过程要求pH在8-9之 间，否则会降低孵化率。
6.摄食
为杂食性动物，以滤食为主，也刮食硅藻（角毛藻、 骨条藻），10 μm以下的饵料颗粒较适宜。 水温28℃ ，培育5 mm 长的卤虫，用衣藻（10～ 15×6～9 μm）为饵料，最大摄食量 700 万个细胞/ （个 · 天），一般10～30万个/（个·天）
卤虫作为饵料所具有的优点
1.卤虫卵来源广，资源量大 2.卤虫休眠卵可长期贮存，而且可以包装后长途运输，需用时随时孵化备用 3.卤虫卵孵化和分离工艺技术简单，操作方法容易掌握 4.卤虫卵所孵的幼虫有不同的发育阶段和大小，可以根据对虾仔、幼虾和鱼苗的大小而选用 5.卤虫所含的化学组成及营养成分符合鱼虾等营养需要 6.卤虫卵及其孵化出的幼虫可以进行消毒去除敌害和污染源 7.幼虫和成虫均可作为营养的媒介载体，把各种营养传递到鱼虾体内
• 壳的最内层为胚表皮，这是一层 透明的富有弹性的膜，可分为纤 维质层和与胚胎相邻的内表皮膜 两层。
• 膜内的胚胎为一约有4000个细胞 的原肠胚。
卤虫无节幼体形态
夏卵或经滞育终止处理的冬卵，孵化 成Ⅰ龄无节幼体，体长一般为400～ 500微米。
卤虫无节幼体形态
Ⅰ龄无节幼体体内充满卵黄，颜色为 橘红色。有三对附肢:第一触角有感觉 功能，第二触角有运动及滤食功能， 一对大颚有摄食功能。在头部有一单 眼。
一、枝角类分布
• 卤虫（Artemia salina） （Brine
Shrimp）又称丰年虫（或盐水丰年 虫） • 隶属于节肢动物门 （Arthropoda） 、甲壳纲 （Crustacea）、鳃足亚纲 （Branchiopoda）、无甲目 （Anostrace）、盐水丰年虫科 （Brabchinectidae）
饵料生物培养实验
2. 消化与分装：在上述瓶中加入适量消化液(0.02%EDTA或0.04％ EDTA+0.5％胰蛋白酶液各一半)以盖满细胞为宜，置于室温，停留2～ 3min后，翻转培养瓶，肉眼观察细胞单层是否出现缝隙(针孔小的空隙)， 如出现缝隙，即可倒去消化液，如未出现缝隙，则可将瓶翻回，继续进 行消化，直到出现缝隙为止(消化时间长短与不同的细胞及生长状态有 关)。此时，可倒去消化液，加入新配制的营养液3ml，以终止消化。然 后用吸管吸取培养瓶中的营养液，反复吹打瓶壁上的细胞层，直至瓶壁 细胞全部脱落下来为止。此时，可继续轻轻地吹打细胞悬液，以使细胞 散开。随之即可补加营养液，细胞传代的比例，不同细胞亦不同，HeLa 细胞一般以1：2或1：4进行分装，即一瓶细胞可传为两瓶。若原瓶为 5ml营养液，要分装成两瓶，则需补液到10ml。混匀后，可将另一半分 装至另一培养瓶中。
饵料生物培养实验
实验一、细胞膜的渗透性
1. 实验目的 了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞
的速度 。
饵料生物培养实验
2.实验原理
将红细胞放入数种等渗溶液中，由于红细胞对 各种溶质的透性不同，有的溶质可以渗入，有溶质 不能渗入，渗入的溶质能够提高红细胞的渗透压， 所以促使水分进入细胞，引起溶血。由于溶质透入 速度互不相同，因此溶血时间也不相同
饵料生物培养实验
6.作业与思考题
➢
计算以上三种情况下，活细胞在总细胞
中的比例,并分析原因。
饵料生物培养实验
实验三、细胞骨架的观察
1. 实验目的 了解细胞骨架的结构特征及其制备技术 。
饵料生物培养实验
2.实验原理
➢ 细胞骨架是由蛋白质丝组成的复杂网状结构， 根据其组成成分和形态结构可分为微管、微丝和中 间纤维。它们对细胞形态的维持，细胞的生长、运 动、分裂、分化，物质运输，能量转换，信息传递， 基因表达等起到重要作用。当用适当浓度的 TritonX-100处理细胞时，可将细胞质膜中和细胞 质中的蛋白质和全部脂质被溶解抽提，但细胞骨架 系统的蛋白质不受破坏而被保存，经用戊二醛固定， 考马斯亮蓝R250染色后，可在光学显微镜下观察到 由微丝组成的微丝束为网状结构（图3-3），就是 细胞骨架。
饵料生物培养实验
实验一、细胞膜的渗透性
1. 实验目的 了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞
的速度 。
饵料生物培养实验
2.实验原理
将红细胞放入数种等渗溶液中，由于红细胞对 各种溶质的透性不同，有的溶质可以渗入，有溶质 不能渗入，渗入的溶质能够提高红细胞的渗透压， 所以促使水分进入细胞，引起溶血。由于溶质透入 速度互不相同，因此溶血时间也不相同
饵料生物培养实验
6.作业与思考题
➢
计算以上三种情况下，活细胞在总细胞
中的比例,并分析原因。
饵料生物培养实验
实验三、细胞骨架的观察
1. 实验目的 了解细胞骨架的结构特征及其制备技术 。
饵料生物培养实验
2.实验原理
➢ 细胞骨架是由蛋白质丝组成的复杂网状结构， 根据其组成成分和形态结构可分为微管、微丝和中 间纤维。它们对细胞形态的维持，细胞的生长、运 动、分裂、分化，物质运输，能量转换，信息传递， 基因表达等起到重要作用。当用适当浓度的 TritonX-100处理细胞时，可将细胞质膜中和细胞 质中的蛋白质和全部脂质被溶解抽提，但细胞骨架 系统的蛋白质不受破坏而被保存，经用戊二醛固定， 考马斯亮蓝R250染色后，可在光学显微镜下观察到 由微丝组成的微丝束为网状结构（图3-3），就是 细胞骨架。
轮虫培养(生物饵料培养课件)
蛋白质*（ng/个） 蛋白质**（ng/个） 蛋白质/脂肪* 蛋白质/脂肪** ng/个（干重）
富含DHA的强化剂短时强化 163±13 100 2.3 1.4 331±13
蛋白质强化剂短时强化 238±44 165 2.6 1.8 502±33
*蛋白质按N×6.25计算；**蛋白质按氨基酸总和计算。
广布于淡水、河口等半咸水水体，但不出现在 酸性水体 。
是淡水湖泊、池塘的主要轮虫种群之一，也是 淡水池塘主要培养种类之一 。
褶皱臂尾轮虫
雌性个体大，被甲长平均238m，宽 171µm，前沿背面有棘刺6个，而腹面仅4 个。轮虫有一个尾，其内有粘液分泌于趾， 可粘于池壁等物体上作休息。雄性个体小， 结构简单，仅有纤毛环和精巢，也不摄食， 专为有性生殖交配。
在良好环境下：冬卵 （非混交）雌性→夏
卵（无需受精，挂在足 基部）→雌性小个体。 褶皱臂尾轮虫大约4h产卵1次，21个卵/雌， 持续时间6.7d。
非混交雌体、非混交卵
非混交雌体是指通过非混交生殖 的方式繁殖子代的雌性轮虫。
非混交雌体经过有丝分裂产生双 倍体的卵称为非混交卵。
轮虫的休眠卵在适宜条件下孵化 后，发育成双倍体的雌性轮虫， 此轮虫为非混交雌体 。
轮虫概述 一、轮虫
生物饵料应用概述
二、动物性生物饵料必须具备的条件
必需小型：作为鱼类的开口饵料； 形状简单，容易被破碎； 富有营养，容易消化； 不使水质恶化； 容易制备（培养）； 能适应养殖幼体的摄食生态条件。
常见种类 牡蛎担轮幼虫：受精卵 担轮幼虫:大约饵用13-14小时；
藤壶无节幼虫Ⅰ、Ⅱ期：大约饵用3-4小时；
通常称为L-型轮虫 是海水培养的主要种类， 在鱼虾蟹的育苗中应用最广泛。
生物饵料课件 第9章水生环节动物的培养1123
（一）外部形态
（3）吻。为 消化道富含 肌肉的口腔 和咽，经口 外翻而成
（一）外部形态
2、躯干部。由许多体 节组成，从围口节至 后端（除最末一节外） 的每一体节的形态均 相同，每节的两侧都 有1对疣足，是运动器 官。
3、尾部。虫体最后一 节无疣足和刚毛的体 节，常称为尾或肛节。
双齿围沙蚕的疣足
3、养殖管理
（1）巡塘检查。最好每天巡塘一次，尤其是大潮 迅期间，须加强防范。
（2）施肥。养殖过程最好能追加肥料，以发酵的 鸡、鸭、猪粪培养饵料效果好。施肥在退潮后立即 进行。
（3）投饵。滩涂粗放养殖不需投饵，蓄水精养应 投饵。前期（幼体阶段）可以采取施肥为主，逐步 增加鱼粉、豆粉等粉末饵料。中后期（养成阶段） 可投小杂鱼虾等搅碎打浆，或豆粕、菜籽粕粉碎、 兑水泼洒。
双 齿 围 沙 蚕 胚 胎 与 幼 体 发 育
双 管 阔 沙 蚕 胚 胎 与 幼 体 发 育
琥 珀 叶 沙 蚕 胚 胎 与 幼 体 发 育
日 本 刺 沙 蚕 胚 胎 与 幼 体 发 育
（四）生态习性
1、栖息地：双齿围沙蚕喜栖息于中、高潮带海滩， 以泥、泥沙底质为主，富含有机质、硅藻等的生境 更有利于沙蚕的生长和繁殖。
双 齿 围 沙 蚕 幼 体 对 温 盐 度 的 适 应 性
二、双齿围沙蚕的人工育苗
（一）亲体的培育 （二）催产与孵化 （三）幼体培育 （四）出苗与运输
（一）亲体的培育
1、亲体的采捕
每年的4-10月，在大潮汛来临前2-3天，从沙蚕的 养殖区或自然海滩上，徒手捕捞异沙蚕体或个体较 大的沙蚕，挑选体健无伤残的个体作为亲体。
丝蚯蚓属于环节动物门，寡毛纲，近孔寡毛目， 颤蚓科。常见培养种类有水丝蚓属的戈氏水丝 蚓、霍甫水丝蚓和尾鳃蚓属的苏氏尾鳃蚓等。
枝角类培养(生物饵料培养课件)
每蜕皮一次即增加一龄，同时身体也显著地增大。最后一个幼 龄称为终末幼龄。 • 成熟期：是终末幼龄和第一个成龄间单独的一个龄期。 • 成龄期：此时每蜕皮一次即产生一批幼蚤。成龄数也因种类和 环境因子的不同而有较大变化，如蚤状溞18～25个，大型溞6 ～22个，长刺溞10～19个。
二、生殖
1、孤雌生殖
四、观察鉴定方法
枝角类体型较大,行动缓慢,壳瓣和身体较为透明,便于观 察其形态结构。把标本用吸管移放到载玻片上,在低倍镜 下观察整体形态和壳瓣上的花纹。然后,盖上盖玻片使后 腹部压挤出壳瓣之外,观察后腹部各部分结构及其它结构。 枝角类固定后不会剧烈收缩变形,根据分类特征鉴定到属 一般困难不大,要鉴定到种,就不那么容易了,特别是有些 微小的差异,必须用高倍镜仔细观察,并需要有足够的参考 资料。
长刺溞的生活史有年变化现象，一年 是双周期，另一年改为单周期。枝角 类生活史的改变是和环境的年变化和 枝角类的生理变化分不开的。
一、实验目的
实验 枝角类的形态观察
1.通过对枝角类常见种类的观察,掌握形态构造特征。 2.识别枝角类常见种类
二、实验用品
生物显微镜、盖玻片、载玻片、吸管、纱布、擦镜纸、生物网
淡水种类可用曝气自 来水，内陆盐水种类 可在淡水中加入食盐 或海水调节盐度。
3．接种。枝角类接种的密度会影响培养的成败。培养 枝角类时接种密度越大，成功率越高，生长也越快。
4.投饵。枝角类的理想食物是单细胞绿藻、酵母、细 菌以及植物汁液。此外，大豆粉、玉米蛋白粉、蛋黄 等也可作为培养枝角类的补充饵料。
影响枝角类生殖量的高低的因素
• 种类、形体大小、龄期、外界环境条件的影响。 • 食物：各种枝角类要求一定的食物量来保证其生殖量。饥饿的枝
角类雌体则不排卵，即使卵已排入孵育囊，也可能因食物不足而 被吸收。
二、生殖
1、孤雌生殖
四、观察鉴定方法
枝角类体型较大,行动缓慢,壳瓣和身体较为透明,便于观 察其形态结构。把标本用吸管移放到载玻片上,在低倍镜 下观察整体形态和壳瓣上的花纹。然后,盖上盖玻片使后 腹部压挤出壳瓣之外,观察后腹部各部分结构及其它结构。 枝角类固定后不会剧烈收缩变形,根据分类特征鉴定到属 一般困难不大,要鉴定到种,就不那么容易了,特别是有些 微小的差异,必须用高倍镜仔细观察,并需要有足够的参考 资料。
长刺溞的生活史有年变化现象，一年 是双周期，另一年改为单周期。枝角 类生活史的改变是和环境的年变化和 枝角类的生理变化分不开的。
一、实验目的
实验 枝角类的形态观察
1.通过对枝角类常见种类的观察,掌握形态构造特征。 2.识别枝角类常见种类
二、实验用品
生物显微镜、盖玻片、载玻片、吸管、纱布、擦镜纸、生物网
淡水种类可用曝气自 来水，内陆盐水种类 可在淡水中加入食盐 或海水调节盐度。
3．接种。枝角类接种的密度会影响培养的成败。培养 枝角类时接种密度越大，成功率越高，生长也越快。
4.投饵。枝角类的理想食物是单细胞绿藻、酵母、细 菌以及植物汁液。此外，大豆粉、玉米蛋白粉、蛋黄 等也可作为培养枝角类的补充饵料。
影响枝角类生殖量的高低的因素
• 种类、形体大小、龄期、外界环境条件的影响。 • 食物：各种枝角类要求一定的食物量来保证其生殖量。饥饿的枝
角类雌体则不排卵，即使卵已排入孵育囊，也可能因食物不足而 被吸收。
光合细菌培养(生物饵料培养课件)
(二)开放式的微气光照培养
• 一般采用100-200升的白色塑料桶或卤虫孵化桶为培养 容器，以底部成锥形并有排放开关的容器较理想，在 底部装一气石，培养时微充气，在培养容器上方装一 灯光[40μE(m2·s)] 。容器经消毒后，加入消毒好的培养 液，接入20-50％的菌种母液，在适宜的温度条件下， 一般经过7-10天的培养，即可达到指数生长期高峰， 便可扩种或作为饵料。
营养代谢情况
3.繁殖方式：多以二分裂方式，例外的有出芽分裂 和极性伸长分裂。
光合细菌的培养
01特 征
02 分 离
培养 保存
03 应 用
01Part One 特征-3
四、生态分布
1.湖泊：半对流湖泊中，下层的停滞区，四季都有紫硫细 菌和绿硫细菌。全对流湖中，不易生长，但夏季下层可 繁殖。
2.氧化池：可大量繁殖。 3.活性污泥：生长好氧菌，红假单胞菌大量繁殖。 4.污水沟：数量少，夏季红螺菌优势，冬季紫硫菌占优势。 5.海水：厌氧层中，分布有各种光合细菌，盐度要求不一。 6.其他：池塘、沼泽、水田中均有分布。
➢ 红细菌目（Rhodobacterales） 有1科4属 • 红细菌科， （ Rhodobacteraceae）
➢ 根瘤菌目（Rhizobiales） 有3科7属 • 慢生根瘤菌科（Bradyrhizobiaceae）2个属 • 生丝微菌科（Hyphomicrobiaceae）3个属 • 红游动菌科（Rhodobiaceae）2个属
三、大量培养
（一）全封闭式的厌气光照培养 （二）开放式的微气光照培养 （三）培养流程
（一）全封闭式的厌气光照培养
• 采用无色透光的玻璃容器或塑料薄膜袋，经消毒后， 装入消毒好的培养液，接入20-50％的菌种液，使 整个容器被液体充满，加盖扎口，造成厌气培养环 境，置于有光的地方进行培养，在适宜的温度条件 下，一般经过5-10天的培养，即可达到指数生长期 高峰，便可扩种或作为饵料。
水产饵料生物的培养-PowerPointPresent
⑵开放非循环培养：其特点是培养液不循环流动，而定时由小管通入CO2 和空气到培养液中；同时也起搅拌作用。此法在大面积培养中使用较普遍。 优点是设备简单，无需动力，水泵及大量的CO2及通气设备。
⑶半开放循环培养：半开放培养是指培养容器或池、槽等场所虽仍敞开 ，但有些部分密闭，或用塑料布覆盖。这种培养方式，利用管道，依靠动力
，使培养液流动和通入含二氧化碳的空气。该方式设备复杂，但效果较好。
培养液的配制及举例
在实验条件下培养微型藻类有多种培养基配方。这些配方大多数是早 先发表过的配方的修改方，有些则从分析天然生境的水而得到，有些是从 生态角度考虑的。发展藻类培养的营养配方时的主要考虑的问题是：
a．盐的总浓度：大多是取决于有机体的生态来源。
此法稀释要使用较多容器分组培养，比较麻烦，但较易成功。
3．微吸管法：将水样在载玻片上滴成绿豆粒大小的一些水滴， 这样可使每个水滴中有很少生物而便于分离；在解剖镜下用微吸管 （口径小至0.008～0.16mm，圆口，可自行拉制）。将要分离的藻 体吸出，用蒸馏水或平衡矿物质溶液冲洗数次，然后主导成有培养 基的小培养皿中培养，待生长旺盛后，再扩大培养。此法较适用于 能运动的藻类。
b．主要离子组分的组成及浓度：他们是钾、镁、钠、钙、硫酸盐和磷 酸盐。
c．氮源：硝酸盐、氨和尿素常用作配方中的氮源，根据造中的性能和 pH的最适点而定。藻类的生长主要依赖氮的可利用性。大多数微型藻干物 中含有7～9％的氮。因此在1升培养液中生产10g细胞就至少需要500～ 600mgL-1KNO3。
第五篇 水产饵料生物
的培养 （增殖）
第一章 水产饵料生物的
室内培养
藻类培养方法简介
藻类，特别是单细胞藻类的营养丰富，含有动物和人生长发育所必
⑶半开放循环培养：半开放培养是指培养容器或池、槽等场所虽仍敞开 ，但有些部分密闭，或用塑料布覆盖。这种培养方式，利用管道，依靠动力
，使培养液流动和通入含二氧化碳的空气。该方式设备复杂，但效果较好。
培养液的配制及举例
在实验条件下培养微型藻类有多种培养基配方。这些配方大多数是早 先发表过的配方的修改方，有些则从分析天然生境的水而得到，有些是从 生态角度考虑的。发展藻类培养的营养配方时的主要考虑的问题是：
a．盐的总浓度：大多是取决于有机体的生态来源。
此法稀释要使用较多容器分组培养，比较麻烦，但较易成功。
3．微吸管法：将水样在载玻片上滴成绿豆粒大小的一些水滴， 这样可使每个水滴中有很少生物而便于分离；在解剖镜下用微吸管 （口径小至0.008～0.16mm，圆口，可自行拉制）。将要分离的藻 体吸出，用蒸馏水或平衡矿物质溶液冲洗数次，然后主导成有培养 基的小培养皿中培养，待生长旺盛后，再扩大培养。此法较适用于 能运动的藻类。
b．主要离子组分的组成及浓度：他们是钾、镁、钠、钙、硫酸盐和磷 酸盐。
c．氮源：硝酸盐、氨和尿素常用作配方中的氮源，根据造中的性能和 pH的最适点而定。藻类的生长主要依赖氮的可利用性。大多数微型藻干物 中含有7～9％的氮。因此在1升培养液中生产10g细胞就至少需要500～ 600mgL-1KNO3。
第五篇 水产饵料生物
的培养 （增殖）
第一章 水产饵料生物的
室内培养
藻类培养方法简介
藻类，特别是单细胞藻类的营养丰富，含有动物和人生长发育所必
饵料生物培养技术实验讲义
在测定筛网孔径大小时，先在载玻片上滴加一滴水，将一小片筛网放 在水滴上，然后在其上加盖盖玻片，测量其孔径（内径）的长宽。
四、实验报告：
1. 写明你所用的显微镜号码，高，低倍镜的放大倍数及在高、低倍镜下目测 微尺每格长度的计算。
2.量出 4 种生物饵料样品的长，宽，每种测量 3 个细胞。 3.测量 200 目、120 目、100 目和 80 目四种筛网的孔径大小。
1、 器材 光学显微镜，目测微尺，台测微尺，载玻片，盖玻片，胶头滴管，
鲁哥氏碘液，擦镜纸，水，吸水纸 2、 样品
各种规格的筛网小片，扁藻，三角褐指藻，小球藻，卤虫休眠卵， 褶皱臂尾轮虫
三、 方法与步骤
（一）、目测微尺的校正 目测微尺也称目微尺，为一圆形光学玻璃片，可被安装到光学显微镜
的目镜中。玻片中央刻有一条线段，此线段被等分成共 100 格。由于显微 镜物镜下的物体经过放大，而目镜中的目测微尺没有被放大，因此，当以 目测微尺为参照物，目测微尺的每一格刻度线的测量长度因显微镜物镜的 放大倍数的不同而不同。故必须用台测微尺进行校正，以求得在特定的放 大倍数下，目测微尺每一格线所代表的真实长度。
扩大后的培养液镜检为单种时，分离成功。 注意： 1、培养液配方根据待分离藻种的不同选择，一般用 F/2 配方。 2、此微吸管所形成的小滴以显微镜低倍镜一个视野能全看到为宜。 但又不能太小，以免很快干掉。
四、报告与讨论
1、在分离中需要注意哪些问题？ 2、怎样才能熟练掌握分离技术？
实验五 单细胞藻的分离（二）平板分离纯化技术
将台测微尺置于显微镜的载物台上，先用低倍镜观察，调节调焦旋钮 和光栅，直至看清楚台测微尺的刻度线。旋转目镜，使目测微尺与台测微 尺平行。移动载物台的推进器，先使两尺重叠，再使两尺在视野的左方某 一刻度完全重合。然后从左到右寻找第二个完全重合的刻度。并计数两重 合线段之间目测微尺和台测微尺的格数。由于台测微尺的刻度是镜台上的
四、实验报告：
1. 写明你所用的显微镜号码，高，低倍镜的放大倍数及在高、低倍镜下目测 微尺每格长度的计算。
2.量出 4 种生物饵料样品的长，宽，每种测量 3 个细胞。 3.测量 200 目、120 目、100 目和 80 目四种筛网的孔径大小。
1、 器材 光学显微镜，目测微尺，台测微尺，载玻片，盖玻片，胶头滴管，
鲁哥氏碘液，擦镜纸，水，吸水纸 2、 样品
各种规格的筛网小片，扁藻，三角褐指藻，小球藻，卤虫休眠卵， 褶皱臂尾轮虫
三、 方法与步骤
（一）、目测微尺的校正 目测微尺也称目微尺，为一圆形光学玻璃片，可被安装到光学显微镜
的目镜中。玻片中央刻有一条线段，此线段被等分成共 100 格。由于显微 镜物镜下的物体经过放大，而目镜中的目测微尺没有被放大，因此，当以 目测微尺为参照物，目测微尺的每一格刻度线的测量长度因显微镜物镜的 放大倍数的不同而不同。故必须用台测微尺进行校正，以求得在特定的放 大倍数下，目测微尺每一格线所代表的真实长度。
扩大后的培养液镜检为单种时，分离成功。 注意： 1、培养液配方根据待分离藻种的不同选择，一般用 F/2 配方。 2、此微吸管所形成的小滴以显微镜低倍镜一个视野能全看到为宜。 但又不能太小，以免很快干掉。
四、报告与讨论
1、在分离中需要注意哪些问题？ 2、怎样才能熟练掌握分离技术？
实验五 单细胞藻的分离（二）平板分离纯化技术
将台测微尺置于显微镜的载物台上，先用低倍镜观察，调节调焦旋钮 和光栅，直至看清楚台测微尺的刻度线。旋转目镜，使目测微尺与台测微 尺平行。移动载物台的推进器，先使两尺重叠，再使两尺在视野的左方某 一刻度完全重合。然后从左到右寻找第二个完全重合的刻度。并计数两重 合线段之间目测微尺和台测微尺的格数。由于台测微尺的刻度是镜台上的
生物饵料课件 第五章卤虫的培养1109
5、淡水冲洗去盐
为了去除卵表面的盐分，必须用淡水充分 冲洗。淡水冲洗过程，应注意控制去盐过 程的时间和温度。
6、用淡水进行比重分离
将卤虫卵移入有淡水的锥形容器中，经搅 拌或短暂充气后，静置片刻，完好卤虫卵 沉于底部，去除表层空壳与杂质。然后用 200目筛网将虫卵收集。立刻进行离心脱水。
7、离心脱水
二、室外大量养殖
卤虫单—养殖模式 （1）选址。 （2）建池。 （3）整池、清池、除害。 （4）进水、施肥 （5） 晒水 （6）养殖品系的选择 （7）接种 （8）养殖管理 （9）卤虫捕捞 （10）卤虫卵收获
卤虫单—养殖模式
（1）选址：地面平坦、供水方便、排水通畅的盐场贮 水池、蒸发池等。盐度维持70-110
3、饱和卤水的冲淋筛分
将饱和卤水比重分离的卤虫卵用一系列不 同规格的筛网进行筛分。在干净的饱和卤 水冲淋下，可将卤虫卵从其他大小不同的 杂质中分离出来。
4、滞育终止处理
根据卤虫对不同滞育终止处理的敏感性， 选择合适的滞育终止处理方法。滞育解除 方法有：反复脱水、低温刺激、光照处理、 紫外线照射、甲醛溶液浸泡、过氧化氢浸 泡和二氧化碳处理等。其中最常用的是低 温刺激和反复脱水。
第四节 卤虫卵的采收和加工
一、采收 二、加工 三、贮存 四、卤虫卵的质量判别
二、加工（加工流程）
1、原料卵收集 2、用饱和卤水进行比重分离 3、饱和卤水的冲淋筛分 4、滞育终止处理 5、淡水冲洗去盐 6、用淡水进行比重分离 7、离心脱水 8、干燥 9、分级 10、包装
1、原料卵收集
3、水中的离子浓度：卤虫对水域中离子组成及浓度 的耐受力范围很广。
4、溶解氧：卤虫具高效的呼吸色素—血红素，可以 在低溶解氧状态下（1mg/L）生存，也可生活于溶解 氧为饱和溶解度150％的超富氧水体中。
(生物饵料培养课件)第六章其他生物饵料的培养
红藻
如紫菜、石花菜等，富含 天然色素，可用于食品和 化妆品。
绿藻
如小球藻、衣藻等，分布 广泛，对环境适应性强。
藻类培养的方法
开放式培养
利用天然水体进行大规模 培养，如池塘、湖泊等。
封闭式培养
在人工控制的条件下进行 培养，如使用培养基和光 照等设备。
半封闭式培养
结合开放式和封闭式培养 的方法，既利用天然水体， 又进行人工控制。
第六章 其他生物饵料的培 养
目录
• 引言 • 藻类的培养 • 轮虫的培养 • 枝角类的培养 • 其他生物饵料的培养
01
引言
目的和背景
研究目的
随着水产养殖业的快速发展，对生物饵料的需求也日益增加。培养其他生物饵料旨在解决饵料来源问题，促进 水产养殖业的可持续发展。
研究背景
传统的饵料来源已无法满足现代水产养殖的需求。同时，野生饵料的过度捕捞也对生态环境造成了负面影响。 因此，寻找新的饵料来源成为了迫切的任务。
生物饵料的重要性
养殖业发展
01
生物饵料是水产养殖业的基础，为鱼类、虾类等水生动物提供
必要的营养。
经济效益
02
通过大规模培养生物饵料，可以降低养殖成本，提高经济效益。
环境保护
03
合理利用生物饵料可以减少对野生资源的依赖，降低对环境的
破坏和污染。
02
藻类的培养
藻类种类
01
02
03Biblioteka 蓝藻包括颤藻、念珠藻等，是 地球上最早出现的藻类。
桡足类的培养
桡足类的生物学特性
桡足类是一种小型水生动物，具有生长快、适应性强、繁 殖力高等优点，是水产养殖中的重要生物饵料。
桡足类的培养条件
生物饵料培养学
现代生物饵料培养学绪论第一章微藻培养（microalgae culture）第二章轮虫培养（rotifer culture）第三章卤虫培养（brine shrimp culture）教材：成永旭等，生物饵料培养学，中国农业出版社，2005年8月第2版.中文参考书陈明耀等，生物饵料培养，中国农业出版社，1995年10月第1版.梁英等，海水生物饵料培养技术，青岛海洋大学出版社，1998.外文参考书：1.Algal Culturing TechniquesEditor: Robert A. AndersenPrice: $84.95Hardcover (精装本): 578 pagesPublisher: Academic Press (2005.1.21)ISBN（书号）: 0120884267注：海大图书馆有此书2. Plankton Culture ManualEditor: Frank H. Hoff and Terry W. SnellPrice: $70Softcover (平装本): 183 pagesPublisher: Florida Aqua Farms (2007)ISBN: 97809662960443. Handbook of Microalgal Culture: Biotechnology and Applied PhycologyEditor: Amos RichmondPrice: $333.99Hardcover (精装本): 584 pagesPublisher: J, Wiley-Blackwell (2004.1)ISBN: 97806320595394.Algae (2nd Edition)Editor: James E. Graham / Lee W. Wilcox / Linda E. GrahamPrice: $127.73Hardcover (精装本): 584 pagesPublisher: Benjamin Cummings (2008.11.9)ISBN: 9780321559654注：海大图书馆有此书的第1版。
生物饵料课件 第四章枝角类培养008
（Simocephlaus vetulus）
（Ceriodaphnia cornuta）
（ Scapholeberis mucronata ）
裸腹溞科：头大、无吻、有颈沟。第一触角长，呈棒
状，能活动。后腹部具有一列肛刺，最末一肛刺分叉，其余 肛刺边缘均有羽状刚毛。雄体较小，壳瓣背侧平直，雄体第 一触角远长于雌体的第一触角，常有一弯曲，并在弯曲的前 侧着生2根触毛，触角末端除嗅毛外，有数根钩状刚毛。
海洋枝角类中大个体种类的生殖量反而少。如多型圆囊
溞（平均体长0.39㎜）和诺氏三角溞（平均体长0.45 ㎜），生殖量分别为4.7个和4.4个；而个体较大的中型 圆囊溞（平均体长0.99㎜ ）和刘氏圆囊溞（平均体长 0.67㎜ ）,平均生殖量分别为3.0个和2.6个。
淡水洋枝角类溞属的种类，其生殖量是随个体增大而增 大。（表4-2）
（Daphnia magna） 常见种类 在低盐度（<5‰）水体中也有分布。雌体长2-6 mm，壳 刺短，甚至消失。壳弧发达但其延伸长度不如隆线溞。 后腹部在肛门之后的背侧显著凹陷，形成“肛凹陷”。 卵鞍内冬卵斜卧，长轴与卵鞍长轴成一定角度。
（Daphnia longispina）
常见于水库、湖泊和江河中，但池塘中的出现率不如隆线 溞和大型溞，偶尔出现于半咸水水体中。雌体长1.2-3.0 mm。虎刺长>1/2体长。壳弧后端弯曲成－钝角。后腹部 无“肛凹陷”。卵鞍近三角形，冬卵长轴与卵鞍背缘垂直。
海水鱼类育苗，也使用人工培养的蒙古裸腹溞为 饵料。
一、形态分类
（一）分类 属于节肢动物门，甲壳纲、枝角目。常见种 类：溞科、溞属和裸腹溞科、裸腹溞属。 （二）形态特征 1、外部形态 枝角类身体左右侧扁，可分 为头部、躯干部和后腹部。
生物饵料课件 第三章轮虫的培养01012
一、轮虫种的分离
• 1、采样：用网目为120 μm浮游生物网采样。 • 2、去除较大个体浮游生物：用300 μm筛网
去除较大动物与杂质。
• 3、静止：使轮虫浮游水面，用纱布或滤纸
吸取。
• 4、解剖镜下分离：在解剖镜下用吸管吸取。
二、休眠卵的孵化
（一）休眠卵的萌发形式 零星萌发形式：指轮虫的休眠卵在较长的一段时间内
围内，轮虫都能正常繁殖，适宜光照范围88-200 μmol/(m2·s)。萼花臂尾轮虫光照强度在2-240 μmol/(m2·s)范围内，对轮虫生长的影响不显著。因 此，光照强度对轮虫种群增长影响效果与种的属性 有关。
七、轮虫的生态条件(续)
• 4、pH：褶皱臂尾轮虫在pH5-10的范围内，均能正
• pH:萼花臂尾轮虫和角突臂尾轮虫休眠卵在pH4.5-
11.5的范围内可以萌发。pH8时休眠卵孵化时间最短。
• 溶氧：萼花臂尾轮虫和角突臂尾轮虫休眠卵正常萌
发的临界氧量0.3mg/L.
3、休眠卵形成时的食物与环境状况及其对萌 发率的影响
• 休眠卵形成时的母体的生理状况、环境条件对轮
第三章 轮虫的培养
• 第一节轮虫的生物学 • 第二节轮虫的分离和培养 • 第三节轮虫保种和休眠卵的保存
轮虫的研究与开发利用历史
• 1960年，日本Ito发现褶皱臂尾轮虫（ Brachionus
plicatilis ）作为仔鱼饵料的价值，并进行大量培 养技术的探索。1967年，Hirata和Mori发展面包 酵母是轮虫的适合饵料，至70年代在轮虫培养占 面包酵母被广泛使用。
食物、盐度和pH值等
五、轮虫的发育
• 轮虫的个体发育划分为4个阶段：即胚胎发育期、生
殖前期、生殖期和生殖后期。
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⑴用培养液作为参比，分别测定相应的5个浓度梯度藻液的吸
光度（绿色的藻类一般选择的波长为720-750nm；金藻门 藻类、硅藻门藻类一般选择的波长为420nm）。
越努力越幸运
（2 ）用血球计数板分别计数工作曲线用的藻细胞浓度。
April 9, 2009 Thursday ① 把血球计数板及盖玻片擦洗清洁、平放在桌上、并盖好盖玻片。
二、药品
浓硫酸、重铬酸钾、漂白水或次氯酸钠溶液、硫代硫酸钠。 洗液的配制方法：称15g重铬酸钾至干燥的烧杯中，然后加入200ml粗 硫酸，搅拌并加热至重铬酸钾溶解，即得洗液，冷却后将上清液倒入试 剂瓶中备用。
三、实验材料
海水200L、淀粉碘化钾试纸2包、充气管、充气石10粒。
越努力越幸运
【实验操作步骤】
《生物饵料培养学》实验课件
April 9, 2009 Thursday
王珺 海南大学海洋学院
2010年6月
越努力越幸运
实验一 单细胞藻浓度的测定
【实验目的】
April 9, 2009 Thursday
1.掌握用血球计数板计数单细胞藻的方法。 2.掌握使用分光光度计进行单细胞藻类计数的原理、方法。
②摇匀工作曲线用的藻液，用一支干净的平口微吸管吸取藻液，迅速把 吸管放在计数板旁的盖玻片边缘处，轻压橡皮头，使藻液流入计数板内 （如果样品是有运动能力的种类，则应加入碘液杀死，才能取样计数）。 ③ 稍停一分钟后，在低倍镜下（细胞太小需用40×10倍）计数中央大格 （400个小格）和东北、西北、西南、东南等4个大格（16个中格），每 个样品重复计数两次，然后取其平均值。得： 1ml水体的藻类细胞数目=计数平均值×稀释倍数×10000个（简记： 万个/ml）
2．测定被测藻液的吸光度。 3．根据工作曲线查出藻液相应吸光度的藻细胞浓度。
越努力越幸运
【实验用品】
1.实验器材
2.试剂
鲁哥氏液。
April 9, 2009 Thursday
分光光度计、显微镜、电子天平、干燥箱、血球计数板、计数 器。
3.实验材料
比色管（每组6支）、吸管、擦镜纸、单胞藻液500ml、待 测藻液500ml、10ml移液管（每组6支）、50ml试剂瓶、消毒 海水500ml、蒸馏水。
【作业与思考】
1.绘制工作曲线。 2.计算出你测定的单细胞藻的细胞密度。 3.你是如何减少计数所造成的误差？
越努力越幸运
April 9, 2009 Thursday
Thank you!
越努力越幸运
实验二 单细胞藻培养的容器、工具与用水的消毒
【实验目的】
April 9, 2009 Thursday
越努力越幸运
2．测定被测藻液的吸光度。 3．根据工作曲线求出藻液相应吸光度的藻细胞浓 April 9, 2009 Thursday 度（或由公式：被测藻液的藻细胞浓度=工作曲 线中总的藻细胞浓度/工作曲线中总的吸光度× 被测藻液的藻细胞吸光度）。
越努力越幸运
【注意事项】
1.血球计数板计数时，藻液不能溢出盖玻片上方，若有溢出，需 April 9, 2009 Thursday 冲洗干净，重新取样，注意控制藻液流入量，不能过多，也不能过 少，应充满计数板的部分，不能有气泡。 2.应注意摇匀后，再取样进行测定或计数。 3.如果藻细胞浓度太大，应稀释后才计数，计数结果应乘以稀释 倍数。 4.运动的藻类，应杀死后才能计数。（建议：稀释液中含有固定 液）
学习并掌握培养单细胞藻的容器工具及用水的消毒方法，为今后 成功培养单细胞藻打基础。
【实验原理和基础知识】
单细胞藻培养用的工具、容器及水都必须经过严格消毒，尽可 能杀死一切生物，以免污染影响藻类生长和繁殖。
越努力越幸运
【实验用品】
一、实验器材
仪器设备： 恒温干燥箱、电炉、电子天平、充气泵。 工具容器： April 9,只） 400ml烧杯30只 3000ml三角烧瓶10只 (6人/组) 搅拌棒 20根 移液管（5或10ml） 30支 塑料桶 4个 移液管（1ml） 30支 乳胶管 若干 容量瓶（100ml） 30只 量筒100ml 30只
【实验原理】
1. 制作工作曲线
取一定量的单胞藻液，稀释成5个梯度，分别用分光光度计测定 其吸光度（O.D.），并用血球计数板测定相应藻液的藻细胞个体浓 度，由于藻细胞浓度与吸光值的大小成正比关系，根据各组数据绘 出吸光度-藻细胞浓度的相关曲线，即工作曲线。
越努力越幸运
1.1 血球计数板计数的原理 血球计数板是一块比普通载玻片厚的载玻片特制而成的，板的中部 有一“H”形的凹沟，在凹沟包围的上、下两块地方比凹沟外的两条高起 April 9, 2009 Thursday 的边低0.1mm，在此部的中央划线为一具有准确面积的大小方格，在其 中分为九个方格，每一大方格的面积是1mm2，在四角的大格又分为16 个中格，在中央的大格分为25个中格，每一中格分为16个小格，共400 个小格；另外一种计数板的中央大格分为16个中格，每一中格分为25个 小格，总数400个小格，加盖玻片后，每一大格即形成一个体积为 0.1mm3的空间。
一、工具、容器消毒方法
1．洗液消毒法
所有待用三角瓶、烧杯、容量瓶等玻璃器皿均先用自来水（加去污粉）冲刷 干净，然后倒入少许洗液，沿着内壁慢慢转动器皿，使其全部浸泡，放置 10min后，将底部洗液回收（以备后用），然后用自来水冲净瓶子，把瓶口朝 April 9, 2009 Thursday 下晾干。移液管应用洗耳球吸取洗液，使其浸泡内壁，10min后，用自来水冲 净内
越努力越幸运
【实验步骤】
一、分光光度计计数法 1. 制作工作曲线
April 9, 2009 Thursday
取单胞藻液20ml置于比色管中，并稀释成5个浓度梯度 （建议第一浓度是第二浓度的2倍，依次类推），以培养液作 为参比，用分光光度计分别测定其吸光度（O.D.），并用血 球计数板测定相应藻液的藻细胞个体浓度，由于藻细胞浓度与 吸光值的大小成正比关系，根据5组数据绘出吸光度-藻细胞浓 度的相关曲线，即工作曲线。
光度（绿色的藻类一般选择的波长为720-750nm；金藻门 藻类、硅藻门藻类一般选择的波长为420nm）。
越努力越幸运
（2 ）用血球计数板分别计数工作曲线用的藻细胞浓度。
April 9, 2009 Thursday ① 把血球计数板及盖玻片擦洗清洁、平放在桌上、并盖好盖玻片。
二、药品
浓硫酸、重铬酸钾、漂白水或次氯酸钠溶液、硫代硫酸钠。 洗液的配制方法：称15g重铬酸钾至干燥的烧杯中，然后加入200ml粗 硫酸，搅拌并加热至重铬酸钾溶解，即得洗液，冷却后将上清液倒入试 剂瓶中备用。
三、实验材料
海水200L、淀粉碘化钾试纸2包、充气管、充气石10粒。
越努力越幸运
【实验操作步骤】
《生物饵料培养学》实验课件
April 9, 2009 Thursday
王珺 海南大学海洋学院
2010年6月
越努力越幸运
实验一 单细胞藻浓度的测定
【实验目的】
April 9, 2009 Thursday
1.掌握用血球计数板计数单细胞藻的方法。 2.掌握使用分光光度计进行单细胞藻类计数的原理、方法。
②摇匀工作曲线用的藻液，用一支干净的平口微吸管吸取藻液，迅速把 吸管放在计数板旁的盖玻片边缘处，轻压橡皮头，使藻液流入计数板内 （如果样品是有运动能力的种类，则应加入碘液杀死，才能取样计数）。 ③ 稍停一分钟后，在低倍镜下（细胞太小需用40×10倍）计数中央大格 （400个小格）和东北、西北、西南、东南等4个大格（16个中格），每 个样品重复计数两次，然后取其平均值。得： 1ml水体的藻类细胞数目=计数平均值×稀释倍数×10000个（简记： 万个/ml）
2．测定被测藻液的吸光度。 3．根据工作曲线查出藻液相应吸光度的藻细胞浓度。
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【实验用品】
1.实验器材
2.试剂
鲁哥氏液。
April 9, 2009 Thursday
分光光度计、显微镜、电子天平、干燥箱、血球计数板、计数 器。
3.实验材料
比色管（每组6支）、吸管、擦镜纸、单胞藻液500ml、待 测藻液500ml、10ml移液管（每组6支）、50ml试剂瓶、消毒 海水500ml、蒸馏水。
【作业与思考】
1.绘制工作曲线。 2.计算出你测定的单细胞藻的细胞密度。 3.你是如何减少计数所造成的误差？
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April 9, 2009 Thursday
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实验二 单细胞藻培养的容器、工具与用水的消毒
【实验目的】
April 9, 2009 Thursday
越努力越幸运
2．测定被测藻液的吸光度。 3．根据工作曲线求出藻液相应吸光度的藻细胞浓 April 9, 2009 Thursday 度（或由公式：被测藻液的藻细胞浓度=工作曲 线中总的藻细胞浓度/工作曲线中总的吸光度× 被测藻液的藻细胞吸光度）。
越努力越幸运
【注意事项】
1.血球计数板计数时，藻液不能溢出盖玻片上方，若有溢出，需 April 9, 2009 Thursday 冲洗干净，重新取样，注意控制藻液流入量，不能过多，也不能过 少，应充满计数板的部分，不能有气泡。 2.应注意摇匀后，再取样进行测定或计数。 3.如果藻细胞浓度太大，应稀释后才计数，计数结果应乘以稀释 倍数。 4.运动的藻类，应杀死后才能计数。（建议：稀释液中含有固定 液）
学习并掌握培养单细胞藻的容器工具及用水的消毒方法，为今后 成功培养单细胞藻打基础。
【实验原理和基础知识】
单细胞藻培养用的工具、容器及水都必须经过严格消毒，尽可 能杀死一切生物，以免污染影响藻类生长和繁殖。
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【实验用品】
一、实验器材
仪器设备： 恒温干燥箱、电炉、电子天平、充气泵。 工具容器： April 9,只） 400ml烧杯30只 3000ml三角烧瓶10只 (6人/组) 搅拌棒 20根 移液管（5或10ml） 30支 塑料桶 4个 移液管（1ml） 30支 乳胶管 若干 容量瓶（100ml） 30只 量筒100ml 30只
【实验原理】
1. 制作工作曲线
取一定量的单胞藻液，稀释成5个梯度，分别用分光光度计测定 其吸光度（O.D.），并用血球计数板测定相应藻液的藻细胞个体浓 度，由于藻细胞浓度与吸光值的大小成正比关系，根据各组数据绘 出吸光度-藻细胞浓度的相关曲线，即工作曲线。
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1.1 血球计数板计数的原理 血球计数板是一块比普通载玻片厚的载玻片特制而成的，板的中部 有一“H”形的凹沟，在凹沟包围的上、下两块地方比凹沟外的两条高起 April 9, 2009 Thursday 的边低0.1mm，在此部的中央划线为一具有准确面积的大小方格，在其 中分为九个方格，每一大方格的面积是1mm2，在四角的大格又分为16 个中格，在中央的大格分为25个中格，每一中格分为16个小格，共400 个小格；另外一种计数板的中央大格分为16个中格，每一中格分为25个 小格，总数400个小格，加盖玻片后，每一大格即形成一个体积为 0.1mm3的空间。
一、工具、容器消毒方法
1．洗液消毒法
所有待用三角瓶、烧杯、容量瓶等玻璃器皿均先用自来水（加去污粉）冲刷 干净，然后倒入少许洗液，沿着内壁慢慢转动器皿，使其全部浸泡，放置 10min后，将底部洗液回收（以备后用），然后用自来水冲净瓶子，把瓶口朝 April 9, 2009 Thursday 下晾干。移液管应用洗耳球吸取洗液，使其浸泡内壁，10min后，用自来水冲 净内
越努力越幸运
【实验步骤】
一、分光光度计计数法 1. 制作工作曲线
April 9, 2009 Thursday
取单胞藻液20ml置于比色管中，并稀释成5个浓度梯度 （建议第一浓度是第二浓度的2倍，依次类推），以培养液作 为参比，用分光光度计分别测定其吸光度（O.D.），并用血 球计数板测定相应藻液的藻细胞个体浓度，由于藻细胞浓度与 吸光值的大小成正比关系，根据5组数据绘出吸光度-藻细胞浓 度的相关曲线，即工作曲线。