南医大药物分析第02章-药物的鉴别实验

（四）色谱鉴别法
1.薄层色谱鉴别法 采用对照品（或标准品）比较 法，要求二者的Rf值一致 ； 2.高效液相色谱鉴别法 要求供试品和对照品色谱 峰的保留时间比值一致；含量测定方法为内标法 ； 3.气相色谱鉴别法 4.纸色谱鉴别法 逐渐被薄层色谱法所取代 5.高效毛细管电泳
ChP 2010: 雌二醇的熔点：本品的熔点为175180℃.
（3）比旋度
在一定波长与温度下，偏振光透过长1 dm 且每1 ml中含有旋光性物质1 g的溶液时， 测得的旋光度称为比旋度。反映手性药物 特性及其纯度的主要指标。
ChP 2010： 维生素C的比旋度测定：取本品， 精密称定，加水溶解并定量稀释使成每1 ml 中含约0.10 g的溶液，测定，比旋度为 +20.5~+21.5.
（专属性很强、 应用较广）
适用范围：组分单一、结构明确的原料药；特别是
其他方法不易区分的同类药物。
2.1.试样制备方法：压片法、糊法、膜法和溶液法； 2.2.原料药鉴别 注意多晶现象； 2.3.制剂的鉴别 采取提取分离、适当干燥、压片绘制 图谱。 （1）有机溶剂直接提取，去除辅料干扰测定IR （2）有机酸，有机碱的对应盐，加入酸或碱沉淀， 分离干燥测定IR （3）主成分有机酸，加碱溶解，过滤，加酸沉淀分 离干燥测定IR （4）无辅料或辅料干扰少，可 （二）溶液的酸碱度 （三）溶液的温度 （四）共存物质干扰 （五）反应介质 （六）试验时间
三、鉴别试验的灵敏度
（一）反应灵敏度和空白试验 1.反应灵敏度（Sensitivity） *最低检出量（Minimum detectable quantity） （又称检出限量）：以m表示，就是应用某一反 应，在一定的条件下，能够观测出的供试品的最 小量，其单位通常用微克（μg）表示。
（1）溶解度
反映药品的纯度、晶型或粒度，通过溶解 度试验判断溶解度
ChP 2010: 尼莫地平的溶解度：在丙酮、三氯 甲烷或乙酸乙酯中易溶，在乙醇中溶解， 在乙醚中微溶，在水中几乎不溶。
（2）熔点
指一种物质按规定方法测定，由固体熔化 成液体的温度、熔融同时分解的温度或在 熔化时自初熔至全熔的一段温度。
（二）提高灵敏度的方法 1.加入与水不相溶的有机溶剂 2.改进观测方法
四、鉴别方法
（一）物理鉴别法 物理常数如沸点、熔点、相对密度、比旋度等均可 作为鉴别药物的依据，常用于纯度较高的原料药的 鉴别。如可可碱、氨茶碱、磷酸可待因等，测定熔 点是一种简便、专属的鉴别方法。对于某些熔点过 高、对热不稳定、熔点不敏锐的药物，可通过加入 试剂，使药物与试剂反应生成衍生物再测定熔点的 方法易于测定—制备衍生物测定熔点法。
例如，经一般鉴别反应的钠盐试验，证实某一药物 为钠盐，但不能辨认是氯化钠、苯甲酸钠或者是其 它某一种钠盐药物。要想最后证实被鉴别的物质到 底是哪一种药物，必须在一般鉴别试验的基础上， 再进行专属鉴别试验，方可确认。
（三）专属鉴别试验（Specific identification test）： 根据每一种药物化学结构的差异及其所引起的物理化 学特性的不同,选用某些特有的灵敏定性反应，来鉴别 药物的真伪。
（三）光谱鉴别法
1．紫外光谱鉴别法 (p76)
➢同时测定、核对λmax和λmin； ➢规定一定浓度的供试液在λmax处的吸收度； ➢规定吸收波长和吸收系数法； ➢规定吸收波长和吸收度比值法； ➢经化学处理后，测定其反应产物的吸收光谱特性。
2.红外光谱 鉴别法
标准图谱对照法： 中国药典（2010年版) 对照品法：USP (32)。 JP(15)采用对照品鉴别法、对 照光谱鉴别和吸收波数鉴别法。 BP(2009)采用对照品法和对照 光谱法
第二章 药物的鉴别试验 (Identification test）
（一）性状：反映了药物特有的物理性质，一般包括 外观、嗅、味、溶解度以及物理常数(mp. bp. 等)。
（二）一般鉴别试验（General identification test）： 证实其是某一类药物，而不能证实是哪一种药物。仅 供确认单一的化学药物，如为数种化学药物的混合物 或有干扰物质存在时，除另有规定外，应不适用。 无机药物 阴离子和阳离子的特殊反应 有机药物 典型的官能团反应
常见的呈色反应有：
➢与重金属离子的沉淀反应---如巴比妥类药物与 铜盐、钴盐、银盐生成沉淀的反应； ➢与硫氰化铬铵（雷氏盐）的沉淀反应-多为生物 碱及其盐，具有芳香环的有机碱及其盐； ➢其它沉淀反应。
常有气体生成的药物
➢大多数的胺（铵）类药物、酰脲类药物以及某些酰胺类 药物，可经强碱处理后，加热，产生氨（胺）气 ➢化学结构中含硫的药物，可经强酸处理后，加热，发生 硫化氢气体 ➢含碘有机药物经直火加热，可生成紫色碘蒸气 ➢含醋酸酯和乙酰胺类药物，经硫酸水解后，加乙醇可产 生乙酸乙酯的香味。
（二）化学鉴别法
1.干法 焰色试验 加热分解
➢取铂丝，用盐酸湿润后，蘸取供试品，在 无色火焰中燃烧，使火焰显出特殊的颜色。 ➢在适当的温度条件下，加热使供试品分解， 生成有特殊气味的气体。
2.湿法
呈色或褪色反应 沉淀生成反应 荧光反应 气体生成反应
常见的呈色反应
➢三氯化铁呈色反应---酚羟基或水解后产生酚羟基 ➢异羟肟酸铁反应---多为芳酸及其酯类、酰胺类 ➢茚三酮呈色反应---脂肪氨基 ➢重氮化-偶合显色反应---芳伯氨基或能产生芳伯氨 基 ➢氧化还原显色反应及其它颜色反应
*最低检出浓度（Minimum detectable concentration）：以1:G或1:V表示，是应用 于某一反应，在一定条件下，能够观测出供试 品的最低浓度。
2. 空白试验（Blank test）:就是在与供试 品鉴别试验完全相同的条件下，除不加供 试品外，其它试剂同样加入进行的试验。
（5）辅料无干扰，待测组分的晶型变化，可用对照 品经同法处理后的光谱对比。
（6）待测成分的晶型不变化，辅料存在干扰，可参 照原料药的表征光谱，在指纹区选择数个不受辅料干 扰的待测成分作为特征的鉴别谱带。
3. 近红外光谱法 4. 原子吸收法（AAS） 5. 核磁共振法（NMR） 6. 质谱法（MS） 7. X射线粉末衍射法（XRD）